雷利度胺联合地塞米松抗T淋巴瘤细胞作用的研究

目的探讨雷利度胺联合地塞米松对T淋巴瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法预实验后选取雷利度胺(40、80、120、160、200、400、600 mg/L)、地塞米松(50、100、150、200、250 mg/L)及两药联用处理人T淋巴瘤Jurkat细胞24、48、72 h;MTT法测试细胞毒性,流式细胞术检测细胞周期,光镜、荧光显微镜进行形态学观察,Annexin V染色检测凋亡率。结果雷利度胺和地塞米松均以浓度和时间依赖性方式抑制Jurkat细胞生长,诱导Jurkat细胞凋亡。雷利度胺和地塞米松联合处理组的Jurkat细胞增殖受抑率显著高于单用雷利度胺组(P<0.05)和单用地塞米松处理组(P<0.05)。结论雷利度胺和地塞米松联合具有协同抗T细胞淋巴瘤作用,本研究为雷利度胺和地塞米松临床联合应用于T细胞淋巴瘤提供了理论基础。

化疗药物与细胞因子协同作用引起小鼠T淋巴瘤细胞凋亡

本实验旨在了解化疗药物和细胞因子协同作用对细胞凋亡的影响。在培养的小鼠T淋巴瘤RMA细胞系中加化疗药物地塞米松 (DEX)、足叶乙甙 (VP16 )、三氧化二砷 (As2 O3 )及维甲酸(ATRA)以及培养细胞中先分别与细胞因子IL 2 ,IL 6和GM CSF共同培养后再加入上述药物 ,观察对引起细胞凋亡的影响。四种化疗药均能抑制RMA细胞增殖 ,DEX ,VP16和As2 O3 可以诱导细胞凋亡 ,单独使用ATRA不能引起RMA细胞凋亡 ,但与DEX联用时可降低DEX诱导凋亡的浓度。单用IL 2 ,IL 6或GM CSF不引起肯定的细胞凋亡 ;如同时并用IL 2和IL 6则出现肯定的细胞凋亡。化疗药物与细胞因子并用时可减低药物引发细胞凋亡的浓度 ,并使细胞凋亡发生的时间提前。实验结果表明 ,化疗药物与细胞因子在诱导细胞凋亡中具有协同作用 ,为细胞因子特别是IL 2与化疗药物配伍使用治疗恶性淋巴瘤提供了一定实验依据。

XIAP抑制剂Embelin对人T淋巴瘤细胞Jurkat增殖抑制作用

目的:研究XIAP抑制剂Embelin体外对人T淋巴瘤细胞Jurkat增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:应用MTS法分析不同浓度Embelin对人T淋巴瘤细胞增殖的影响;光学显微镜下观察经Embelin处理后细胞形态学的改变;经Annexin V/PI双染后用流式细胞术检测Embelin对Jurkat细胞凋亡的影响;Western blot方法检测Embelin作用后细胞XIAP、PARP、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-xl、Bel-2表达的变化。结果:Emebeli对人白血病细胞具有显著增殖抑制作用(P<0.05);Caspase-3抑制剂z-DEVD-fmk,Caspase-9抑制剂Ac-LEHD-CHO能显著下调这种增殖抑制作用经不同浓度Emebelin处理24 h后,Jurkat细胞凋亡率明显增高,与未处理组比较有显著性差异(P<0.01);经Emebelin处理24 h后,Jurkat细胞出现PARP、Caspase3、9裂解片段,且Bax蛋白表达上调,Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达水平下调结论:Embelin在体外可明显抑制人T淋巴瘤细胞Jurkat的增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是通过拮抗XIAP的作用,激活Caspase依赖性的细胞凋亡内源途径而诱导Jurkat细胞发生凋亡。

