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基因熔解曲线谱型图技术分析肺结核患者CD4^+T细胞受体β链可变区基因多态性
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作者 张冬梅 孙晓雷 +5 位作者 段义农 汤伟 周鸣鸣 李正欣 张菊 张洁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1317-1322,共6页
目的利用荧光定量PCR结合基因熔解曲线谱型图(gene melting curve spectratyping,GMCS)技术分析肺结核病患者外周血CD4+T细胞中T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因多态性。方法提取15例健康人和30例肺结核患者外周血单个核细胞(periphera... 目的利用荧光定量PCR结合基因熔解曲线谱型图(gene melting curve spectratyping,GMCS)技术分析肺结核病患者外周血CD4+T细胞中T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因多态性。方法提取15例健康人和30例肺结核患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的总RNA,反转录成cDNA,以26个人TCRBV基因家族设计上游引物,共同的TCRβ链恒定区(BC)基因设计下游引物,荧光定量PCR扩增26个TCRBV基因家族谱系,样品谱系用荧光定量PCR中的DNA熔解曲线进行分析。结果在15例健康人外周血T细胞TCRβ链中,同一BV位点PCR产物的熔解曲线谱型相同。但是与健康人相比,30例肺结核患者的外周血TCRβ链26个BV位点熔解曲线谱型存在差异,差异比率为6.7%~33.3%,差异具有显著性(P<0.05,P<0.01)。此外,26个位点中有13个位点熔解曲线谱型差异比率≥20%。结论荧光定量PCR结合GMCS技术分析TCRBV基因家族谱系情况,方法稳定、简便,能较好地监测肺结核患者外周血T细胞TCR的β链谱型。 展开更多
关键词 CD4阳性t淋巴细胞 t细胞受体β基因 遗传多态现象 肺结核
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大鼠T细胞受体Vβ5.2-HSP70和Vβ8.2-HSP70基因真核表达质粒的构建及表达 被引量:1
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作者 肖婧 赵文明 +3 位作者 李蕴 王炜 李慎涛 赖丽仁 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1883-1886,1891,共5页
目的:构建含大鼠TCR Vβ5.2-HSP70和TCR Vβ8.2-HSP70基因的重组真核表达质粒,并检测其在体内外的表达。方法:实验于2005-10/2006-09在首都医科大学免疫学系实验室完成。①以自主构建的重组表达载体pTARGET-TCR Vβ5.2和pTARGET-TCR Vβ... 目的:构建含大鼠TCR Vβ5.2-HSP70和TCR Vβ8.2-HSP70基因的重组真核表达质粒,并检测其在体内外的表达。方法:实验于2005-10/2006-09在首都医科大学免疫学系实验室完成。①以自主构建的重组表达载体pTARGET-TCR Vβ5.2和pTARGET-TCR Vβ8.2为模板,将结核杆菌HSP70的一段保守序列P111-125设计到引物中,通过PCR的方法得到TCR Vβ5.2-HSP70和TCR Vβ8.2-HSP70基因片段,将其插入到真核表达载体pTARGET中,构建重组表达载体pTARGET-TCR Vβ5.2/8.2-HSP70。②将BALB/c小鼠48只随机分为4组,pTARGET-TCR Vβ 5.2-HSP70组、pTARGET-TCR Vβ8.2-HSP70组和空质粒组肌注相应的质粒DNA100μg/次,PBS组注射PBS缓冲液100μL/次。共注射3次,每次间隔2周。于末次免疫后3d取注射部位的肌肉,用RT-PCR及免疫组化染色法检测TCR Vβ5.2/8.2-HSP70基因在注射部位的转录和表达。③将COS-7细胞分为pTARGET-TCR Vβ5.2-HSP70组、pTARGET-TCR Vβ8.2-HSP70组、空质粒组和未转染细胞组,进行相应质粒转染,24h后收集细胞,用免疫细胞化学染色法检测靶基因在真核细胞内的表达。结果:①TCR Vβ5.2/8.2-HSP70基因已被正确插入到pTARGET载体中。②pTARGET-TCR Vβ5.2-HSP70组、pTARGET-TCR Vβ8.2-HSP70组小鼠免疫处的肌肉组织RT-PCR检测显示,在500~600bp和400~500bp处出现特异的扩增带,分别与TCR Vβ5.2-HSP70和TCR Vβ8.2-HSP70基因片段的大小相符,而注射空质粒组和PBS组均未见此条带。③免疫组化结果显示转染重组质粒pTARGET-TCR Vβ5.2/8.2-HSP70的COS-7细胞的胞质及胞膜都有明显的着染。结论:成功构建了重组真核表达质粒pTARGET-TCR Vβ5.2/8.2-HSP70,并在体内外检测到其转录和表达,为进一步进行TCR DNA疫苗治疗胶原诱导性关节炎的实验研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胶原诱导性关节炎 自身反应性t细胞 t细胞受体Vβ基因 热休克蛋白70 真核表达载体
