目的:观察乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染对机体免疫功能的影响,研究补肾健脾方对HBV感染者免疫功能的影响。方法:(1)将招募的慢性HBV感染者及健康志愿者分为实验组和对照组,采集各组研究对象的外周血,分离血清,ELISA法检测...目的:观察乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染对机体免疫功能的影响,研究补肾健脾方对HBV感染者免疫功能的影响。方法:(1)将招募的慢性HBV感染者及健康志愿者分为实验组和对照组,采集各组研究对象的外周血,分离血清,ELISA法检测两组血清中γ干扰素(IFN-γ)、α干扰素(IFN-α)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术(FCM)检测两组的PBMC中自然杀伤细胞(NK)、辅助性T细胞1(Th1)、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)数量及胞内IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-12、TNF-α、干扰素基因刺激蛋白(STING)、T盒子转录因子(T-BET)、信号传导转录激活因子4(STAT4)蛋白表达水平。(2)制备大鼠含药血清,通过WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒筛选含药血清干预PBMC的安全剂量;以HBV感染者PBMC为实验对象将其分为3个组,空白对照组、空白血清组和含药血清组,干预48 h后,ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-12、TNF-α含量,FCM检测各组PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量及胞内细胞因子水平;RT-qPCR法检测各组细胞因子mRNA表达。结果:(1)与健康志愿者相比,HBV感染者血清中IFN-γ、IL-12含量和PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量明显降低(P<0.05);HBV感染者PBMC胞内IFN-γ、IL-12、TNF-α、STAT4、T-BET较健康志愿者合成减少(P<0.05)。(2)与空白血清组相比,补肾健脾方含药血清组PBMC细胞培养上清中IFN-γ、IL-12含量明显升高(P<0.05);补肾健脾方含药血清组PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量以及胞内IFN-γ蛋白表达水平较空白血清组明显升高(P<0.05);与空白血清组相比,补肾健脾方含药血清可明显上调Ifnγ、IL2、Il12、TnfαmRNA表达(P<0.05)。结论:补肾健脾方可通过上调CTL、Th1、NK细胞数量,促进IL-12分泌,进而促进IFN-γ的合成与分泌,从而恢复HBV感染者PBMC的免疫功能。展开更多
本研究旨在探讨PD-L1和PD-L2在卵巢癌组织中的表达及其与疾病预后的关系。采用免疫组化法检测77例卵巢癌组织PD-L1和PD-L2的表达,取10例卵巢子宫内膜异位囊肿组织作为对照;Kaplan-Meier法比较不同PD-L1、PD-L2表达水平单独或联合分析对...本研究旨在探讨PD-L1和PD-L2在卵巢癌组织中的表达及其与疾病预后的关系。采用免疫组化法检测77例卵巢癌组织PD-L1和PD-L2的表达,取10例卵巢子宫内膜异位囊肿组织作为对照;Kaplan-Meier法比较不同PD-L1、PD-L2表达水平单独或联合分析对患者术后总生存期(overall survival,OS)的影响;流式细胞术分离TIL及其亚群分析PD-L1、PD-L2的表达。结果显示,PD-L1和PD-L2主要表达在卵巢癌细胞膜上和细胞质中。PD-L1在卵巢癌组织中的高表达率为44.16%,PD-L2的高表达率为22.08%,对照组均低表达。PD-L1表达与患者国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期有统计学意义(P=0.026)。Kaplan-Meier法生存分析显示,PD-L1、PD-L2高表达组OS较低表达组显著缩短[风险比(hazard ratio,HR)=2.689,P=0.0005;HR=2.204,P=0.0105]。多因素Cox比例风险模型显示,PD-L1高表达(HR=2.275,P=0.023)、PD-L2高表达(HR=2.314,P=0.021)、FIGO分期(HR=11.229,P=0.024)是影响卵巢癌患者生存的独立危险预后因素。将PD-L1及PD-L2均低表达作为判断指标,OS显著延长(HR=3.396,P<0.0001)。结合前期研究结果,PD-L1阴性且T盒子转录因子(T-box transcription factor,T-bet)^+TIL高浸润的患者OS较其他患者更长(P=0.001),而PD-L1阳性且T-bet^+TIL低浸润的患者OS最短。研究提示PD-L1及PD-L2可能参与了卵巢癌的发生和发展,对卵巢癌的临床诊断及患者预后判断具有潜在价值。展开更多