蛋白酶体抑制剂MG132对NK/T淋巴瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的:探讨蛋白酶体抑制剂MG132(Z-leu-leu-leu-CHO,三肽基乙醛)对NK/T淋巴瘤细胞的增殖和细胞周期分布的影响,研究蛋白酶体抑制剂MG132治疗NK/T细胞淋巴瘤的潜在应用价值。方法:用蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞,噻唑蓝[3(4,5二甲基噻唑2)2,5二苯基四氮唑溴盐,3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]法检测细胞增殖抑制率,倒置显微镜观察细胞形态改变,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡。结果:1μmol/LMG132作用24h,HANK1细胞增殖抑制率为(57.72±7.44)%,而0.1μmol/LMG132作用24h,增殖抑制率仅为(3.98±0.07)%;MG132剂量大,增殖抑制率高;1μmol/LMG132作用24h后,HANK1细胞G1和G2期细胞分别为(72.33±3.44)%和(12.86±1.29)%,对照组为(63.63±2.29)%和(7.94±1.91)%,用药组G1和G2期细胞明显高于对照组(P<0.01,P<0.05);早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞分别为(33.57±2.10)%和(16.66±0.47)%,而对照组仅为(7.18±0.82)%和(3.81±1.06)%,与对照组相比,凋亡率明显增高(P<0.01,P<0.01)。结论:MG132抑制NK/T细胞淋巴瘤细胞增殖,使细胞周期G1和G2期阻滞,促进细胞凋亡,并存在剂量和时间依赖关系,蛋白酶体抑制剂MG132很可能成为治疗进展期NK/T细胞淋巴瘤的药物。

阿的平诱导结外NK/T淋巴瘤细胞凋亡的实验研究

背景与目的:随着含有门冬酰胺酶化疗方案以及局部放疗和免疫检查点抑制剂的成功应用,结外NK/T细胞淋巴瘤[extranodal natural killer(NK)/T-cell lymphoma,ENKTCL]患者缓解率和无病生存率较以往有显著提高,然而仍有相当一部分进展期ENKTCL患者成为复发/难治性病例。前期研究发现,抗寄生虫小分子化合物阿的平可以抑制包括血液肿瘤在内多种肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡,可能成为新型抗肿瘤药物。进一步探究阿的平对ENKTCL细胞的影响及其可能作用机制。方法:以不同浓度阿的平处理ENKTCL细胞系SNK6和NK92(分别由上海交通大学医学院附属新华医院血液内科和上海血液学研究所提供),观察细胞生长和形态并采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测其增殖,同时应用流式细胞术检测细胞周期、凋亡率以及细胞内线粒体跨膜电位和活性氧水平,进一步利用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞自噬相关蛋白LC3B和P70表达的变化。结果:SNK6和NK92细胞经阿的平处理48 h后,细胞增殖抑制率分别为(47.08±2.19)%和(30.46±7.95)%,明显高于对照组[(11.85±1.89)%和(10.08±2.01)%,P值均<0.05],阿的平处理24 h后处理组SNK6和NK92细胞凋亡率分别达到(86.45±6.54)%和(76.5±10.8)%;显著高于对照组[(3.3±3.24)%和(2.64±1.67)%,P值均<0.05]。同时阿的平处理组SNK6和NK92细胞周期均发生明显S期阻滞,但细胞内线粒体跨膜电位均无显著变化。进一步研究还发现,阿的平能够促使SNK6细胞内活性氧水平升高并抑制SNK6和NK92细胞内P70蛋白磷酸化,同时上调LC3B蛋白表达。结论:阿的平能够诱导ENKTCL细胞增殖阻滞和凋亡,其机制可能与阿的平介导细胞内活性氧水平升高以及抑制mTOR信号通路进而激活细胞自噬有关。

