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间充质干细胞对肺动脉高压的治疗作用及其对肿瘤坏死因子α/活化T淋巴细胞核因子的影响 被引量:3
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作者 吴西军 刘俊峰 何志旭 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2017年第13期1018-1021,共4页
目的阐释肿瘤坏死因子-α(TNF-α)/活化T淋巴细胞核因子(NFAT)通路是间充质干细胞(MSC)治疗肺动脉高压(PH)过程中抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的主要作用途径。方法利用人脐带来源的MSC对野百合碱诱导的PH大鼠模型进行治疗。大鼠... 目的阐释肿瘤坏死因子-α(TNF-α)/活化T淋巴细胞核因子(NFAT)通路是间充质干细胞(MSC)治疗肺动脉高压(PH)过程中抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的主要作用途径。方法利用人脐带来源的MSC对野百合碱诱导的PH大鼠模型进行治疗。大鼠分为对照组、PH模型组、MSC治疗组。观察大鼠一般情况,检测血流动力学,采用病理切片、免疫组织化学染色等方法检测肺组织结构改变情况,同时检测TNF-α/NFAT的变化情况。结果与PH模型组大鼠比较,MSC治疗组一般情况明显趋于正常,右心室收缩压(RVSP)下降[(30.37±3.13) mmHg比(47.90±3.45) mmHg,1 mmHg=0.133 kPa],主动脉压(MAoP)上升[(115.03±16.01) mmHg比(92.78±16.28) mmHg],动脉中膜增厚情况明显减轻[(17.22±1.21)%比(31.68±2.26)%],血浆TNF-α水平明显降低[(842±76) ng/L比(245±24) ng/L],肺组织TNF-α水平降低(0.172±0.024比0.248±0.051),差异均有统计学意义(均P〈0.05)。MSC治疗组肺动脉NFATc2的活化明显受抑制。结论MSC治疗PH是通过TNF-α/NFAT通路抑制炎症相关的肺动脉血管平滑肌细胞过度增殖,从而发挥治疗作用。 展开更多
关键词 间充质干细胞 肺动脉高压 肿瘤坏死因子 活化t淋巴细胞核因子
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雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎Th_1反应相关因子的抑制作用 被引量:2
2
作者 乔治 刘春 张梁海 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2002年第4期333-335,共3页
目的:探讨雷公藤内酯醇(TP)对试验性色素膜视网膜炎(EAU)Th1反应相关因子的抑制作用。方法:用ELISA检测IL-12、IFN-γ水平;采用原位杂交染色法,观测TP对EAU的T淋巴细胞IL-12mRNA的表达的影响;采用电泳迁移率改变试验对EAU T淋巴细胞... 目的:探讨雷公藤内酯醇(TP)对试验性色素膜视网膜炎(EAU)Th1反应相关因子的抑制作用。方法:用ELISA检测IL-12、IFN-γ水平;采用原位杂交染色法,观测TP对EAU的T淋巴细胞IL-12mRNA的表达的影响;采用电泳迁移率改变试验对EAU T淋巴细胞NF-AT活性检测。结果:①TP能有效的降低S-抗原诱导产生的EAU(P<0.05);②TP能降低EAU T淋巴细胞IL-12、IFN-γ分泌水平;③P能抑制EAT淋巴细胞IL-12 mRNA的表达;④TP抑制EAU T淋巴细胞NF-AT活性。结论:TP对EAU的免疫抑制作用可能是通过抑制与Th1反应相关的调节因子使Th1反应减弱,而使EAU的发病率明显降低。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 试验性色素膜视网膜炎 IL-12 t淋巴细胞转录因子 IFN-Γ
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人脐带间充质干细胞对T细胞活化介导的肺动脉平滑肌细胞增殖抑制及机制研究
3
作者 吴西军 刘庆 +2 位作者 刘俊峰 杨小燕 何志旭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期2174-2180,共7页
目的阐释人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hu-MSCs)抑制T淋巴细胞活化介导的肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖的作用及可能的调节机制。方法复苏并培养hu-MSCs和大... 目的阐释人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hu-MSCs)抑制T淋巴细胞活化介导的肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖的作用及可能的调节机制。