抗-Tat抗体预示HIV感染的进程缓慢

据Medscape．com5月4日报道(原载J Infect Dis 2005:191：1321-1324)，在具有抗-Tat抗体的HIV-1血清转换者中HIV疾病的进展可能相对缓慢。

Sanofi—Aventis与日本生物技术公司签署抗LIGHT抗体的研发协议

Sanofi—Aventis公司与日本Kyowa Hakko Kirin生物技术公司就一项早期研究签署协议，并将获得其临床前期炎症分子的权利。

小鼠抗KLH多克隆抗体的制备及TDAR实验间接ELISA定量检测方法的建立

目的:通过制备小鼠抗KLH多克隆抗体,优化反应条件建立KLH特异性抗体ELISA定量分析方法,以期提供一种特异性好、灵敏度高及误差低的TDAR实验检测方法。方法:利用盐析沉淀和亲和层析纯化技术分离和纯化小鼠抗KLH特异性多克隆IgG抗体;以纯化后的抗体作为标准品,建立TDAR实验间接ELISA定量检测方法,并对该方法进行线性范围、特异性、变异系数(CV)及检测限验证。结果:以KLH包被浓度为80μg/ml,山羊抗小鼠IgG/HRP酶标二抗的稀释倍率为1∶20000条件进行间接ELISA定量分析的方法学验证,检测线性范围为390.63~25000 ng/ml,R^(2)=0.9848,线性良好;批内和批间CV均<10%;检测限为194.83 ng/ml。结论:通过制备抗KLH多克隆抗体,并优化实验反应条件来建立间接ELISA定量分析方法,其线性范围、特异性及批内、批间CV均满足实验要求,是一种高灵敏度的TDAR实验检测方法。

嵌合抗原受体T细胞产品非临床免疫毒性评价思考

目的 分析嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞产品非临床免疫毒性,为临床安全使用提供参考。方法 通过介绍CAR-T目前的研究现状,针对其产品的原理、特性和研究方向,以及CAR-T的免疫相关毒性,结合目前现有的指导原则以及免疫毒性试验进行总结和探讨。结果 目前针对不同类型的CAR-T免疫毒性评价方面相关指导原则的内容非常有限。通常是将免疫毒性试验整合到标准毒性实验中去进行初筛,再根据结果选择相应的免疫功能性实验作为附加实验。T细胞依赖性抗体应答(TDAR)是目前较为合适的用于整体评价CAR-T免疫毒性的方法。结论 目前尚没有完善的评价策略对CAR-T细胞产品进行免疫毒性评价。

人源抗汉坦病毒核衣壳蛋白T7噬菌体抗体库的构建

构建人源T7噬菌体单链抗体(scFv)库筛选抗汉坦病毒核衣壳蛋白(NP)抗体。从肾综合征出血热恢复期患者外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA第一条链,PCR分别扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),经重叠延伸拼接(SOE)PCR组成scFv基因,并将其与T7噬菌体载体的2个臂相连接。体外包装后,在宿主菌BLT5403中,扩增重组噬菌体抗体库。以基因工程表达NP进行4轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选,酶免疫实验检测抗体活性。所建抗体库库容为1.35×107,扩增后初级库滴度为2.12×1010pfu/mL。以NP抗原筛选后抗体出现特异性富集,经酶免疫实验鉴定,得到2株与NP抗原特异结合的噬菌体抗体。结果表明,研究成功构建了人源抗NP蛋白T7噬菌体抗体库。

抗乙型肝炎病毒表面抗原T7噬菌体抗体库的构建

构建T7噬菌体单链抗体(scFv)库筛选抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体。从抗-HBs阳性患者外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA第1条链,PCR分别扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),经重叠延伸拼接(SOE)PCR组成scFv基因,并将其与T7噬菌体载体的2个臂相连接。体外包装后,在宿主菌BLT5403中,扩增重组噬菌体抗体库。以乙型肝炎病毒表面抗原进行4轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选,酶免疫实验检测抗体活性。所建抗体库库容为1.53×107,扩增后初级库滴度为2.42×1010pfu/mL。以乙型肝炎病毒表面抗原筛选后抗体出现特异性富集,经酶免疫实验鉴定,得到2株与HBsAg抗原特异结合的噬菌体抗体,成功构建了抗HBsAg蛋白T7噬菌体抗体库。

