白细胞介素-33/ST2信号通路调控辅助T细胞/调节性T细胞免疫平衡参与慢性阻塞性肺疾病发病机制分析

目的探究基于白细胞介素-33(IL-33)/ST2信号通路激活树突状细胞(DCs)成熟,调控辅助T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡参与小鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病的临床机制。方法选择36只SPF级C57BL/6健康小鼠,随机选取12只作为健康对照组,其余小鼠用于制作COPD模型,采用香烟烟雾刺激和气道内注入脂多糖的方式建立COPD模型,以小鼠肺部压力-容积曲线移动或弹性程度降低为造模成功,将模型小鼠按照随机数字表法分为COPD组(n=12)和IL-33抗体干预组(n=12)。于造模开始第3周时为IL-33抗体组小鼠腹腔注射IL-33抗体,健康对照组和COPD组小鼠注射同等剂量生理盐水,于造模开始第28天在小鼠清醒状态下采集三组小鼠的内眦静脉从血液,使用PBS液冲洗三组小鼠右肺组织并收集支气管肺泡灌洗液(BALF),比较三组小鼠外周血、BALF中DCs、IL-33表达情况差异,采集肺组织甲醛固定后染色处理,光镜下观察肺组织病理变化。结果COPD组小鼠外周血、BALF中Th17/Treg比值均高于健康对照组和IL-33抗体干预组,差异有统计学意义(P<0.05);COPD组小鼠外周血、BALF中DCs成熟标志物CD80、CD86水平均高于健康对照组和IL-33抗体组,主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ低于健康对照组和IL-33抗体组,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR分析显示,COPD组小鼠IL-33灰度值高于健康对照组和IL-33抗体干预组,差异有统计学意义(P<0.05);三组小鼠气道炎症病理差异较大。结论调控IL-33/ST2信号通路可以激活DCs细胞成熟,恢复COPD小鼠Th17/Treg平衡,改善COPD小鼠炎症指标水平。

肠易激综合征大鼠模型外周血免疫调节性T细胞的研究

目的：观察外周血免疫调节性T细胞（Treg）在感染后肠易激综合征（PI-IBS）大鼠模型中的变化．探讨Treg在其发病机制中的作用。方法：随机将16只大鼠分为模型组和正常对照组，分别用福氏Ⅳ型志贺氏痢疾杆菌和生理盐水灌胃。模型组急性肠道感染16～22d，测定两组大鼠的肠道感觉阈值和平滑肌张力积分，远端结肠行病理学检查，用流式细胞仪分析外周血Treg的比例。结果：模型组肠道感觉阈值明显降低（P〈0．05），肠道平滑肌张力积分明显升高（P〈0．05），而组织学无明显变化，表明PI-IBS大鼠模型建立成功；模型组外周血Treg／CD4^＋T比值明显下降（P〈0．05）。结论：大鼠在急性肠道感染消失后．会出现PI-IBS；免疫调节的异常参与了PI-IBS的发病过程。

伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白类似基因的原核表达和抗体制备

目的克隆伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白(PbTIP)类似基因,原核表达PbTIP重组蛋白,并制备其抗血清。方法在GenBank中检索PbTIP类似基因序列,设计特异性引物,从伯氏疟原虫ANKA株扩增获得该基因cDNA片段,克隆入原核表达载体pGEX4T-1并转化大肠埃希菌BL21(DE3)。经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)鉴定重组蛋白。用重组蛋白GST-PbTIP包涵体免疫BALB/c小鼠,以间接荧光抗体试验(IFAT)和Western blotting鉴定产生的抗体。结果获得了纯化的重组蛋白GST-PbTIP及其相应抗体,该抗体可以识别相对分子质量(Mr)约为60000的伯氏疟原虫感染红细胞内的PbTIP蛋白。结论获得PbTIP重组蛋白及其相应抗体。

化疗对晚期食管癌患者细胞免疫及调节T细胞的影响

目的:探讨晚期食管癌患者化疗前后细胞免疫及调节T细胞(tregs)的变化及其临床价值。方法:采用流式细胞术检测健康志愿者及食管癌患者化疗前后外周血CD4+T、CD8+T细胞及调节T细胞的比例变化。结果:晚期食管癌患者化疗前外周血CD4+T细胞所占比例和CD4+T/CD8+T均较化疗后低,且二者均低于健康对照组(P<0.05)。晚期食管癌患者CD4+CD25+T细胞和Tregs细胞所占比例化疗后较化疗前有所降低,二者均明显高于健康对照组。结论:化疗能明显减轻晚期食管癌患者的肿瘤免疫耐受,改善免疫状况。

