T-AK细胞的细胞毒活性研究

目的：探讨抗ＣＤ３单抗（ＣＤ３ＭｃＡｂ）和ｒＩＬ２共同激活诱生的ＴＡＫ（Ｔａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒ）细胞的细胞毒活性本质。方法：采用ＭＴＴ法分别检测ＴＡＫ细胞杀伤白血病细胞的活性及其构成。结果：ＴＡＫ细胞杀伤白血病细胞的活性主要由４部分组成：ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的ＣＤ３ＡＫ活性约占５０％，ｒＩＬ２诱生的ＬＡＫ细胞活性约为３０％，ＮＫ活性约占１０％，可溶性抑制性因子的抑制活性约为１０％；细胞表型分析ＴＡＫ细胞主要表达活化Ｔ淋巴细胞和ＮＫ细胞的表面标志。结论：ＴＡＫ细胞为异质性细胞群体。

T-AK细胞的形态学和免疫表型研究

ＴＡＫ（Ｔａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒ，ＴＡＫ）细胞是由抗ＣＤ３单克隆抗体和ｒＩＬ２共同激活诱生的具有高度溶细胞活性的肿瘤杀伤效应细胞。为探讨ＴＡＫ细胞的免疫生物学特征，研究了ＴＡＫ细胞的形态学和细胞表型。结果表明，ＴＡＫ细胞体积较大，核／浆比例小，胞浆内含有大量颗粒，具有活化淋巴母细胞的形态学特征；９０％以上的ＴＡＫ细胞表达Ｔ淋巴细胞表型（ＣＤ３＋，ＣＤ８＋），２０％～５０％细胞为ＮＫ细胞表型（ＣＤ１６＋，ＣＤ５６＋），并表达ＩＬ２受体、ＣＤ３８和ＭＨＣⅡ类抗原等激活淋巴细胞的表面标志。攻击Ｋ５６２细胞的ＴＡＫ细胞主要为富含颗粒、ＣＤ８＋和ＣＤ５６＋细胞。证明ＴＡＫ细胞是以激活Ｔ淋巴细胞和ＮＫ细胞为主的具有细胞毒活性的异质性细胞群体。

T-AK细胞上清液抑瘤活性的研究

本文应用MTT比色法检测了rIL—2和抗CD_3单抗共同诱导激活的T—AK细胞培养上清液对K_(562)细胞和BEL—7402细胞增殖的抑制效应,并观察了T—AK上清液抑瘤活性与T—AK细胞杀伤活性的相关性。结果表明:①T—AK细胞能够自发地分泌一些抑制K_(562)细胞和BEL—7402细胞增殖的抑制因子,但活性很低;②T—AK细胞在杀伤K_(562)细胞过程中释放的抑制肿瘤细胞生长的物质,抑瘤活性较高,其作用为非特异性的;③T—AK细胞杀伤活性与其上清液的抑瘤活性显著相关。提示T—AK细胞释放的抑制性细胞因子产生的间接杀伤作用是其杀伤活性的构成成分之一。

MTT法和LDH法检测T-AK细胞活性的研究

采用MTT比色分析法和LDH释放法检测了CD_3单克隆抗体和白细胞介素—2共同激活的T—AK细胞的杀伤活性,并对检测方法进行了改良。结果表明:T—AK细胞对K_(562)细胞有很高的杀伤活性;MTT法和LDH法经本研究改良后应用于细胞毒活性的检测,具有简便实用、方法稳定和结果可靠的特点;经对比观察,MTT法和LDH法的检测结果具有良好的相关性,但MTT法较LDH法敏感。

T-AK细胞在体外和裸鼠体内抗人膀胱癌细胞株(Fen)的实验研究

用可溶性肿瘤抗原和抗ＣＤ３ 单克隆抗体共同刺激外周单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生ＣＤ＋８ Ｔ 细胞为主的杀瘤细胞，称为Ｔ－ ＡＫ 细胞。与ＬＡＫ细胞、ＣＤ３ － ＡＫ 细胞比较，Ｔ－ ＡＫ细胞扩增快、低依赖ＩＬ－ ２，培养１４ 天细胞数扩增２４ 倍，比ＣＤ３ － ＡＫ细胞高８ 倍，比ＬＡＫ细胞高１５ 倍，并能维持生长２１ 天。Ｔ－ ＡＫ细胞中含ＣＤ＋３ ８９％ ，ＣＤ＋４ ２１ ％ ，ＣＤ＋８ ９５％ ，ＣＤ＋１６ ２２％ ，ＣＤ＋２５ ４１％ ，ＣＤ＋５６ ４７ ％ ，ＣＤ＋３８ ９０ ％ ，它们是ＣＤ＋８ Ｔ细胞为主的异质性细胞群。体外实验结果表明，Ｔ－ ＡＫ细胞对Ｆｅｎ 的明显的杀伤作用，与ＬＡＫ、ＣＤ３ － ＡＫ细胞比较，差异有高度显著性（ Ｐ＜ ０．００１） 。裸鼠体内试验结果显示，对照组及ＬＡＫ组全部、ＣＤ３ － ＡＫ 组１ 只裸鼠长出瘤结节，而Ｔ－