抗T细胞单克隆抗体对再生障碍性贫血患者TNF和IL-2水平的影响

为探讨抗Ｔ淋巴细胞单克隆抗体（ＭｃＡｂ－Ｔ）对再生障碍性贫血（ＡＡ）患者免疫功能的调节作用，采用放射免疫法检测２５例ＡＡ患者ＭｃＡｂ－Ｔ治疗前后血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和白细胞介素－２（ＩＬ－２）水平及其中１０例周围血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）体外诱生ＴＮＦ和ＩＬ－２水平的变化。结果表明：有效组治疗前血清ＴＮＦ和ＰＢＭＮＣ诱生的ＴＮＦ和ＩＬ－２水平均明显高于正常对照（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）；治疗后均显著降低，与对照组比较无明显差异（Ｐ＞０．０５）。无效组血清和ＰＢＭＮＣ诱生的ＴＮＦ和ＩＬ－２水平治疗前后无显著差异（Ｐ＞０．０５）；但治疗前后ＰＢＭＮＣ诱生的ＴＮＦ和ＩＬ－２水平均明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。提示ＡＡ患者存在造血相关细胞因子分泌异常，ＭｃＡｂ－Ｔ对ＴＮＦ和ＩＬ－２等造血调控因子发挥特异性免疫调节作用。

应用T细胞依赖性抗体反应模型评价参麦注射液对大鼠免疫功能的影响

目的建立T细胞依赖性抗体反应(TDAR)大鼠模型,研究参麦注射液(SMIJ)对大鼠免疫功能的影响。方法 SD大鼠按分组分别ig给予环孢素A(CSA)0.02 g·kg-1,iv给予SMIJ溶剂或SMIJ 0.6,1.2和2.4 g·kg-1,每天1次,连续28 d。于给药第15天和第22天经左后足趾sc给予钥孔其虫戚血蓝蛋白(KLH)2.4 mg·kg-1进行免疫刺激。实验期间观察大鼠的一般状态,每周测体质量和摄食量。在第20天和第29天用ELISA法分别测定大鼠血清KLH-Ig M和KLH-Ig G抗体浓度,第29天活杀大鼠,应用全自动血液分析仪测定血液红细胞和白细胞数及白细胞分类,用天平称取肺、肝、脾和胸腺质量并计算脏器系数,采用HE染色法观察肺、肝、脾、胸腺和淋巴结组织病理变化。结果实验期间未见大鼠死亡,各给药组体质量增长和摄食量无异常。与正常对照组相比,模型组大鼠血清KLH-Ig M和KLH-Ig G抗体浓度均明显增高(P<0.01),提示KLH引起机体免疫应答;与模型组相比,血清KLH-Ig M和KLH-Ig G抗体浓度在CSA组均明显降低(P<0.01),而在SMIJ溶剂组和给药组则无明显变化。给药后第29天,与正常对照组相比,模型组大鼠各项血液学指标和脏器系数无差异,各组织脏器亦无明显病变;与模型组相比,CSA组白细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数、脾和胸腺脏器系数均明显降低(P<0.05,P<0.01),脾出现白髓范围和脾小体淋巴细胞数目减少及淋巴小结界限不清等免疫抑制现象,而SMIJ溶剂和给药组各项血液学和脏器系数均无明显改变,各组织脏器亦无明显病变。结论建立了SD大鼠TDAR研究模型,连续尾静脉给予SMIJ 28 d对SD大鼠TDAR无明显影响。