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T细胞受体Vβ基因谱系分析在血液肿瘤研究中的应用 被引量:1
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作者 尹青松 李扬秋 《国外医学(输血及血液学分册)》 CAS 2005年第4期342-345,共4页
分析T细胞受体(TCR)Vβ基因谱和CDR3长度可以确切了解TCR Vβ亚家族T细胞的表达和克隆性。目前TCR Vβ基因谱分析已广泛应用于判断血液肿瘤和免疫相关疾病患者的免疫功能状态及某些致病克隆的确定;评价不同造血干细胞移植后的免疫重建;... 分析T细胞受体(TCR)Vβ基因谱和CDR3长度可以确切了解TCR Vβ亚家族T细胞的表达和克隆性。目前TCR Vβ基因谱分析已广泛应用于判断血液肿瘤和免疫相关疾病患者的免疫功能状态及某些致病克隆的确定;评价不同造血干细胞移植后的免疫重建;探索性区分临床移植物抗白血病效应和移植物抗宿主病;以及为血液肿瘤的免疫靶向治疗提供依据等。 展开更多
关键词 t细胞受体Vβ基因谱系分析 血液肿瘤 CDR3 t细胞 免疫功能
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T-ALL及T细胞株相关TCR Vβ基因谱系和克隆性分析 被引量:7
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作者 黄梅娟 李扬秋 +3 位作者 陈少华 周羽竝 杨力建 韩素芳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期439-442,共4页
目的 了解T细胞 急性淋巴细胞白血病 (T ALL)患者外周血中的T细胞及T细胞株的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。方法 利用RT PCR方法扩增 6个不同的T细胞株和 6例初发未治T ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 ... 目的 了解T细胞 急性淋巴细胞白血病 (T ALL)患者外周血中的T细胞及T细胞株的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。方法 利用RT PCR方法扩增 6个不同的T细胞株和 6例初发未治T ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性 ,部分T细胞株的单克隆PCR产物进一步进行序列分析。结果 与正常人外周血表达全部 2 4个Vβ亚家族不同 ,6例T ALL病人分别表达 5~ 12个Vβ亚家族。 6例病人均存在 1个或多个Vβ亚家族的寡克隆或双克隆增殖T细胞 ,另外 ,还有一些Vβ亚家族多克隆模式发生改变 ,呈现寡克隆性增殖的趋势。T细胞株多显示为表达一个Vβ亚家族的单克隆T细胞 ,不同T细胞株的CDR3长度和序列不尽相同。结论 T ALL患者外周血T细胞的TCRVβ谱系出现限制性改变 ,均可检测到克隆性增殖T细胞 ,尚需进一步鉴定其性质 (肿瘤性或抗原特异性增殖 ) 。 展开更多
关键词 t细胞-急性淋巴细胞白血病 t细胞 t细胞受体Vβ基因 t细胞克隆性
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DLI治疗CML病人的克隆性增殖TCR Vβ细胞分析 被引量:5
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作者 李扬秋 杨力建 +3 位作者 陈少华 张涛 许敏华 罗更新 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期157-160,共4页
目的 :了解供者淋巴细胞输注 (DLI)后 ,产生GVL效应的克隆性TCRVβ亚家族T细胞的情况。 方法 :利用RT PCR分别扩增 2例CML经allo BMT后复发病人DIL治疗前后不同时间外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,了解病人各Vβ亚家... 目的 :了解供者淋巴细胞输注 (DLI)后 ,产生GVL效应的克隆性TCRVβ亚家族T细胞的情况。 方法 :利用RT PCR分别扩增 2例CML经allo BMT后复发病人DIL治疗前后不同时间外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,了解病人各Vβ亚家族的利用情况。阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。结果 :DLI治疗前病人外周血仅表达 4~ 11个Vβ亚家族 ,而DLI治疗后缓解期则可检测到 12~ 2 1个Vβ亚家族。基因扫描显示DLI后病人外周血出现某些新的Vβ亚家族克隆性增殖T细胞。结论 :病人的TCRVβ亚家族T细胞存在倾斜性分布现象 ,该倾斜现象在完全缓解时逐步恢复正常。DLI治疗病人时 。 展开更多
关键词 供者淋巴细胞输注 慢性粒细胞白血病 t细胞受体β基因 t细胞克隆 基因骨髓移植
