T-钙黏蛋白在冠心病中的作用研究进展

T-钙黏蛋白(T-cad)是一种新发现的脂联素受体,可以与脂联素六聚体和高分子质量多聚体结合。T-cad在体内许多组织中广泛表达,尤其是心血管系统。T-cad与冠心病密切相关,具有抑制细胞凋亡、阻止动脉粥样硬化、限制血管内膜增生、诱导血管内皮细胞增殖、促进生长因子分泌、促进肌肉再生的作用。因此,探讨T-cad在冠心病中的作用机制,或许能为冠心病的诊疗提供新的思路。

T-钙黏蛋白对黑素瘤侵袭力的影响

目的探讨T-钙黏蛋白(T-cadherin)对黑素瘤侵袭力的影响。方法体外培养黑素瘤细胞株B16F10,将pEGFP-N1空载体和构建的pEGFP-N1-T-cadherin转染B16F10细胞,采用RT-PCR和免疫组化SP法检测T-cadherin基因及蛋白水平的表达情况;应用transwell细胞侵袭实验测定转染T-cadherin后肿瘤细胞的侵袭力。结果 RT-PCR和免疫组化SP法检测结果表明,细胞可转录和表达T-cadherin;转染T-cadherin组穿过transwell小室膜的细胞数目(2.20±0.49)明显少于未转染组(16.80±1.39)和转染pEGFP-N1空载体组(15.00±1.26),差异有统计学意义(P<0.05),未转染组与转染pEGPF-N1空载体组差异无统计学意义(P>0.05);MTT法结果显示,转染T-cadherin组穿过小室膜细胞的吸光度(OD)值(0.124±0.003)明显低于未转染组(0.263±0.006)和转染pEGFP-N1空载体组(0.247±0.012),差异有统计学意义(P<0.05),未转染组与转染pEGFP-N1空载体组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 T-cadherin对黑素瘤细胞的体外侵袭能力有抑制作用。

T-钙黏蛋白基因对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖以及凋亡的影响

目的探讨T-钙黏蛋白(T-cadherin)因子水平对人鼻咽癌(NPC)细胞株CNE-2增殖及凋亡的影响。方法采用RT PCR检测Tcadherin基因含量,采用Western印迹方法检测T-cadherin蛋白表达水平,并构建T-cadherin过表达载体用于转染NPC细胞株,使CNE-2细胞株高表达T-cadherin,运用RT PCR和Western印迹方法进行验证。最后采用MTT法及流式细胞技术检测T-cadherin因子水平与CNE-2细胞增殖及凋亡是否具有相关性。结果 RT PCR和Western印迹结果显示NPC组织中T-cadherin基因含量和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);转染T-cadherin基因过表达质粒的CNE-2细胞增殖水平显著降低(P<0.05);转染T-cadherin基因过表达质粒的CNE-2细胞凋亡水平显著升高(P<0.05);对照组和正常组以上指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 T-cadherin基因具有抑制NPC细胞增殖和促进NPC细胞凋亡的作用,在NPC靶向治疗上有一定应用前景。

