调节性T细胞、免疫球蛋白G4对支气管哮喘急性发作患儿再次发作的预测价值

目的分析调节性T细胞(Treg)、免疫球蛋白G4(IgG4)对支气管哮喘(BA)急性发作患儿再次发作的预测价值。方法选取2019年1月至2021年9月景德镇市妇幼保健院收治的86例BA急性发作患儿作为研究对象,对所有患儿均开展为期1年的随访观察,按照再次发作情况与否分成再次发作组(40例)与未再次发作组(46例)。比较两组治疗前的外周血Treg、IgG4水平,一般资料以及肺功能指标,并以受试者工作特征(ROC)曲线分析明确外周血Treg、IgG4水平预测BA急性发作患儿再次发作的效能。结果再次发作组外周血Treg、IgG4水平低于未再次发作组,差异有统计学意义(P<0.05)。再次发作组年龄低于未再次发作组,治疗前哮喘严重程度重于未再次发作组,合并过敏性鼻炎以及合并慢性鼻窦炎人数占比均高于未再次发作组,差异有统计学意义(P<0.05)。再次发作组各项肺功能指标水平低于未再次发作组,差异有统计学意义(P<0.05)。外周血Treg、IgG4水平联合检测预测BA急性发作患儿再次发作的曲线下面积优于上述两项指标单独预测效能(P<0.05)。结论Treg、IgG4联合检测预测BA急性发作患儿再次发作的效能较佳,值得推广普及。

过敏性哮喘患儿外周血T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域4和血清免疫球蛋白G4的水平变化及意义

目的研究过敏性哮喘患儿外周血T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域4(TIM4)、血清免疫球蛋白G4(Ig G4)的水平变化及诊断价值。方法选取2016年12月至2019年2月广东省第二人民医院收治的过敏性哮喘患儿80例,按照病情严重程度将入选患者分为轻度哮喘组(24例)、中度哮喘组(29例)和重度哮喘组(27例)。另取同期于我院进行体检的健康儿童30例作为对照组。比较4组儿童治疗前后外周血TIM4和血清Ig G4水平,分析外周血TIM4、血清Ig G4水平与过敏性哮喘患儿病情严重程度的相关性,探讨外周血TIM4、血清Ig G4对过敏性哮喘的诊断价值。结果治疗前,轻、中、重度哮喘组患儿外周血TIM4、血清Ig G4水平均高于对照组,重度哮喘组患儿外周血TIM4、血清Ig G4水平高于轻、中度哮喘组(均P <0. 05)。治疗后中、重度哮喘组患儿外周血TIM4、Ig G4水平明显低于治疗前,且高于轻度哮喘组,重度哮喘组外周血TIM4、血清Ig G4水平高于中度哮喘组(均P <0. 05)。Pearson相关性分析结果显示,外周血TIM4、血清Ig G4水平与过敏性哮喘患儿病情严重程度均呈正相关(r=0. 481、0. 475,P=0. 032、0. 029)。外周血TIM4、血清Ig G4对过敏性哮喘诊断的曲线下面积分别为0. 723、0. 791,理论诊断阈值为1. 5%、0. 8 g/L,敏感度为0. 721、0. 784,特异度为0. 706、0. 765。二者联合检测诊断过敏性哮喘患儿的敏感度为0. 841,特异度为0. 812,均高于上述两项指标单独检测。结论过敏性哮喘患儿外周血TIM4、血清Ig G4水平存在明显高表达,且随着病情不断加重,上述两项指标表达水平随之升高,临床工作中联合检测外周血TIM4、血清Ig G4水平有助于过敏性哮喘的诊断。

