肝癌患者集束电极射频消融治疗前后T淋巴细胞及红细胞免疫功能的研究

目的 研究肝癌患者接受射频消融治疗前后机体T淋巴细胞及红细胞免疫功能的变化。方法 分析 12 0例肝细胞肝癌患者射频消融治疗前和治疗后 3d ,7d和 14d外周血淋巴细胞亚群(T 3 ,T 4,T 8,T4/T 8)和红细胞C 3b受体花环 (RBC C3bR )及免疫复合物花环 (RBC ICR )形成率。结果 所有肝癌患者在射频消融治疗后 7d和 14d ,T 3细胞 ,T 4细胞 ,T 4/T 8及RBC C 3bR ,RBC ICR形成率均明显高于治疗前 (P <0 .0 5 )。结论 采用射频消融治疗肝癌 ,可以改善患者的细胞免疫状态。

加味寿胎丸对乙肝免疫耐受患者外周血T淋巴细胞上CD蛋白分子表达水平的影响

目的:观察补肾透邪类中药对乙肝免疫耐受患者外周血T淋巴细胞上的CD蛋白质分子表达水平的影响,推断其打破乙肝免疫耐受的机制。方法:选择乙肝免疫耐受患者120例,随机分成治疗组、安慰剂组各60例,另取30例健康志愿者做为对照组,治疗组、对照组口服加味寿胎丸胶囊(桑寄生、续断、菟丝子、阿胶、柴胡、青蒿等),安慰剂对照组口服模拟胶囊。结果:口服药物治疗3月后,治疗组外周血T淋巴细胞(CD4和CD8T淋巴细胞)上CD28的表达较治疗前明显升高,前后对照比较,有着显著差异(P<0.05)。提示:乙肝免疫耐受患者口服加味寿胎丸治疗可以提高机体细胞免疫,具有打破乙肝免疫耐受作用。

骨髓间充质干细胞对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:从人骨髓中分离培养BMSCs,采用流式细胞仪(FCM)分析鉴定BMSCs的纯度。在PHA刺激下,人外周血淋巴细胞与不同数量的BMSCs共培养。检测各组T淋巴细胞的增殖、凋亡情况,分析各组T淋巴细胞免疫表型CD152、CD28的表达以及各组T淋巴细胞的IFN-γ、IL-10、TGF-β1 mRNA的表达。结果:在体外,BMSCs对由PHA诱导的T淋巴细胞的增殖、凋亡均有抑制作用,且抑制作用与BMSCs呈剂量依赖性。BMSCs对T淋巴细胞的CD152、CD28的表达无明显影响。BMSCs能促进IL-10、TGF-β1mRNA的表达,抑制IFN-γmRNA的表达。结论:BMSCs可能通过抑制T淋巴细胞增殖、减少T淋巴细胞凋亡、促进T淋巴细胞IL-10、TGF-β1mRNA表达及抑制IFN-γmRNA表达来下调免疫反应。

三七总皂苷对力竭运动大鼠血糖代谢及T淋巴细胞亚群免疫功能的影响

探讨三七总皂苷对力竭运动过程中血糖代谢及T淋巴细胞亚群功能的调节机制。方法:对大鼠力竭运动过程中和运动后血糖浓度变化,以及运动后T淋巴细胞亚群免疫功能调节效应进行研究。结果:三七总皂苷能有效减缓力竭运动训练过程中血糖下降,促进力竭运动训练后T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)等指标的含量的良好变化。