T-钙黏蛋白联合顺铂对黑色素瘤顺铂耐药株的作用研究

目的探讨T-钙黏蛋白联合顺铂对黑色素瘤顺铂耐药株的作用。方法采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法诱导建立小鼠黑色素瘤B16F10顺铂耐药细胞株(CDDP-RB16F10)。 MTT法检测CDDP-RB16F10的增殖能力。将T-钙黏蛋白转染肿瘤细胞。分别采用反转录聚合酶链式反应(R T-PCR)和免疫组化SP法检测转染后T-钙黏蛋白mRNA和蛋白的表达。实验将CDDP-RB16F10细胞分为空白对照组、pEGFP-N1组、pEGFP-N1-T-cadherin组、顺铂组、pEGFP-N1联合顺铂组、pEGFP-N1-T-cadherin联合顺铂组。采用Wound-healing划痕实验和transwell侵袭实验检测T-钙黏蛋白联合顺铂对CDDP-RB16F10细胞迁移和侵袭力的影响。结果成功建立黑色素瘤顺铂耐药细胞株。MTT法结果显示,CDDP-RB16F10细胞增殖能力与B16F10细胞相比差异无统计学意义(P>0.05)。 RT-PCR和免疫组化SP法检测表明,转染后细胞可稳定转录和表达T-钙黏蛋白。pEGFP-N1-T-cadherin联合顺铂组细胞迁移率和穿膜细胞数低于pEGFP-N1-T-cadherin组(P<0 .05),而 pEGFP-N1-T-cadherin组低于空白对照组、pEGFP-N1组、顺铂组和pEGFP-N1联合顺铂组(P<0 .05)。析因分析显示,T-钙黏蛋白与顺铂联合对CDDP-R B16F10细胞迁移率及侵袭力的抑制有交互作用(P<0 .05)。结论 T-钙黏蛋白可恢复顺铂对黑色素瘤顺铂耐药细胞株迁移及侵袭力的抑制作用。

T-钙黏蛋白对B16F10黑素瘤细胞周期调节的研究

目的探讨T-钙黏蛋白对B16F10黑素瘤细胞周期的影响。方法应用脂质体LipofectamineTM2000将构建的pEGFP-N1-T-钙黏蛋白以及pEGFP-N1空载体转染至B16F10细胞,OPTI-MEM培养基体外培养6 h后RPMI-1640继续培养24 h,应用碘化丙啶标记,流式细胞仪检测T-钙黏蛋白对B16F10黑素瘤细胞周期的影响。结果转染T-钙黏蛋白组G0/G1期和G2/M期细胞比率分别为(60.917±1.897)%、(8.513±0.651)%,明显高于未转染组的(53.563±1.856)%、(2.627±0.434)%和pEGFP-N1空载体组的(53.880±2.164)%、(2.770±0.466)%,差异有显著性(P<0.05);转染T-钙黏蛋白组S期细胞比率为(30.570±1.368)%,低于未转染组的(43.810±2.003)%及pEGFP-N1空载体组的(43.350±2.629)%,差异有统计学意义(P<0.05)。未转染组与转染pEGFP-N1空载体组各期差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 T-钙黏蛋白使B16F10细胞G0/G1期和G2/M期比率增高,S期比率降低。

稳定表达T-钙黏蛋白的黑色素瘤顺铂耐药细胞株的建立及其生物学特性

目的:建立稳定表达T-钙黏蛋白(T-cadherin)基因的顺铂(cisplatin,CDDP)耐药黑色素瘤B16F10细胞株(CDDP-R B16F10),并研究其生物学特性。方法:采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法诱导CDDP-R B16F10细胞株。采用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测CDDP-R B16F10细胞株的增殖能力,并观察CDDP-R B16F10细胞株对CDDP和紫杉醇的敏感性。将T-cadherin互补cDNA插入增强绿色荧光蛋白质粒(enhanced green fluorescent protein plasmid,pEGFP)-N1载体中,获得编码人T-cadherin的质粒载体pEGFP-N1-T-cadherin,再将pEGFP-N1-T-cadherin转染CDDP-R B16F10细胞。分别采用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白质印迹法和免疫组织化学SP法检测转染后耐药细胞株T-cadherin的mRNA及蛋白质表达情况。采用MTT法检测T-cadherin联合CDDP对CDDP-R B16F10细胞株增殖的影响,并观察转染T-cadherin后CDDP-R B16F10细胞株对紫杉醇的敏感性。结果:成功建立耐CDDP的CDDP-R B16F10细胞株。该细胞株同B16F10细胞株比较,其增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。CDDP-R B16F10细胞株和B16F10细胞株对CDDP的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为268.706和19.748 mg/L,耐药指数为13.61。CDDP-R B16F10细胞株和B16F10细胞株对紫杉醇的IC50分别为11.415和7.799 mg/L,耐药指数为1.46。重组真核表达载体pEGFPN1-T-cadherin构建成功。RT-PCR,蛋白质印迹法和免疫组织化学SP法检测结果显示:CDDP-R B16F10可转录和表达T-cadherin。MTT法显示T-cadherin联合CDDP可抑制CDDP-R B16F10细胞株的增殖(P<0.05),析因分析显示T-cadherin与CDDP联合对CDDP-R B16F10细胞株增殖的抑制有交互效应(P<0.05)。T-cadherin联合紫杉醇可抑制CDDP-R B16F10细胞株的增殖(P<0.05),析因分析显示T-cadherin与紫杉醇联合对CDDP-R B16F10细胞株增殖的抑制无交互效应(P>0.05)。结论:成功建立了稳定表达T-cadherin的CDDP-R B16F10细胞株。T-cadherin可逆转CDDP-R B16F10细胞株对CDDP的耐药性,并能提高CDDP-R B16F10细胞株对紫杉醇的敏感性。

