PD1-TCF1+CD8+干细胞样记忆T细胞对肿瘤患者免疫预后及三级淋巴结构的影响

目的探讨PD1-TCF1+CD8+干细胞样记忆T细胞在肿瘤微环境中的表达及对免疫治疗预后及三级淋巴结构(TLSs)的影响。方法收集33例武汉大学人民医院接受免疫治疗的晚期胸部肿瘤患者病理组织切片,18例NSCLC及15例食管鳞癌(ESCC)。多重免疫荧光技术对PD1-TCF1+CD8+T细胞表型进行定量分析,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Pearson检验进行相关性分析。结果PD1-TCF1+CD8+T细胞的高表达与更好的无进展生存期(PFS)和免疫治疗疗效有关;在NSCLC队列中,PD1-TCF1+CD8+T细胞的高表达还与三级淋巴结构的数量(P=0.0017)及相对面积(P=0.006)显著正相关。结论在NSCLC和ESCC患者中,PD1-TCF1+CD8+干细胞样记忆T细胞的高表达可能与良好的预后及免疫治疗疗效有关,并且在NSCLC中与肿瘤微环境内TLSs的形成密切相关。

干细胞样记忆T细胞在自身免疫性疾病中的作用

干细胞样记忆T(stem cell-like memory T,T_(SCM))细胞是一种长寿的、具有持续自我更新能力及重建记忆、效应T细胞亚群的多分化潜能的记忆T细胞亚群,是记忆T细胞系统中的最小分化细胞,具有类似干细胞的生物学特征,对于维持功能性免疫至关重要。由于T_(SCM)细胞强大的免疫重建功能,它在人类的许多病理和生理过程中发挥着核心作用,在多种自身免疫性疾病的发生及发展中起重要作用。T_(SCM)细胞在自身免疫性疾病中的独特作用可能使其成为治疗多种自身免疫性疾病的潜在靶点,可在相关疾病治疗中进行有效的免疫功能重建。

HIV-1潜伏库的研究进展——T记忆干细胞

人体的许多组织器官都由相应的特应性干细胞发育而来。研究发现,记忆性淋巴细胞群中也存在一小部分具有干细胞特性的细胞,命名为T记忆干细胞（TSCM）。这类细胞占外周总循环T淋巴细胞的2%~4%,可以分化为中枢记忆T细胞（TCM）、效应记忆T细胞（TEM）和终末分化效应T细胞,并且可以利用自我更新复制能力来维持一定的数量。近期研究发现,T记忆干细胞在人类艾滋病病毒（HIV）感染的发病机制中发挥着关键作用,在其内潜伏的HIV-1是病毒潜伏库的重要组成部分。文章将总结TSCM细胞在HIV感染中的一些新发现,探讨其与潜伏库的关系。

HIV-1慢性感染者外周血中CD8^+干细胞样记忆型T细胞变化以及对疾病进展的影响

目的观察人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)慢性感染者外周血中CD8+干细胞样记忆型T细胞(CD8+stem memory T cells,CD8+TSCM)随治疗的动态变化,分析其与疾病进展的关系。方法观察25例经抗反转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)的慢性HIV-1感染者(治疗方案为替诺福韦+依非韦伦+拉米夫定)以及36例健康对照者,对样本外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)分别用CD3-APCCy7、CD4-FITC、CD8-Per CPCy5、CD45RAPECy7、CCR7-APC、CD27-PE、CD95-Pacific Blue抗体和CD38-PE、HLA DR-APC抗体进行细胞表面染色并通过流式细胞仪检测CD8+TSCM细胞比例。比较HIV-1慢性感染者和健康者CD8+TSCM细胞比例的差异,并分析其与疾病进展指标(CD4+T细胞计数、HIV病毒载量以及免疫活化指标)的关系。结果 HIV-1慢性感染组的CD8+TSCM细胞比例小于健康对照组;CD8+TSCM细胞比例与CD4+T细胞计数呈正相关,与HIV-1病毒载量以及免疫活化指标CD38+HLA-DR+CD8+T细胞呈负相关;随着ART治疗,CD8+TSCM细胞比例在144周后升至健康对照水平。结论 CD8+TSCM在慢性HIV-1感染中发挥一定的保护作用,HIV-1相关特异性CD8+TSCM细胞可能是未来T细胞疫苗设计的靶点。

