TRBC1作为潜在靶点治疗T细胞来源肿瘤的研究进展

T细胞来源肿瘤具有侵袭性、易耐药且预后不良的特点,常规治疗后复发率高,目前对于其的治疗不存在特效药。若能改进早期诊断和治疗手段,将有效改善患者的预后。细胞免疫治疗对B细胞来源的血液系统肿瘤获得较高的治愈率。却因为缺乏合适的靶点对治疗T细胞来源血液系统肿瘤的免疫治疗效果不佳。最新发现的T细胞受体β链恒定结构域1(TRBC1)作为一个潜在的治疗靶点,给T细胞来源肿瘤的诊断和治疗带来希望。本文将对TRBC1在当前的疾病诊断和细胞免疫治疗中研究进展进行综述。

艾灸干预免疫抑制兔细胞毒性T淋巴细胞抗原-4的作用效应分析

目的:比较不同艾灸干预下免疫抑制兔细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)及程序性死亡受体1(PD-1)表达变化的异同。方法:20只大耳白兔随机分为空白组、模型组、艾条灸(MSM)组与隔药饼灸(HPM)组,每组5只,连续7 d腹腔注射环磷酰胺(CTX)诱导免疫抑制模型。造模成功后分别进行MSM与HPM干预,均为隔日灸,共治疗10次。治疗结束后麻醉白兔,取血清、肝脏与脾脏,ELISA检测血清中PD-1、PD-L1含量,免疫组化法检测肝组织PD-1含量,RT-qPCR检测肝、脾组织CTLA-4 mRNA含量。结果:HPM和MSM均可降低免疫抑制下PD-1及PD-L1水平,并可有效抑制脾脏CTLA-4和肝脏PD-1、CTLA-4水平升高,与免疫抑制模型组相比差异均存在统计学意义(P<0.05),且Pearson相关性检验表明肝组织中CTLA-4与PD-1呈显著正相关(r=0.7807,P<0.001)。结论:HPM可通过调控多个免疫抑制位点改善机体免疫功能。

老年特应性皮炎患者外周血Th1、Th2、Th17细胞与鳞状上皮细胞癌抗原水平的变化及意义

目的探究外周血辅助性T细胞Th1、Th2、Th17和鳞状细胞癌抗原(SCCA)水平在老年特应性皮炎患者中的变化及其意义。方法以2022年3月—2022年7月于四川省人民医院皮肤科就诊的25例老年特应性皮炎患者(老年特应性皮炎组)及同期33例健康体检者(健康对照组)为研究对象。采取流式细胞术测定外周血Th1、Th2和Th17细胞占CD4+T细胞的比例;检测老年特应性皮炎患者的外周血嗜酸性粒细胞(EOS)计数、总免疫球蛋白E(IgE)及血清SCCA水平;采用Spearman法进行相关性分析。结果老年特应性皮炎患者皮损严重且分布广泛,主要表现为四肢伸侧及背部苔藓样湿疹,部分患者有1种或多种系统性疾病。老年特应性皮炎组的外周血EOS计数较健康对照组明显增加(P<0.05)。老年特应性皮炎组外周血中Th2和Th17细胞比例均高于健康对照组(P<0.05),而Th1细胞比例与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。老年特应性皮炎组外周血EOS计数与Th2细胞比例、SCCA水平有相关性(rs=-0.399和0.607,均P<0.05)。老年特应性皮炎患者的SCCA水平与SCORAD评分呈正相关(rs=0.416,P<0.05)。结论老年特应性皮炎患者具有特有的临床特征,以Th2和Th17型炎症为主。老年特应性皮炎患者血清SCCA水平可在一定程度上反映其疾病的严重程度。

Th1/Th2平衡、分化簇抗原28、可诱导共刺激分子、程序性死亡受体-1和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4在急性冠脉综合征患者外周血中的表达