T细胞多克隆抗体在公民逝世后器官捐献供肾肾移植中的效果分析

目的比较不同T细胞多克隆抗体在公民逝世后器官捐献供肾肾移植中的临床疗效。方法回顾性分析行公民逝世后器官捐献供肾肾移植的691例供、受者的临床资料。根据用于诱导的T细胞多克隆抗体不同,将受者分为兔抗人T细胞免疫球蛋白(rALG)组(414例)和兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白(rATG)组(277例)。收集两组受者移植肾功能恢复情况,包括受者肾移植术后移植肾功能延迟恢复(DGF)和急性排斥反应(AR)的发生情况、术后血清肌酐水平的变化;收集肾移植术后受者和移植肾1年的生存率;统计术后1年内不良反应的发生率;按供者DGF风险评分分为5组,统计各组受者的rALG和rATG的使用比例。结果rALG组和rATG组受者DGF发生率分别为14.5%(60/414)、11.9%(33/277),rALG组、rATG组受者DGF持续时间分别为(7±4)d、(12±7)d,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。rALG组AR发生率为7.5%(31/414),明显高于rATG组的4.0%(11/277)(P<0.05)。两组受者肾移植术后6个月内血清肌酐均呈逐渐下降的趋势。供者DGF风险评分为0~15分的供肾肾移植中,rALG的使用比例显著高于rATG;而供者DGF风险评分>16分的供肾肾移植中,rATG 使用的比例显著高于rALG(P<0.05)。rALG 组和rATG 组受者、移植肾1 年存活率分别为99.8% 和99.6%、98.1% 和98.2%,两组间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。rATG 组受者急性肺水肿和白细胞减少的发生率显著高于rALG 组(均为P<0.05)。结论 rALG 和rATG 均能有效降低公民逝世后器官捐献供肾肾移植术后DGF 及AR 发生率,获得良好的临床效果,rATG 诱导的肾移植受者白细胞减少和急性肺水肿发生率高于rALG。

抗T淋巴细胞单克隆抗体治疗再生障碍性贫血27例临床观察

用抗T淋巴细胞单克隆抗体(McAb—T)治疗再生障碍性贫血(再障,AA)27例:其中急性型7例,慢性型20例,随访观察4～12个月,治疗后Hb、WBC、PLT均明显升高,总有效率为77.78％,T淋巴细胞亚群异常得到纠正。表明McAb—T治疗AA临床疗效显著,且副作用小。

国产T细胞单克隆抗体WuT3治疗移植肾急性排斥反应

1临床资料 1998-06/2000-12我们应用WuT3治疗移植肾难治性急性排斥反应39例,男32例,女7例,年龄23～56岁,其中4例为再次肾移植,其余均为首次肾移植.

两种ELISA试剂检测献血者抗人类嗜T淋巴细胞白血病病毒-Ⅰ/Ⅱ抗体结果分析

目的分析两种酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测抗人类嗜T淋巴细胞白血病病毒(human T-cell leukemia virus,HTLV)-Ⅰ/Ⅱ抗体检测结果的差异,并分析产生差异的原因,为临床实验室试剂的选择提供依据。方法分别采用试剂A对35144份献血者标本和试剂B对69538份献血者标本进行抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体检测,对筛查出的反应性标本采用对应的试剂进行符合性的检测;采用蛋白印迹试验(WesternBlot)对ELISA初筛为反应性抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体血浆标本进行确证试验。结果试剂A检测抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体初筛反应性率1.707‰,确证阳性率28.33%,假阳性率为71.67%;试剂B检测抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体的初筛反应性率0.676‰,确证阳性率63.83%,假阳性率为26.17%;两种试剂阳性符合率为50.47%。两种ELISA试剂的初筛反应性率、确证阳性率有统计学差异(P<0.05)。两种ELISA试剂的敏感度均为100%,试剂A、试剂B的特异度为分别为99.88%、 99.98%,敏感度、特异度均无统计学差异(P>0.05)。结论试剂A和试剂B均存在不同程度的假阳性,试剂A的假阳性率高于试剂B。