记忆性干细胞样T细胞在肿瘤治疗应用中的研究进展

记忆性干细胞样T细胞(stem memory T cells,TSCM)是最近几年发现的一个细胞亚群,约占外周血中总的CD4+T细胞和CD8+T细胞的2%~4%,是记忆性T细胞的早期分化阶段,具有记忆性细胞和干细胞的特点,基因谱介于初始T细胞和中央记忆T细胞之间。记忆性干细胞样T细胞具有自我更新和长期存活能力,这些特点使它们成为肿瘤领域关注的热点。本文将简述记忆性干细胞样T细胞的一些特点,以及它们在肿瘤治疗中的应用。

干细胞样记忆性T细胞的研究进展

干细胞样记忆性T细胞(stem like memory T cells,T SCM)是近年来发现的一种具有明显干细胞特性的记忆性T细胞亚群,除了具有记忆性T细胞快速高效的再次免疫应答的特点外,它还具有极强的自我更新、持续增殖分化等一系列干细胞特点。本文针对其分化、功能特点,在疾病发生发展中的作用和在制备预防性疫苗、肿瘤免疫治疗中的应用等方面进行综述,为其研究与应用提供相关的线索。

干细胞样记忆性CD8^+T细胞的生物学特性研究进展

干细胞样记忆性T细胞(TSCM)是一种新型记忆细胞亚群,TSCM具有类似干细胞样自我更新能力,能够在体内长期存活,并在抗原刺激下迅速分化为成熟的中枢记忆、效应记忆和效应T细胞。TSCM在临床患者和小鼠模型中均可检出且参与相关疾病的发生与发展。本文对CD8^+TSCM生物学特性进行总结,重点探讨CD8^+TSCM表型和转录特征、参与CD8^+TSCM分化的细胞因子和信号通路,及其在免疫相关疾病和肿瘤免疫治疗中的应用价值。

记忆性干细胞样T细胞:从哪里来?

记忆性干细胞样T细胞(stem cell-like memory T cells,T_(SCM))是近期发现的一群具有自我更新、长期生存以及分化为其他类型T细胞的多能干细胞。这些特性使其正成为细胞免疫治疗的重要武器。但是,由于正常人体内的T_(SCM)极为稀少,这成为其临床转化应用的绊脚石。近年来,越来越多的研究发现通过调控WNT、m TORC、Notch等信号通路可以促进T_(SCM)的产生。通过小分子药物调控相关信号通路可以诱导、促进多能干细胞的转化。同时,细胞因子以及APC在T_(SCM)细胞的产生上也扮演着至关重要的角色。本文主要聚焦通过小分子药物、细胞因子等调控相关信号通路获取T_(SCM)机制的研究进展。

重症肌无力患者外周血中CD4^+记忆性干细胞样T细胞水平的表达及临床意义

目的探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者外周血中CD4^+记忆性干细胞样T细胞(memory stem cell-like T cell,Tscm)的表达水平及其临床意义。方法收集2016年9月—2018年12月在徐州医科大学附属医院神经内科就诊的34例MG患者及20例健康体检者(健康对照组)外周静脉血样,并根据MG患者病情程度分为眼肌型重症肌无力(ocular myasthenia gravis,OMG)组和全身型重症肌无力(generalized myasthenia gravis,GMG)组,根据定量重症肌无力(QMG)量表评分。流式细胞术检测外周血中CD4^+Tscm表达水平、CD38^+CD138^+浆细胞频率,ELISA法检测血清炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-17的表达水平。分析OMG组和GMG组CD4^+Tscm的表达水平与QMG评分、CD38^+CD138^+浆细胞频率及IL-1β、IL-6、IL-17血清炎性因子的相关性。结果与健康对照组比较,OMG组和GMG组CD4^+Tscm表达水平、CD38^+CD138^+浆细胞频率及IL-1β、IL-6、IL-17血清炎性因子表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.01),且GMG组变化较OMG组变化更为显著(P<0.01)。OMG组和GMG组外周血CD4^+Tscm的表达水平与QMG评分、CD38^+CD138^+浆细胞频率及IL-1β、IL-6、IL-17血清炎性因子呈显著正相关。结论CD4^+Tscm在MG患者外周血中表达增加,与临床严重程度、浆细胞频率及血清炎性因子均呈正相关,提示CD4^+Tscm可能通过介导炎症因子的释放而参与MG的发病。

