T细胞转录因子-4在大鼠脑缺血再灌注海马齿状回神经干细胞中的表达

目的:检测T细胞转录因子-4(Tcf-4)在大鼠脑缺血再灌注海马组织神经干细胞中的表达及其变化。探讨影响神经干细胞早期增殖分化的分子调控机制。方法:采用大脑中动脉栓塞(MCAO)制作大鼠脑缺血再灌注模型。用免疫组织化学SP法及RT-PCR法检测海马神经干细胞BrdU、Tcf-4中的表达。结果:随着脑缺血再灌注第3日齿状回神经元BrdU阳性细胞明显增多,第7日达高峰,然后逐渐减少。Tcf-4 mRNA反应产物随脑缺血再灌注时间延长逐渐增多,第21日表达最强,以后表达逐渐减少。结论:Tcf-4时间依赖性表达与神经干细胞增殖分化进程相吻合,说明其在神经干细胞晚期分化中起重要调控作用。

T细胞因子3在消化系统恶性肿瘤中的研究进展

T细胞因子3(TCF3)属于淋巴增强因子/T细胞转录因子(LEF/TCF)家族成员,是经典的WNT信号通路下游关键效应分子,通过激活一系列WNT靶基因的转录,在多种恶性肿瘤的发生、发展过程中起重要作用。本文对TCF3的生物学特性及其在消化系统恶性肿瘤中的作用机制和研究进展进行综述,分析TCF3在消化系统恶性肿瘤中的功能及临床潜在价值。

T细胞转录因子对类风湿性关节炎免疫发病机制的影响

分析T细胞转录因子给RA免疫发病机制带来的影响。方法:选取2016年1月-2020年12月本院收治的RA患者50例为RA组,另选取同时间段50例健康体检者为对照组,检测两组外周血内调节性T细胞比例、调节性T细胞增殖活性和对效应性T细胞(Tresp)抑制功能,检测T细胞转录因子STAT3 和分泌的炎症因子水平,经STAT3抑制剂Stattic V对RA患者的调节性T细胞开展处理,观察增殖和抑制功能恢复与促炎因子分泌量改变情况;取RA患者滑膜组织开展病理形态学有关检测,于光镜下评定滑膜炎症及滑膜增生状况。结果:RA患者外周血内调节性T细胞的数量低于对照组,调节性T细胞的体外增殖率和对于Tresp抑制率明显下降(P<0.05)。RA组CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞内p-STAT3、TNF-α、IFN-γ及IL-17A高于对照组,调节性T细胞所表达的炎症因子水平高于对照组(P<0.05)。加50μg/L Stattic V后,RA患者的调节性T细胞对于Tresp抑制率高于未处理组,IFN-γ、IL-17及TNF-α等促炎因子表达量低于未处理组(P<0.05)。RA患者光镜下显示关节的滑膜组织有明显炎症,滑膜间质显著充血、水肿和大量淋巴细胞、浆细胞浸润,伴随组织损害与灶性坏死;滑膜被覆上皮细胞增生,由1-3层变为5-10层,局部可见纤维素性渗出、坏死物沉积。结论:RA患者存在滑膜炎症病变和滑膜增生反应,在调节性T细胞的Tresp细胞负向调控能力方面有一定下降,作用机制和STAT3异常表达相关,抑制STAT3异常表达对RA患者免疫发病机制有着重要影响,可能能够促进调节性T细胞的功能恢复,减少炎症因子分泌,进而防止RA发生。