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急性早幼粒细胞白血病患者中TCR Vβ T细胞体内外克隆性增殖的比较 被引量:6
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作者 杨力建 李扬秋 +4 位作者 陈少华 韩素芳 陈盛亭 张学利 张涛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期499-502,共4页
急性早幼粒细胞白血病 ;T细胞受体Vβ基因 ;T细胞培养 ;克隆性增殖为了解急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者T细胞在体内或体外经诱导后TCRVβ亚家族的分布和克隆性增殖特点 ,利用T淋巴细胞液体培养法 ,在rhIL 2和抗CD3单抗条件下诱导扩增... 急性早幼粒细胞白血病 ;T细胞受体Vβ基因 ;T细胞培养 ;克隆性增殖为了解急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者T细胞在体内或体外经诱导后TCRVβ亚家族的分布和克隆性增殖特点 ,利用T淋巴细胞液体培养法 ,在rhIL 2和抗CD3单抗条件下诱导扩增APL患者单个核细胞 ,并应用RT PCR分别扩增培养前后患者T细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的互补决定区 3 (CDR3 )片段 ,了解各Vβ亚家族的表达情况 ;对阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。结果发现 ,APL患者T细胞仅表达部分Vβ亚家族 ,但经体外培养后可检测到部分新增TCRVβ亚家族T细胞。全部患者存在某些TCRVβ亚家族的克隆性增殖T细胞。 2例患者均出现相似的Vβ1,Vβ3 ,Vβ7,Vβ16和Vβ2 0T细胞的克隆性增殖情况。结论 :T细胞的体外培养可诱导某些Vβ亚家族的表达。在T细胞培养不同时间中 。 展开更多
关键词 急性早幼粒细胞白血病 t细胞受体Vβ基因 t细胞培养 克隆性增殖
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B-ALL病人TCR Vβ基因谱系和克隆性分析 被引量:7
7
作者 黄梅娟 李扬秋 +3 位作者 陈少华 杨力建 周羽竝 张涛 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第6期320-322,共3页
目的 了解B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。 方法 利用RT PCR方法扩增 13例初发未治B ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而... 目的 了解B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。 方法 利用RT PCR方法扩增 13例初发未治B ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果  13例B ALL病人分别表达 2~ 18个Vβ亚家族。 13例病人均存在 1个或多个Vβ亚家族的克隆增殖T细胞 ,增殖形式包括寡克隆及寡克隆增殖趋势、双克隆和单克隆。Vβ2 1和Vβ2 3亚家族出现克隆增殖性T细胞的频率较高。结论 B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ谱系呈现优势利用的特点 ,并存在克隆性增殖的T细胞 ,这可能是机体对白血病相关抗原产生的特异性免疫反应 ;Vβ2 1和Vβ2 3亚家族T细胞发生克隆增殖改变的趋向性比较明显 ,可能与B 展开更多
关键词 B细胞-急性淋巴细胞白血病 t细胞受体Vβ基因 t细胞克隆性
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NOD/SCID小鼠人源化TCR Vβ亚家族T细胞分布与克隆性分析 被引量:4
8
作者 林晨 谭玉波 +4 位作者 白雪 陈少华 杨力健 江振友 李扬秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期376-378,382,共4页
目的应用脐血CD34+细胞移植NOD/SCID鼠所建立的人源化SCID模型,分析人源化TCR Vβ亚家族T淋巴细胞分布与克隆性。方法磁珠分选法分离脐血中CD34+细胞,分别经尾静脉输入亚致死剂量照射的NOD/SCID小鼠。第6周处死小鼠提取外周血、骨髓、... 目的应用脐血CD34+细胞移植NOD/SCID鼠所建立的人源化SCID模型,分析人源化TCR Vβ亚家族T淋巴细胞分布与克隆性。方法磁珠分选法分离脐血中CD34+细胞,分别经尾静脉输入亚致死剂量照射的NOD/SCID小鼠。第6周处死小鼠提取外周血、骨髓、胸腺的RNA,RT-PCR扩增人TCR Vβ亚家族基因,并用基因扫描进行T细胞克隆性分析。结果采用RT-PCR技术在模型小鼠骨髓中检测到部分人TCR Vβ亚家族基因Vβ1、2、91、3、19。经进一步基因扫描分析,发现部分TCR Vβ亚家族基因Vβ9、13、19呈寡克隆表达。结论在NOD/SCID模型可重建分化成熟的TCR Vβ亚家族T细胞。未能检测到全部人TCR VβT细胞的原因可能与免疫重建不完全或存在移植物抗宿主的反应有关。人源T淋巴细胞在模型鼠骨髓中分化成熟。 展开更多