人T细胞免疫球蛋白粘蛋白-4基因真核表达载体的构建和生物信息学分析

目的:构建人T细胞免疫球蛋白粘蛋白-4(TIM-4)基因的真核表达载体,用生物信息学分析了解TIM-4蛋白的特性。方法:采用Trizol法从人外周血单个核细胞提取总mRNA,逆转录合成cDNA,以此为模版,两步法RT-PCR扩增TIM-4,将其克隆至表达载体pcDNA3.1(+)中,构建FTIM-4质粒,通过PCR及测序进行鉴定。同时,我们构建pEGFP-N1-TIM-4真核表达载体,并测序鉴定其准确性;将pEGFP-N1-TIM-4质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和荧光显微镜证实其表达。应用生物信息学初步分析TIM-4蛋白的物理化学性质、结构域和功能。结果:从逆转录的cDNA扩增出TIM-4;经PCR、酶切鉴定、测序分析表明扩增产物与GenBank提供的序列完全相同。真核表达载体pEGFP-N1-TIM-4在CHO细胞中稳定表达,表达蛋白主要位于细胞质和细胞膜上。生物信息学分析表明TIM-4蛋白为不稳定亲水性蛋白,有1个跨膜螺旋结构,含约10.32%的α-螺旋,29.89%的延伸链,59.79%的不规则卷曲,有1段由24个氨基酸组成的信号肽。亚细胞主要定位于细胞质、细胞核、分泌系统的小囊泡、线粒体、内质网、高尔基体上。功能分析预测该蛋白具有受体和信号转导功能。结论:成功构建TIM-4基因真核表达载体,利用生物信息学分析洞察了TIM-4蛋白的性质,为进一步研究该基因的免疫调节机制奠定了基础。

T细胞免疫球蛋白粘蛋白域基因多态性与哮喘关系的研究进展

哮喘是儿童时期最常见的慢性呼吸道变应性疾病,近些年来在全球范围有逐渐增加的趋势。大多数成年期哮喘由儿童哮喘发展而来,其病因既受环境因素的影响,又有明显的遗传倾向,是一种复杂的多基因遗传性疾病。人类的TIM基因家族有3个,即:TIM-1、TIM-3和TIM-4,定位于染色体5q33.2,此区域是哮喘的主要遗传易感位点之一。本文就TIM基因家族多态性与哮喘近年来的研究进展做一综述。

肺结核患者血清中可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)和IL-4水平升高但IFN-γ水平降低

目的检测肺结核患者血清中可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)、γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)水平。方法收集48例肺结核患者和20例健康体检者外周血,ELISA检测血清中sTim-3水平;流式细胞微球捕获芯片技术(CBA)检测血清中IFN-γ、IL-4水平。Pearson法分析肺结核患者血清中sTim-3、IFN-γ及IL-4水平的相关性。结果与对照组相比,肺结核患者血清中sTim-3和IL-4水平显著升高,IFN-γ水平显著降低;Pearson分析显示:sTim-3与IFN-γ、IFN-γ与IL-4呈负相关;而sTim-3与IL-4呈正相关。结论肺结核患者血清中sTim-3和IL-4水平升高、但IFN-γ水平降低。

过敏性紫癜性肾炎患儿血清白细胞介素-33和T细胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白-1的表达及临床意义

目的探讨过敏性紫癜性肾炎(HSPN)患儿血清白细胞介素-33(IL-33)和T细胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白-1(Tim-1)的表达及临床意义。方法 40例过敏性紫癜患儿按是否存在肾脏损害分为观察组和对照组,每组各20例,采用酶联免疫吸附试验分别检测2组患儿急性期和恢复期血清IL-33和Tim-1水平,并与20例同期无过敏性疾病史、自身免疫性疾病及家族史的健康体检儿童(健康组)的血清IL-33和Tim-1水平进行比较。观察组和对照组患儿随访6个月,排除失访和不符合条件的患儿后,对剩余的13例观察组患儿血清IL-33、Tim-1水平与预后的关系进行分析。结果与健康组比较,对照组患儿急性期血清IL-33、Tim-1水平以及观察组患儿急性期和恢复期血清IL-33、Tim-1水平均显著增高(P<0.01);观察组患儿急性期和恢复期血清IL-33和Tim-1水平均显著高于对照组同期(P<0.01);观察组与对照组患儿恢复期血清IL-33、Tim-1水平均显著低于急性期(P<0.01)。随访6个月后,观察组患儿总有效率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组完成随访的13例患儿中,好转和无效患儿的血清IL-33、Tim-1水平均显著高于痊愈患儿(P<0.01),无效患儿的血清IL-33、Tim-1水平均显著高于好转患儿(P<0.01)。结论血清IL-33、Tim-1水平与HSPN疾病活动有关,可为寻找HSPN的发病机制提供新的依据,有助于监测HSPN的进展和转归。