不同分级慢性阻塞性肺疾病患者调节性T细胞核转录因子叉头状转录因子3表达水平及与炎性因子相关性研究

目的探讨不同分级慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者调节性T细胞核转录因子叉头状转录因子3(Foxp3)的表达水平及与炎性因子相关性。方法选取2015年1月至2017年1月来院就诊的120例COPD患者纳入观察组,按照病情严重程度分为COPD1~2级组53例、COPD3~4级组67例,并选择同期进行健康体检的健康志愿者50例为对照组。对3组受试者的Foxp3水平、炎性因子[C-反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、B型脑尿钠肽(BNP)]水平进行检测对比,并采用Pearson检验对COPD患者Foxp3水平与炎性因子水平间相关性进行分析探讨。结果观察组患者的Foxp3水平低于对照组,炎性因子CRP、IL-6、TNF-α、血浆BNP水平均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组内COPD3-4级组患者Foxp3水平低于COPD1-2级组,而CRP、IL-6、TNF-α、BNP水平均高于COPD1-2级组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性检验,Foxp3水平与CRP、IL-6、TNF-α、BNP呈负相关性(r值分别为-0.571、-0.534、-0.593、-0.516,P<0.05)。结论在COPD患者体内调节性T细胞核转录因子Foxp3的表达水平有降低趋势,并随着患者病情分级加重而进一步降低,且Foxp3与炎性因子水平呈负相关性,通过对COPD患者Foxp3、炎性因子水平监测,对于疾病的临床治疗评估有一定的指导作用。

生血合剂对慢性再生障碍性贫血患者T-bet/GATA-3、相关信号分子、细胞因子表达及Th_1/Th_2的影响

目的研究转录因子T-bet(T-box expressed in T cells)、GATA-3(GATA binding protein3)及相关信号通路在慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia,CAA)免疫发病中的作用,从辅助性T(helper T,Th)细胞失衡、转录因子及相关信号通路水平探讨生血合剂治疗CAA的免疫调控机制。方法 40例CAA患者均来自上海中医药大学附属岳阳医院,随机分为治疗组20例和对照组20例,选取体检健康者20名为正常组。治疗组患者辨证分为脾肾阳虚型和脾肾阴虚型,脾肾阳虚型患者服用生血合剂1号,脾肾阴虚型患者服用生血合剂2号,对照组服用环孢菌素A(CsA),采用实时荧光定量PCR(Realtime FQ-PCR)检测CAA患者治疗前后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMNC)、T-bet、GATA-3及信号转导子及转录激活因子4(signal transducer and activator of transcription 4,STAT4)、STAT6 mRNA表达,采用流式细胞术、酶联免疫吸附法(ELISA)检测CAA患者治疗前后PBMNC Th_1、Th_2比例及PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12、IL-4水平。结果 CAA患者PBMNC T-bet、STAT4 mRNA表达、T-bet/GATA-3比值、Th_1比例、Th_1/Th_2比值、PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12表达均明显高于正常组(P<0.01),采用生血合剂或CsA治疗后,患者T-bet、STAT4表达、T-bet/GATA-3比值、Th_1比例、IFN-γ、IL-12表达均有所下降(P<0.01),但T-bet、STAT4、T-bet/GATA-3比值、Th_1比例、IFN-γ表达仍未达到正常水平,治疗组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而GATA-3、STAT6 mRNA表达、Th_2比例、IL-4表达治疗前后与正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化,及Th_1/Th_2平衡向Th_1型偏移,在CAA免疫异常的发病过程中起关键的作用。生血合剂和CsA能通过下调IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化,并纠正Th_1过度极化,从而减轻CAA异常亢进的细胞免疫,解除造血抑制。

