人类白细胞抗原-DRβ1特异性低T细胞反应性肽对T细胞激活的抑制作用

目的 研究人类白细胞抗原 (HLA) DRβ1特异性Ⅱ型胶原 (CII)多肽的T细胞受体(TCR)结合表位改变对T细胞激活的影响。探讨通过抑制T细胞对抗原肽的识别治疗类风湿关节炎的新途径。方法 利用AutoDock3 0系统设计非T细胞结合肽 ;以激光共焦显微镜及流式细胞仪观察荧光标记的CⅡ 2 6 3 2 72修饰肽的细胞内转运及其在细胞膜上的表达 ;应用HLA DR1转基因抗原呈递细胞和特异性T细胞的激活体系 ,研究替换TCR识别氨基酸的CII修饰肽在T细胞激活中的作用。结果 计算机模拟显示CII第 2 6 3位苯丙氨酸 (F)、2 6 6位谷氨酸 (E)是与HLA DR1结合的关键位点 ,而 2 6 7位谷氨酰胺 (Q)、2 6 9位脯氨酸 (P)和 2 70位赖氨酸 (K)是T细胞识别的主要功能氨基酸。用甘氨酸 (G)、和 /或丙氨酸 (A)替换上述位点可去除功能性侧链。CⅡ修饰肽可被HLA DR1转基因抗原呈递细胞摄取并与膜表面的HLA DR1分子结合。CⅡ 2 6 3 2 72原型肽可激活T细胞 ,而用A或G单一替换 2 6 7、2 6 8、2 6 9、2 70位氨基酸或连续替换 2 6 8 2 70位氨基酸的修饰肽对T细胞的激活能力明显降低 (P <0 0 1)。低反应性修饰肽 2 70A、sub2 6 8 2 70对CⅡ诱导的T细胞激活有显著抑制作用。结论 通过替换CII中TCR特异性氨基酸可减弱或消除其对T细胞的结合能力及激?

人重组粒细胞集落刺激因子动员的外周血采集物和稳态骨髓采集物免疫学特性的对比研究

目的研究人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的健康供者外周血采集物(G-PB)和稳态骨髓采集物(SS-BM)在免疫学特性方面的异同。方法对2003年4月至10月北京大学血液病研究所接受异基因造血干细胞移植的15名亲缘供者,采用流式细胞仪测定两种移植物的T细胞亚群、树突细胞(DC)亚群、单核细胞及共刺激分子CD28的表达,并用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测G-PB和SS-BM中T淋巴细胞增殖能力和白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的分泌情况。结果G-PB中淋巴细胞,CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞,单核细胞的含量以及CD4与CD8比值均高于SS-BM(P<0.01);G-PB的T细胞增殖能力与SS-BM相比差异无显著性意义(P>0.05);每微升G-PB移植物中T细胞分泌细胞因子IFN-γ、IL-4的量均高于SS-BM(P<0.05、P<0.01),G-PB中IL-4与IFN-γ比值与SS-BM比较差异无显著性意义;G-PB中DC1、DC2的含量高于SS-BM(P<0.01),DC2与T淋巴细胞的比值低于SS-BM(P<0.01),单核细胞和T淋巴细胞的比值显著高于SS-BM(P<0.01);CD3+、CD4+、CD8+细胞上CD28表达的百分比和总体表达均高于SS-BM(P<0.01);CD8+CD28-T细胞与T淋巴细胞的比值和SS-BM的差异无显著性意义(P>0.05)。结论G-PB与SS-BM在免疫特性方面的异同可能是二者在移植后具有相似的急性移植物抗宿主病(GVHD)发生率以及G-PB移植后较高的慢性GVHD发生率和较低复发率的免疫学基础。