人T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4 cDNA全长真核表达载体的构建及其在16HBE细胞中的表达

目的克隆人T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(TIM-4)基因cDNA,构建其真核表达载体pEGFP-C2-TIM-4,并转染16HBE细胞。方法根据GeneBank中人TIM-4 cDNA序列(编号:NM-138379.2),设计出带有EcoRI和BamHI的上下游引物,应用RT-PCR技术,从人骨髓中扩增出TIM-4基因编码区序列,克隆到pMD18-T载体,形成pMD18-T-TIM-4重组质粒,经菌落PCR,双酶切,测序鉴定获得人TIM-4基因cDNA片段,然后将其亚克隆入pEGFP-C2绿色荧光载体中,并通过菌落PCR,双酶切,测序鉴定其重组体。将测序正确的pEGFP-C2-TIM-4质粒转染人气道上皮细胞(16HBE),用实时定量PCR检测目的基因的表达。结果成功扩增出人TIM-4 cDNA全长1134 bp,经T-A克隆构建的pMD18-T-TIM-4重组质粒经菌落PCR,双酶切,测序证实载体中含有正确的TIM-4编码区片段。由此构建的真核表达载体pEGFP-C2-TIM-4,经菌落PCR扩增出1134 bp左右的片段,经双酶切后产生4.7 kb和1134 bp左右的2条带,DNA测序显示与GeneBank中人TIM-4 cDNA序列一致。重组质粒转染16HBE细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光,经实时定量PCR分析,转染细胞TIM-4基因的表达显著增加。结论首次从人骨髓中扩增出TIM-4基因cDNA全长,构建了其真核表达载体pEGFP-C2-TIM-4,并在16HBE细胞内成功高表达,为进一步研究TIM-4的生物学功能奠定了基础。

免疫球蛋白G4相关硬化性胆管炎中黏膜相关恒定T细胞的免疫生物学特性

目的探讨黏膜相关恒定T细胞(MAIT)在免疫球蛋白G4相关硬化性胆管炎(IgG4-SC)中的功能及表型变化。方法采用流式细胞术检测18例IgG4-SC患者及18名健康对照者外周血MAIT细胞的频率、表型和功能特性。结果 IgG4-S组外周血MAIT细胞的比例显著低于健康对照(HC)组[(1.03±0.17)%比(3.72±0.68)%,P<0.001]。此外,IgG4-SC组外周血中MAIT细胞分泌细胞因子的功能也发生改变。与HC组相比,IgG4-SC组分泌颗粒酶B(GrB)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的MAIT细胞频率显著升高[(13.78±5.09)%比(1.82±0.66)%,P<0.05;(21.03±2.97)%比(11.72±1.93)%,P<0.05;(18.07±3.19)%比(4.98±1.20)%,P<0.001],而两组分泌白细胞介素-17(IL-17)的MAIT细胞频率差异无统计学意义[(1.07±0.23)%比(1.10±0.38)%,P=0.962]。此外,IgG4-SC组外周血中MAIT细胞向肝脏趋化的能力较HC组增强。IgG4-SC组外周血中CXCR6阳性的MAIT细胞比例显著高于HC组[(36.25±6.54)%比(13.53±1.36)%,P<0.001]。结论外周血MAIT细胞通过向肝脏趋化聚集在肝脏炎性反应中发挥作用,从而影响IgG4-SC疾病的进展。