T-钙黏蛋白联合顺铂对顺铂耐药的黑色素瘤细胞的影响

目的:探讨T-钙黏蛋白(T-cadherin)联合顺铂对顺铂耐药的黑色素瘤细胞株的影响。方法:采用大剂量冲击、逐步增加剂量相结合的方法诱导B16F10顺铂耐药细胞株(CDDP-R B16F10)。将T-钙黏蛋白转染CDDP-R B16F10,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法检测CDDP-R B16F10细胞T-钙黏蛋白的表达;噻唑蓝(MTT)法和流式细胞术检测T-钙黏蛋白联合顺铂对CDDP-R B16F10细胞增殖和凋亡的影响。结果:免疫组化SP法结果显示,T-钙黏蛋白呈阳性表达,证实T-钙黏蛋白已成功转染于肿瘤细胞。pEGFP-N1-T-cadherin联合顺铂组CDDP-R B16F10细胞增殖抑制率61.5%,凋亡率(19.43±2.52)%,均显著高于其他组(均P<0.05)。结论:T-钙黏蛋白联合顺铂可抑制CDDP-R B16F10增殖,促进CDDP-R B16F10凋亡;T-钙黏蛋白可逆转顺铂耐药的黑色素瘤细胞株对顺铂的耐药性。

T-钙黏蛋白对B16F10黑素瘤细胞增殖凋亡的影响

目的探讨T-钙黏蛋白(T-cadherin)对B16F10黑素瘤细胞增殖凋亡的影响。方法体外培养转染T-cadherin的黑素瘤细胞株B16F10(转染T-cadherin组),以及转染pEGFP-N1空载体(转染空载体组)和未转染的黑素瘤细胞株B16F10(未转染组),采用MTT法和流式细胞技术检测黑素瘤B16F10细胞株的增殖凋亡情况。结果 MTT结果显示,转染T-cadherin组细胞吸光度(OD)值(0.383±0.116)明显低于未转染组(1.142±0.053)和转染空载体组(1.250±0.055),差异有统计学意义(P<0.05),未转染组与转染空载体组间差异无统计学意义(P>0.05);流式细胞仪检测结果显示,转染T-cadherin组细胞的凋亡率[(28.157±3.692)%]远远高于未转染组[(2.893±0.454)%]和转染空载体组[(2.350±0.578)%],差异有统计学意义(P<0.05);未转染组与转染空载体组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 T-cadherin对B16F10黑素瘤细胞的增殖有抑制作用,对其凋亡有促进作用。

脂联素对高糖环境下人心肌细胞增生及caspase-3、T-钙黏蛋白表达的影响

目的研究脂联素(ADPN)对高糖环境下人心肌细胞(HCM)的增生及caspase-3、钙黏蛋白(T-cadherin)表达的影响。方法①分为3组:对照组、高糖组、高糖+脂联素组;②分别干预24h、48h、72h后用MTT法测定细胞增生,ELISA法测定上清液中caspase-3的含量,荧光定量PCR法测定T-钙黏蛋白的表达。结果高糖的持续作用可以抑制细胞增生,增加caspase-3的表达;加入脂联素后促进细胞增生,同时减少caspase-3的表达。T-钙黏蛋白在高糖组表达较对照组减少,脂联素组表达较高糖组增加,且呈时间依赖性。结论脂联素可以纠正高糖诱导的人心肌细胞凋亡,通过上调T-钙黏蛋白的表达发挥对心肌细胞的保护作用。