Ad-TRAIL对人T淋巴瘤细胞的感染效果及体外抗肿瘤作用

目的研究携带肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的重组腺病毒(Ad-TRAIL,Ad T)对人T淋巴瘤Jurkat细胞株的感染效果及体外抗肿瘤作用。方法人T淋巴瘤Jurkat细胞株应用携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒载体(Ad-GFP,Ad G)处理,以流式细胞仪分析细胞的GFP表达率。以Ad T处理Jurkat细胞后,RT-PCR检测Ad T感染后1、3、5、7天TRAIL基因的表达情况;MTT法检测Ad T单药以及和化疗药物阿霉素(ADM)、依托泊苷(VP-16)、长春新碱(VCR)、地塞米松(DXM)联合用药的细胞毒作用;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果腺病毒可成功感染Jurkat细胞,Ad T感染Jurkat细胞后目的基因TRAIL可有效表达,并持续至感染后7 d左右。Ad T作用细胞后,可抑制Jurkat细胞的增殖。MTT检测显示,Ad T对肿瘤细胞的增殖抑制呈剂量依赖关系(P均<0.05)。流式细胞仪检测发现,Ad T可诱导淋巴瘤细胞凋亡,且随着剂量增加,诱导凋亡作用增强(P均<0.05)。MTT和流式细胞仪检测发现,Ad T和DXM联合对Jurkat细胞的增殖抑制和诱导凋亡起协同作用,Ad T和ADM、VP-16、VCR联合对细胞的增殖抑制为单纯相加作用。结论 Ad T可成功转染人T淋巴瘤Jurkat细胞株并诱导细胞凋亡,其和化疗药物联用对抑制细胞增殖可起到协同或相加作用。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对小鼠T淋巴瘤细胞EL4中miR-150表达及增殖的影响

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)SAHA对EL4细胞中miR-150表达及增殖的影响。方法使用HDACi SAHA处理EL4细胞,定量RT-PCR法测定各组细胞中miR-150的表达水平,MTT法测定各组细胞增殖能力。结果经HDACi SAHA处理后, EL4细胞中miR-150的表达随着SAHA剂量的增加而增加。经HDACi SAHA处理后,EL4细胞增殖能力下降。结论 HDACi SAHA能够恢复或提高小鼠T淋巴瘤细胞EL4中miR-150表达并抑制EL4细胞增殖。miR-150在EL4细胞中表达可能受乙酰化修饰的调控,乙酰化修饰调控亦可能通过miR-150下调EL4细胞的增殖能力。

Smad真核表达质粒构建及其在小鼠T淋巴瘤细胞中的表达

目的构建并鉴定pc DNA3.1-Smad2、pc DNA3.1-Smad3及pc DNA3.1-Smad4真核表达质粒,探讨Smad在小鼠T淋巴瘤细胞(EL4)中能否稳定表达。方法以EL4细胞c DNA为模板,PCR法获取转录因子Smad2、Smad3、Smad4 mRNA CDS区即目的基因片段;构建含有目的基因的T载体p MD19-T-Smad2、p MD19-T-Smad3、p MD19-TSmad4;用HindⅢ和EcoRⅠ双酶切pc DNA3.1载体、p MD19-T-Smad2,用XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切pc DNA3.1载体、p MD19-T-Smad3及p MD19-T-Smad4,T4 DNA连接酶连接纯化后的酶切产物;将连接产物转化DH5α大肠杆菌感受态细胞并挑选阳性克隆,扩大培养并提取重组质粒;通过PCR、双酶切及DNA测序等方法鉴定重组质粒。将构建好的pc DNA3.1-Smad2、pc DNA3.1-Smad3、pc DNA 3.1-Smad4电转入EL4细胞,72 h后用Western blotting法检测EL4细胞中目的蛋白的表达。结果 PCR和双酶切结果均提示重组质粒pc DNA3.1-Smad2、pc DNA3.1-Smad3、pc DNA3.1-Smad4构建成功;测序结果确定插入片段无突变,序列完全正确。重组质粒pc DNA3.1-Smad2、pc DNA3.1-Smad3、pc DNA3.1-Smad4转入EL4细胞后上调目的蛋白Smad2、Smad3、Smad4蛋白的表达。结论成功构建pc DNA3.1-Smad2、pc DNA3.1-Smad3和pc DNA3.1-Smad4真核表达质粒;将Smad真核表达质粒成功转染入EL4细胞,诱导细胞内目的蛋白高表达。