αβ-TCR^+CD3^+CD4^-CD8^-双阴性T细胞:一种新发现的免疫调节T细胞

免疫系统对自身或异体抗原产生免疫耐受的主要机制之一 ,是免疫调节T细胞的抑制性调节反应。此理论已在数种进行器官移植和自身免疫研究的动物模型中被证实。现已明确 ,免疫调节T细胞由多种不同的细胞亚型所组成。最近发现 ,一种新的抗原特异性αβ TCR+ CD4 CD8 免疫调节T细胞 (双阴性T细胞 ,DNT )能够抑制具有相同T细胞受者特异性的CD8+和CD4 + T细胞 ,从而抑制异体皮肤移植的排斥反应。有关DN调节T细胞及其独特抑制机制的研究 ,对于了解受者如何获得针对供体移植器官的特异性耐受 ,及正确理解如何保持对自身抗原的外周免疫耐受 。

免疫调节T细胞在再生障碍性贫血细胞免疫功能紊乱中的作用

目的探讨免疫调节T细胞在再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)细胞免疫功能紊乱中的作用。方法选择初发再生障碍性贫血(AA)40例。分组:(1)初发AA,20例,临床诊断符合小儿AA的诊疗建议,且入院前未接受相关治疗。(2)缓解期AA,20例患者再生障碍性贫血经免疫治疗后,临床指标提示造血恢复。(3)对照组,选取与之匹配的正常儿童20例。检测外周血CD 4+、CD 8+、NK及Treg细胞群数量及比例。结果初发组CD 4+及Treg细胞比例(26.8±3.2、3.3±1.1)较缓解组(36.6±3.0、5.9±1.4)及对照组(38.7±7.2、6.0±1.5)低(P<0.05),而CD 8+的细胞的比例(38.4±6.2)、较缓解组(32.1±4.5)及对照组(28.7±7.5)高(P<0.05);初发AA CD4-/CD8+的值为(0.74±0.2)较缓解组(1.2±0.3)及对照组(1.4±0.5)低(P<0.05);缓解组与对照组细胞比例差异无统计学意义。初发组(15.7±4.0)、缓解组(18.2±3.2)与对照组(19.2±5.3)的NK细胞比例差异无统计学意义。结论本研究显示AA患者的造血功能的衰竭与T细胞亚群比例失衡有关,支持了细胞免疫功能紊乱参与AA发生。

CD4^+C25^+Foxp3^+调节性T细胞在自身免疫性疾病中的研究进展

调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是一类能够抑制自身免疫反应、特异性表达Foxp3、分泌IL-10和TGF-β等细胞内因子的CD4+T淋巴细胞亚群。其作用机制是通过调控性抑制效应性T细胞、肥大细胞、树状细胞及B细胞的活性和免疫反应,在预防自身免疫性疾病及肿瘤免疫和抑制耐受方面发挥关键作用。当其功能或数量发生异常变化时,会导致多种自身免疫性疾病的发生。同时,调节性T细胞免疫疗法有可能成为治疗自身免疫性疾病的新途径。本文对CD4+C25+Foxp3+调节性T细胞在自身免疫性疾病中的研究进展进行综述。

进展期胃癌术前术后免疫调节性T细胞和自然杀伤细胞影响的临床分析

目的对进展期胃癌患者术前术后免疫调节T细胞与自然杀伤细胞(NK)水平变化及改善方法进行研究。方法方便选取该院2017年1月-2018年12月收治的58例进展期胃癌患者,将其随机分为两组,每组29例。其中,观察组患者给予脾多肽干预,对照组患者未接受脾多肽干预,对两组患者术前与术后免疫调节性T细胞与自然杀伤细胞水平变化进行观察对比。结果与术前相比,观察组患者术后7 d的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+与NK细胞水平分别为(38.6±5.3)%、(33.2±4.9)%、(28.5±4.1)%、(1.3±0.2)和(18.7±0.7),差异有统计学意义(t=7.596、5.021、4.978、4.029、4.351,差异有统计学意义(P<0.05)),而术后21 d各项指标与术前对比,差异无统计学意义(P>0.05);对照组术前与术后7 d、术后14 d、术后21 d的各项指标变化,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,组间对比显示,观察组患者术后14 d和21 d的各项指标结果与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论进展期胃癌患者手术前后免疫调节性T细胞与NK细胞水平存在明显变化,采用脾多肽能够对患者术后近期免疫功进行改善。