脂联素及T-钙黏蛋白与大鼠糖尿病心肌病的关系

观察糖尿病(DM)大鼠心肌细胞形态学变化,测定血清脂联素(APN)及受体T-钙黏蛋白(T-cad)在心肌的表达水平。DM大鼠心肌细胞超微结构出现符合糖尿病心肌病改变,血清APN及T-cad的表达随着病变发展而升高。血清APN及T-cad的表达均随时间延长增多,从而发挥其保护作用。

脂联素、T-钙黏蛋白与糖尿病肾病的关系

目的探讨脂联素(adiponectin,ADPN)及其受体T-钙黏蛋白(T-cadherin,T-cad)在糖尿病大鼠肾脏病变发生、发展中的变化及作用。方法Wistar大鼠64只,随机分成对照组和实验组,每组32只。实验组腹腔注射链脲佐菌素50mg/kg,对照组注射等体积枸橼酸缓冲液。于注射STZ或枸橼酸缓冲液后1、4、8和12周各取8只大鼠,收集24h尿,心脏取血,分别测定24h尿白蛋白排泄量、血糖、血清脂联素水平。在光镜和透射电镜下观察肾脏病理结构的改变,免疫组化法检测T-cad的表达。结果糖尿病大鼠模型建立成功,与对照组比较,实验组大鼠肾脏体积明显增大(P<0.01),血清ADPN水平及肾脏T-cad的表达在4、8和12周显著升高(P<0.01)。结论ADPN及T-cad在糖尿病肾脏病变中有一定的保护性作用。

辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2、载脂蛋白A1、T-钙黏蛋白在早发型重度子痫前期期待治疗中的动态变化及其对终止妊娠的指导作用

目的探讨辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2(Th1/Th2)、载脂蛋白A1(ApoA1)、T-钙黏蛋白(T-cadherin)在早发型重度子痫前期(S-PE)期待治疗中的动态变化及其对终止妊娠的指导作用。方法选取2018年3月至2021年3月成都市双流区第一人民医院收治的88例早发型S-PE患者作为研究对象,根据期待治疗是否有效分为有效组(n=47)和无效组(n=41)。比较两组基线资料及治疗前后Th1/Th2、ApoA1、T-cadherin水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析治疗前Th1/Th2、ApoA1、T-cadherin水平预测治疗无效的价值。结果无效组治疗前后的Th1/Th2水平高于有效组,治疗前后的ApoA1、T-cadherin水平低于有效组(P<0.05);Th1/Th2、ApoA1、T-cadherin水平预测治疗无效的AUC分别为0.679、0.756、0.840,各指标联合预测为0.915。结论早发型S-PE患者治疗前Th1/Th2、ApoA1、T-cadherin水平与期待治疗效果有关,联合检测可作为预测疗效的有效方法,并可对终止妊娠起到指导作用。

早发型子痫前期孕妇血清T-钙黏蛋白水平与子宫动脉血流参数相关性分析

目的研究早发型子痫前期(EOSP)孕妇血清T-钙黏蛋白(T-cadherin)水平与子宫动脉血流参数相关性。方法选取2018年1月~2019年1月于陆军第八十一集团军医院分娩的EOSP患者50例作为观察组,同期正常分娩的孕妇50例为对照组。比较两组孕妇孕14周血清T-cadherin水平,20周子宫动脉血流参数水平,围生儿不良结局发生情况,并分析各指标间的相关性。结果观察组孕妇血清T-cadherin水平低于对照组,而子宫动脉囊括搏动指数(PI)、阻力指数(RI)以及收缩期和舒张期血流流速比值(S/D)水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析显示,EOSP孕妇血清T-cadherin水平与子宫动脉PI、RI、S/D水平均呈负相关关系(P<0.05)。观察组胎儿生长受限、胎儿窘迫以及围产儿死亡发生率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析显示,EOSP孕妇血清T-cadherin水平与胎儿生长受限、胎儿窘迫以及围产儿死亡发生率均呈负相关关系(P<0.05)。结论EOSP孕妇血清T-cadherin水平存在明显低表达,且与子宫动脉血流参数存在密切相关,临床工作中可能通过检测血清T-cadherin水平,实现对早发性子痫前期的临床预测以及预后评估。