外周血干细胞样记忆性T细胞和调节性T细胞在卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义

目的探讨外周血干细胞样记忆性T细胞(Tscm)和调节性T细胞(Treg)在卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义。方法选取行腹腔镜切除根治术治疗的卵巢癌患者83例作为研究组,以60例同期体检的健康志愿者作为对照组,采集研究组术后24 h内、对照组体检当日的外周血,检测Tscm及Treg比率,分析卵巢癌患者外周血Tscm、Treg比率与临床病理特征的关系;术后随访3年,统计卵巢癌患者生存情况,并比较死亡组和生存组患者的Tscm、Treg比率;采用Cox回归分析影响卵巢癌患者预后的因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)评价外周血Tscm、Treg对卵巢癌患者预后的预测效能。结果研究组Tscm比率明显低于对照组、Treg比率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);不同肿瘤大小、临床分期、分化程度、有无淋巴结转移、有无腹水卵巢癌患者外周血Tscm、Treg比率比较,差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者Tscm比率低于生存组、Treg比率高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05);Cox回归分析显示临床分期、分化程度、淋巴结转移、外周血Tscm、Treg比率均为影响卵巢癌患者预后的独立影响因素(P<0.05);ROC分析显示,外周血Tscm、Treg比率单独及两者联合预测卵巢癌患者预后的灵敏度分别为82.61%、69.57%、69.57%,特异度分别为70.69%、75.86%、92.28%,AUC分别为0.756、0.743、0.892,。结论卵巢癌患者外周血Tscm比率偏低、Treg比率偏高,两者联合预测卵巢癌患者预后的效能较高。

干性记忆型T细胞及其在抗肿瘤研究中的进展

伴随CAR-T细胞疗法获得FDA批准正式上市以来,足以改变癌症治疗模式的过继免疫治疗（AIT）成为人们持续关注的热点。AIT目前大多采用分化终末期的效应T细胞,而且其疗效与过继转移T细胞的数量有关。研究表明中晚期T细胞回输后,其扩增及存活能力均不如早期T细胞,例如Klebanoff等^（[1]）观察了中心记忆型T细胞（TCM）和效应型T细胞（TEM）分别输注于接种肿瘤细胞的小鼠模型,发现在体内TCM比TEM具有更持久的存活时长和更好的抗肿瘤效果。

人干细胞样记忆性T细胞的免疫学特征及功能研究进展

干细胞样记忆性T细胞(stem-like memory T cell,Tscm)是新发现的一类记忆性T淋巴细胞亚群,具有自我更新和分化为中央型记忆性T细胞(Tcm)、效应型记忆性T细胞(Tem)以及效应T细胞(Teff)的多种分化潜能,是人体潜在的记忆性T细胞库。这些细胞能够特异性识别多种病毒和自身肿瘤抗原,与其他已知的记忆性细胞相比,Tscm细胞具有更高的增殖能力,能在体内长期维持,在抗原的刺激下能迅速产生大量细胞因子,更有效的调节抗肿瘤和抗感染免疫。人Tscm细胞的发现,为T细胞疫苗和T细胞免疫治疗提供了理论依据。本文就Tscm细胞的免疫学特征及功能进行综述。

不同CD8^+T细胞分化状态对CAR-T实体肿瘤疗效影响的研究进展

T淋巴细胞分化是一个表型和功能不断改变的渐进过程。T细胞不同分化亚群的抗病毒特征已被较为清晰地揭示,然而在抗肿瘤过程中,这些T细胞亚群的作用和功能研究远不够深入,人们对哪些T细胞亚群能在体内有效地杀伤实体肿瘤知之甚少。2017年美国FDA准入了两款抗CD19嵌合型抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor modified T cells,CAR-T)产品上市,为难治性淋巴瘤患者带来了希望。而相较之下,CAR-T在实体肿瘤中的临床应用则相对滞后。近年来深入的T细胞分化研究显示,不同阶段的CD8^+T细胞体内外抗肿瘤效应存在较大差异,幼稚CD8^+T细胞在沿着干细胞样记忆型T细胞向终末效应型T细胞分化的系列进程中会逐渐丧失自我更新、增殖存活、再活化能力,但细胞毒作用却显著增强。这种CD8^+T细胞分化中呈现的效应功能与细胞自我更新、增殖和存活能力的负相关关系,可能是导致CAR-T在体外杀伤效能无法准确反映体内抗实体瘤疗效的重要原因。本文就CD8^+T细胞各分化阶段的特征,以体外靶向杀伤能力评估临床CD8^+CAR-T抗实体瘤疗效的局限性,以及针对这一临床问题可能的解决方案进行了综述。