多发性硬化免疫调节细胞的变化及与疾病复发的关系

目的观察复发与缓解期多发性硬化患者免疫调节细胞(CD4+CD25+细胞及Th2细胞)的变化及与疾病复发的关系。方法用流式细胞仪分别对复发期(n=26)及缓解期(n=22)MS患者的外周血标本进行CD4+CD25+细胞及Th2细胞的百分数进行检测,并与疾病复发进行相关性比较。结果复发期与缓解期CD4+CD25+细胞及Th2细胞均少于正常对照标本;而CD4+CD25-细胞及Th1细胞与对照标本比较无统计学意义的差异。CD4+CD25+细胞及Th2细胞的数量与疾病复发具有良好的相关性(P值分别等于0.000及0.003)。结论MS患者在复发期与缓解期均存在有免疫调节细胞数量减少,免疫调节细胞的减少程度与疾病复发具有良好的相关性。

Graves病患者外周血CD4^+、CD25^+调节性T细胞的定量及功能分析

目的:检测Graves病患者外周血CD4+、CD25+免疫调节性T细胞(Tregulatory cells,Tregs)数量并对其进行免疫抑制功能分析,探讨Tregs细胞在其发病机制中的作用。方法:利用不同荧光标记的鼠抗人CD3、CD4、CD25单克隆抗体标记患者及对照组外周血淋巴细胞,流式细胞仪定量检测Tregs细胞占CD4+T细胞的百分比。用CD4细胞阴性选择磁珠分离CD4细胞,用抗CD25的磁珠分选CD25+Tregs和CD25-Tregs的效应性T细胞(T responder cells,Treps),用体外细胞培养和3H-thymidine掺入法测定Tregs细胞对Treps细胞的免疫抑制功能。结果:36例Graves病患者与20例健康对照组外周血CD4+T细胞中Tregs细胞分别为(6.96±1.98)%及(8.22±2.78)%,两者差异无统计学意义(P>0.01)。Graves病患者的Tregs细胞可以抑制自身Treps细胞的体外增殖,1∶1、1∶2、1∶4、0∶1比例平均抑制率分别为(48.2±4.9)%、(29.6±7.1)%、(17.7±5.6)%、0,健康对照组的平均抑制率分别为(73.1±5.3)%、(51.5±5.8)%、(29.6±6.3)%、0。Graves病组与健康对照组相比平均抑制率降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Graves病患者外周血中Tregs细胞的数量与对照组没有差异,但其免疫抑制功能明显降低,提示Tregs细胞功能的降低与Graves病的致病机制存在关联。

与自身免疫T1D相关的控制iNKT细胞发育的基因

iNKT细胞（invariant Natural killer T cells,iNKT cells）,半恒定自然杀伤T细胞,是一群能够调控机体抗病毒、细菌、真菌、寄生虫、肿瘤、同种异体移植物以及自身组织免疫反应的免疫调节性T细胞[1,2]。与传统T细胞相比,iNKT细胞不仅具有CD1d限制性,而且可以同时表达NK细胞表面标志CD161（人类）（鼠类NK1.1）以及恒定的Vα24-Jα18/Vβ11 T细胞受体（TCR）（人类）（鼠类Vα14-Jα18/Vβ8.2、7、2 TCR）。

肠道梭状芽孢杆菌与调节性T细胞的研究进展

FOXP3＋CD4＋T细胞是肠道中最丰富的免疫调节性T细胞（Treg）.肠道Treg具有独特的特点.一小部分肠道Treg表达T细胞受体,可识别来自肠道菌群的抗原.肠道菌群的存在,尤其是梭菌属,影响Treg的发育和功能.这些肠道细菌引起的Treg可能在肠道微生物的耐受中发挥作用.胃肠道是由宿主细胞、食物颗粒和微生物之间通过相互作用构成的一个复杂、动态的生态系统[1].虽然普遍认为在健康成人肠道菌群是相对稳定的,但膳食变化、抗生素治疗或病原体的存在均可导致微生物群落结构发生改变.