T-钙黏蛋白与恶性胶质瘤发生、发展及放疗敏感性的关系

目的探讨T-钙黏蛋白与恶性胶质瘤发生、发展及放疗敏感性的关系。方法(1)取37例恶性胶质瘤患者的癌组织和癌旁组织,以及正常胶质细胞株HEB和胶质瘤细胞系U251、A172,检测其T-钙黏蛋白mRNA和蛋白的表达情况。比较不同T-钙黏蛋白表达情况的患者的中位生存期。(2)将U251细胞、A172细胞分别分为空白对照组、阴性对照组、T-钙黏蛋白过表达组,空白对照组细胞不进行转染,将质粒pcDNA3.1、pcDNA3.1-T-cadherin分别转染至阴性对照组、T-钙黏蛋白过表达组细胞。检测转染后各组U251、A172细胞的增殖、凋亡、迁移能力,T-钙黏蛋白、波形蛋白、E-钙黏蛋白的表达水平。对转染后各组U251、A172细胞进行放射干预后,检测细胞存活率和相对克隆数。将各组转染后的U251细胞皮下注射至裸鼠右侧腋窝处,观察注射部位的成瘤情况。结果(1)恶性胶质瘤组织中T-钙黏蛋白的mRNA表达水平和阳性表达率均低于癌旁组织;T-钙黏蛋白表达阴性患者中位生存期短于T-钙黏蛋白表达阳性患者(均P<0.05)。与正常胶质细胞株HEB相比,胶质瘤细胞系U251和A172中T-钙黏蛋白的mRNA和蛋白表达水平均下调(均P<0.05)。(2)与空白对照组、阴性对照组比较,T-钙黏蛋白过表达组U251与A172细胞的EdU阳性率均降低,细胞凋亡率升高,迁移细胞数减少,波形蛋白表达水平下调,而T-钙黏蛋白和E-钙黏蛋白表达水平均上调,4 Gy、6 Gy的γ射线照射后细胞存活率降低,6 Gy的γ射线照射后细胞相对克隆数减少(均P<0.05)。与空白对照组、阴性对照组比较,T-钙黏蛋白过表达组裸鼠的肿瘤体积缩小(均P<0.05)。结论T-钙黏蛋白在恶性胶质瘤中呈现异常低表达状态。过表达T-钙黏蛋白能够明显抑制恶性胶质瘤的发展,并提高其放疗敏感性,有利于改善患者预后。

脂联素受体T-钙黏蛋白在急性心肌梗死中的表达及与急性炎症反应关联性研究

目的研究脂联素受体T-钙黏蛋白在ISO诱导大鼠心肌梗死模型中的表达及与急性炎症反应的关联性。方法将wistar雄性大鼠24只随机(随机数字法)分为心肌梗死模型组和对照组,每组12只,描记正常心电图后,心肌梗死模型组大鼠皮下注射异丙肾上腺素(ISO)150 mg·kg-1.d-1,连续2 d。对照组同法皮下注射等量的生理盐水,连续2 d。在第2次皮下注射异丙肾上腺素24 h后描记心电图。待模型成功后处死大鼠,心脏组织HE染色,免疫组织化学检测心肌中T-钙黏蛋白(T-cadherin)的蛋白表达,ELISA检测血清脂联素(Adiponectin)、T-钙黏蛋白(T-cadherin)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor Alpha,TNF-α)蛋白的含量。结果免疫组织化学结果显示,心肌梗死组心肌组织中T-钙黏蛋白的蛋白表达水平减少[(0.1567±0.0061)vs.(0.1228±0.0027)],差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法结果显示,心肌梗死组血清脂联素(ng/mL)含量明显下降[(7.016±0.7236)vs.(1.883±0.2240)],两组比较差异有统计学意义(P<0.01);心肌梗死组血清T-钙黏蛋白(ng/mL)[(6.075±0.8149)vs.(14.61±1.583)]、血清肿瘤坏死因子α(pg/mL)[(1860±95.96)vs.(3141±92.5)]、血清超敏C反应蛋白(ng/mL)[(20.93±1.079)vs.(30.49±1.742)]含量明显升高,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。血清T-钙黏蛋白与血清脂联素呈负相关,血清T-钙黏蛋白与炎症因子(TNF-α、hs-CRP)呈正相关,血清脂联素与炎症因子(TNF-α、hs-CRP)呈负相关。结论T-钙黏蛋白参与急性心肌梗死炎症反应,可能成为急性心肌损伤的重要分子标志物,对疾病预警起重要作用。