环黄芪醇联合IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增的影响

目的探究环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)联合细胞因子IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增和CD8^+T细胞亚群中干细胞样中心记忆性T细胞(stem cell-like central memory T cells,TSCM)比例的影响,为基于T细胞的肿瘤细胞免疫治疗研究奠定实验基础。方法采集健康产妇脐带血,通过密度梯度离心法分离获得脐带血单个核细胞(umbilical cord blood mononuclear cells,UCBMC),利用CD3/CD28抗体偶联磁珠刺激活化后,采用不同浓度的CAG(0、0.04、0.2、1、5μmol/L)联合IL-7和IL-15连续培养,利用多色流式细胞术分别测定T细胞的增殖程度以及CD8^+T细胞中TSCM比例的变化情况。结果 0.2μmol/L CAG与IL-7和IL-15细胞因子联用组促T细胞扩增作用显著高于其他浓度CAG与细胞因子IL-7和IL-15联用组或单独使用细胞因子IL-7和IL-15组。同时,0.2μmol/L CAG联用IL-7和IL-15组还可以促进CD8^+T中CD197^+CD45RA+细胞表型的表达,即维持CD8^+T中高比例的TSCM亚群。结论 0.2μmol/L CAG联合IL-7和IL-15可以显著提高活化T细胞扩增能力,并能保持CD8^+T细胞中高比例的TSCM亚群。

HIV-1慢性感染者CD8^+Tscm异常免疫活化对T细胞耗竭的影响

目的探讨HIV-1慢性感染者CD8^+干细胞样记忆性T细胞(stem memory T cell,Tscm)免疫活化水平的变化特点及其活化对CD8^+T细胞功能耗竭的影响。方法选取24例未经治疗的HIV-1慢性期感染者和41名健康对照者,采用流式细胞术分别检测健康对照者和HIV-1感染者CD8^+Tscm的比例、CD8^+Tscm的免疫活化水平、CD8^+T细胞表面抑制性分子(CD160、PD-1、TIGIT、TIM-3和LAG-3)表达水平及CD8^+T细胞功能(分泌细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的能力);分析CD8^+Tscm的免疫活化水平与CD8^+T细胞抑制性分子表达及CD8^+T细胞功能的相关性。结果与健康对照者相比,HIV-1慢性期感染者CD8^+Tscm的比例显著下降,CD8^+Tscm免疫活化水平(CD38^+HLA-DR^+CD8^+Tscm比例)显著升高。HIV-1慢性期感染者CD8^+Tscm免疫活化水平与CD8^+T细胞分泌IL-2和TNF-α水平呈负相关。HIV-1慢性感染引起CD8^+T细胞抑制性分子(CD160、PD-1、TIGIT和LAG-3)上调,但活化的CD8^+Tscm仅与CD8^+T细胞抑制性分子TIGIT表达水平呈正相关。CD8^+T细胞抑制性分子TIGIT表达水平与CD8^+T细胞分泌IL-2和TNF-α水平呈负相关。结论 HIV-1慢性感染引起CD8^+Tscm的异常免疫活化,活化的CD8^+Tscm通过上调CD8^+T细胞抑制性分子TIGIT抑制CD8^+T细胞功能。

记忆性干细胞样T细胞的研究进展

人记忆性干细胞样T细胞（TSCM）是新发现的一个T细胞亚群.这一类群的细胞具有干细胞的特征,具有较强的多向分化潜能,TSCM细胞能够分化为中枢性记忆性T细胞（TCM）,效应性记忆性T细胞（TEM）和效应性T细胞（TEF）,在分化的同时又能够维持自我更新.虽然TSCM细胞表达初始T细胞的标记,但是在基因表达谱、功能等方面又表现出记忆性T细胞的特征等,基于目前人们对TSCM细胞的生物学特点以及其在肿瘤免疫中的作用的了解,为TSCM细胞应用于临床免疫治提供依据疗.

干细胞样记忆型T细胞在HIV-1感染中作用的研究

干细胞样记忆型T细胞(Stem memory T cells,Tscm)是最早期分化的、存活时间最长的一类记忆型T细胞。这类细胞具有自我更新及多能分化等干细胞特性,其在抗肿瘤中具有重要的作用,在HIV-1感染中的作用也开始成为研究热点。本文对Tscm细胞的特点、CD4+Tscm细胞在HIV-1病毒储藏库中的重要性及CD8+Tscm细胞抗病毒作用的最新研究进行介绍。了解并充分利用Tscm细胞的特性及其在HIV-1感染中的作用,将有助于开发以Tscm为靶点的HIV-1疫苗及免疫治疗新方法,为HIV-1的防控及功能性治愈提供新的策略。