过继T-AK细胞免疫治疗晚期肾细胞癌

我们从1993年5月至1993年12月用肾癌细胞可溶性抗原和抗CD_3单克隆抗体共同刺激人外周血淋巴细胞体外培养,产生激活的T杀伤细胞,称之为TAK细胞,配合手术治疗晚期肾细胞癌患者8例,共输注TAK细胞十三疗程,有3例术后残存转移瘤缩小超过50％以上,疗效持续超过1月,近期有效率37.5％。治疗前、后所测几项免疫功能指标均有明显增高。本项治疗对肾癌的脑、肺转移及腔静脉瘤栓有明显疗效,对肝、肾功能无明显影响。所见副作用为轻度发烧、皮疹、头晕、浮肿,对症处理可缓解。此治疗方法1L-2用量少,杀伤性T细胞增殖快,副作用轻,见效快,疗效好,有进一步研究和临床实用价值。

T-AK细胞和IL-2脂质体联合硒酸酯多糖抗白血病效应的研究

目的研究抗ＣＤ３单克隆抗体与ＩＬ－２共同诱导的Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体（Ｌ－ＩＬ－２）联合硒酸酯多糖（ＫＳＣ）对Ｌ１２１０小鼠白血病的治疗作用。方法用ＤＢＡ／２小鼠建立Ｌ１２１０白血病模型，正常小鼠脾细胞诱生制备Ｔ－ＡＫ细胞，按设计方案转输Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体，ＫＳＣ灌胃，检测ＮＫ细胞活性、脾淋巴细胞增殖活性和ＩＬ－２诱生水平，观察荷瘤小鼠生存期。结果Ｌ１２１０白血病小鼠的免疫功能急剧降低，生存期为１６．４３±１．９２天；转输Ｔ－ＡＫ细胞（５×１０６）和Ｌ－ＩＬ－２（１０４Ｕ／ｋｇ）能部分逆转白血病小鼠低下的细胞免疫功能，生存期延长（２４．７８±３．９４天），并有１４．３％小鼠长期存活；ＫＳＣ（４０ｍｇ／ｋｇ）对Ｔ－ＡＫ／Ｌ－ＩＬ－２的抗白血病作用有明显的增强效应，荷瘤小鼠细胞免疫功能进一步增强，生命延长率、长期存活率分别提高３６％和９９．９％。结论硒酸酯多糖具有生物反应调节剂（ＢＲＭ）样作用；以应用Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体为主体。

可溶性肿瘤抗原和CD3单克隆抗体共同诱导的杀瘤细胞——T-AK细胞

用可溶性肿瘤抗原和CD3单克隆抗体共同刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生CD8^+T细胞为主的杀瘤细胞,称其为T-AK细胞。与LAK细胞和CD3-AK细胞比较,T-AK细胞扩增快、低依赖IL-2,培养14天细胞数扩增24倍,比CD3-AK细胞高8倍,比LAK细胞高15倍,并能持续生长21天。T-AK细胞中含CD3^+86％、CD4^+20％、CD8^+95％、CD16^+40％、CD25^+53％,它们是CD8^+T细胞为主的异质性细胞群。T-AK细胞对刺激它的STA来源的靶细胞高亲和性杀伤,杀伤率>90％,对NK敏感和不敏感细胞也有杀伤,表现非MHC限制杀伤。

植物多糖增强肿瘤杀伤效应细胞的增殖活性和细胞毒活性

目的 观察红景天、红芪、地黄、枸杞子、沙参和芦荟的多糖成分对 T- AK细胞增殖活性和杀瘤活性的增强作用。方法 用抗 CD3单抗 ( CD3Mc Ab)和 r IL - 2激活诱生 T- AK细胞 ,观察 6种植物多糖在诱生、扩增和杀瘤过程中对 T- AK细胞增殖活性、IL- 2 R表达水平以及杀伤 Raji细胞和 L1 2 1 0 细胞活性的影响。结果 6种植物多糖( 1～ 10 0 μg/ m L)单独对 T- AK细胞的增殖无明显作用 ,但在 r IL- 2和 CD3Mc Ab存在下 ,可不同程度地增强 T-AK细胞的增殖能力和杀瘤活性 ,并增加 T- AK细胞 IL - 2 R的表达。结论 红景天、红芪、地黄、枸杞子、沙参和芦荟的多糖成分增强 T- AK细胞的增殖和杀伤活性 ,其作用效应与其促进 IL- 2