腹腔镜和开腹子宫切除术对患者T淋巴细胞免疫及卵巢储备功能的影响

【目的】探讨腹腔镜子宫切除术和开腹子宫切除术对患者T淋巴细胞免疫及卵巢储备功能的影响。【方法】选取2011年2月至2016年2月在本院行次全子宫切除术的患者160例，其中接受腹腔镜子宫切除术80例（腹腔镜组），开腹子宫切除术80例（开腹组），比较两组卵巢动脉血流动力学指标、T细胞亚群及血清激素指标。【结果】观察组和对照组术后48h搏动指数（PI）、阻力指数（RI）、收缩期血流速最大值（Vmax）和舒张末期血流速最小值（Vrain）较术前均降低（P〈0．05），术后2周上升（P〈0．05）；观察组术后48h和术后2周PI、RI、Vmax和Vmln均高于对照组（P〈0．05）；观察组和对照组术后CD4＋和CD3＋T细胞均升高（P〈0．05），CD8＋T细胞均降低（P〈0．05）；观察组术后48h和术后2周CD4＋和CD3＋T细胞高于对照组（P〈0．05），而CD8＋T细胞低于对照组（P〈0．05）；观察组和对照组术后雌二醇（E2）明显降低（P〈0．05），卵泡刺激素（FSH）明显升高（P〈0．05）；观察组术后1个月和3个月E2明显高于对照组（P〈0．05），FSH明显低于对照组（P〈0．05）。【结论】腹腔镜子宫切除术对患者卵巢血流动力学、卵巢功能和免疫功能等具有一定的保护作用，值得临床推广使用。

T细胞疫苗在移植免疫领域中的研究进展

用照射过的自身反应性T细胞（T细胞疫苗）免疫可致抗个体基因型T细胞反应，导致自身反应性T细胞克隆被清除，可治疗自身免疫性疾病：如多发性硬化，类风湿性关节炎，红斑狼疮，糖尿病，免疫性肝炎，免疫性神经炎等.近来在多发性硬化患者的临床实验中已应用。髓磷脂基础蛋白（MBP）反应性T细胞被认为在多发性硬化的发病机制中起一定作用，而皮下接种照射过的MBP反应性T细胞（T细胞疫苗）可以清除其细胞克隆。主要机制是：①MBP反应性T细胞疫苗可激发CD8^＋抗基因型T细胞反应。它具有特异性。②CD4^＋ Th2细胞反应，可通过分泌IL-4和IL-10来抑制MBP反应性T细胞的增殖。

CAR-T细胞免疫疗法的原理及最新研究进展

嵌合抗原受体修饰的T(CAR-T)细胞免疫疗法,又称过继免疫细胞疗法,是近10年兴起的一种肿瘤治疗方法,目前已经成为继手术、放疗、化疗之后的第4种肿瘤治疗方法。该疗法在临床试验中显示出良好的靶向性、杀伤性和持久性,并在治疗血液肿瘤方向有显著治疗效果[1-3]。2017年,美国食品药品监督管理局(FDA)批准了2项以CD19为分子靶标的CAR-T细胞免疫药物上市,用于治疗多种B淋巴细胞白血病,开启了细胞免疫治疗的新纪元[4]。然而,CAR-T细胞免疫疗法的发展还面临着众多难题,如分子靶标的选择、治疗后脱靶效应及不良反应的预防、预测等。

结直肠癌患者外周血CD4^+CD25^(high)调节性T细胞分析

目的探讨结直肠癌患者外周血高表达CD25的CD4+调节T细胞(CD4+CD25highTr)的比率变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞术检测37例结直肠癌患者外周血CD4+CD25high调节T细胞水平,并进行分层分析。结果结直肠癌患者外周血高表达CD25T细胞水平占总CD4+T细胞的(4.59±1.62)%(n=37),与健康对照组比较(2.04±1.03)%(n=15),差异有统计学意义(t=2.007582;P=0.0000012)。该CD4+CD25highTr细胞低表达CD45RA,不表达CD69。Ⅰ~Ⅲ期结直肠癌患者外周血CD4+CD25highTr占总T细胞的(3.93±1.48)%(n=17),Ⅳ期结直肠癌患者外周血CD4+CD25highTr细胞占总T细胞的(5.18±1.54)%(n=20),明显高于Ⅰ~Ⅲ期患者,差异有统计学意义(t=2.08091;P=0.015)。结论结直肠癌患者外周血CD4+CD25highTr细胞比率明显升高,可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用。