胃癌患者外周血记忆性干细胞样T细胞的分布特征及临床意义

目的研究胃癌患者外周血记忆性干细胞样T细胞(memory stem cell T cells,TSCM)的分布特征,分析TSCM与临床病理特征的关系,探讨其临床应用价值。方法选取2018年7—12月在我院住院的胃癌患者32例为病例组,同期健康志愿者23例作为对照组。流式细胞术检测胃癌患者外周血TSCM、初始T细胞(naive T cells,TN)、记忆性T细胞(memory T cells,TM)的比例,并比较其与对照组的差异,分析TN、TSCM、TSCM/TN值、TM与临床病理特征的关系。结果病例组患者外周血TN比例、TSCM比例均明显低于健康对照组,TSCM/TN值明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。TN比例与肿瘤TNM分期、浸润深度呈负相关,与组织分化程度呈正相关;TSCM/TN值与肿瘤TNM分期、浸润深度、淋巴结转移呈正相关。结论胃癌患者外周血TN、TSCM/TN值与肿瘤分期、浸润深度等临床病理特征密切相关,可作为一种新的方式用于评价患者的免疫状态;TSCM在胃癌的过继细胞免疫治疗中可能有重要的临床应用价值,但需大规模多中心临床研究进一步评价。

二甲双胍诱导的干细胞样记忆性嵌合抗原受体-T细胞对小鼠多发性骨髓瘤移植瘤的治疗作用

目的:探讨体外培养过程中加入二甲双胍对靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)的嵌合抗原受体-T细胞(chimeric antigen receptor-T cells,CAR-T)分化及抗肿瘤能力的影响。方法:从健康人外周血单个核细胞中提取并活化T细胞,采用病毒感染法制备BCMA-BBZ CAR-T细胞。二甲双胍诱导组为CAR-T细胞扩增过程同时加入重组人白细胞介素7(recombinant human interleukin-7,rhIL-7)、rhIL-21和二甲双胍进行诱导,非二甲双胍诱导组为只使用细胞因子诱导的CAR-T细胞,空白对照组为未转导慢病毒的T细胞。采用FCM法检测CAR-T细胞中CAR的表达水平、记忆表型和凋亡情况,非放射性细胞毒性实验评价CAR-T细胞对人多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞的特异性免疫杀伤作用。用RPMI-8226细胞连续多轮刺激后,检测CAR-T细胞的记忆表型和对RPMI-8226细胞的毒性杀伤功能。构建RPMI-8226细胞小鼠移植瘤模型,输注各组CAR-T细胞后,记录小鼠的肿瘤体积、体质量、生存期,检测CAR-T输注14 d后小鼠外周血中淋巴细胞数量。结果:二甲双胍诱导后的CAR-T细胞,CD8~+T细胞中干细胞样记忆T细胞(stem-cell memory T cell,Tscm)(CD95high CD45RAhigh CCR7high)所占比例明显增多(P<0.05)。在经过连续2轮RPMI-8226细胞刺激后,CD8~+T细胞中仍保持较高的Tscm比例。与未转染慢病毒的T细胞相比,二甲双胍诱导组和非二甲双胍诱导组CAR-T细胞均能有效抑制甚至清除肿瘤(P<0.01和P<0.0001),但2组CAR-T细胞的疗效差异无统计学意义(P>0.05)。进一步研究显示,相较于非二甲双胍诱导的CAR-T细胞治疗组二甲双胍诱导的CAR-T细胞治疗组小鼠外周血中CD8^(+)T细胞数明显更多(P<0.05),小鼠生存期也具有一定的存活受益。结论:二甲双胍具有维持CAR-T细胞低分化的作用,其诱导的Tscm富集可在连续培养和接受连续抗原刺激后维持。二甲双胍诱导的CAR-T细胞能够有效抑制肿瘤生长。

干细胞样记忆性CD4+T细胞与临床疾病的研究进展

干细胞样记忆性T细胞(stem cell-like memory T cell,TSCM)是记忆T细胞的重要组成,具有干细胞样自我更新、多分化潜能和免疫重构特性。有别于中枢记忆T细胞(central memory T cell,TCM)或效应记忆T细胞(effective memory T cell,TEM)亚群,TSCM具有初始T细胞表型且分化程度较低。CD4+TSCM细胞在疾病发生发展中发挥保护性或致病性双重作用,现就记忆T细胞的形成机制和CD4+TSCM生物学特性做一综述,进而探讨其在艾滋病、肿瘤、结核和自身免疫性疾病中的作用。