方法复苏并培养hu-MSCs和大鼠来源的PASMCs、T细胞,将实验分为PASMCs对照组、T细胞刺激组(PASMCs+T淋巴细胞)、MSC干预组(PASMCs+T淋巴细胞+MSC)、英夫利西单抗干预组(PASMCs+T淋巴细胞+英夫利西单抗)、TNF-α刺激组(PASMCs+T淋巴细胞+MSC+TNF-α)。通过荧光分光光度计、RT-qPCR、倒置荧光显微镜观察等方法研究钙调磷酸酶、T淋巴细胞核因子的变化。结果 T淋巴细胞刺激组TNF-α浓度明显升高(P<0.01);MSCs与英夫利西单抗均能明显降低其TNF-α浓度(P<0.01)。与单纯PASMCs对照组比较,T淋巴细胞刺激组PASMCs的增殖能力明显增强(P<0.01),胞浆中游离钙离子的浓度明显升高(P<0.01),胞内CaN的表达(P<0.01)和活性(P<0.01)均显著上调,NFATc2的表达和活性亦显著上调(P<0.01);与T淋巴细胞刺激组相比,MSCs干预组、英夫利西单抗干预组PASMCs的增殖被明显抑制(P<0.01),胞浆中游离钙离子的浓度均明显下降(P<0.01),胞内CaN的表达(P<0.01)和活性(P<0.01)均显著下调,NFATc2的表达(P<0.01)和活性亦下调;外源TNF-α可有效逆转MSC的干预作用,其作用与T淋巴细胞刺激组几乎相当。结论 hu-MSCs可以通过改变CaN、NFATc2的表达和活化状态,抑制T淋巴细胞活化,抑制炎症因子TNF-α导致的PASMCs增殖。 展开更多
关键词 间充质干细胞 肺动脉平滑肌细胞 细胞增殖 肿瘤坏死因子α 钙调磷酸酶 t淋巴细胞核因子
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间充质干细胞条件培养基对炎症介导的肺动脉血管平滑肌细胞增殖调控的研究 被引量:2
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作者 牛志浩 刘庆 +2 位作者 刘俊峰 吴西军 何志旭 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第6期641-645,共5页
目的:探讨间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)对炎症介导的肺动脉血管平滑肌细胞(PASMC)增殖的调控机制。方法:取4~6代处于对数生长期人脐带MSC,建立体外细胞培养体系,分为对照组(PASMC)、T淋巴细胞刺激组(PASMC+T淋巴细胞)、MSC-CM干预组(... 目的:探讨间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)对炎症介导的肺动脉血管平滑肌细胞(PASMC)增殖的调控机制。方法:取4~6代处于对数生长期人脐带MSC,建立体外细胞培养体系,分为对照组(PASMC)、T淋巴细胞刺激组(PASMC+T淋巴细胞)、MSC-CM干预组(PMSMC+T淋巴细胞+MSC-CM);分别于培养第3天时,检测3组培养上清中肿瘤坏死因子(TNF)-α含量、PASMC的增殖、钙调神经磷酸酶(Ca N)活性及活化的T淋巴细胞核因子2(NFATc2)活化情况。结果:与T淋巴细胞刺激组比较,MSC-CM干预组TNF-α的生成显著减少(P<0.01);与对照组和T淋巴细胞刺激组比较,MSC-CM干预组的PASMC内Ca N的磷酸酶活性降低、NFATc2的活化减少,PASMC的增殖降低(P<0.01)。结论:MSC-CM可能通过Ca N/NFAT信号通路抑制炎症介导的PASMC增殖。 展开更多
关键词 间充质干细胞 肺动脉高压 平滑肌 增殖 肿瘤坏死因子 t淋巴细胞核因子2 钙调神经磷酸酶
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雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎IL-12 mRNA表达以及NF-AT活性的抑制作用
5
作者 乔治 张良海 +1 位作者 刘春 梁刚 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期601-603,共3页
目的 :探讨雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎IL 12mRNA表达的影响及其机制。方法 :采用原位杂交染色法和电泳迁移率改变试验观测雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎的T淋巴细胞IL 12mRNA的表达及NF AT活性。结果 :雷公藤内酯醇能有... 目的 :探讨雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎IL 12mRNA表达的影响及其机制。方法 :采用原位杂交染色法和电泳迁移率改变试验观测雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎的T淋巴细胞IL 12mRNA的表达及NF AT活性。结果 :雷公藤内酯醇能有效地降低S 抗原诱导产生的试验性色素膜视网膜炎 ,能抑制淋巴细胞IL 12mRNA的表达及NF AT活性。结论 :雷公藤内酯醇对EAU的免疫抑制作用可能是通过抑制与Th1反应相关的调节因子使Th1反应减弱 。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 色素膜视网膜炎 IL-12mRNA t淋巴细胞转录因子 原位杂交染色法 实验研究