关键词 造血干细胞 NOD/SCID鼠 t细胞受体Vβ基因
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甲氰咪呱对K562细胞诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响 被引量:3
9
作者 田红霞 林晨 +5 位作者 陈少华 杨力建 江振友 高珂 郜世隽 李扬秋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期1637-1640,共4页
目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特... 目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特异杀伤活性,同时利用RT-PCR基因扫描技术分析培养后T细胞的TCR Vβ亚家族谱系的选择性利用和克隆性增殖情况。结果经甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞诱导培养2周后,各组均不同程度诱导细胞增殖,其中甲氰咪呱联合K562细胞诱导组的T细胞对K562细胞的特异性杀伤作用显著增强(P<0.01)。3组均呈现不同程度的T细胞TCR Vβ亚家族选择性利用,均有TCR Vβ21亚家族呈克隆性增殖。结论甲氰咪呱可协助增强bcr-abl抗原刺激的特异性抗CML T细胞作用。 展开更多
关键词 甲氰咪呱 t细胞受体Vβ基因 慢性粒细胞白血病 脐血
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CML细胞诱导自体和脐血T细胞TCR Vβ谱系和杀伤性分析 被引量:2
10
作者 杨力建 李扬秋 +4 位作者 陈少华 黄梅娟 韩素芳 张学利 张涛 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期376-379,共4页
目的 了解慢性粒细胞白血病 (CML)细胞诱导T细胞的TCRVβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况 ,及其对CML细胞的杀伤活性。方法 采用混合淋巴细胞 肿瘤细胞培养 (MLTC)方法 ,利用CML细胞体外诱导脐血或患者的T细胞增殖 ,用RT PCR和基因... 目的 了解慢性粒细胞白血病 (CML)细胞诱导T细胞的TCRVβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况 ,及其对CML细胞的杀伤活性。方法 采用混合淋巴细胞 肿瘤细胞培养 (MLTC)方法 ,利用CML细胞体外诱导脐血或患者的T细胞增殖 ,用RT PCR和基因扫描分析MLTC前后T细胞的 2 4个TCRVβ亚家族基因的互补决定区 (CDR3) ,了解各Vβ亚家族的利用和T细胞克隆性特点。并利用LDH方法检测MLTC后T细胞的细胞毒性。结果 脐血T细胞表达 8~ 11个TCRVβ亚家族 ,经MLTC后 ,2~ 3个Vβ亚家族呈克隆性增殖 ,CML细胞诱导的自体T细胞的TCRVβ亚家族也类似。经MLTC后T细胞对原诱导细胞有较强的杀伤活性。结论 CML细胞可诱导脐血T细胞和自体T细胞TCRVβ优势利用和克隆性增殖 ,诱导后T细胞具有特异性杀伤CML细胞的作用。 展开更多
关键词 CML MLtC t细胞受体Vβ基因 克隆性 细胞毒活性
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脐血中TCR Vβ亚家族T细胞的增殖特点 被引量:3
11
作者 杨力建 李扬秋 +3 位作者 陈少华 张玉平 王震 罗更新 《现代临床医学生物工程学杂志》 CAS 2002年第4期237-240,共4页
目的 了解脐血T细胞体外诱导后TCRVβ亚家族的分布和克隆性增殖特点 .方法 利用T淋巴细胞液体培养法 ,在不同刺激源 (rhIL - 2、抗CD3 单抗、PHA、AML -M5细胞和bcr -abl多肽 )条件下诱导脐血T细胞扩增 ,并利用RT -PCR分别扩增培养前... 目的 了解脐血T细胞体外诱导后TCRVβ亚家族的分布和克隆性增殖特点 .方法 利用T淋巴细胞液体培养法 ,在不同刺激源 (rhIL - 2、抗CD3 单抗、PHA、AML -M5细胞和bcr -abl多肽 )条件下诱导脐血T细胞扩增 ,并利用RT -PCR分别扩增培养前后脐血T细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3片段 ,了解各Vβ亚家族的表达情况 .阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性 .结果 脐血T细胞仅表达部分Vβ亚家族 ,但经体外培养后 ,可检测到绝大多数TCRVβ亚家族T细胞 ,而经AML -M5细胞和bcr-abl多肽诱导后 ,TCRVβ亚家族T细胞呈限制性表达和Vβ亚家族克隆性增殖 .结论 脐血T细胞具备产生各TCRVβ亚家族T细胞的潜能 ,在白血病相关抗原诱导下 ,具有限制性和克隆性增殖的能力 . 展开更多
关键词 脐血 t细胞受体Vβ基因 白血病 克隆性增殖 免疫治疗 细胞移植