人T淋巴瘤细胞免疫表型分析及生长因子的探讨

建立一个良好的肿瘤细胞系,必须弄清楚它的生物学特性,这样有助于肿瘤学、免疫学等方面的研究。我们于1990年建立了一株人T淋巴瘤细胞系,命名H—TL_(90)。现将其免疫学表型分析及生长因子的探讨报告如下: 一、免疫学表型分析 用针对淋巴细胞CD抗原的FITC荧光标记单克隆抗体(CD_3、CD_4、CD_7、CD_8、CD_(16)、CD_9、

皮肤T细胞淋巴瘤的治疗进展

皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)是一组原发于皮肤的非霍奇金淋巴瘤。蕈样肉芽肿是最常见的CTCL类型,多数患者处于疾病早期,发展缓慢,以局部治疗为主。但进展期(ⅡB期~Ⅳ期)患者可累及淋巴结、血液和内脏器官,尚缺少有效的治疗方法,进展期患者预后不佳,5年生存率仅为47%。近年随着对肿瘤发病机制的认识加深,出现多种新型疗法,如单克隆抗体和抗体偶联药物、表观遗传学修饰药物、免疫检查点抑制剂等。该文对CTCL的发病机制及治疗进展作一综述。

以眼部肿物为首发表现的鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤的临床分析

目的 比较以眼部肿物为首发表现的鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal NK/T-cell lymphoma,nasal type,ENKTCL),与其他部位首发的ENKTCL临床特征、疗效及预后的差异。方法 回顾性分析2009年5月至2021年2月于首都医科大学附属北京同仁医院血液科收治的266例新诊断且未经治疗的ENKTCL患者的临床资料,结合随访调查,对两组患者的临床特征、治疗后缓解率及生存情况进行比较分析。结果 266例ENKTCL患者中,26例患者以眼部肿物为首发表现,其中眼睑肿胀为最常见的临床表现。与其他ENKTCL组相比,眼部ENKTCL组中Ⅲ/Ⅳ期患者所占比例更高(23.8%vs 42.3%,P=0.0394),LDH升高患者的比例更高(27.1%vs 46.2%,P=0.0417)。预后方面,眼部ENKTCL组KPI评分≥3分的患者比例高于其他ENKTCL组(46.2%vs 21.3%,P=0.0046);眼部ENKTCL组PINK评分为高危组的患者比例高于其他ENKTCL组(38.5%vs 19.2%,P=0.0219)。疗效方面,两组患者在治疗方案选择上差异无统计学意义;眼部ENKTCL组评效为疾病进展的患者比例高于其他ENKTCL患者组(46.2%vs 22.9%,P=0.0090)。生存方面,眼部ENKTCL组中死亡患者共有12(46.2%)例,其他ENKTCL组中有56(23.3%)例。两组患者3年及5年的PFS率差异无统计学意义,但眼部和其他ENKTCL组3年的OS率分别为69.2%和76.7%,以及5年的OS率分别为58.6%和72.2%,差异有统计学意义(P=0.0321)。结论 以眼部肿物为首发临床表现的ENKTCL具有高肿瘤负荷、疾病进展快、对治疗的反应不佳及预后差等特点,及时进行影像学检查及组织活检对明确诊断尤为重要。

鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤误诊为鼻窦炎眶周蜂窝织炎1例

1临床资料患者,男,34岁,因“鼻堵脓涕1月余伴右眼红肿2周”于门诊就诊。患者1个月前在劳累饮酒后出现双侧持续性鼻堵、黄脓涕,伴双侧额部头痛、右眼眶重度胀痛,需口服止痛药缓解疼痛。2周前右眼疼痛加重,伴视物稍模糊,无复视,伴发热,体温最高38.2℃。门诊初步疑诊“急性鼻窦炎眶周蜂窝织炎”收治入院。发病以来患者神清,精神可,食欲尚可,近6个月体重下降约30斤,夜间睡眠差,伴乏力。