T细胞多克隆抗体在公民逝世后器官捐献供肾移植中有效性及安全性的研究

目的观察T细胞多克隆抗体在公民逝世后器官捐献(deceased donation,DD)供肾移植患者中的有效性和安全性。方法回顾性分析昆明市第一人民医院甘美医院自2015年8月20日至2020年2月28日符合研究标准的共324例肾移植受者资料,将其分为使用兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白(rabbit anti human thymocyte immunoglobulin,rATG)的患者(A组)147例,使用抗人T细胞兔免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte rabbit immunoglobulin,ATG-Fresenius)(B组)的患者177例,比较两组患者急性排斥反应(acute rejection,AR)发生情况、术后移植肾功能延迟恢复(delayed graft function,DGF)的情况以及肺部感染、骨髓抑制、巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染情况等。结果A组和B组在DD供肾移植中术后1年内AR发生率分别为32.65%、16.94%(P<0.05);术后1个月内A组发生AR为17例(17/48),B组发生AR为23例(23/30),两组相比具有统计学意义(χ^(2)=12.5737,P<0.01),A组AR发生率低于B组;A组和B组的DGF发生率分别为25.17%(37/147)和12.42%(22/177)(P<0.01);术后30 d,A组DGF发生率较B组更低(P<0.01);术后骨髓抑制、肺部感染、CMV感染3个方面不良事件比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论rATG和ATG-F均能安全有效地运用于DD肾移植术前诱导及术后治疗,rATG纠正DD供肾移植中DGF的作用及降低AR的发生率有着更优的表现。

注射用鼠抗人T淋巴细胞CD25抗原单克隆抗体在肾移植患者体内的药动学与药效学

目的研究注射用鼠抗人T淋巴细胞CD25抗原单克隆抗体(WuTac)在肾移植患者体内的药动学和药效学。方法 16名肾移植患者随机分配到低、高(0.2,0.1 mg.kg-1)2个剂量组,用酶联免疫吸附法检测受试者血清中WuTac和人抗鼠抗体(HAMA)的浓度,评估该药物的药动学行为特征;通过流式细胞仪,检测全血中T细胞表面CD25结合情况,评判其药效学。结果低、高2个剂量组的主要药动学参数:T1/2分别为(51.41±16.24)(,59.53±24.96)h;AUCss分别为(2.28±0.35)(,5.13±1.53)mg.d.L-1;AUC0-t分别为(8.63±1.87)(,19.16±9.01)mg.d.L-1;AUC0-∞分别为(9.11±2.28)(,21.03±10.88)mg.d.L-1;Cmax分别为(3.27±0.53)(,8.36±1.92)mg.L-1;Tmax分别为(2.50±0.76)(,2.47±1.06)h。2组多次恒速滴注停药后,均能饱和T细胞白介2受体(IL-2R)相应结合位点。结论本品在中国肾移植患者起效迅速,疗效持久。多次给药耐受性良好,WuTac在0.1～0.2 mg.kg-1内基本呈线性药动学特征。

血蓝蛋白不同免疫途径对小鼠T细胞依赖性抗体反应的影响

目的探讨以血蓝蛋白(KLH)为特异性T细胞依赖性抗原,不同免疫途径下对小鼠T细胞依赖性抗体反应(TDAR)的影响。方法选用SPF级KM小鼠,分为静脉注射组、皮下注射组、腹腔注射组及空白对照组。通过上述三种途径免疫小鼠,免疫剂量为每只200μg,第10天等剂量加强免疫一次,空白对照组不给予任何药物。于末次免疫后第7天,采血检测血清KLH抗体Ig G含量,计算脾脏器系数,HE染色观察脾组织学变化。结果 KLH三种不同免疫途径均可引起脾出现不同程度次级淋巴滤泡及生发中心的形成,B淋巴细胞凋亡,边缘区细胞增多等病理改变,以腹腔和静脉免疫途径脾形态变化更为明显;三种不同免疫途径均可引起机体产生抗体,与正常对照组相比差异具有显著性(P<0.05),其中静脉途径引起抗体产生浓度最高,明显高于其他两种免疫途径(P<0.05);各组脾脏器系数存在部分差异,其中静脉注射组和腹腔注射组脾脏器系数显著高于空白对照组(P<0.05),静脉注射组脾脏器系数显著高于皮下注射组和腹腔注射组(P<0.05)。结论 KLH三种不同免疫途径引起机体产生抗体浓度、脾脏器系数及形态改变是不完全相同的,可通过这些差异多方面分析TDAR实验结果。