TBX21和ADCY9多态性在儿童哮喘发生发展中的临床研究

目的:探究T细胞转录因子(TBX21)和腺苷酸环化酶9抗体(ADCY9)基因多态性在儿童哮喘发生发展中的临床作用。方法:选取2016年7月至2017年1月200例河南地区5岁及以下汉族喘息患儿作为研究组,另选同期100例5岁及以下汉族健康儿童作为对照组。采集两组口腔黏膜脱落细胞,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术对TBX21基因rs2240017多态性位点、ADCY9基因rs2230739多态性位点的基因型进行检测,根据检测结果评估哮喘危险程度,据此将研究组分为低危组、高危组两个亚组,比较低危组、高危组患儿血清免疫球蛋白E(IgE)水平、儿童哮喘预测指数(API)阳性率、过敏性疾病发生率,分析哮喘相关基因多态性危险程度与血清IgE水平、API、过敏性疾病发生率的相关性。所有患儿均随访至6岁明确哮喘诊断,比较低危组、高危组哮喘发生率,发生哮喘患儿均给予吸入糖皮质激素与白三烯受体拮抗剂治疗3个月,比较低危组、高危组哮喘控制情况及肺功能受损情况。结果:研究组与对照组TBX21基因rs2240017多态性位点、ADCY9基因rs2230739多态性位点的基因型检测结果比较,差异有统计学意义(P<0.001);200例喘息患儿TBX21基因rs2240017多态性位点CC、CT、TT基因型占比分别为19.50%、56.00%、24.50%,ADCY9基因rs2230739多态性位点CC、CG、GG基因型占比分别为86.00%、10.00%、4.00%;高危组血清IgE水平、API阳性率及过敏性疾病发生率均高于低危组(P分别为<0.001、<0.001、0.021);喘息患儿哮喘相关基因多态性危险程度与血清IgE水平、API阳性率、过敏性疾病发生率呈正相关(P<0.001);高危组哮喘发生率(81.48%)、肺功能受损率(74.07%)均高于低危组(4.90%、3.50%)(P<0.001);高危组哮喘患儿哮喘控制率(79.55%)与低危组哮喘患儿哮喘控制率(100.00%)比较,差异无统计学意义(P=0.433)。结论:喘息患儿TBX21基因rs2240017位点、ADCY9基因rs2230739位点基因多态性与哮喘发生、肺功能受损具有密切相关性。

雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎Th_1反应相关因子的抑制作用

目的:探讨雷公藤内酯醇（TP）对试验性色素膜视网膜炎（EAU）Th1反应相关因子的抑制作用。方法:用ELISA检测IL-12、IFN-γ水平;采用原位杂交染色法,观测TP对EAU的T淋巴细胞IL-12mRNA的表达的影响;采用电泳迁移率改变试验对EAU T淋巴细胞NF-AT活性检测。结果:①TP能有效的降低S-抗原诱导产生的EAU（P<0.05）;②TP能降低EAU T淋巴细胞IL-12、IFN-γ分泌水平;③P能抑制EAT淋巴细胞IL-12 mRNA的表达;④TP抑制EAU T淋巴细胞NF-AT活性。结论:TP对EAU的免疫抑制作用可能是通过抑制与Th1反应相关的调节因子使Th1反应减弱,而使EAU的发病率明显降低。

MDSC、Th2、FoxP3^(+)Treg及炎症因子与HR-HPV感染宫颈病变的关系研究

目的研究髓系来源抑制性细胞(MDSC)、辅助性T细胞2(Th2)和叉头状转录因子-3调节性T细胞(FoxP3^(+)Treg)水平及炎症因子与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染患者宫颈病变的关系。方法以邢台市人民医院2017年1月至2019年12月收治的180例宫颈病变患者作为研究对象,其中宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINⅠ组)患者39例,宫颈上皮内瘤变Ⅱ级(CINⅡ组)患者31例,宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CINⅢ组)患者35例,宫颈癌(UCC组)患者37例,宫颈炎(CC组)患者38例,比较5组患者的MDSC、Th2、FoxP3^(+)Treg细胞水平及炎症因子水平之间的差异,采用Logistic回归对宫颈病程的影响因素进行分析。结果5组患者的MDSC、Th2和FoxP3^(+)Treg细胞水平比较差异有统计学意义(P<0.05);经两两比较,患者的MDSC、Th2和FoxP3^(+)Treg细胞水平从高到低依次为UCC组、CINⅢ级组、CINⅡ级组、CINⅠ级组、CC组,差异有统计学意义(P<0.05)。5组患者的白细胞介素(IL)-2、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平比较差异有统计学意义(P<0.05),IL-4、IL-6、γ干扰素水平比较差异无统计学意义(P>0.05);经过两两比较,IL-10、IL-17A、TNF-α水平从高到低依次为UCC组、CINⅢ级组、CINⅡ级组、CINⅠ级组、CC组,差异有统计学意义(P<0.05);IL-2从高到低依次为CINⅠ级组、CC组、CINⅡ级组、UCC组、CINⅢ级组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,Th2细胞、MDSC细胞、FoxP3^(+)Treg细胞、IL-10、IL-17A、TNF-α、IL-2是影响宫颈癌恶性病变程度的危险因素(P<0.05)。结论MDSC、Th2和FoxP3^(+)Treg细胞均为造成HR-HPV感染患者宫颈病变的重要影响因素,通过MDSC、Th2和FoxP3^(+)Treg细胞及炎症因子的分析,可能对早期宫颈恶性病变做出预测。