1例外周T细胞淋巴瘤患者PICC术后CRBSI的案例分析

通过回顾性分析我科收治的1例外周T细胞淋巴瘤患者PICC术后发生导管相关血液感染(CRBSI)的护理过程,并阅读相关文献报道,总结经验,为皮肤型淋巴瘤患者选择血管通路时提供一定的参考依据,从而提高护理质量安全。

治疗前淋巴细胞与C反应蛋白比值对结外NK/T细胞淋巴瘤预后的判断价值

目的:探讨治疗前淋巴细胞与C反应蛋白比值(LCR)对结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)预后的判断价值。方法:回顾性分析郑州大学第一附属医院收治的203例初诊为ENKTL患者的临床资料,ROC曲线得到LCR预测5 a总生存期(OS)的最佳截断值,并根据截断值将患者分为两组,绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用Cox回归分析无进展生存期(PFS)和OS的影响因素。结果:LCR预测5 a OS的最佳截断值为0.19,低LCR组患者预后较差(P<0.001)。Cox回归分析结果表明,低LCR组ENKTL患者预后较差,PFS和OS的HR(95%CI)分别为0.462(0.336~0.636)和0.381(0.275~0.527)。结论:治疗前LCR可影响ENKTL预后,低LCR患者的预后较差。

原发性十二指肠T淋巴细胞淋巴瘤病例回顾

原发性肠道淋巴瘤(PIL)最常见的部位是回盲部,病理类型以B细胞来源为主,其中弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)最为常见,其次是黏膜相关淋巴组织型边缘区B细胞淋巴瘤。PIL总体发病率偏低,但呈逐渐上升趋势。国内有关PIL的报道较少。现报告1例原发性十二指肠T淋巴细胞淋巴瘤。

PD-1/PD-L1抑制剂治疗结外NK/T细胞淋巴瘤研究进展

结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal NK/T-cell lymphoma,ENKTCL)是一种罕见的且具有高度侵袭性的非霍奇金淋巴瘤,与EB病毒感染密切相关。目前,ENKTCL治疗手段包含化疗、放疗、造血干细胞移植以及免疫治疗等。近年来,随着ENKTCL发病机制的深入研究,针对PD-1/PD-L1的免疫检查点治疗被认为具有重要的临床价值。本文综述了PD-1/PD-L1抑制剂的作用机制,总结了其在ENKTCL治疗领域的临床研究进展以及预测疗效的标志物的选择,并概述了PD-1/PD-L1抑制剂治疗ENKTCL所面临的限制因素以及未来的发展前景。

儿童T淋巴母细胞淋巴瘤采用白血病方案治疗的预后分析

目的探讨儿童T淋巴母细胞淋巴瘤(T-lymphoblastic lymphoma,T-LBL)采用急性淋巴细胞白血病(autelymphoblasticleukemia,ALL)方案治疗的预后及相关影响因素。方法回顾性总结2010年5月—2022年5月收治的29例T-LBL患儿采用同期ALL方案(ALL-2009方案或CCCG-ALL-2015方案)治疗的预后特点。结果29例T-LBL患儿5年总生存(overall survival rate,OS)率及无事件生存(event-free survival,EFS)率分别为(84±7)%、(81±8)%。初诊时全身症状有B症状(不明原因发热>38℃,连续3d以上;盗汗;体重在6个月内下降大于10%)的患儿5年EFS率低于无B症状患儿(P<0.05)。初诊时血小板计数>400×10^(9)/L、同时累及纵隔和淋巴结的患儿5年OS率较低(P<0.05)。CCCG-ALL-2015方案和ALL-2009方案的5年OS率及EFS率比较差异无统计学意义(P>0.05)。CCCG-ALL-2015方案相较于ALL-2009方案减少大剂量氨甲蝶呤化疗次数,降低重症感染率(P<0.05)。结论儿童T-LBL采用ALL方案治疗安全有效;初诊时全身症状有B症状、血小板计数>400×10^(9)/L、同时累及纵隔和淋巴结的患儿预后较差;减少大剂量氨甲蝶呤化疗次数能够降低重症感染率,但不影响预后。