桥本甲状腺炎T_3、T_4自身抗体对RIA测定值的影响

目的 探讨T3、T4 自身抗体对放射免疫法 (RIA)T3、T4 测定值的影响 ,建立测定FT3、FT4 真实浓度方法 .方法 应用抗体结合试验和抗体稀释滴度测定 ,检测桥本甲状腺炎患者血清存在T3、T4 自身抗体 .分段盐析血清蛋白和球蛋白 ,RIA测定无球蛋白血样本FT3、FT4 .结果 T3、T4 自身抗体结合试验呈阳性 .抗体稀释滴度 1:6 4时T3 结合率 ,1:32时T4 结合率才与正常人相似 .盐析球蛋白T3 抗体结合试验呈阳性反应 .无球蛋白血样本FT3、FT4 浓度分别为 0 .72pmol/L和 2 .18pmol/L .结论 实验证明该病人血清存在T3、T4 自身抗体 ,自身抗体干扰RIA测定 ,使T3、T4 测定值假性升高 .自身抗体属于球蛋白 .测定无球蛋白血样本FT3、FT4

CAR-T细胞治疗在自身免疫性疾病中的应用

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞疗法在血液肿瘤取得了令人瞩目的成绩,研究者尝试将该技术拓展用于系统性红斑狼疮、视神经脊髓炎、重症肌无力、1型糖尿病等自身免疫性疾病。本文概述了CAR-T、嵌合自身抗体受体T细胞(CAAR-T)和嵌合抗原受体调节T细胞(CAR-Treg)治疗自身免疫性疾病的病理基础及研究进展。

抗T淋巴细胞单克隆抗体对再生障碍性贫血患者细胞免疫功能的调节作用

为了探讨再生障碍性贫血(AA)的免疫发病机制及抗T淋巴细胞单克隆抗体(MdAb-T)的免疫调节治疗作用,采用酶联免疫法和放射免疫法,检测30例AA患者McAb-T治疗前后周围血T淋巴细胞亚群,血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素2(IL-2)水平及其中10例AA外周血单个核细胞(PBMNC)体外诱生TNF-α和IL-2水平的变化。结果表明:治疗前AA患者T淋巴细胞亚群CD4/CD8比值降低或倒置(P<0.001);淋巴细胞HLA-DR抗原表达增高(P<0.001);血清TNF-α水平显著增高(P<0.01);PBMNC诱生的TNF-α和IL-2水平均明显高于正常对照(P<0.01)。治疗后T淋巴细胞亚群比例恢复正常,血清TNF-α和PBMNC诱生的TNF-α和IL-2水平降低,与对照组比较无显著差异(P>0.05)。T淋巴细胞亚群比例失调和TNF-α与IL-2等造血调控因子异常分泌在AA发病机制中起重要作用。McAb-T能发挥特异性的免疫调节作用,解除T淋巴细胞及相关细胞因子对造血功能的直接或间接抑制作用。

抗人T细胞单克隆抗体的研制及初步鉴定

应用B细胞杂交瘤技术，将胎儿胸腺细胞免疫的BALB／c小鼠脾细胞与Sp2／0骨髓瘤细胞融合，以扁桃体冰冻组织切片免疫酶染色技术作为筛选方法，从两次融合筛选建立了四株分泌抗人T细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞系(分别命名为SM，SM2，SM3和SM4)四次克隆化后，阳性孔率均达100％。经七个月传代培养仍能稳定分泌特异性抗体：液氯冷冻复苏后不影响其产生抗体的能力。