CD4^+CD25^+调节性T细胞与大肠癌的关系

近来CD4+CD25+调节性T细胞对肿瘤免疫调节的抑制作用正受到越来越多的重视,许多恶性肿瘤患者外周血都存在CD4+CD25+调节性T细胞比例上调,机体抗肿瘤免疫力下降。大肠癌的发病率正逐年上升,其发病分子机制已为熟知,免疫机制研究不多,国内尚未见大肠癌与该类细胞关系的报道,现对CD4+CD25+调节性T细胞在大肠癌的发生、发展、治疗中的研究综述如下。

Treg细胞在实验性自身免疫性葡萄膜炎发病过程中的动态变化

背景 研究表明,调节性T细胞（Treg）是一类负向调控免疫应答的T细胞亚群,在维持免疫稳态和免疫耐受方面发挥重要作用.自身免疫性葡萄膜炎是一种免疫性眼病,Treg细胞在自身免疫性葡萄膜炎发生和发展过程中的调控作用尚不完全清楚. 目的 观察Treg细胞在实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）大鼠发病过程中的动态变化.方法 选取84只6～8周龄SPF级Lewis大鼠,采用随机数字表法随机分为模型组和对照组.模型组于大鼠双后足垫、腹部双侧及背部皮下注射光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）1177-1191、结核菌素（TB）、完全弗氏佐剂（CFA）和PBS混合乳化剂共300μl,对照组大鼠以同样方法皮下注射等容量不含IRBP的TB与CFA乳化剂.分别于造模后第9、13、18、23、28、35、48天观察模型组和对照组大鼠的眼部炎症症状并根据严重程度进行炎症评分.于造模后上述时间点分别处死模型组及对照组大鼠各6只,采用常规组织病理学方法观察各组大鼠眼部虹膜、睫状体和视网膜组织形态变化;分离大鼠脾脏淋巴细胞,采用流式细胞术检测大鼠脾脏悬液中Treg细胞特异性标志物Foxp3标记细胞比例;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠脾脏淋巴细胞中Foxp3 mRNA相对表达量变化. 结果 免疫后第8天模型组大鼠虹膜血管扩张充血,开始出现眼部炎症表现,免疫后第13天虹膜血管明显扩张,前房可见渗出和积脓,瞳孔区有膜样渗出,炎症评分最高,为（3.75±0.42）分,之后眼部炎症反应逐渐减轻,至免疫后第23天炎症反应接近消失,造模后第7、11、13、15、17、19、21天间模型鼠眼炎症反应评分总体比较差异有统计学意义（F=81.709,P＜0.001）.对照组大鼠眼部检查正常.组织病理学观察发现,模型组大鼠虹膜、睫状体、视网膜等组织有中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞浸润,组织结构排列疏松,以免疫后第13天最为明显,此后逐渐减轻,至免疫后第23天虹膜、睫状体和视网膜组织结构接近正常,炎性细胞浸润消失.流式细胞技术检测发现,免疫后第13、18、23、28、35、48天模型组大鼠脾脏Foxp3标记细胞比例分别为（5.50±0.64）％、（13.36±0.98）％、（10.34±0.79）％、（9.58±1.02）、（6.73±0.81）％和（5.58±0.47）％,明显高于对照组的（2.80±0.38）％、（3.36±0.53）％、（3.65±0.57）％、（3.37±0.43）％、（3.33±0.50）％和（3.13±0.61）％,差异均有统计学意义（t=-6.272、-15.556、-11.910、-9.753、-6.154、-5.491,均P＜0.01）.模型组和对照组造模后各时间点大鼠脾脏淋巴细胞中Foxp3 mRNA的相对表达量变化与Foxp3标记细胞比例变化趋势基本一致. 结论 EAU大鼠葡萄膜炎的发病及转归与Treg细胞数量和功能变化密切相关.

肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样分子2在调节性T细胞中的表达

目的:观察肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样分子2(TIPE2)在CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Treg)中的表达。方法:免疫磁珠法分离正常BALB/C小鼠脾脏CD4^+CD25^+Tregs,流式细胞术鉴定CD4^+CD25^+Treg的纯度。激光共聚焦荧光法检测Treg细胞中TIPE2的分布,并进行初步定位;进一步采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术分别从基因和蛋白水平检测Treg细胞中TIPE2表达。结果:免疫磁珠分选法得到的CD4^+CD25^+Tregs纯度在92%以上,台盼蓝染色显示细胞活性大于97%。Western blot证实Treg细胞中存在清晰TIPE2条带,分子质量为21kD;采用RT-PCR技术在Treg细胞中检测到147 bp大小的特异性TIPE2目的基因条带。结论:TIPE2可表达于小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞。

Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏骨髓来源树突状细胞瘤苗的抗肿瘤免疫学效应

目的：研究Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的骨髓来源树突状细胞（BMDCs）的抗肿瘤免疫生物学效应.方法：用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏BMDCs制成瘤苗,瘤苗的效应通过C57BL/6J小鼠肝细胞癌模型验证.皮下接种Hepal-6细胞8d后,成瘤小鼠随机分实验组,足垫部皮下注射Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏BMDCs;无血清RPMI-1640注射组、BMDCs注射组和单纯Hepal-6细胞裂解蛋白致敏BMDCs注射组.取肿瘤组织分离成细胞悬液,FACS检测CD11c＋细胞、CCR7＋细胞、CD80＋细胞和CD86＋细胞;取淋巴结、脾、肿瘤冷冻切片并采用免疫组织化学检测淋巴结、脾、肿瘤内Foxp3＋细胞浸润的改变;ELISA检测瘤内转化生长因子-p1（TGF-β1）、白细胞介素-10（IL-10）、γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）的表达.结果：实验组肿瘤组织比各对照组有更多的CD11c＋细胞、CCR7＋细胞、CD80＋细胞和CD86＋细胞浸润;与各组对照相比较,实验组Foxp3＋细胞在淋巴结、脾、肿瘤内浸润明显减少;实验组细胞因子TGF-β1、IL-10低于各对照组,IFN-γ、IL-2则高于各对照组.结论：Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs瘤苗能促进DCs在瘤内浸润和成熟,减少Foxp3＋细胞在肿瘤内的浸润,下调免疫抑制细胞因子TGF-β1、IL-10和上调免疫促进因子IFN-γ、IL-2分泌,有较强的抗肿瘤免疫生物学效应.

原发性胆汁性肝硬化患者外周血CD4^+ CD25^+ T细胞的定量及其功能分析

目的检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血CD4+CD25+免疫调节性T细胞(Tregs)数量及其对T效应细胞(Treps)增殖的抑制作用。方法流式细胞仪定量检测PBC患者及对照组外周血中Tregs细胞百分比。统计无症状期、症状期、肝硬化期3组患者Tregs细胞百分比。免疫磁珠分离Tregs,检测CD62L、T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)的表达。体外细胞培养,3H-胸腺嘧啶掺入法测定Tregs对Treps的免疫抑制功能。结果PBC患者外周血CD4+T细胞中的Tregs[3.63±0.92)%]明显低于健康对照组[(7.42±1.09)%,P<0.01)]。无症状期、症状期、肝硬化期各组Tregs细胞分别为(3.93±0.71)%、(3.64±0.83)%、(3.52±0.95)%,均明显低于健康对照组,但3组之间差异无统计学意义。Tregs细胞高表达CD62L、CTLA-4、GITR分子。PBC患者Treps的体外增殖可以被自身Tregs所抑制,1∶1、1∶2、1∶4、0∶1的比例平均抑制率分别为(78.2±4.9)%、(51.6±7.1)%、(21.7±5.6)%、0,健康对照分别为(75.1±5.3)%、(54.5±6.4)%、(27.6±6.3)%、0,两组相比差异无统计学意义。结论PBC患者Tregs数量的降低可能是PBC的致病机制之一。