TCF7L2与糖尿病的关系

1 TCF7L2基因位于人类染色体10q25.3的TCF7L2基因,长度为215.9 kb,包括14个外显子,其表达产物为高迁移率组盒包含的T细胞转录因子-4（TCF-4）,是T细胞因子/淋巴细胞增强子结合因子（TCF/LEF）中的一个,是Wnt信号传导通路的重要组成成分,参与细胞增殖与分化的调节[1,2].

Sox-Wnt相互作用在发育和疾病发生中的作用

Sox基因是一大类编码转录因子的发育相关基因家族,其编码超过20种Sox蛋白。近年研究发现Sox基因与Wnt/β-连环素信号通路关系密切,通过参与调节Wnt/β连环素信号通路活性,在生物发育和肿瘤发生等多种生命活动中发挥重要作用。本文总结近年国内外相关研究成果,综合分析Sox-Wnt相互作用及其对Wnt/β连环素信号通路的调节机制。

姜黄素靶向抑制SW480细胞信号通路研究

目的:探讨姜黄素抑制SW480细胞的作用机制。方法:应用内盐法(MTS)检测方法观察SW480细胞活性及姜黄素的干预影响;应用Western blot、实时定量PCR研究姜黄素对SW480细胞的信号干预机制,检测上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、β-链蛋白(β-catenin)、T细胞转录因子4(TCF4)基因等表达量。结果:SW480细胞增殖活性在姜黄素干预下被明显抑制,姜黄素对SW480细胞增殖IC50分别为(75.75±3.17)μmol/L(12 h)、(21.15±2.47)μmol/L(24 h)、(18.95±1.75)μmol/L(48 h)、(17.93±1.55)μmol/L(72 h);姜黄素干预下,SW480细胞内E-cadherin、Vimentin明显上调,而β-catenin、TCF4明显下调,且呈剂量依赖性。结论:姜黄素能抑制SW480细胞活性,并通过Wnt/β-catenin信号通路发挥靶向抑制作用。

COPD大鼠T细胞介导转录因子对Th1/Th2细胞调控的实验研究

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠T细胞介导的转录调节因子(T-bet)、GATA-结合蛋白3(GATA-3)、孤独核受体(RORgammat)的表达。方法将30只大鼠随机分为正常对照组、COPD模型组,每组15只。COPD模型大鼠采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入法建立COPD模型,模型复制成功第28d,采用肺功能仪检测肺功能,酶联免疫吸附法检测大鼠血清γ干扰素(IFN-γ)、白介素(IL)-4、IL-17表达,Western blot检测肺组织T-bet、GATA-3、RORgammat蛋白表达。结果与正常对照组比较,COPD模型组大鼠肺功能参数、血清IL-4水平降低,血清INF-γ、IL-17、Th1/Th2,肺组织T-bet、T-bet/GATA-3、RORgammat蛋白表达升高(P<0.05)。肺功能参数0.3s用力呼气容积(FEV0.3)与血清INF-γ水平,肺组织T-bet/GATA-3蛋白表达呈负相关,用力肺活量(FVC)与血清IL-4水平呈正相关,FEV0.3/FVC与血清Th1/Th2、肺组织T-bet、T-bet/GATA-3蛋白表达呈负相关,最大呼气流量(PEF)与血清IL-17水平,肺组织T-bet,RORgammat蛋白表达呈负相关(P均<0.05);血清Th1/Th2与肺组织T-bet/GATA-3蛋白表达呈正相关,IL-17与RORgammat呈正相关(P均<0.05)。结论 COPD的发生与T-bet/GATA-3、RORgammat对Th1/Th2、Th17细胞调控失衡有关。