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杨梅黄酮通过激活miR-361-3p/NFAT5通路改善大鼠急性肺损伤 被引量:1
6
作者 朱晖 吉宏学 《湖北医药学院学报》 CAS 2021年第6期571-577,F0003,共8页
目的:探讨杨梅黄酮对大鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法:采用脂多糖腹腔注射建立大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,雄性SD大鼠50只随机分为5组(n=10):正常对照组、ALI模型组、低剂量杨梅黄酮组、中剂量杨梅黄酮组和高剂... 目的:探讨杨梅黄酮对大鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法:采用脂多糖腹腔注射建立大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,雄性SD大鼠50只随机分为5组(n=10):正常对照组、ALI模型组、低剂量杨梅黄酮组、中剂量杨梅黄酮组和高剂量杨梅黄酮组。检测肺损伤指标:肺泡灌洗液(BALF)总蛋白浓度、肺湿/干重比值、苏木素伊红染色;检测肺部炎性反应指标:BALF中炎性因子白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性及细胞计数;检测信号机制分子:肺组织miR-361-3p和活化性T淋巴细胞核因子5(NFAT5)表达量。另培养的A549细胞随机分为8组:对照组、脂多糖组、低剂量杨梅黄酮组、中剂量杨梅黄酮组、高剂量杨梅黄酮组、miR转染空白对照(miR-NC)组、miR-361-3p拟似物(miR-361-3p mimic)组和KRN2(NFAT5抑制剂)组。TUNEL免疫荧光技术检测A549细胞凋亡率;检测A549细胞中凋亡相关蛋白Bax表达量及培养液中IL-6和TNF-α含量。结果:与正常对照组比较,ALI模型组肺湿/干重比值增大,BALF中总蛋白浓度升高,细胞计数增大,IL-6和TNF-α含量升高,肺组织MPO活性升高,NFAT5表达量增多,而肺组织miR-361-3p表达量减少。与ALI模型组比较,中、高剂量杨梅黄酮治疗明显降低肺湿/干重比值,降低BALF中总蛋白浓度,减小细胞计数,减少IL-6和TNF-α含量,降低肺组织MPO活性,减少NFAT5表达量,升高肺组织miR-361-3p表达量。机制上,应用miR-361-3p拟似物预处理可降低A549细胞中NFAT5表达量;中、高剂量杨梅黄酮、miR-361-3p拟似物和NFAT5抑制剂KRN2均明显减轻A549细胞凋亡和减少炎性因子释放。结论:杨梅黄酮通过调控炎症相关miR-361-3p/NFAT5信号轴而改善急性肺损伤,为杨梅黄酮在急性肺损伤临床治疗中的应用提供实验依据。 展开更多
关键词 杨梅黄酮 急性肺损伤 微型RNA 活化性t淋巴细胞核因子5
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NFAT5基因报告载体的构建及其与miR-155关系的实验研究 被引量:1
7
作者 舒彬 李文婷 +5 位作者 刘真 张亚洁 尹斌 赵盼 张同威 贾赤宇 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第8期1009-1011,1014,共4页
目的通过生物信息软件预测出miR-155的靶基因,构建miR-155靶基因荧光素酶基因报告载体,验证其与miR-155的对应关系。方法以数据库miR Base为依据,对miR-155进行生物信息学分析,通过Target Scan、Mir Base、Pic Tar三大软件预测miR-155... 目的通过生物信息软件预测出miR-155的靶基因,构建miR-155靶基因荧光素酶基因报告载体,验证其与miR-155的对应关系。方法以数据库miR Base为依据,对miR-155进行生物信息学分析,通过Target Scan、Mir Base、Pic Tar三大软件预测miR-155的靶基因;将设计合成的T淋巴细胞核因子5(NFAT5)及其突变序列NFAT5-mu序列分别克隆至荧光素酶报告质粒pMIR-REPORT^(TM) Luciferace;将第4代人胚胎肾293AD(HEK-293AD)细胞按随机数字表法分为4组:miR-155mimics+pMIR-NFAT5组、miR-155 mimics+pMIR-NFAT5-mu组、miR-155inhibitor+pMIR-NFAT5组、miR155 Negative control+pMIR-NFAT5组与对照质粒(pRL-TK)共转染24h后用双荧光素酶检测试剂盒测定相对荧光素酶活性。结果 Mirbase、TargetScan、PicTar预测交叉结果显示,NFAT5基因3′UTR与miR-155存在结合互补位点;构建pMIR-NFAT5、pMIR-NFAT5-mu重组质粒经酶切及测序鉴定正确;双荧光素酶报告基因检测系统显示:pMIR-NFAT5+miR155 mimics组较pMIR-NFAT5+miR-control组荧光素酶活性降低,差异有统计学意义(P<0.01);而其他组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建pMIR-NFAT5、pMIR-NFAT5-mu荧光素酶报告基因重组质粒;证实miR-155对NFAT5基因mRNA 3′-UTR具有靶向调控作用,为下一步研究miR-155在吸入性肺损伤机制中的作用提供前期实验室数据和方法。 展开更多