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淋巴瘤白血病患者TCR Vβ亚家族T细胞的分布及其克隆性 被引量:1
12
作者 杨力建 李扬秋 +2 位作者 陈少华 卢育洪 罗更新 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2002年第2期7-10,共4页
目的 :了解B细胞淋巴瘤白血病 (LL)患者TCRVβ亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法 :利用RT -PCR分别扩增 3例LL患者外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,以了解患者各Vβ亚家族的利用情况 ,然后将阳性的PCR产物进一步经荧... 目的 :了解B细胞淋巴瘤白血病 (LL)患者TCRVβ亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法 :利用RT -PCR分别扩增 3例LL患者外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,以了解患者各Vβ亚家族的利用情况 ,然后将阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。结果 :患者中仅存在 2~ 6个Vβ亚家族T细胞。基因扫描分析显示 ,2例患者外周血中的Vβ1、Vβ3或Vβ4亚家族出现克隆性增殖T细胞。结论 :LL患者外周血存在倾斜性分布和克隆性增殖的Vβ亚家族T细胞 ,这可能是机体T细胞受白血病细胞相关抗原的刺激作用而引起机体产生相应的特异性抗白血病的免疫反应。 展开更多
关键词 淋巴瘤白血病 t细胞受体Vβ基因 t细胞克隆性 基因扫描
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弥漫大B型非霍奇金淋巴瘤患者外周血TCR Vβ亚家族T细胞分布和克隆性增生特点 被引量:3
13
作者 叶静梅 谭获 +4 位作者 李扬秋 陈少华 岑东芝 陈思 吴秀丽 《临床血液学杂志》 CAS 2009年第6期594-596,共3页
目的:了解弥漫大B淋巴瘤(DLBL)患者外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及克隆性增殖情况。方法:利用RT-PCR方法扩增6例DLBL患者外周血单个核细胞中24个TCRVβ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T... 目的:了解弥漫大B淋巴瘤(DLBL)患者外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及克隆性增殖情况。方法:利用RT-PCR方法扩增6例DLBL患者外周血单个核细胞中24个TCRVβ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果:6例DLBL患者分别表达9~20个TCRVβ亚家族。患者均存在1个或多个Vβ亚家族的克隆增殖T细胞,增殖形式包括寡克隆、寡克隆增殖趋势及双克隆。Vβ13和Vβ15亚家族出现克隆增殖性T细胞的频率较高(66.7%)。结论:DLBL患者外周血TCRVβ亚家族T细胞的分布具有特点,表现为TCRVβ亚家族T细胞呈限制性选用和克隆性增殖,这可能是淋巴瘤患者机体对淋巴瘤相关抗原产生的特异性免疫反应。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞性淋巴瘤 t细胞受体Vβ基因 t细胞克隆性 基因扫描
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应用RT-PCR分析真性红细胞增多症病人TCR Vβ亚家族T细胞的表达 被引量:1
14
作者 杨力建 李扬秋 +4 位作者 许敏华 祁明芳 郁志 陈少华 廖继东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期76-78,共3页
近几年,国外相继报道对T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族基因的分析,从而了解肿瘤或自身免疫性疾病病人的细胞免疫功能状态,并为临床上进一步开展特异性免疫治疗提供新的实验依据。本文利用RT-PCR方法分析3例真性红细胞增多症病人Vβ亚家族... 近几年,国外相继报道对T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族基因的分析,从而了解肿瘤或自身免疫性疾病病人的细胞免疫功能状态,并为临床上进一步开展特异性免疫治疗提供新的实验依据。本文利用RT-PCR方法分析3例真性红细胞增多症病人Vβ亚家族T细胞的表达情况。 展开更多
关键词 t细胞受体Vβ基因 t细胞 真性红细胞增多症 逆转录-聚合酶链反应
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AML-M6患者外周血TCR Vβ亚家族T细胞限制性增殖情况
15
作者 陈少华 李扬秋 +2 位作者 杨力建 周羽竝 黄梅娟 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第10期646-646,共1页