IgA肾病大鼠肾组织中T细胞免疫球蛋白与黏蛋白域基因1的表达和意义

目的观察Ig A肾病(Ig AN)大鼠肾组织中T细胞免疫球蛋白与黏蛋白域基因1(TIM-1)的表达,探讨TIM-1在Ig AN大鼠发病中的作用。方法 20只雄性SD大鼠随机分成Ig AN模型组和对照组,每组10只。在复制模型完成后处死大鼠,取肾脏,肾组织切片行PAS染色,免疫荧光观察大鼠肾脏病理变化,并行免疫组织化学法检测肾组织中TIM-1的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测TIM-1 m RNA的表达。结果 Ig AN组TIM-1主要分布在肾小球和肾小管,表达量较对照组增加(P<0.05)。Ig AN组肾组织中TIM-1 m RNA表达量均较对照组升高。TIM-1 m RNA相对表达量和肾脏病理Katafuchi评分呈正相关,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TIM-1可能参与了Ig AN的发生发展。

高血压脑出血患者发病早期外周血γ干扰素和T细胞免疫球蛋白黏蛋白域分子3 mRNA的表达及意义研究

目的研究高血压脑出血患者发病早期外周血γ干扰素及外周血单个核细胞中T细胞免疫球蛋白黏蛋白域分子3(TIM-3)mRNA的表达及意义。方法选择四川绵阳四〇四医院2019年1—12月收治的43例发病至入院时间在6 h内的高血压脑出血患者作为脑出血组;选取同期年龄、性别匹配的健康体检者40名作为对照组。比较对照组与脑出血组发病<6 h和发病24、48、72 h血清γ干扰素、TIM-3 mRNA表达水平及白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10水平。结果脑出血组发病<6 h和发病24、48、72 h血清γ干扰素、TIM-3 mRNA表达水平均高于对照组[(177±21)、(194±23)、(239±25)、(191±22)ng/L比(125±17)ng/L,(0.208±0.077)、(0.504±0.120)、(0.824±0.148)、(0.561±0.073)比(0.065±0.018)],差异均有统计学意义(均P<0.05)。脑出血组发病<6 h和发病24、48 h血清γ干扰素、TIM-3 mRNA表达水平呈上升趋势,发病72 h时二者表达水平下降,且均低于发病48 h,差异均有统计学意义(均P<0.05)。脑出血组发病<6 h和发病24、48、72 h血清IL-2、IL-4、IL-10水平与对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。脑出血组发病不同时间IL-2、IL-4、IL-10水平差异也均无统计学意义(均P>0.05)。结论高血压脑出血患者发病早期血清γ干扰素、TIM-3 mRNA表达增加,可能参与脑出血后的病理过程。

可切除肝细胞癌患者术后早期T细胞亚群、免疫球蛋白、C_3及C_4的变化

目的 研究可切除肝细胞癌术后早期T细胞亚群、免疫球蛋白和C3、C4的变化。方法 分别于术前、术后 3d和术后 7d采集患者外周血用流式细胞仪检测T细胞及亚群、透射比浊法测定IgG、IgM、IgA、C3和C4。结果 术后 3d患者CD3、CD4、NK细胞下降和CD4/CD8比值下降与术前比较 ,差异均有显著性 ,术后 7d即有回升。术后 7dIgG、IgM和C3明显下降 ,与术前比较 ,差异有显著性 (P均 <0 0 5 )。结论 可切除肝细胞癌患者术后早期机体免疫功能下降。

哮喘治疗的潜在新靶点:T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3

T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3(Tim-3)通过与CD4+CD25+调节性T细胞和(或)抗原提呈细胞上表达的Tim-3配体相互作用,抑制Th1免疫应答,在哮喘等免疫性疾病中发挥重要作用。由于Tim-3与哮喘的高度相关性,其可能成为哮喘治疗的新靶点。