儿童急性早幼粒细胞白血病治疗后继发T淋巴母细胞淋巴瘤1例临床报告

目的总结急性白血病治疗后继发非霍奇金淋巴瘤患儿的临床诊治过程,探讨疾病相关机理。方法回顾性分析1例急性早幼粒细胞白血病(APL)治疗后继发T淋巴母细胞淋巴瘤(T-LBL)患儿的临床资料,并检索急性白血病治疗后继发非霍奇金淋巴瘤的文献报告进行总结。结果患儿,男,10岁,因“间断发热”起病,确诊APL后,在治疗过程中出现骨髓复燃,调整治疗方案后达完全缓解,然而在结束白血病治疗后因淋巴结肿大诊断为T-LBL,经规范化疗再次得以缓解。检索近10年文献,急性白血病治疗后继发非霍奇金淋巴瘤共报告9例,均为成人病例,其中6例患者至报告时均为无病生存状态。结论急性白血病治疗后继发非霍奇金淋巴瘤的发生率低、预后较好。此外,对肿瘤性疾病化疗后的患者,需注意继发性肿瘤的发生,应用先进检测技术可提高对继发性肿瘤致病机制的认知。

误诊为丹毒的结外NK/T细胞淋巴瘤一例

结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)是一种罕见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤亚型。本文报道以面部肿胀为表现的结外NKT细胞淋巴瘤一例,患者曾多次被误诊为“丹毒、蜂窝组织炎”等,最终通过病理、免疫组化等检查确诊,给予DDGP方案(培门冬酶、吉西他滨、顺铂、地塞米松)化疗,随访9个月患者恢复良好。

多中心成人早期前体T细胞白血病/淋巴瘤的临床特征及预后研究

目的:对3个血液学中心的成人早期前体T细胞白血病/淋巴瘤(ETP-ALL/LBL)患者进行回顾性分析,总结其临床特点、治疗及预后影响因素。方法:收集2006年1月至2019年1月来自北京大学第三医院、解放军第一医学中心和中国医学科学院血液学研究所3个血液研究中心共113例T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤(T-ALL/LBL)患者的临床数据资料,对其中ETP-ALL/LBL及非ETP-ALL/LBL患者的临床特征及预后进行分析比较。结果:113例T-ALL/LBL患者中,13例诊断为ETP-ALL/LBL(11.5%),其中男性患者11例(84.6%),中位年龄28(18-53)岁。与非ETP-ALL/LBL患者相比,ETP-ALL/LBL患者在年龄、性别、纵隔大包块发生率、临床分期、IPI评分、白细胞水平、乳酸脱氢酶水平方面差异无统计学意义。在13例ETP-ALL/LBL患者中,9例(69.2%)获得完全缓解,ETP-ALL/LBL患者较非ETP-ALL/LBL患者化疗诱导缓解率无统计学差异。在单纯化疗未进行异基因造血干细胞移植的患者中,ETP-ALL/LBL组较非ETP-ALL/LBL组显示出更差的5年生存率(0 vs 7.1%,P=0.008),而在进行异基因造血干细胞移植的患者中,两组5年生存率无统计学差异(37.5%vs 40.2%,P>0.05)。多因素Cox回归分析提示,诱导治疗达到完全缓解、异基因造血干细胞移植以及乳酸脱氢酶水平为影响T-ALL/LBL的独立预后因素。结论:ETP-ALL/LBL较其他类型T-ALL/LBL患者诱导化疗反应率无显著差异,诱导缓解后续贯异基因造血干细胞移植巩固治疗对于提高ETP-ALL/LBL患者远期生存率具有重要意义。