鼻咽癌患者外周血调节性T细胞变化

目的探讨鼻咽癌(NPC)患者外周血调节性T(Tr)细胞比例变化的特点及其与临床分期的关系和意义。方法采用流式细胞技术检测56例NPC患者治疗前后和14例健康对照者外周血中T细胞亚群和CD4+CD25+Tr细胞的比例。结果 NPC患者治疗前CD3、CD4降低,CD4+CD25+Tr细胞比例增高(P<0.05),中晚期患者CD3、CD4低于早期患者和健康对照组,而CD4+CD25+Tr细胞则显著高于该两组(P<0.05);54例治疗后患者CD3、CD8和CD4+CD25+Tr细胞比例较治疗前降低(P<0.05),而中晚期患者CD4+CD25+Tr细胞比例有降低的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NPC患者存在免疫抑制,治疗后免疫抑制程度降低;免疫状态的呈现是多因素综合作用的结果,免疫抑制仅仅是免疫功能异常的一个表现。

腹泻型肠易激综合征患者外周血T淋巴细胞亚群及血清微量元素含量变化研究

目的:通过测定腹泻型肠易激综合征(D-IBS)患者外周血T淋巴细胞亚群及血清Zn、Se、Fe、Cu含量变化,旨在探讨IBS的可能病因及发病新机制。方法:随机抽取30例D-IBS患者和30例健康志愿者的外周血标本,采用流式细胞技术,分别测定CD3、CD4、CD8T淋巴细胞亚群百分比,并计算CD4/CD8比值;采用原子吸收光谱法,测定血清Zn、Fe、Cu水平,用原子荧光分析法,测定血清Se水平。结果:D-IBS组外周血CD4T淋巴细胞水平及CD4/CD8比值较正常对照组明显降低(P<0.01);D-IBS组与正常组血清Zn、Se、Fe、Cu水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:外周血T淋巴细胞CD4水平及CD4/CD8比值降低提示D-IBS患者可能存在细胞免疫异常;D-IBS患者血清Zn、Se、Fe、Cu水平较正常对照组无统计学意义。

调节性T细胞的研究进展

调节性T细胞(regu latory T cells,T reg)是维持机体免疫平衡的功能成熟的T细胞。在体内外T reg通过抗原非特异性或特异性扩增,下调效应性免疫细胞的功能并削弱其增殖能力,来抑制或控制机体免疫应答的程度。T reg为临床疾病的免疫治疗提供了新的途径。

调节性T细胞在慢性肝病中的变化

目的:观察调节性T细胞在慢性肝病中的变化及其临床意义。方法:用流式细胞仪检测患者的CD4+CD127loCD25hi-int调节性T细胞。比较不同慢性肝病患者(慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化、肝癌)间CD4+CD127loCD25hi-int调节性T细胞的表达情况。结果:不同慢性肝病患者间调节性T细胞的表达有差异,但无统计学意义,肝癌患者最高,乙肝患者次之,肝硬化患者最低,但均高于健康对照。结论:调节性T细胞与慢性肝病显著相关。

胸腔镜治疗原发性纵隔肿瘤及对T淋巴细胞因子的影响

目的研究电视胸腔镜手术(videoassisted thoracoscopic surgery,VATS)治疗原发性纵隔肿瘤(primary mediastinal tumor,PMT)及其对T淋巴细胞因子的影响。方法选择90例PMT患者按照手术方式分为VATS组(n=45)与开胸组(n=45)。VATS组行VATS治疗,开胸组行开胸切除术。观察指标为:术中失血量、手术时间、镇痛药物使用时间、引流时间及住院时间等手术指标,术前与术后7 d血清白介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)等炎性因子,术前与术后7 d血清CD3^+、CD4^+、CD8^+和CD4^+/CD8^+等T淋巴细胞因子,术后并发症等。结果VATS组术中出血量、手术时间、镇痛药物使用时间、引流时间及住院时间等均小于开胸组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。术后3 d,VATS组IL-6、IL-1β、TNF-α和CRP水平均低于开胸组,组间差异均具有统计学意义(均P<0.05)。术后7 d,VATS组CD3^+、CD4^+和CD4^+/CD8^+高于开胸组,CD8^+低于开胸组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。VATS组术后并发症发病率(4.4%)低于开胸组(20.0%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论VATS治疗PMT可有效切除病灶,有利于免疫机制恢复,炎性反应小,术后并发症发生率低。