胸腺细胞转录因子TCF-1、Nur77以及mRNA对长期递增负荷运动的应答性特征

目的:通过研究对胸腺细胞发育具有正性调节的作用的转录因子TCF-1和负性调节作用的Nur77在6周递增负荷运动的应答性特征,探讨长期运动影响胸腺细胞发育的调节机制。方法:128只SD大鼠随机分为运动组和对照组,运动组进行递增负荷跑台训练6周,每周6次,每天30 min。分别于第02、、46、周末利用IHC、WB及FQ-RT-PCR技术测定安静状态、运动后即刻和运动后3 h胸腺TCF-1、Nur77及其mR-NA表达水平。结果:TCF-1和Nur77呈现几乎相反的应答性变化:1)TCF-1:对负荷初次应答时运动前后没有明显变化;第2周末和第四周末运动后明显降低,恢复3 h升高,呈"V"型应答曲线;第6周末,则在运动后持续下降。其mRNA应答趋势与其蛋白表达相一致。2)Nur77:第0、2、4周末呈现倒"V"型变化,第6周则持续上升。其mRNA应答趋势与其蛋白表达相一致。结论:随着递增负荷运动的进程,TCF-1及其mR-NA总体水平越来越低,且越来越难以恢复,表明对胸腺细胞发育的正性调节作用越来越弱;Nur77及其mR-NA总体水平越来越高,恢复也越来越难,表明对胸腺细胞的负性调节作用越来越强。这应该是胸腺细胞受长期递增负荷运动影响,胸腺细胞发育受阻且功能逐步下降的重要调节机理之一。

免疫抑制曲霉感染大鼠髓样细胞表达触发受体-1、T细胞特异性转录因子、脱中胚蛋白表达的研究

目的 通过观察免疫抑制曲霉感染大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液（BALF）中髓样细胞表达触发受体-1（TREM-1）、T细胞特异性转录因子（T-bet）、脱中胚蛋白（Eomes）水平,探讨其在免疫抑制曲霉感染大鼠淋巴细胞调控分化中的作用和意义.方法 将大鼠分为4组,健康对照组（免疫正常＋无曲霉接种）、侵袭性肺曲霉感染（IPA）组（免疫正常＋曲霉接种）、环磷酰胺（CTX）组（CTX＋无曲霉接种）、CTX＋ IPA组（免疫抑制＋曲霉接种）.建立免疫抑制IPA大鼠模型后处死取血、BALF和肺组织.采用ELISA法检测sTREM-1、T-bet、Eomes水平,肺组织标本进行病理切片PAS染色和组织匀浆培养.结果 IPA组、CTX＋ IPA组大鼠曲霉感染后肺组织病理表现：肺组织急性炎性细胞浸润、肺间质充血,肺泡结构破坏,部分肺泡内可见曲霉菌丝,提示建模成功.与健康对照组比,IPA组和CTX ＋IPA组24 h、48 h血浆sTREM-1[IPA组（146.77±10.41） ng/L,CTX ＋IPA组24 h （226.00±11.88） ng/L,CTX ＋IPA组48 h（200.77±10.63）ng/L,健康对照组（110.50±7.70）ng/L]和T-bet水平[IPA组（561.17 ±7.23）μg/L,CTX ＋IPA组24 h（647.00±33.03） μg/L,CTX＋ IPA组48 h（619.23±87.44） μg/L,健康对照组（340.03±26.32）μg/L]升高（P＜0.05）,Eomes水平[IPA组（7.96±0.65） ng/L,CTX ＋IPA组24 h（3.97±0.35）ng/L,CTX ＋IPA组48 h（4.00±0.74）ng/L,健康对照组（8.38±0.51） ng/L]降低（P＜0.001）;与CTX ＋IPA组24 h、48 h比,72 h、96 h血浆sTREM-1（106.67±7.64） ng/L,（133.27±32.79） ng/L]和T-bet[（299.64±63.07）μg/L, （398.02±109.22） μg/L]水平降低（P＜0.001）,Eomes水平[（8.38±0.54） ng/L,（8.40±0.70） ng/L]升高（P＜0.001）.与健康对照组比,CTX ＋IPA组BALF中sTREM-1水平持续较高（P＜0.05）.相关性分析显示,大鼠血浆sTREM-1与T-bet呈正相关（r=0.91,P＜0.001）,与Eomes呈负相关（r=-0.788,P＜0.001）.结论 免疫抑制曲霉感染大鼠血浆sTREM-1水平与T-bet和Eomes变化密切相关,提示TREM-1可能参与真菌感染淋巴细胞调控分化.