小儿手足口病T淋巴细胞和免疫球蛋白及补体C3、C4的表达及检测价值

目的探究小儿手足口病T淋巴细胞、免疫球蛋白及补体C3、C4的表达及检测价值。方法选取2019年5月至2020年5月本院收治的50例手足口病患儿作为研究组,另选取同期50名健康体检儿童作为对照组。比较两组T淋巴细胞(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))水平、免疫球蛋白[免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)]水平与补体C3、C4水平。结果研究组CD3^(+)、CD4^(+)水平均低于对照组,且CD8^(+)水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组IgA、IgG水平均低于对照组,且IgM水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组补体C3、C4水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论手足口病患儿T淋巴细胞、免疫球蛋白与补体C3、C4水平与健康幼儿之间存在差异,临床可根据免疫球蛋白和T淋巴细胞水平判断患儿病情。

唾液酸免疫球蛋白型凝集素-15促进结直肠癌细胞增殖和迁移并抑制肿瘤组织中CD4+与CD8+T细胞浸润

唾液酸免疫球蛋白型凝集素-15(sialic acid-binding immunoglobulin-type lectin-15,Siglec-15)属于Siglecs家族的一员,是一种新型免疫抑制分子。Siglec-15在多种人类肿瘤细胞和肿瘤相关巨噬细胞中高表达,但Siglec-15在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的生物学功能及其对免疫微环境的影响尚不明确。本文旨在分析Siglec-15异常表达对CRC细胞功能及CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润的影响。首先,分析TCGA数据库中结直肠癌与正常组织中Siglec-15 mRNA表达水平,并对52例人CRC与配对癌旁组织进行免疫组织化学染色(IHC),发现Siglec-15在CRC中的表达水平高于癌旁组织(P<0.01)。CCK8和划痕愈合结果显示,敲低Siglec-15能抑制人CRC细胞SW480增殖(P<0.01)和迁移(P<0.05)。磁珠分选小鼠脾的CD8^(+)T细胞并与小鼠CRC细胞MC38共培养,发现MC38细胞过表达Siglec-15能抑制CD8^(+)T细胞对其的杀伤以及IFN-γ和TNF-α的分泌(P<0.01)。小鼠荷瘤结果表明,过表达Siglec-15可以促进小鼠肿瘤生长(P<0.05)。单样本基因集富集分析、荷瘤小鼠肿瘤组织及人结直肠癌组织IHC分析均表明,Siglec-15高表达时,肿瘤微环境中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润减少(P<0.05)。综上所述,Siglec-15可能通过促进CRC细胞增殖迁移以及抑制CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润促进结直肠癌进展。本文为探究Siglec-15在CRC中的免疫抑制作用提供了一些新的实验依据。

不同剂量静注人免疫球蛋白(pH4)对川崎病合并冠状动脉损伤患儿外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞、TGF-β、IL-10、MMP-9、AECA、ANCA表达的影响

目的探讨不同剂量静注人免疫球蛋白(pH4)对川崎病合并冠状动脉损伤患儿外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)、抗内皮细胞抗体(anti endothelial cell antibody,AECA)、抗中性粒细胞胞质抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)的影响。方法选择2014年1月至2018年1月本院收治的62例川崎病合并冠状动脉损伤的患儿为研究对象,采用随机数表法将其分为观察组(31例)和对照组(31例)。对照组患儿采用常规剂量静注人免疫球蛋白(pH4)联合阿司匹林治疗,观察组患儿采用大剂量静注人免疫球蛋白(pH4)联合阿司匹林治疗,比较两组患儿治疗前后CD4^+CD25^+调节性T细胞、TGF-β、IL-10、MMP-9、AECA、ANCA水平。结果治疗后,两组患儿CD4^+CD25^+调节性T细胞及TGF-β水平均显著高于治疗前(P均<0.05),MMP-9、AECA、ANCA、IL-10水平均显著低于治疗前(P均<0.05)。观察组患儿CD4^+CD25^+调节性T细胞及TGF-β水平均显著高于对照组(P均<0.05),MMP-9、AECA、ANCA、IL-10水平均显著低于对照组(P均<0.05)。结论 CD4^+CD25^+调节性T细胞、TGF-β、IL-10、MMP-9、AECA、ANCA参与了川崎病合并冠状动脉损伤的发生发展,监测其水平变化对预测患儿早期冠状动脉损伤具有重要意义,大剂量静注人免疫球蛋白(pH4)有利于改善患儿机体免疫功能和炎症状态。