目的研究Th1/Th2及相关细胞因子、共信号分子分化簇抗原28(CD28)、可诱导共刺激分子(ICOS)、程序性死亡受体1(PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)在急性冠脉综合征(ACS)患者外周血中的表达,并探讨其是否参与ACS的发病机制。方法前瞻性选取2021年7月至2022年4月经中山大学附属第三医院粤东医院心血管内科诊断为ACS的120例患者作为研究对象,采用ACS不同亚型的诊断标准将其分为不稳定型心绞痛(UA)组、ST段抬高型心肌梗死(STEMI)组、非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)组,每组各40例。选取同时间段行冠状动脉造影检查正常的40例住院患者作为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中的干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-2、IL-4和IL-10表达水平,采用流式细胞仪检测外周血互助性T细胞(Th)1、Th2细胞占CD4^(+)T细胞的比例以及共信号分子CD28、ICOS、PD-1、CTLA-4在CD4^(+)T细胞表面的表达水平,通过冠脉造影手术采用SYNTAX评分法评估ACS患者冠脉病变严重程度,比较四组上述各指标之间的差异并进行各指标之间的相关性分析。结果ACS患者外周血中Th1/Th2比值、Th1数量及相关细胞因子IFN-γ和IL-2的血清表达量高于对照组,其外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28、ICOS和PD-1表达量也高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);另外,STEMI组和NSTEMI组的这些指标也均高于UA组,差异有统计学意义(P<0.05);SYNTAX评分与外周血Th1数量、Th1/Th2比值、血清IFN-γ及IL-2水平和外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28及ICOS表达量呈明显正相关(P<0.05);外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28及ICOS表达量均与Th1数量、Th1/Th2比值、血清IFN-γ及IL-2表达水平呈明显正相关(P<0.05)。结论ACS患者外周血中的Th1、相关细胞因子IFN-γ和IL-2以及其CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28、ICOS和PD-1表达较健康体检者均明显上调,其均可能在ACS的发病机制中发挥了重要作用。

TIA-1通过影响肝细胞转录因子的活性调节HBV的e抗原和s抗原表达

目的证明TIA-1分子具有调节HBV基因表达的功能。方法TIA-1真核表达质粒pcDNA3-TIA-1,用脂质体转染HepG2.2.15细胞后,ELISA检测e和s抗原的表达;RT-PCR检测与HBV复制有关的转录因子HNF1、HNF2、HNF3、HNF4、RXRα、PPARα、C/EBP的表达。结果与正常的HepG2.2.15细胞相比,转染pcDNA3-TIA-1质粒的HepG2.2.15细胞,其e抗原的表达量明显的增高,而s抗原表达量明显的降低。与正常的HepG2.2.15细胞相比,转染pcDNA3-TIA-1质粒的HepG2.2.15细胞中的HNF1、HNF2、RXRα mRNA含量有明显的下降。结论TIA-1蛋白能通过影响与HBV复制有关的转录因子活性,调节HBV e抗原和s抗原的表达。

sPD-L1、IL-8、T细胞亚群水平变化与颅内肿瘤切除术后并发颅内感染的相关性

【目的】探讨可溶性程序死亡配体1(sPD-L1)、白介素-8(IL-8)、T细胞亚群水平与颅内肿瘤切除术后并发颅内感染的相关性。【方法】选取2019年7月至2021年9月在本院行颅内肿瘤切除术的126例患者,根据术后7 d是否并发颅内感染分为感染组(n=84)和未感染组(n=42)。比较两组及不同感染类型患者sPD-L1、IL-8、T细胞亚群水平及神经功能损伤指标、氧化应激指标水平,采用Spearman相关系数分析sPD-L1、IL-8、T细胞亚群水平与颅内感染类型、神经功能损伤指标、氧化应激指标的相关性。【结果】与未感染组术后7 d比较,感染组确诊颅内感染时血清sPD-L1、IL-8、CD8^(+)水平较高,CD3^(+)、CD4^(+)水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。确诊颅内感染时血清sPD-L1、IL-8、CD8^(+)水平比较:细菌性颅内感染组>结核性颅内感染组>病毒性颅内感染组(P<0.05);CD3^(+)、CD4^(+)水平比较:细菌性颅内感染组<结核性颅内感染组<病毒性颅内感染组(P<0.05)。确诊感染时血清中枢神经特异性蛋白(S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、超氧歧化酶(SOD)水平比较:细菌性颅内感染>结核性颅内感染>病毒性颅内感染(P<0.05);丙二醛(MDA)水平比较:细菌性颅内感染<结核性颅内感染<病毒性颅内感染(P<0.05)。血清sPD-L1、IL-8、CD8^(+)水平与S-100β、NSE、SOD呈正相关(P<0.05),与MDA呈负相关(P<0.05);CD3^(+)、CD4^(+)水平与S-100β、NSE、SOD呈负相关(P<0.05),与MDA呈正相关(P<0.05)。【结论】颅内肿瘤切除术后血清sPD-L1、IL-8、T细胞亚群水平与颅内感染的发生密切相关,可为临床早期辅助诊断颅内感染类型及评估病情提供参考,有利于制定治疗方案。