关键词 急性髓性白血病 t细胞受体Vβ基因 t细胞克隆性
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狼疮模型鼠各脏器中T细胞受体Vβ基因的表达 被引量:3
16
作者 周广宇 藤尾圭志 +1 位作者 俞戎 山本一彦 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2004年第12期733-736,共4页
目的探讨MRL/lpr和(NZB×NZW)F1两种狼疮模型鼠中致病性T细胞克隆在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增狼疮模型鼠各脏器中的T细胞受体(TCR)Vβ基因,单链构象多态性分析法(SSCP)分析TCRVβ的... 目的探讨MRL/lpr和(NZB×NZW)F1两种狼疮模型鼠中致病性T细胞克隆在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增狼疮模型鼠各脏器中的T细胞受体(TCR)Vβ基因,单链构象多态性分析法(SSCP)分析TCRVβ的表达,并应用磁珠细胞分离法(MACS)确定广泛浸润于各脏器中的T细胞的表型。结果两种狼疮模型鼠在SLE发病时,多个脏器中出现相同的T细胞寡克隆扩增带;该广泛浸润的T细胞克隆扩增呈TCRVβ限制性;此共同的T细胞克隆大多来源于CD4+T细胞。结论两种狼疮模型鼠的CD4+T细胞被活化后呈克隆扩增,广泛浸润于多脏器。 展开更多
关键词 狼疮 脏器 t细胞克隆 扩增 tCR 表达 t细胞受体Vβ基因 结论 模型 目的
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膜性肾病患者T细胞受体Vβ基因的表达及与抗M型磷脂酶A2受体抗体的相关性分析 被引量:3
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作者 周广宇 金玲 毕丽荣 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期384-386,共3页
近年研究发现.在特发性膜性肾病(|MN)患者中检测到抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体,其滴度与蛋白尿的消长相关,表明PLA2R是1MN重要的靶抗原。现已明确T细胞在膜性肾病动物模型Hevmann肾炎的发病中具有重要作用,但目前尚未虬IMN患... 近年研究发现.在特发性膜性肾病(|MN)患者中检测到抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体,其滴度与蛋白尿的消长相关,表明PLA2R是1MN重要的靶抗原。现已明确T细胞在膜性肾病动物模型Hevmann肾炎的发病中具有重要作用,但目前尚未虬IMN患者T细胞受体(TCR)vB基因表达方面的报道。本研究通过对成人IMN患者TCRVB基斟表达及其与血清抗PLA2R抗体的相关性分析,来探讨IMN疾病的自身免疫发病机制。 展开更多
关键词 t细胞受体Vβ基因 膜性肾病患者 相关性分析 磷脂酶A2 受体抗体 M型 免疫发病机制 特发性膜性肾病
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血液肿瘤患者细胞免疫功能状态的研究 被引量:2
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作者 尹青松 李扬秋 《国外医学(输血及血液学分册)》 CAS 2005年第6期515-518,共4页
血液肿瘤患者均存在严重的免疫功能紊乱,由此而影响机体自发抗肿瘤免疫反应和各种抗肿瘤治疗效果。本文就新近有效的免疫检测手段——T细胞受体Vβ基因谱型分析和T细胞受体删除 DNA环及其检测的意义,血液肿瘤的细胞免疫功能缺陷状况和... 血液肿瘤患者均存在严重的免疫功能紊乱,由此而影响机体自发抗肿瘤免疫反应和各种抗肿瘤治疗效果。本文就新近有效的免疫检测手段——T细胞受体Vβ基因谱型分析和T细胞受体删除 DNA环及其检测的意义,血液肿瘤的细胞免疫功能缺陷状况和免疫缺陷的影响因素等作一综述。 展开更多
关键词 血液肿瘤 t细胞受体删除DNA环 t细胞受体Vβ基因 细胞免疫功能状态 肿瘤患者 抗肿瘤免疫反应 细胞免疫功能缺陷 t细胞受体 免疫功能紊乱 检测手段
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成年发病狼疮鼠的T细胞受体Vβ基因测序分析
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作者 周广宇 藤尾圭志 +1 位作者 俞戎 山本一彦 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2005年第8期458-462,共5页