头孢曲松联合乙酰半胱氨酸治疗儿童迁延性细菌支气管炎效果及对痰液黏稠度、GATA3、T-bet的影响

目的探讨头孢曲松联合乙酰半胱氨酸吸入对儿童迁延性细菌支气管炎(PBB)效果及对痰液黏稠度、GATA结合蛋白3(GATA3)、T细胞转录因子(T-bet)影响。方法选择2019年6月—2021年6月收治的PBB患儿118例,按治疗方法分为观察组和对照组各59例。2组均采取对症治疗,对照组给予头孢曲松,观察组在对照组基础上给予乙酰半胱氨酸雾化吸入,连续治疗2周。比较2组临床疗效、细菌清除率及治疗前后血气指标变化情况、GATA3和T-bet mRNA表达情况,观察痰液黏稠度、临床症状体征消失时间、住院时间,记录不良反应发生情况。结果治疗2周后,观察组治疗总有效率、细菌清除率及动脉血氧分压、pH高于对照组,动脉血二氧化碳分压低于对照组(P<0.05,P<0.01)。治疗2周后,观察组GATA3 mRNA水平低于对照组,T-bet mRNA高于对照组,痰液黏稠度改善情况优于对照组(P<0.01)。观察组肺部啰音、咳痰、咳嗽、喘息消失时间及住院时间短于对照组(P<0.01)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论头孢曲松联合乙酰半胱氨酸治疗儿童PBB效果确切,安全性高,可能机制与其调节转录因子GATA3、T-bet有关。

雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎IL-12 mRNA表达以及NF-AT活性的抑制作用

目的 :探讨雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎IL 12mRNA表达的影响及其机制。方法 :采用原位杂交染色法和电泳迁移率改变试验观测雷公藤内酯醇对试验性色素膜视网膜炎的T淋巴细胞IL 12mRNA的表达及NF AT活性。结果 :雷公藤内酯醇能有效地降低S 抗原诱导产生的试验性色素膜视网膜炎 ,能抑制淋巴细胞IL 12mRNA的表达及NF AT活性。结论 :雷公藤内酯醇对EAU的免疫抑制作用可能是通过抑制与Th1反应相关的调节因子使Th1反应减弱 。

人T细胞因子4外显子3～9突变在微卫星不稳定性直肠癌中的意义

目的 探讨人T细胞因子4（hTCF-4）外显子3～9突变在微卫星不稳定散发性直肠癌中的意义.方法 对102例散发性直肠癌患者进行微卫星标记遗传筛选.11例证实为高频率微卫星不稳定.对这11例以及来源于不同样本的微卫星稳定和正常组织病例各5例进行hTCF-4基因外显子3～9编码区测序分析.结果 研究揭示几个新的突变和序列变异体.在外显子4,一个为导致氨基酸由Q131T改变为S132I的一个四位连续变化（391insA、392G＞A、393A＞G and 395delC）,另一个为核苷酸缺失（395delC）,这些改变分别存在于不同的高频率微卫星不稳定病例（5/10,50%和4/10,40%）,而对照组缺乏.结论 这些突变与高频率微卫星不稳定性散发性直肠癌患者高度相关.

Aberrant expression and function of TCF4 in the proliferation of hepatocellular carcinoma cell line BEL-7402

Wnt signaling pathway is essential for development and tumorigenesis,however,this signaling pathway in the progress of hepatocellular carcinoma (HCC) remains unclear. In this paper,we studied the function of human T-cell transcription factor-4 (TCF4),a key factor of Wnt signaling pathway,on the proliferation of HCC cell line. We showed that the expression of TCF4 mRNA in HCC cell line BEL-7402 was higher than that in immortalized normal liver cell line L02. Blockage of Wnt pathway by △NTCF4,a dominant negative TCF4,could suppress BEL-7402 cells growth and decrease the expression of cyclin D1 and c-myc,two of target genes of Wnt pathway. On the other hand,stimulating Wnt pathway by introducing a degradation-resistant β-catenin S37A could increase BEL-7402 cells proliferation. But all the treatments had no effect on L02 cells. Our data indicated that TCF4 might be another key factor in Wnt pathway involved in HCC cells proliferation and TCF4 could be an effective therapeutic target for suppressing the growth of hepatocellular cancers.