人血小板/T细胞活化抗原PTA1/Ig融合蛋白表达载体的构建、表达及鉴定

目的：获得人血小板／Ｔ细胞活化抗原１（ｐｌａｔｅｌｅｔａｎｄＴｃｅｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｔｉｇｅｎ１，ＰＴＡ１）胞膜外区与人ＩｇＧ１Ｆｃ段融合蛋白，为ＰＴＡ１配体的鉴定及其功能的研究提供有力的工具。方法：针对人ＰＴＡ１ｃＤＮＡ序列设计３段引物，通过反转录、半套式ＰＣＲ方法从活化Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出ＰＴＡ１胞膜外区基因片段，并将其克隆入融合蛋白表达载体ｐＩＧ中，通过酶切、ＰＣＲ及序列测定鉴定重组表达载体。重组载体通过ＤＥＡＥｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，经夹心ＥＬＩＳＡ及亲和层析、ＳＤＳＰＡＧＥ鉴定融合蛋白的表达及免疫学活性。结果：经序列测定后证实重组表达载体含有正确的ＰＴＡ１胞膜外区序列及剪接供体序列，转染ＣＯＳ７细胞后，通过亲和层析纯化证实融合蛋白的Ｍｒ为８３０００，并能被抗ＰＴＡ１胞膜外区单抗及抗人ＩｇＧＦｃ的单抗同时识别。结论：ｐＰＴＡ１／Ｉｇ融合表达载体的构建及表达成功，为ＰＴＡ１的功能及配体（ＰＴＡ１Ｌ）的研究打下了良好的基础。

移植肾急性排斥时Fas配体和T细胞内抗原1的表达

目的:探讨移植肾发生急性排斥反应时肾组织Fas配体(Fas ligand,FasL)和T细胞内抗原1(T-cell intracellular an-tigen-1,TIA-1)的表达及意义。方法:应用免疫组织化学技术分别检测32例移植肾标本、2例供肾标本及8例肾癌周围肾组织标本FasL和TIA-1的表达,标本按Banff标准分为急性排斥(14例)、慢性排斥(15例)和无排斥改变(13例)3组,分析移植肾组织标本病理形态学改变与FasL和TIA-1表达的相关性。结果:FasL主要在肾小管上皮细胞胞质内表达,急性排斥组表达明显强于慢性排斥组和无排斥组(P<0.05);TIA-1在肾小管上皮细胞和间质浸润淋巴细胞均有表达,小动脉内皮细胞亦可见阳性着色,急性排斥组阳性强度较高,与慢性排斥组和无排斥组间存在显著差异(P<0.05);急性排斥标本FasL和TIA-1的表达强度与组织损害的严重程度呈正相关。结论:急性排斥时移植肾组织FasL和TIA-1表达增强是T细胞活化的反映,其检测可能有助于移植肾急性排斥的早期诊断。

血小板T细胞活化抗原1与移植肾急性排斥反应的相关性

目的 :观察肾移植术后血清可溶性血小板T细胞活化抗原 1 (sPTA1 )水平及细胞膜性血小板T细胞活化抗原 1 (mPTA1 )的表达与排斥反应 (AR)的相关性。 方法 :选取 1 7例围手术期同种尸体肾移植患者以及 2例术后超过 1年的AR的患者 ,根据患者的不同病况每周采取血样 ,采用夹心ELISA法测定血清sPTA1水平 ,流式细胞术检测淋巴细胞mPTA1表达 ,对明确有排斥反应、可疑有排斥反应以及不能区分排斥反应的患者在B超引导下行移植肾活检穿刺病理检查。 结果 :术前sPTA1水平及mPTA1表达与对照无显著差异 (P >0 0 5)。术后第 1天sPTA1即有高水平的表达 ,与对照组差异显著 (P <0 0 5)。 1 9例尸体肾移植患者中经病理证实的 5例排斥反应患者sPTA1显著升高 ,mPTA1表达增强 ,与对照组差异非常显著 (P <0 0 1 )。经激素冲击治疗后 ,血清sPTA1下降 ,mPTA1表达下降。而且sPTA1水平变化早于AR的临床表现 ,持续时间较长。 结论 :PTA1可以作为移植物AR的预警和监测指标 ,与病理检查的结果有较好的一致性 ;