目的分析MRL/lpr和(NZB×NZW)F1两种狼疮鼠成年发病时,广泛浸润于多脏器的T细胞克隆T细胞受体(TCR)Vβ基因编码的氨基酸基序特点,揭示该T细胞克隆的抗原特异性。方法用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增不同成年发病狼疮鼠个体的... 目的分析MRL/lpr和(NZB×NZW)F1两种狼疮鼠成年发病时,广泛浸润于多脏器的T细胞克隆T细胞受体(TCR)Vβ基因编码的氨基酸基序特点,揭示该T细胞克隆的抗原特异性。方法用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增不同成年发病狼疮鼠个体的肾脏、大脑中的TCRVβ6基因,对扩增产物进行基因克隆和DNA测序分析;单链构象多态性分析法(SSCP)鉴定广泛浸润的T细胞克隆TCRVβ6基因编码的氨基酸基序。结果两种成年发病狼疮鼠的不同个体之间,广泛浸润于多脏器的T细胞克隆TCRVβ6基因的互补决定区3(CDR3)中出现相同的氨基酸基序。结论不同个体成年发病狼疮鼠的多脏器中广泛浸润的T细胞克隆TCRVβ基因的CDR3中出现相同的氨基酸,表明该克隆针对特定的自身抗原。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 小鼠 近交MRL LPR 小鼠 近交NZB 受体 抗原 t细胞 氨基酸序列 t细胞受体Vβ基因 DNA测序分析 发病时 狼疮
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Analysis of the Clonal Expansion of TCR VβT Cells in Patients
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作者 LIYangqiu YANGLijian 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2002年第3期145-148,共4页
Objective To investigate the clonal expansion of T cell receptor(TCR)Vβ subfamily T cells which were considered as GVL effective cells after donor lymphocytes infusion(DLI)in patients with relapse chronic myelogenous... Objective To investigate the clonal expansion of T cell receptor(TCR)Vβ subfamily T cells which were considered as GVL effective cells after donor lymphocytes infusion(DLI)in patients with relapse chronic myelogenous leukemia(CML)after allogeneic bone marrow transplantation(allo-BMT).Methods The CDR3 of TCR Vβ24 subfamily genes were amplified in samples of peripheral blood mononuclear cells at different time points before and after DLI,which were drawn from 2 cases of relapse CML treated by allo-BMT,to observe the usage of TCR Vβrepertoire.The PCR products were further labeled with fluorescent and analyzed by genescan technique for identification of the CDR3 size,to evaluate the clonality of the detectable TCR VβT cells.Results Only 4-11 VβT subfamily T cells could be identified in CML cases before DLI,and 12-21 Vβ subfamily T cells could be deected in samples from CML which display remission after DLI.Genescan analysis showed that new clonal expansion TCR Vβ subfamily T cells could be found in samples after DLI.Conclusion The skew distribution of TCR Vβ subfamily T cells could be found on patients with relapse CML after allo-BMT,and this skewing pattern may stage to stage to normal pattern during the complete remission.The GVL effect may exert through some clonal expansion TCR Vβ subfamily T cells during the treatment of DLI in relapse CML. 展开更多
关键词 慢性粒细胞性白血病 CML DLI治疗 供体淋巴细胞输注 t细胞受体β基因 克隆性增殖
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