唑来膦酸对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制

目的研究唑来膦酸对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法将对照组(未做任何处理)、唑来膦酸(ZOL)组(50μmol/L唑来膦酸处理)、miR-con组(转染miR-con)、miR-520a-3p组(转染miR-520a-3p mimics)、ZOL+anti-miR-con组(转染anti-miR-con再用唑来膦酸处理)、ZOL+anti-miR-520a-3p组(转染anti-miR-520a-3p再用唑来膦酸处理),均用脂质体法转染至人骨肉瘤细胞(HOS);MTT法检测各组细胞的增殖;Transwell法检测各组细胞的迁移、侵袭;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-520a-3p的表达;蛋白质印迹法(Westernblotting)检测各组细胞中T细胞特异性转录因子7(TCF7)的蛋白表达。双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果与对照组相比,ZOL组HOS细胞的吸光度[(1.05±0.11)比(0.73±0.07)]、迁移细胞数[(86.49±9.17)个比(31.67±4.29)个]、侵袭细胞数[(64.17±7.72)个比(17.82±3.19)个]显著降低,miR-520a-3p的表达明显下调(P<0.05);过表达miR-520a-3p可升高HOS细胞的吸光度[(1.09±0.12)比(0.68±0.09)]、迁移细胞数[(88.49±9.17)个比(35.76±5.14)个]、侵袭细胞数[(64.17±7.72)个比(19.48±4.27)个];TCF7是miR-520a-3p的靶标。抑制miR-520a-3p可逆转ZOL对HOS细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用,且可部分逆转ZOL对HOS细胞中TCF7表达的抑制作用。结论唑来膦酸可能通过调控miR-520a-3p/TCF7轴抑制骨肉瘤HOS细胞的增殖、迁移和侵袭。

COPD患者肺组织悬液DC细胞、CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞介导的免疫应答水平分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者树突细胞(dendritic cell,DC)、CD4^(+)叉头状转录因子-3(forkhead transcription facter3,Foxp3)T细胞介导的免疫应答变化及其临床转归。方法以2019年1月至2020年12月沧州市人民医院收治的120例COPD患者作为观察组,COPD稳定期患者78例,加重期患者42例,同时挑选我院健康体检的120例正常志愿者为对照组。采用流式细胞仪检测患者的非组织悬液中的CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞以及成熟DC细胞水平,分别对比分析观察组与对照组、稳定期组与加重期组、生存组与死亡组患者的CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞以及成熟DC细胞水平。通过线性相关分析CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞以及成熟DC细胞水平与患者生存情况以及严重程度的相关性。通过ROC曲线分析CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞以及成熟DC细胞水平对于不良预后的预测效能。结果与对照组相比,观察组患者的CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞以及成熟DC细胞水平更低,差异均具有统计学意义[%:(2.32±0.36)比(1.45±0.25),(4.09±1.02)比(2.15±0.78),t值分别为21.74和16.55,P值均<0.05]。与加重期患者相比,稳定期患者的CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞以及成熟DC水平更高,差异具有统计学意义[%:(0.26±0.08)比(2.09±0.85),(1.41±0.52)比(2.55±0.96),t值分别为18.86和8.44,P值均<0.05]。与死亡组相比,生存组患者的CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞以及成熟DC细胞水平更高,差异具有统计学意义[%:(0.37±0.12)比(2.01±0.77),(1.88±0.28)比(2.29±0.56),t值分别为20.07和4.94,P值均<0.05]。通过线性相关性分析,患者的严重程度与生存情况与CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞以及成熟DC细胞水平呈现负相关(r=-0.37,-0.46,-0.46,-0.59,P值均<0.05)。ROC曲线分析表明CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞以及成熟DC细胞水平对于不良预后具有预测效能(P<0.05)。结论COPD患者DC细胞、CD4^(+)Foxp3^(+)T细胞与疾病的进展以及患者的预后呈现相关性。