一种新的恒河猴T淋巴细胞活化抗原PTA1

本文应用抗人Ｔ细胞活化抗原ＣＤ２５和ＰＴＡ１ＭｃＡｂ对恒河猴ＰＢＭＣ进行间接免疫荧光染色和流式细胞仪分析，结果发现，恒河猴静止ＰＢＭＣＣＤ２５和ＰＴＡ１均为阴性，而ＰＨＡ活化后或经连续２个月注射ｒＨｕＴＮＦ－α恒河猴ＰＢＭＣ均表达高比率的ＣＤ２５和ＰＴＡ１阳性细胞。此结果表明，ＰＴＡ１抗原可作为恒河猴活化Ｔ淋巴细胞的一种有用标志，为ＰＴＡ１分子结构和功能研究以及采用恒河猴作为灵长类动物模型，观察细胞免疫功能状态提供了有用的资料。

人血小板T细胞活化抗原PTA1基因探针的制备及初步鉴定

目的：制备地高辛标记的PTA1基因探针，以用于PTA1表达及功能的研究．方法：根据新克隆的人PTA1基因序列，设计针对PTA1分子不同结构域的引物，通过PCR扩增、地高辛标记的方法制备基因探针．结果：细胞原位杂交方法证实这种探针具有较高的敏感性和特异性．结论：PTA1基因探针的制备为进一步研究PTA1分子的分布、表达及功能打下了较好的基础．

淋巴细胞功能相关抗原-1调节Treg细胞对炎症性肠病的影响

背景:Treg细胞在炎症性肠病(IBD)中主要发挥免疫保护作用,淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)参与了Treg细胞的分化和功能发挥。目的:探讨LFA-1调节Treg细胞对IBD的影响,明确LFA-1在IBD发生中的作用。方法:将LFA-1基因缺失小鼠和相同遗传背景野生型小鼠各20只分别随机分为对照组和炎症组,炎症组以饮用4.5%DSS溶液诱导结肠炎模型。观察各组小鼠一般情况和结肠组织学表现,流式细胞术检测外周血CD4+、Treg细胞比例,real time PCR检测结肠组织Foxp3 mRNA表达,ELISA法检测血清IL-17A、TGF-β1、IL-10水平。结果:LFA-1缺失炎症组实验过程中有2只小鼠死于消化道出血,体质量下降较野生型炎症组显著。LFA-1基因缺失小鼠外周血CD4+、Treg细胞比例低于野生型小鼠,其中LFA-1缺失炎症组伴TGF-β1、IL-10分泌减少;LFA-1缺失炎症组与野生型炎症组间外周血Treg细胞比例无明显差异。野生型和LFA-1缺失炎症组血清IL-17A、TGF-β1、IL-10水平和结肠组织Foxp3 mRNA表达均高于相应对照组。结论:LFA-1参与了IBD时Treg细胞的分化和迁移。LFA-1基因缺失小鼠对DSS结肠炎的耐受性差于野生型小鼠,可能与其Treg细胞分化和相关细胞因子分泌受到影响有关。

嗜乳脂蛋白3A1(BTN3A1)促进结核杆菌耐热抗原诱导的人外周血Vγ9Vδ2 T细胞活化增殖

目的初步探讨嗜乳脂蛋白3A1(BTN3A1)在结核杆菌耐热抗原(MTB-HAg)诱导的人外周血Vγ9Vδ2 T细胞活化增殖中的作用。方法人外周血单个核细胞(PBMC)先加BTN3A1阻断性抗体作用3 h,再分别用MTB-HAg和磷酸类抗原(PAg)刺激培养24 h后收集细胞,用流式细胞术检测Vγ9Vδ2 T细胞中CD69表达;或刺激20 h后收集细胞,检测Vγ9Vδ2 T细胞中1型辅助性T(Th1)细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)产生细胞比例;或刺激后,在含白细胞介素2(IL-2)培养液中培养10 d后,收集细胞检测Vγ9Vδ2 T细胞扩增比例及增殖活性。结果MTB-HAg刺激后,Vγ9Vδ2 T细胞中CD69平均荧光强度和阳性细胞比例在BTN3A1阻断组均明显下降(为刺激组的13.84%和43.00%);而PAg阻断组的CD69平均荧光强度和阳性细胞比例显著被抑制(为刺激组的3.10%,4.47%和9.53%,10.91%)。MTB-HAg刺激后Vγ9Vδ2 T细胞中IFN-γ和TNF-α产生细胞比例在BTN3A1阻断组显著减少,Vγ9Vδ2 T细胞扩增数量和细胞增殖活性在BTN3A1阻断组也显著减少或降低。与PAg阻断组明显被抑制的结果相似。结论BTN3A1促进MTB-HAg诱导的外周血Vγ9Vδ2 T细胞活化增殖。