T-钙黏蛋白基因甲基化在肺癌发生中的作用

目的探讨T-钙黏蛋白（CDH13）基因甲基化在肺癌发生中的作用及其影响因素。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测CDH13基因在肺癌组织中异常甲基化的水平，探讨CDH13基因在56例肺癌组织、56例癌旁组织标本和20例非肺癌良性肺切除组织标本中的表达及临床意义，研究CDH13基因异常甲基化与肺癌的相关性。结果在肺癌组织中CDH13基因甲基化率明显高于癌旁组织和非肺癌良性肺切除组织，甲基化率分别为33．9％、8．9％、5．0％，差异有统计学意义（P〈0．05）。CDH13基因异常甲基化与CDH13的表达水平呈负相关（r=-0．490，P〈0．05）。CDH13基因启动子区5’端CpG岛甲基化导致了CDH13的表达下调。结论CDH13基因甲基化的发生具有肿瘤特异性，并且与肺癌患者的病理生理改变密切相关。

脂联素上调心肌细胞缺氧/复氧损伤后T-钙黏蛋白的表达

本文旨在研究脂联素(adiponectin, APN)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)损伤的心肌细胞T-钙黏蛋白(T-cadherin,T-cad)表达的影响。采用酶消化法原代培养Sprague-Dawley (SD)乳鼠心肌细胞,随机分为:正常对照组、H/R组、H/R+脂联素(3, 10, 20, 30 μg/mL)组。H/R组置缺氧环境(高浓度N2饱和过的缺氧液)中培养3 h后, 再置于复氧环境(纯氧饱和过的复氧液)中培养1 h。APN处理组先用不同浓度APN预处理24 h后中随后处理同H/R组。用化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)的释放,通过流式细胞术和脱氧核糖核苷酸缺口末端标记(TUNEL)法来检测心肌细胞的凋亡,用RT-PCR和Western blotting方法检测T-cad的表达。结果显示,与正常对照组相比,H/R组心肌细胞凋亡率显著升高,心肌细胞LDH的释放量明显增加,T-cadmRNA和蛋白水平表达均明显下降;而和H/R组相比,APN预处理可剂量依赖性地降低心肌细胞凋亡率,减少LDH释放量,并上调T-cad mRNA和蛋白水平。以上结果提示,脂联素可能通过上调T-cad的表达逆转H/R所致的心肌细胞损伤及凋亡,对心肌细胞有保护作用。