文摘目的:观察乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染对机体免疫功能的影响,研究补肾健脾方对HBV感染者免疫功能的影响。方法:(1)将招募的慢性HBV感染者及健康志愿者分为实验组和对照组,采集各组研究对象的外周血,分离血清,ELISA法检测两组血清中γ干扰素(IFN-γ)、α干扰素(IFN-α)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术(FCM)检测两组的PBMC中自然杀伤细胞(NK)、辅助性T细胞1(Th1)、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)数量及胞内IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-12、TNF-α、干扰素基因刺激蛋白(STING)、T盒子转录因子(T-BET)、信号传导转录激活因子4(STAT4)蛋白表达水平。(2)制备大鼠含药血清,通过WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒筛选含药血清干预PBMC的安全剂量;以HBV感染者PBMC为实验对象将其分为3个组,空白对照组、空白血清组和含药血清组,干预48 h后,ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-12、TNF-α含量,FCM检测各组PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量及胞内细胞因子水平;RT-qPCR法检测各组细胞因子mRNA表达。结果:(1)与健康志愿者相比,HBV感染者血清中IFN-γ、IL-12含量和PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量明显降低(P<0.05);HBV感染者PBMC胞内IFN-γ、IL-12、TNF-α、STAT4、T-BET较健康志愿者合成减少(P<0.05)。(2)与空白血清组相比,补肾健脾方含药血清组PBMC细胞培养上清中IFN-γ、IL-12含量明显升高(P<0.05);补肾健脾方含药血清组PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量以及胞内IFN-γ蛋白表达水平较空白血清组明显升高(P<0.05);与空白血清组相比,补肾健脾方含药血清可明显上调Ifnγ、IL2、Il12、TnfαmRNA表达(P<0.05)。结论:补肾健脾方可通过上调CTL、Th1、NK细胞数量,促进IL-12分泌,进而促进IFN-γ的合成与分泌,从而恢复HBV感染者PBMC的免疫功能。
文摘本研究旨在探讨PD-L1和PD-L2在卵巢癌组织中的表达及其与疾病预后的关系。采用免疫组化法检测77例卵巢癌组织PD-L1和PD-L2的表达,取10例卵巢子宫内膜异位囊肿组织作为对照;Kaplan-Meier法比较不同PD-L1、PD-L2表达水平单独或联合分析对患者术后总生存期(overall survival,OS)的影响;流式细胞术分离TIL及其亚群分析PD-L1、PD-L2的表达。结果显示,PD-L1和PD-L2主要表达在卵巢癌细胞膜上和细胞质中。PD-L1在卵巢癌组织中的高表达率为44.16%,PD-L2的高表达率为22.08%,对照组均低表达。PD-L1表达与患者国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期有统计学意义(P=0.026)。Kaplan-Meier法生存分析显示,PD-L1、PD-L2高表达组OS较低表达组显著缩短[风险比(hazard ratio,HR)=2.689,P=0.0005;HR=2.204,P=0.0105]。多因素Cox比例风险模型显示,PD-L1高表达(HR=2.275,P=0.023)、PD-L2高表达(HR=2.314,P=0.021)、FIGO分期(HR=11.229,P=0.024)是影响卵巢癌患者生存的独立危险预后因素。将PD-L1及PD-L2均低表达作为判断指标,OS显著延长(HR=3.396,P<0.0001)。结合前期研究结果,PD-L1阴性且T盒子转录因子(T-box transcription factor,T-bet)^+TIL高浸润的患者OS较其他患者更长(P=0.001),而PD-L1阳性且T-bet^+TIL低浸润的患者OS最短。研究提示PD-L1及PD-L2可能参与了卵巢癌的发生和发展,对卵巢癌的临床诊断及患者预后判断具有潜在价值。