猴T淋巴细胞趋向性病毒1型双抗原夹心ELISA检测试剂盒的研制

目的研制灵敏度和特异性高的检测实验猴血清中T淋巴细胞趋向性病毒-1型(STLV-1型)抗体的双抗原夹心ELISA(dsELISA)检测试剂盒。方法采用经原核表达系统表达并纯化的人T淋巴细胞白血病病毒-1型(HTLV-1型)的Env蛋白作为包被用抗原,建立了检测STLV-1的dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂,确定了dsELISA诊断试剂盒的相关条件,并经敏感性、特异性和重复性试验考查该试剂盒质量。结果试剂盒特异性好,批内重复试验变异系数(CV)<7%,批间重复试验CV<10%。对200份猴血清进行随机检测,与国际公认的诊断试剂盒(美国BioReliance公司)的符合率为97%。结论本试剂盒可初步应用于临床上实验猴STLV-1型抗体的检测。

伴侣素包含T复合蛋白1ε亚基(CCT5)是与人γδT细胞相关的自身抗原

目的探讨CCT5与γδT细胞及自身免疫病的关系。方法 PCR扩增人CCT5的基因,表达并纯化CCT5重组蛋白;用3条CCT5蛋白的肽段免疫小鼠,制备并筛选抗CCT5的单克隆抗体;固相化CCT5重组蛋白,体外扩增人外周血单个核细胞中的γδT细胞;用制备的单抗通过ELISA检测正常人、类风湿性关节炎(RA)及系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆中CCT5蛋白的含量;用流式细胞技术分析不同亚型γδT细胞的比例,并与血浆CCT5含量做相关性分析。结果 PCR扩增获得CCT5基因,目的片段长度为1 750 bp;经SDS-PAGE分析可见重组CCT5蛋白分子质量约为65 ku,并获得了纯化。通过筛选,获得两株抗CCT5单克隆抗体对。重组CCT5蛋白能在体外扩增外周血γδT细胞;而血浆CCT5浓度与Vγ9和Vδ2 T细胞的比例呈显著正相关。在RA及SLE患者血浆中,可溶性CCT5的浓度显著低于正常对照(P<0.05)。结论 CCT5是与人Vγ9δ2γδT细胞识别的相关自身抗原,有助于我们深入了解Vγ9δ2γδT细胞在自身免疫病中的作用。

地高辛标记的血小板T细胞活化抗原1cRNA探针的制备与鉴定

目的制备用地高辛 (digoxigenin ,Dig)标记的血小板T细胞活化抗原1(plateletandTcellactivationantigen1,PTA1)cRNA探针。方法构建重组质粒 pGEM 3ZF( +) PTA1 ,并做序列分析证实PTA1基因的插入方向正确后 ,用EcoRI消化得到线性DNA片段 ,再用SP6RNA聚合酶转录合成带有Dig标记的高比活度的单链cRNA探针。结果经斑点杂交证实 ,该探针敏感性高、特异性强。结论地高辛标记PTA1cRNA探针的制备 ,为进一步研究PTA1mR NA在组织、细胞的表达和分布提供了有效的工具。

肾移植急性排斥反应与T细胞胞内抗原-1表达的关系

目的 :研究移植肾组织T细胞细胞内抗原 1(TIA 1)的表达与急性排斥 (AR)的关系。 方法 :采用竞争性逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)技术在mRNA水平上定量检测 4 2例标本中的TIA 1,并将结果与组织学诊断比较分析。 结果 :AR组全部检测出TIA 1,而慢性排斥组和无排斥组分别只有 10 / 15和 3/ 13;AR组TIA 1mRNA水平明显高于慢性排斥组 (P <0 .0 5 )和无排斥组 (P <0 .0 5 ) ;AR标本TIA 1表达与病理改变严重程度相关联 ,病理改变越严重 ,表达水平越高 ;竞争性RT PCR测定TIA 1诊断移植肾AR敏感度和特异度分别为 93%和6 8%。 结论 :TIA 1的表达与移植肾AR有关 。

