呼吸道疾病外周血T细胞表面受体变化的意义

目的探讨T细胞表面受体(TCR)在小儿呼吸道疾病中的变化及其临床意义。方法运用流式细胞仪检测16例支气管哮喘患儿和67例呼吸道感染患儿外周血TCR,并以正常值为对照进行相关分析。结果支气管哮喘组、呼吸道感染组和反复呼吸道感染组外周血TCR值明显降低,分别为(2.89±1.76)％、(4.04±2.52)%和(4.32±2.09)％,与正常值(6.5±3.5)％比较均有显著差异。结论TCR在支气管哮喘和呼吸道感染的发病过程中起重要作用,并可作为其免疫检测指标之一 实用儿科临床杂志,2004,19(12)

晚期非小细胞肺癌患者外周血CD8^(+)T细胞表面NK相关受体表达及与预后的相关性分析

非小细胞肺癌(NSCLC)是肺癌中最常见类型之一,预后较差,5年生存率不足20%,尤其是晚期患者5年生存率仅2%左右[1-2]。寻找精准可靠、能够实时预测预后的指标成为临床亟待解决的问题。肿瘤免疫逃逸是肿瘤恶性进展的重要过程,其机制十分复杂,机体在清除肿瘤细胞时。

胃肠道肿瘤靶向抗癌胚抗原单链抗体与T细胞表面受体基因的融合分子构建

目的 将胃肠道癌胚抗原 (CEA)特异性单链抗体基因与人T细胞CD3ζ胞内区、跨膜区基因克隆入真核表达载体 ,表达相应的融合分子 ,以期制备消化道肿瘤靶向性杀伤T细胞。方法 应用PCR法扩增抗CEA特异性单链抗体 (scFv)基因 ;用RT PCR法从正常人外周血T细胞扩增出CD3ζ胞内区、跨膜区基因 ;将单链抗体插入CD3ζ基因序列的上游 ,构建重组真核表达载体scFv CD3ζ pcDNA3.0并测序。结果 抗CEAscFvcDNA片段为 810bp ,与已知的序列相符 ;CD3ζ胞内区、跨膜区的cD NA片段为 4 38bp ,与基因库公布的序列一致。重组的表达载体经酶切琼脂糖电泳及测序加以证实。 结论 成功制备了具有抗肿瘤相关抗原CEA靶向性及CD3ζ胞内区、跨膜区信号转导功能的重组分子 。

胰蛋白酶原基因与T淋巴受体Vβ7.2片段之间的间隔序列分析

目的鉴定人类T淋巴细胞受体β链基因(Tcell receptor beta-chain,TCRβ)上两个毗邻基因,即胰蛋白酶原基因(cationictrypsinogen,PRSS1)与TCR Vβ7.2片段之间的间隔序列在胰腺炎和健康人群中的分布情况。方法对来自3位胰腺炎患者及2位健康体检者的DNA样本利用特异引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,产物经电泳、纯化后直接测序,并分析该序列的碱基在胰腺炎组和正常人群中的组成情况。结果利用自行设计的引物在2份胰腺炎患者外周血DNA样本中扩增出片段长度约为2.6 kb的条带,DNA测序结果显示两个毗邻基因之间的片段在健康人群和胰腺炎人群中均不是稳定组成。结论TCRβ序列中胰蛋白酶原基因(PRSS1)与TCR Vβ7.2基因之间间隔序列存在不稳定性。

巢式PCR克隆猪T细胞表面抑制性受体PD-1全长基因

为了获得猪T细胞表面抑制性受体PD-1的全长基因,本研究根据猪T细胞表面抑制性受体PD-1的c DNA序列,设计合成2对引物P1/P2、P3/P4,并在P1和P2的5'端分别引入Eco RⅠ和XhoⅠ酶切位点。应用巢式PCR技术从感染猪瘟病毒(CSFV)石门株的猪外周血单个核细胞中,扩增获得了大小为866 bp的基因片段。将扩增的目的基因回收、纯化,克隆至p MD-18 T克隆载体,转化宿主菌DH5α。菌液PCR和质粒PCR选择可疑阳性重克隆质粒,抽提质粒,然后用Eco RⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定,最后进行基因序列测定。结果表明,成功构建猪PD-1全长基因的重组质粒(p MD-PD1)。

免疫组库在风湿性疾病中的研究进展

免疫组库是指特定时间段内机体内T细胞和B细胞多样性的总和,其多样性特征反映了机体免疫系统对抗各种抗原的免疫应答能力。风湿免疫性疾病以自身抗原导致免疫功能紊乱为特征。通过高通量测序研究免疫组库的多样性是当今一大热点,其在风湿性疾病中的研究亦日益剧增,免疫组库特征不仅为风湿病的发病机制提供了新的见解,还为其临床诊治提供了有用的信息。本文总结了免疫组库多样性在各类风湿病中的研究现状,并强调了免疫组库在风湿免疫性疾病中的应用价值。

基于D50指数的恶性梗阻性黄疸介入疗效及预后评估

目的探讨D50指数评估恶性梗阻性黄疸(MOJ)介入疗效及预后的临床应用价值。方法搜集2020年1月至2020年10月在本院接受检查的对照组(健康人)31名、病例组(MOJ患者)27例的临床资料。分别抽取外周血标本,利用高通量测序获得T细胞表面抗原受体(TCR)可变区序列信息,基于该序列信息分析TCR多样性,采用TCR多样性指数即D50指数,来量化评估免疫力情况;根据D50指数的不同,将MOJ患者免疫力分为优(0.15~0.50)、良(0.10~0.15)、中(0.05~0.10)、差(0~0.05)四个等级,对比分析对照组与病例组之间D50指数的差异。评价MOJ患者不同年龄、性别、体重、肿瘤标志物水平等指标之间的差异,并分析不同免疫级别的MOJ患者总生存期(OS)的差异。结果对照组(31名)中,男10名、女21名,年龄28.0~70.0岁,平均(48.0±10.2)岁,中位D50为0.147(0.017~0.229),免疫力等级为优、良、中、差者分别为15例(48.4%)、8例(25.8%)、6例(19.4%)、2例(6.5%)。病例组(27例)中,男11例、女16例,年龄33.0~75.0岁,平均(55.9±10.3)岁,中位D50为0.069(0.005~0.150),免疫力等级为优、良、中、差者分别为1例(3.7%)、5例(18.5%)、10例(37.0%)、11例(40.7%)。对照组与病例组的D50指数差异有统计学意义(P<0.001)。按照白蛋白-胆红素(ALBI)评分、Child-pugh分级、CA12-5水平及术前是否治疗(化疗或靶向治疗)进行亚组分组,组间D50指数有显著性差异(P<0.05)。免疫力等级为中或差的患者,相比于优或良患者,其Vβ和Jβ基因组合的TCR的丰度呈明显的单调性。不同免疫力等级的患者OS之间有统计学意义(P=0.004,χ^(2)=10.91),其中优良组OS最长。结论D50指数对评价MOJ患者介入疗效及预后有重要的临床意义及应用价值。

CDR3谱型分析在肿瘤研究中的应用进展

肿瘤特异性T细胞通过其表面T细胞受体（T cell receptor，TCR）识别肿瘤，进而杀伤肿瘤细胞，其所介导的细胞免疫在机体抗肿瘤免疫应答中发挥极其重要的作用。寻找肿瘤特异性T细胞克隆是当前肿瘤研究领域的热点，而应用最广泛、