再生障碍性贫血患者CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞及T淋巴细胞亚群表达的研究

[目的]探讨再生障碍性贫血（AA）患者CD4＋ CD25＋ CD127low/-调节性T细胞（Treg）和T淋巴细胞亚群的表达及其在疾病发生发展过程中的意义.[方法]采用流式细胞术分别检测本院28例AA患者和20例健康对照组外周血CD4＋ CD25＋ CD1271ow/-Treg的比例以及T淋巴细胞亚群的表达.[结果]AA患者组CD4＋ CD25＋ CD127low/-/CD4＋ Treg为（4.60±2.11）％,健康对照组为（7.50±1.62）％,两组比较差异具有显著性（P＜0.05）.外周血T淋巴细胞亚群的表达AA组为CD3＋ CD4＋/CD3＋ （Th）：（42.47±5.22）％,CD3＋ CD8＋/CD3＋ （Ts）：（47.46±7.06）％,Th/Ts：0.92±0.19,健康对照组分别为CD3＋ CD4＋/ CD3＋（Th）：（53.28±4.92）％,CD3＋ CD8＋/CD3＋ （Ts）：（37.06±6.08）％,Th/Ts：1.52±0.33,两组比较差异均具有显著性（P＜0.01）.[结论]AA患者CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg细胞数量的减少可能使免疫活性细胞逃避机体对它们的免疫调节,导致体内诱导免疫耐受机能不足,从而促进疾病的发生发展.AA患者存在T淋巴细胞亚群的失调,CD4＋T淋巴细胞减低,CD8＋T淋巴细胞增多导致CD4＋/CD8＋比值降低可能是其重要的免疫学发病机制,进行CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg和T淋巴细胞亚群的检测有助于评估AA患者免疫功能状态及辅助诊断和指导治疗.

外周血T淋巴细胞亚群的检测在MARS人工肝治疗前后中的临床意义

目的:探讨检测MARS人工肝治疗前后肝功能衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群的临床意义。方法:应用流式细胞技术分别检测健康对照组以及MARS人工肝治疗前后肝功能衰竭患者外周血中T淋巴细胞亚群的绝对计数值,观察其变化规律。结果:32例肝功能衰竭患者外周血中CD3+、CD3+CD4+及CD3+CD8+T淋巴细胞绝对计数值均明显低于正常对照组;CD3+CD4+CD8+T淋巴细胞数明显高于正常对照组。经过MARS人工肝治疗后,患者外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+以及CD3+CD4+CD8+T淋巴细胞数均不同程度的升高,但无统计学差异。结论:通过检测MARS人工肝治疗前后肝功能衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群,可反映患者机体的免疫状态,对评价MARS人工肝在改善患者免疫功能方面有一定的临床意义。