TSST-1合成肽之超抗原T细胞表位的Vβ特异性鉴定

对两个含有超抗原Ｔ细胞表位的ＴＳＳＴ－１交叠肽之Ｖβ特异性进行了鉴定。结果显示：两合成肽均具备天然ＴＳＳＴ－１分子四种人和小鼠Ｖβ特异性的两种（人Ｖβ２和小鼠Ｖβ１５）。表明：两合成肽所含有的超抗原Ｔ细胞表位是ＴＳＳＴ－１特异性的；同时，两合成肽Ｖβ特异性的一致性。

葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1在应激刺激下与T细胞胞内抗原1共同参与应激颗粒聚集

目的探讨葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1(SND1)在应激刺激下如何与T细胞胞内抗原1(TIA-1)共同参与应激颗粒(SG)的聚集以及如何调节应激反应。方法利用免疫荧光实验和激光共聚焦显微镜观察HeLa细胞中的SND1蛋白与TIA-1蛋白在应激刺激下是否形成共定位颗粒,并利用绿色荧光蛋白载体过表达质粒转染HeLa细胞进行外源蛋白表达,从而确定在应激刺激下SND1蛋白与TIA-1结合的结构域。利用RNA干扰技术敲除HeLa细胞中SND1蛋白表达并利用Western Blotting检测蛋白表达水平,从而观察SND1低表达是否对TIA-1聚集形成SG产生影响。利用不同热休克刺激时间观察SND1与TIA-1的聚集过程是否存在动态变化。结果 SND1蛋白在应激刺激下与TIA-1蛋白结合共同参与SG聚集,其主要作用结构域为葡萄球菌核酸酶结构域(SN domain)。SND1低表达不会抑制TIA-1聚集到SG,但会减少SG的数量。在不同热休克刺激时间下,SND1聚集到SG的运输过程滞后于TIA-1。结论 SND1蛋白在应激刺激下与TIA-1蛋白共同参与SG的聚集,从而调节细胞应激反应。

Tim-4对kupffer细胞分泌Th1/Th2类细胞因子及抗原呈递功能的影响

目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白(Tim)-4对肝脏巨噬细胞kupffer细胞(KCs)分泌Th1/Th2类细胞因子及抗原呈递功能的影响。方法以非连续梯度离心法体外分离培养BALB/c小鼠KCs,随机分为对照组、过表达Tim-4组、Tim-4-shRNAs组、Tim-4单克隆抗体组,以过表达Tim-4、Tim-4-shRNAs质粒及Tim-4单克隆抗体处理KCs,以100 ng/ml脂多糖(LPS)活化后,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western印迹检测各组细胞Tim-4表达;免疫组化鉴定KCs,台盼蓝染色判断活率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞培养液中Th1类细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、干扰素(IFN)-γ及Th2类细胞因子IL-10水平;流式细胞仪检测KCs表面共刺激分子(MHC)-Ⅱ、CD80、CD86、CD40表达水平;分离BALB/c小鼠脾细胞悬液,制备纯化T细胞,与上述各组KCs共培养,噻唑蓝(MTT)法检测T细胞增殖情况;膜联蛋白异硫氰酸荧光素Ⅴ/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)法观察T淋巴细胞凋亡情况,进而检测KCs抗原呈递功能。结果免疫组化结果显示KCs表面特异性分子CD68表达强阳性,台盼蓝染色结果显示KCs拒染蓝染,其活性良好。与对照组相比,过表达Tim-4组细胞Tim-4表达、IL-10水平、T细胞凋亡率明显升高,TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平明显降低,MHC-Ⅱ、CD80、CD86、CD40表达水平明显降低,T细胞相对增殖率明显降低(均P<0.05);Tim-4-shRNAs组细胞Tim-4表达、IL-10水平、T细胞凋亡率明显降低,TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平明显升高,MHC-Ⅱ、CD80、CD86、CD40表达水平明显升高,T细胞相对增殖率明显升高(均P<0.05);Tim-4单克隆抗体组细胞Tim-4表达无明显变化(P>0.05),其他指标变化趋势与Tim-4-shRNAs组相同。结论上调Tim-4可促进KCS分泌Th2类细胞因子,抑制其分泌Th1类细胞因子,降低其抗原呈递功能。