T-钙黏蛋白对小鼠皮下氮烯咪胺耐药黑素瘤B16F10细胞株的影响

目的观察T-钙黏蛋白(cadherin)对小鼠皮下氮烯咪胺(dacarbazine,DTIC)耐药黑素瘤B16F10细胞株的影响。方法通过体外分步诱导法诱导B16F10氮烯咪胺耐药细胞株(DTIC-R B16F10)。采用CCK-8法检测DTIC-R B16F10细胞的增殖情况。将T-cadherin基因转染至DTIC-R B16F10细胞。免疫组织化学检测转染后T-cadherin的表达情况。培养DTIC-R B16F10细胞,分为6组:对照组、pEGFP-N1组、T-cadherin组、DTIC组、pEGFP-N1联合DTIC组和T-cadherin联合DTIC组。通过CCK-8法和Transwell小室实验检测T-cadherin与氮烯咪胺联合对DTIC-R B16F10细胞活性和迁移的影响。建立荷瘤小鼠模型,观察T-cadherin对小鼠皮下注射DTIC-R B16F10细胞后肿瘤生长的影响。采用析因分析法评价T-cadherin联合氮烯咪胺对细胞活性、迁移和小鼠皮下瘤生长的影响。结果DTIC-R B16F10组、B16F10组与DTIC-R B16F10+DTIC组A值差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学检测表明细胞表达T-cadherin。T-cadherin联合DTIC组细胞活性、迁移细胞数及肿瘤重量均显著低于其他组(P<0.05)。析因分析显示,T-cadherin联合氮烯咪胺对DTIC-R B16F10的细胞活性、迁移和小鼠皮下瘤生长的抑制有协同作用。结论T-cadherin可抑制黑素瘤小鼠皮下瘤的生长,增加黑素瘤对氮烯咪胺的敏感性。

T-钙黏蛋白在喉鳞癌中的表达及意义

目的检测喉鳞癌组织中T-钙黏蛋白(T-cadherin)的表达情况,探讨T-cadherin与喉鳞癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化检测55例喉鳞癌组织和55例癌旁组织中T-cadherin的表达,并结合临床病理特征进行分析。结果 T-cadherin在癌旁组织阳性表达率为87.27%,而在喉鳞癌组织中的阳性表达率仅为30.91%,经χ2检验,差异有统计学意义(P<0.01)。T-cadherin在喉鳞癌组织中的表达情况与肿瘤分化和颈淋巴结转移、TNM分期呈负相关。结论在喉鳞癌组织中存在T-cadherin的表达缺失或低水平表达,提示T-cadherin在喉鳞癌的发生、发展和转移中起着重要的作用。

T-钙黏蛋白可能通过抑制蛋白激酶B/雷帕霉素靶体蛋白通路抑制膀胱癌细胞的增殖、周期和转移

目的:观察T-钙黏蛋白(T-cadherin)的表达对膀胱癌细胞生物学功能的影响,探讨其分子机制。方法:构建T-cadherin过表达质粒和空载质粒,转染至膀胱癌T24细胞,使用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测T-cadherin的表达,流式细胞仪检测细胞周期,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞的增殖能力,Transwell法检测细胞的转移能力。Western blot法检测T-cadherin的表达与蛋白激酶B(PKB,also called Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路关键蛋白的表达。采用方差分析(ANOVA)进行组间数据分析。结果:T-cadherin过表达显著抑制T24细胞的增殖和转移能力,增加细胞在G 0~G 1期的比例。96 h时,T-cad-OE细胞株的吸光度(A)值(2.45±0.13)低于T-cad-Con细胞株(5.49±0.33),差异有统计学意义(χ^(2)=13.893,P<0.01)。24h时,T-cad-OE细胞株G 0~G 1期比例[(70.52±0.59)%]高于T-cad-Con细胞株[(61.22±0.73)%],差异有统计学意义(χ^(2)=129.735,P<0.01)。T-cad-OE细胞株转移细胞数[(38.00±1.63)个]低于T-cad-Con细胞株[(51.30±2.62)个],差异有统计学意义(χ^(2)=266.667,P<0.01)。并且T-cadherin过表达还可以降低Akt/mTOR通路中磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化雷帕霉素靶体蛋白(p-mTOR)的表达水平。T-cad-OE细胞株p-Akt和p-mTOR蛋白相对灰度值(0.27±0.05和0.55±0.08)低于T-cad-Con细胞株(1.01±0.16和1.04±0.08),差异有统计学意义(χ^(2)=0.829、0.355,P<0.01)。结论:T-cadherin的过表达可能通过Akt/mTOR通路抑制了膀胱癌T24细胞的增殖、周期和转移。