miR-448对肺腺癌A549细胞的放疗增敏作用及其机制

目的探讨miR-448对肺腺癌A549细胞的放疗增敏作用,并探讨其作用机制。方法取肺腺癌A549细胞,随机分为空白对照组、放疗组、放疗+miR-448-mimics组、放疗+NC-mimics组,放疗+miR-448-mimics组、放疗+NCmimics组先分别转染miR-448-mimics和NC-mimics 24 h,然后给予10 Gy放疗照射,放疗组仅给予放疗照射,空白对照组正常培养。采用MTT法、细胞克隆实验分别检测四组细胞增殖活性和细胞存活情况,Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting法检测T-框蛋白3(TBX3)、磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)蛋白,qPCR法检测miR-448及TBX3、PTEN mRNA,双荧光素酶报告试验验证PTEN与miR-448的结合位点。结果与空白对照组比较,放疗组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,细胞凋亡增加(P均<0.05);与放疗组、放疗+NCmimics组比较,放疗+miR-448-mimics组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,细胞凋亡增加(P均<0.05)。与放疗组、放疗+NC-mimics组比较,放疗+miR-448-mimics组细胞PTEN蛋白及mRNA表达升高,TBX3 mRNA表达降低(P均<0.05)。miR-448能够与PTEN的3'UTR特异性结合。结论miR-448可增强肺腺癌A549细胞的放疗敏感性,其机制可能是通过调控TBX3和PTEN表达发挥作用。

鳖甲煎丸对HepG2裸鼠移植瘤Wnt信号通路相关分子及靶基因的影响

目的:通过研究鳖甲煎丸对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤组织中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关信号分子及靶基因表达的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝细胞癌的分子机制。方法:建立裸鼠移植瘤肝癌模型,随机分为鳖甲煎丸高、中、低剂量(2.2,1.1,0.55 g·kg-1)组,模型组,正常组,肉眼观察鳖甲煎丸对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤生长的抑制作用,免疫组化检测移植瘤组织中β-catenin和T-框蛋白3(TBX3)的表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测其移植瘤组织中p19ARF,双微基因2(MDM2),p53的表达水平。结果:鳖甲煎丸对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤生长具有明显的抑制作用,鳖甲煎丸能够抑制其移植瘤组织中β-catenin和TBX3的表达,和模型组比较,鳖甲煎丸高、中剂量组中β-catenin和TBX3表达均明显降低(P<0.05)。同时,鳖甲煎丸能够促进人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤组织p19ARF和p53表达,并抑制MDM2表达,鳖甲煎丸高、中剂量组p19ARF,p53,MDM2表达较模型组均有明显差异(P<0.05)。结论:鳖甲煎丸能通过影响Wnt/β-catenin通路,调控β-catenin和TBX3的表达,继而通过调控TBX3/p19ARF/MDM2通路激活抑癌基因p53,最终抑制肝癌细胞的增殖并诱导其出现凋亡,从而达到抗肝细胞癌的目的。