记忆T细胞在行放射治疗的非小细胞肺癌患者中的表达及其预后预测价值

目的:分析记忆T细胞在行放射治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达及其对预后的预测价值。方法:收集2010年2月至2012年5月浙江省宁波市医疗中心李惠利医院共46例接受放射治疗的NSCLC患者和50名健康体检者。应用流式细胞术检测外周血CD4^+、CD8^+的中央型记忆T细胞(T_(CM))和效应型记忆T细胞(T_(EM))的表达。采用多因素Cox回归模型分析患者临床特征及记忆T细胞变化与总生存时间的相关性,并采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线。结果:NSCLC患者放射治疗前外周血CD4^+T_(CM)、CD4^+T_(EM)、CD8^+T_(CM)和CD4^+/CD8^+T_(EM)比值较健康对照组低,CD4^+/CD8^+T_(CM)比值较健康对照组高(均P<0.05);放射治疗4周时,NSCLC患者外周血CD4^+T_(CM)、CD4^+T_(EM)、CD8^+T_(CM)和CD4^+/CD8^+T_(EM)比值较放射治疗前明显降低(均P<0.05),而CD8^+T_(EM)和CD4^+/CD8^+T_(CM)比值较放射治疗前升高(均P<0.05);放射治疗12周时,NSCLC患者外周血CD4^+T_(CM)、CD4^+T_(EM)和CD8^+T_(CM)较放射治疗4周时升高(均P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,放射治疗后CD4^+T_(CM)的变化趋势与NSCLC患者的总生存时间有相关性(95%CI:1.135~2.994,P<0.01)。放射治疗后CD4^+T_(CM)呈下降趋势者的存活率为23.1%,总生存时间为10.7个月(95%CI:0.29~12.41);CD4^+T_(CM)保持稳定者的存活率为52.7%,总生存时间为27.4个月(95%CI:0.00~31.26);CD4^+T_(CM)上升者的存活率为66.4%,总生存时间为37.4个月(95%CI:0.33~29.21)。结论:NSCLC患者放射治疗后初期表现出明显的免疫抑制,之后有逐渐改善的趋势。放射治疗后记忆T细胞的变化趋势对患者的预后有一定的预测价值。

含CEA片段的重组腺病毒转染DCs诱导特异性T细胞对结直肠癌细胞株的体外杀伤作用

目的:探讨人外周血单核细胞来源的树突状细胞转染含CEA片段的重组腺病毒后所诱导的特异性T细胞对直肠癌细胞株LOVO和SW480的体外杀伤作用。方法:抽取HLA表型为A11的健康志愿者外周血,分离单核细胞,体外培养,使用含CEA片断的重组腺病毒转染未成熟DCs,诱导特异性T细胞。检测体外培养的DCs和CTL活性,并使用MTT法检测CTL对LOVO细胞的杀伤作用。结果:转染或未转染的体外培养的成熟DCs高表达CD40、CD86,IL-12,诱导的CTL细胞高表达IFN-γ;转染后DCs诱导特异性CTL可有效识别并杀伤HLA-A11阳性的LOVO细胞。结论:重组腺病毒转染DCs,不明显改变DCs表型和刺激淋巴细胞增殖、分化功能,可诱导自体CTL增殖,含CEA片断的腺病毒转染DCs诱导自体CTL对LOVO细胞有明显杀伤作用。

异基因造血干细胞移植受者T细胞受体β链CDR3谱型表达与巨细胞病毒激活

目的：探讨T细胞受体（TCR）β链可变区域（BV）的互补决定区（CDR3）谱型表达与异基因造血干细胞移植（HSCT）受者CMV激活的关系。方法：采用荧光定量PCR熔解曲线技术，扩增测序7例HSCT受者和3名健康对照者外周血单个核细胞的TCRBV家族CDR3谱型；采用免疫组织化学法检测外周血白细胞中的CMV—pp65抗原；应用ELISA法检测HSCT受者血清中的CMV—IgM。分析TCRBV家族CDR3表达与CMV激活的相关性。结果：3名健康对照者24个TCRBV家族均表达。7例HSCT受者术后TCRBV家族CDR3测序结果显示为BV9、BV11、BV17、BV20等BV家族序列；TCRBV9含“QVRGGTDTQ”，TCRBV11含“VATDEQ”和“LGDEQ”，TCRBV17含“IGQGNTEA”，TCRBV20含“VGLAANEQ”等共有氨基酸序列。抗原检测结果显示：术后3个月7例受者中有5例受者抗原血症阳性，CMV—pp65阳性细胞数为（2—15）个／5×10^4白细胞。抗体检测结果显示：术后3个月7例受者中3例受者CMV-IgM阳性。TCRBV家族CDR3的表达在CMV抗原血症阳性受者与抗原血症阴性受者之间差异无统计学意义（均P〉0．05）；但TCRBV11家族的表达在CMV-IgM阳性受者与CMV-IgM阴性受者之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：HSCT受者在T细胞免疫应答中有特定的TCRBV家族CDR3谱型，其中TCRBV11的表达可能与CMV激活有关。