他克莫司与环孢菌素A对肝移植受者CD8^+ CD28^-调节性T细胞的不同调节特性

目的探讨他克莫司(FK506)与环孢菌素A(CsA)对肝移植受者CD8+ CD28-调节性T细胞(Treg)及细胞因子IL-10的调节效应。方法采用荧光标记单克隆抗体结合流式细胞技术分析接受FK506或CsA治疗的肝移植受者外周血CD8+ T细胞及共刺激分子CD28的表达情况,采用流式细胞小球微阵列术(CBA)分析血浆中IL-10浓度。以健康志愿者和患终末期肝脏疾病拟进行肝移植者作为对照。结果疾病对照组CD8+ T细胞和CD8+ CD28- T细胞/CD8+ CD28+ T细胞比值(Ratio值)显著低于健康对照组(P<0.05)。FK506治疗组CD8+ T细胞表达显著回升(P<0.05),且增加的CD8+ T细胞主要为CD8+ CD28- Treg(P<0.05)。CsA治疗组CD8+ T细胞和CD8+ CD28- Treg未出现明显回升(P>0.05)。且FK506治疗组CD8+ CD28- Treg表达显著高于CsA治疗组(P<0.05)。两治疗组血浆IL-10水平均显著高于健康对照组和疾病对照组(P<0.05),但组间差别无显著性(P>0.05)。结论FK506可促进肝移植受者外周血CD8+ CD28- Treg表达并同时促进IL-10的产生从而加强T细胞的免疫耐受,而CsA虽不能有效促进CD8+ CD28- Treg的表达但却能促进IL-10的产生。

PD-1在器官移植患者T细胞上的表达及其意义

目的:检测共刺激分子PD-1在应用免疫抑制剂的器官移植患者外周血单个核细胞(PBMCs)和T细胞上PD-1的表达,并对其表达的意义以及抗PD-1单克隆抗体与免疫抑制剂的协同作用进行探讨。方法:采用流式细胞分析技术,应用单标记和双标记的方法,对应用免疫抑制剂的肝移植和肾移植患者的外周血单个核细胞和T细胞上PD-1的表达进行检测。以混合淋巴试验在体外模拟移植模型,应用MTT法,观察PD-1单抗与免疫抑制剂的协同作用。结果:PD-1在应用免疫抑制剂的器官移植患者PBMCs和T细胞上有特异性高表达,环孢素A(CsA)能诱导PD-1在PBMCs上的表达,且抗PD-1单克隆抗体与CsA联用具有协同作用。结论:PD-1可作为抗移植排斥作用的免疫干预新靶点。

环孢霉素A对OVA免疫TCR转基因DO11．10小鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的影响

目的:研究免疫抑制剂CsA对处于免疫应答状态的小鼠脾脏调节性CD4+CD25+T细胞影响。方法:采用流式细胞术检测卵白蛋白(OVA)免疫的DO11.10小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞及其中Foxp3+T细胞的变化。结果:OVA免疫后脾脏CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞百分数及Foxp3+T细胞占CD4+CD25+T细胞百分数均增加,显示CsA可明显减少正常及免疫应答状态下小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分数。结论:CsA在抑制免疫应答的同时也可能抑制了免疫耐受的诱导。

环孢霉素A对缺血再灌注心肌的保护作用与CD4^+ T细胞的关系

目的观察环孢霉素A对缺血再灌注心肌的影响,并探讨其与CD4+T细胞之间的关系。方法将32只SD大鼠随机分为4组(n=8):假手术组(Sham)、缺血再灌注(I/R)模型组、环孢霉素(CsA)组、CsA+5-羟基葵酸盐(5-HD)组。CsA、CsA+5-HD组给予CsA 15 mg/kg及1 mL生理盐水腹腔注射,Sham组和I/R组注入相同剂量的生理盐水,连续5 d,CsA+5-HD组于术前30 min加用5-HD腹腔注射(10 mg/kg)。阻断冠状动脉左前降支30 min,复灌24 h,免疫荧光染色计数浸润的CD4+和CD3+T淋巴细胞,RT-PCR及ELISA检测钙调神经磷酸酶(CaN)的表达,组织病理学观察心肌细胞的损伤情况。结果与I/R组相比,CsA组及CsA+5-HD组CD4+T细胞表达明显减少(P<0.05),CaN表达降低(P<0.05),而病理损伤程度减轻。结论 CsA被取消作为线粒体通透性转化孔抑制剂作用后仍能对缺血再灌注心肌产生保护作用,其作用可能与抑制CD4+T细胞的激活有关。

基于树链认证的一种组播源认证方案

简要介绍了现存的组播源认证方案,指出其优点和缺点。同时,基于树链认证技术提出了一种新的组播源认证方案,该方案中,不同数据块的摘要之间采用类似于T-CSA的方法串联起来,扩展了T-CSA的优越性,减少了延迟;而且随着数据流的不断增大,数据包的平均认证代价呈下降趋势,这对于资源有限的成员机器来讲非常重要。

T 细胞耐受的诱导及其机理研究

目的 阐明抗原特异性 Ｔ 细胞无能的诱导条件、无能细胞的特性及其耐受的机理。方法 抗 Ｂ７１ 单抗与 Ｃｓ Ａ 联用诱导抗原特异性 Ｔ 细胞无能， 通过３ Ｈ Ｔｄ Ｒ 掺入法测定 Ｔ 细胞增殖和 Ｍ Ｌ Ｒ， 利用 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 检测细胞因子基因表达。结果 耐受 Ｔ 细胞与异体淋巴细胞比例为０ ．０１∶１时， 可显著抑制 Ｍ Ｌ Ｒ， 转染 Ｂ７１ 分子的 Ｍ Ｄ Ａ４５３ 和３ Ａ Ｏ 能协同刺激 Ｃ Ｄ３ 诱导的 Ｔ 细胞增殖，不表达 Ｂ７ 分子的 Ｍ Ｄ Ａ４５３ 和３ Ａ Ｏ 无此作用。 Ｐ Ｈ Ａ、 Ｃ Ｄ３ 单抗、 Ｐ Ｍ Ａ＋ Ａ２３１８７ 可以逆转本试验所用诱导方法所致的 Ｔ 细胞的耐受状态。无能 Ｔ 细胞 Ｉ Ｌ２ 和 Ｉ Ｆ Ｎγｍ Ｒ Ｎ Ａ 不表达， 而 Ｉ Ｌ４ 和 Ｉ Ｌ１０ ｍ Ｒ Ｎ Ａ可表达。无能 Ｔ 细胞活化后， Ｉ Ｌ２ 和 Ｉ Ｆ Ｎγｍ Ｒ Ｎ Ａ 能够表达。结论 抗原特异性 Ｔ 细胞耐受是可以人为诱导的， 无能 Ｔ 细胞细胞因子基因格局向 Ｔ Ｈ２ 细胞偏离。