复发性流产患者滋养细胞T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子3的表达水平及其与辅助性T淋巴细胞17/调节性T细胞失衡的关系分析

目的分析复发性流产患者滋养细胞T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子3(Tim-3)表达水平及其与辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡的关系。方法选取2019年1月至2021年1月眉山市中医医院收治的45例行清宫术的复发性流产早孕患者作为观察组,另选取同期收治的40例正常早孕需做人工流产女性作为对照组。观察并比较两组滋养细胞Tim-3表达、Th17、Terg、Th17/Treg水平,采用Logistic回归分析滋养细胞Tim-3表达、Th17、Terg、Th17/Treg水平与复发性流产的相关性,采用Pearson相关性分析滋养细胞Tim-3表达水平与Th17、Terg、Th17/Treg水平的关系。结果两组年龄、孕周、月经周期比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组孕酮水平明显低于对照组,孕次明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组滋养细胞Tim-3表达、Th17水平均明显高于对照组,Terg、Th17/Treg水平均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);Logistics回归分析结果显示,滋养细胞Tim-3表达、Th17、Terg、Th17/Treg与复发性流产的发生相关(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,复发性流产患者滋养细胞Tim-3表达与Th17、Terg、Th17/Treg水平均具有相关性(P<0.05)。结论复发性流产患者滋养细胞Tim-3表达明显升高,Th17/Treg细胞失衡更为严重,两者可能在介导复发性流产的过程中存在相互作用。

过敏性紫癜患儿Th细胞亚群及免疫球蛋白状态的研究

目的探讨HSP的免疫学发病机制。方法采用直接免疫荧光流式细胞分析技术检测HSP患儿急性期外周血单个核细胞CD4+CD30和CD4+CD30Th细胞亚群,多克隆抗体单向免疫扩散法检测血浆免疫球蛋白IgA、IgG、IgM浓度,采用SAS8.0统计软件进行分析。结果1.外周血单个核细胞CD4+CD30和CD4+CD30+Th的含量:HSP组分别为80.43%±1.42%和19.56%±1.42%,对照组健康儿童为89.73%±0.52%和10.26%±0.05%,t检验P<0.05,显示与健康儿童相比HSP组外周血单个核细胞CD4+CD30含量明显较高而CD4+CD30+Th明显降低。2.血浆免疫球蛋白的浓度:HSP组IgA、IgG、IgM分别为1.616±0.060g/L、10.551±1.157g/L及1.307±0.144g/L,对照组健康儿童为1.077±0.101g/L、10.597±1.283g/L及1.272±0.145g/L,显示HSP患儿血浆IgA浓度显著高于正常对照组(P<0.05),血浆IgA、IgM与正常对照组差异无显著性(P>0.05)。结论HSP患儿急性期体内存在T细胞功能紊乱,Th1和Th2的失衡,Th2细胞优势活化。血浆免疫球蛋白IgA合成异常增高。