关键词 t淋巴细胞核因子5 MIR-155 荧光素酶基因报告载体
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Relations of transcription expression of IL-2 with nuclear factor of activated T cells as well as changes of C-Fos and C-Jun after trauma 被引量:1
8
作者 罗艳 梁华平 +2 位作者 胡承香 徐祥 王正国 《Chinese Journal of Traumatology》 CAS 2002年第5期275-278,共4页
Objective: To observe the relations among expression of interleukin 2 (IL 2) in spleen lymphocytes, DNA binding activity of nuclear factor of activated T cells (NFAT) and expression of the partly family members C Fos,... Objective: To observe the relations among expression of interleukin 2 (IL 2) in spleen lymphocytes, DNA binding activity of nuclear factor of activated T cells (NFAT) and expression of the partly family members C Fos, C Jun after trauma. Methods: A murine closed trauma model was used, animals were sacrificed 6, 12 hours and 1, 4, 7, 10, 14 days, respectively after injury. Spleen lymphocytes were isolated from injured mice and stimulated with concanavalin A. The culture supernatants were harvested and assayed for IL 2 activity. Total RNA was extracted from spleen lymphocytes and assayed for IL 2 mRNA. Nuclear protein was extracted, and the DNA binding activity of NFAT was measured using an electrophoretic mobility shift assay (EMSA), the expressions of C Fos, C Jun protein determined by Western blot analysis. Results: The expressions of IL 2 activity and IL 2 mRNA in spleen lymphocytes were decreased in injured mice compared with those in control mice, and the most obvious decrease appeared on the 4th day after injury. The DNA binding activity of NFAT decreased gradually and reached the minimum that was only 41% of the control on the 4th day after injury, which was closely associated with the decline of IL 2 activity and IL 2 mRNA. An decrease in the expression of C Fos on the 1st and 4th day after injury, trauma had no significant effect on the C Jun expression. Conclusions: These results suggest that the inhibition of IL 2 expression is partly due to the impairment in the activation of NFAT in injured mice; and the decline in the DNA binding activity of NFAT is partly due to trauma block in the C Fos expression. 展开更多
关键词 transcription factors Wounds and injuries Interleukin 2
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