疏肝平喘方通过转化生长因子-β_(1)/Smad信号通路对哮喘小鼠免疫平衡的影响

目的:阐明疏肝平喘方对哮喘小鼠维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)/叉头框蛋白P3(Foxp3)以及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的干预作用,对转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad信号通路的影响。方法:建立空白对照组、哮喘模型组、疏肝平喘组及地塞米松组实验动物模型。酶联免疫吸附试验检测肺组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17A(IL-17A)和TGF-β_(1)水平,流式细胞仪检测肺组织中Th17/Treg细胞量,蛋白质印迹法检测肺组织中RORγt、Foxp3的蛋白表达,以及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达水平。结果:疏肝平喘方能够降低哮喘小鼠肺组织IL-6、TGF-β_(1),与地塞米松比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),调节IL-10、IL-17A,与地塞米松组相当(均P>0.05);Th17/Treg细胞量,RORγt、Foxp3的蛋白表达量,与地塞米松相当(均P>0.05)。与哮喘模型组比较,疏肝平喘方组、地塞米松组的TGF-β_(1)、Smad2、Smad3的mRNA表达水平下降,而Smad7的mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:疏肝平喘方在改善气道炎症方面,和地塞米松疗效相当,是通过TGF-β_(1)/Smad信号通路,从而调节哮喘小鼠的Th17/Treg免疫平衡。

间充质干细胞对EAU大鼠抗原特异性T细胞和抗原递呈细胞功能的抑制作用

背景 我们前期研究发现,间充质干细胞（MSCs）可以有效治疗大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）,减轻组织损害,但其具体作用机制仍在研究中.目的 研究MSCs对大鼠EAU模型中T细胞亚群和抗原递呈细胞（APCs）的影响.方法 收集6只清洁级4～6周龄Wistar雄性大鼠双侧股骨、胫骨骨髓,采用贴壁培养法纯化Wistar大鼠骨髓MSCs.采用随机数字表法将12只清洁级Lewis雌性大鼠分为MSCs组和PBS组,每组6只.于Lewis大鼠单后足及背部皮下注射200μl含30μg光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP） 1177-1191多肽片段R16及完全弗氏佐剂（CFA）的乳化液以建立EAU模型,造模后于裂隙灯显微镜下观察大鼠眼部炎症表现.造模后9～11d,MSCs组大鼠每日经尾静脉注射密度为5×106/ml的MSCs悬液1 ml;PBS组大鼠以同样的方法注射等容积的PBS.造模后15d,分离各组大鼠脾脏和引流淋巴结中的T细胞及APCs,采用流式细胞仪检测各组大鼠脾脏和引流淋巴结中γ干扰素（IFN-γ）阳性CD4＋T细胞、白细胞介素-17（IL-17）阳性CD4＋T细胞和叉头状螺旋转录因子p3（Foxp3）阳性CD4＋T细胞的比例,以评估辅助性T细胞1（Th1）、Th17和调节性T细胞（Treg）细胞亚群的作用;依据各组T细胞与APCs共培养的方式不同分为PBS共培养组、PBS-MSCs交叉培养组、MSCs-PBS培养组和MSCs共培养组,分别加入不同质量浓度（0.3、1.0、10.0 μg/ml）的R16抗原进行刺激,无R16抗原刺激的细胞作为空白对照,采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）法测定各组大鼠T细胞吸光度（A）值,计算T细胞增生指数.结果 造模后11、12、13和14d,MSCs组大鼠眼前节炎症评分均明显低于PBS组,差异均有统计学意义（t=3.825、5.100、4.250、3.400,均P＜0.05）.与PBS组大鼠比较,MSCs组大鼠脾脏和淋巴结中IFN-γ＋ CD4＋T细胞比例均明显下降,差异均有统计学意义（t=5.651、4.376,均P＜0.05）;MSCs组大鼠脾脏和引流淋巴结中IL-17＋CD4＋T细胞比例均明显下降,差异均有统计学意义（t=3.300、4.925,均P＜0.05）,Foxp3＋ CD4＋T细胞的比例均明显升高,差异均有统计学意义（t=-5.172、-2.825,均P＜0.05）.PBS共培养组大鼠脾脏T细胞增生指数随着R16抗原质量浓度的增加而升高,在各自质量浓度（0.3、1.0和10.0 μg/ml）R16刺激条件下,MSCs共培养组T细胞增生指数较PBS共培养组明显下降,差异均有统计学意义（P=0.027、0.000、0.000）;在R16质量浓度为1.0 μg/ml和10.0 μg/ml条件下,MSCs-PBS交叉培养组和PBS-MSCs交叉培养组T细胞增生指数均明显低于PBS共培养组,差异均有统计学意义（1.0μg/ml R16：P=0.001、0.000;10.0μg/ml R16：P=0.000、0.000）.结论 MSCs可通过同时抑制EAU大鼠体内抗原特异性T细胞和APCs的功能以及上调Treg细胞比例来发挥对大鼠EAU的治疗作用.