斜带石斑鱼T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(TIM-4)基因表达及重组蛋白制备

为研究斜带石斑鱼Epinephelus coioides T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(T-cell immunoglobulin and mucin-domain-containing molecule 4,TIM-4)在免疫应答过程中的作用,通过聚合酶链式反应(PCR)获得斜带石斑鱼TIM-4的蛋白编码区(GenBank登录号:MZ465580),利用生物信息学分析其结构特征,采用荧光定量PCR(qPCR)分析TIM-4在健康鱼体中的组织分布,以及经LPS和Poly I:C刺激后的表达变化,并构建原核表达载体质粒TIM-4-4T,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行TIM-4重组蛋白诱导表达。结果表明:斜带石斑鱼TIM-4基因的蛋白编码区片段长度为702 bp,可编码234个氨基酸,含有V-Type(IGV)、BTK和PRY 3个功能结构域;qPCR显示,TIM-4基因在斜带石斑鱼10种组织中均有表达,在胃中的表达量最高(P<0.05),在脾脏中表达量最低;经LPS刺激后,脾脏细胞中的TIM-4表达量显著降低(P<0.05),而经Poly I:C刺激后,脾脏细胞中的TIM-4表达量显著升高(P<0.05);SDS-PAGE电泳显示,TIM-4重组蛋白相对分子质量约为25100,以包涵体形式表达,在0.4 mmol/L IPTG、37℃下诱导6 h时,TIM-4重组蛋白的表达量最大。研究表明,TIM-4基因可能参与了斜带石斑鱼抗感染免疫反应,本研究结果为深入了解TIM-4的生物学功能提供了理论基础。

疱疹性咽峡炎患儿T细胞亚群和免疫球蛋白变化

目的探讨对疱疹性咽峡炎患儿进行CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞和IgG、IgA、IgM及补体C3、C4检测的临床意义。方法本研究检测30例疱疹性咽峡炎患儿外周血CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞和IgG、IgA、IgM及补体C3、C4的含量变化,并和30例健康儿童比较。结果疱疹性咽峡炎患儿组与健康儿童组比较,CD3+、CD8+明显增高(P<0.05),CD4+及CD4+/CD8+比值均明显降低(P<0.01),IgG、IgA、IgM含量均明显降低(P<0.01),补体C3、C4的含量无明显变化(P>0.05)。结论疱疹性咽峡炎患儿存在细胞免疫和体液免疫失调,血清免疫球蛋白的降低可能与辅助诱导性T细胞亚群(CD4+)的减少和T抑制细胞(CD8+)数量增多和(或)功能不足有关。

儿童手足口病T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白及补体水平的检测结果分析

目的:通过检测外周血T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白及补体水平,探讨各项指标在手足口病病情评估、判断中的作用。方法:选取2017年3月~2017年11月佛山市第二人民医院儿科收治的82例手足口病儿童作为患儿组,选取相同时间段的80例体检健康儿童为对照组,两组均采集清晨空腹静脉血,采用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群含量,采用全自动生化分析仪检测免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4的含量,并分析比较两组的指标水平。结果:患儿组与对照组的T淋巴细胞亚群中CD3^+、CD4^+以及CD+4/CD+8的结果比较分别为(63.57±8.56)%vs(67.92±5.37)%、(32.78±5.68)%vs(38.32±3.39)%、(1.53±1.47)vs(1.75±0.26),显示患儿组表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而CD+8的结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清免疫球蛋白IgG、IgA在患儿组和对照组中结果对比分别为(8.09±2.40)g/Lvs(9.70±2.30)g/L、(0.66±0.50)g/Lvs(1.05±0.31)g/L,显示患儿组含量显著下降;患儿组和对照组的补体C3、C4水平对比结果分别为(0.88±0.13)g/Lvs(0.84±0.07)g/L、(0.27±0.08)g/Lvs(0.22±0.04)g/L,结果显示患儿组含量明显高于对照组,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。两组免疫球蛋白IgM含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:通过联合检测手足口病患儿外周血T淋巴细胞亚群以及免疫球蛋白和补体的水平,探讨手足口病患儿的免疫功能,对早期指导临床诊断,辅助了解患儿病情发展以及采取相应的治疗措施具有重要意义。