中西医结合生物疗法治疗小鼠白血病的研究

目的:探讨抗 CD_3单克隆抗体与白细胞介素-2(IL-2)共同诱导的 T-AK 细胞和IL-2脂质体(L-IL-2、T-AK/L-IL-2),对小鼠 L_(1210)白血病的治疗作用,以及红景天多糖(RKP)和以红景天为主药的复方中药合剂对 T-AK/L-IL-2疗法的促进效应。方法:用 DBA/2小鼠建立L_(1210)白血病模型;正常小鼠脾细胞诱生制备 T-AK 细胞。白血病小鼠转输 T-AK 细胞和 IL-2脂质体,RKP 或复方中药灌胃,检测 NK 细胞活性,脾淋巴细胞增殖活性和 IL-2诱生水平,观察荷瘤小鼠生存期。结果:L_(1210)白血病小鼠过继输入 T-AK 细胞和 L-IL-2能部分逆转白血病小鼠低下的免疫功能,生存期(天)由16.43±1.92延长至24.78±3.94,14.3％荷瘤鼠长期存活(>60天);RKR)和复方中药合剂与 T-AK/L-IL-2联合应用,白血病小鼠免疫功能显著增强,较单纯应用T-AK/L-IL-2治疗,生存期分别延长62％和89％,长期存活率分别为29％和57％结论:应用 T-AK 细胞和Ⅱ-2脂质体为主体,中药类活性增强剂为辅佐的中西医结合生物治疗方案,是较理想的白血病生物治疗方法。

固相CD_3MCAb+IL_2诱导T杀伤细胞的实验研究

用人外周血单个核细胞(PBMC)与固相CD_3单克隆抗体(CD_3 McAb)和不同浓度的IL_2短期体外共同制备T杀伤细胞(T—activated killer,T-AK)。另以 PBMC与IL_2制备LAK细胞。经直接计数法MTT法及间接免疫荧光法检测比较此二种细胞的增殖、细胞毒活性及Tac受体的表达水平。结果表明,T-AK细胞优于LAK细胞在于增殖能力的增加而非细胞毒作用的增强,增殖的机理与IL_2/IL-2R途径有关,并提示T-AK较IL_2/LAK疗法更具有临床应用价值。

BIOLOGICAL FEATURES OF HUMAN T-ACTIVATED KILLER CELLS

Objective: To investigate the immunobiological essence of T-activated killer (T-AK) cells induced by anti-CD3 monoclonal antibody (CD3McAb) and recombinant interleukin-2 (rIL-2) co-stimulation. Methods: The cytomorphology, phenotype and cytotoxicity of T-AK cells generated from human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were determined. Results: T-AK cells were similar to activated lymphoblasts in morphology, more than 90% of T-AK cells expressed the phenotypes of T-lymphocytes (CD3 +, CD8 +, and 20%～50% of the cells were NK-like phenotype (CD16 +, CD56 +, some of them expressed IL-2 receptor (CD25 +), CD38 antigen (CD38 +) and MHC-II antigen (HLA-DR+) characteristic marks for the activated T lymphocytes. T-AK cells attacking targets were morphologically large volumes with granules and mainly contained CD8 + and CD56 + cells. T-AK cells possessed high tumoricidal activities against NK-sensitive K562 cells and NK-resistant Raji cells, the cytotoxicity was composed of mainly CD3McAb-activated CD3AK activity (～50%), IL-2 induced LAK activity (～30%), NK activity (～10%) and the activities of inhibitory factors in T-AK supernatant (～10%). Conclusion: T-AK cells are a heterogeneous cell population consisting of mainly activated T lymphocytes and NK-like cells, the main part of T-AK cytotoxicity is the common activities of CD3AK cells and LAK cells.

Si、Ni元素对兆瓦级风电球铁件低温性能的影响

为了分析S、iNi两种元素对兆瓦级风电球铁铸件低温性能的影响,对S i含量为1.9%～2.5%的球墨铸铁做了-20℃的低温冲击试验,并对QT350-22L做了-80℃至-20℃的低温冲击试验.与前人在QT350-22L中加入0.1%～1.0%Ni元素的-20℃冲击试验结果进行对比,结果表明,Si元素的含量是影响风电球铁件低温性能的主要因素,不建议采用加入Ni元素的方法来提高其低温性能;兆瓦级风电球铁铸件的合金成分中Si含量控制在2.1%～2.3%这个范围内时,其性能可以达到使用需求;在一定范围内,Si含量越低,兆瓦级风电球铁铸件的低温冲击性能越好,但其低温冲击性能对温度也越敏感.

丹参对脑缺血再灌注损伤脑组织中p-Akt、Caspase-3和HIF-1α蛋白的影响

目的探讨丹参对脑缺血再灌注损伤脑组织中磷酸化AKT蛋白(p-AKT)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的影响。方法2020年3—5月,48只健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参组和LY294002组,每组12只。丹参组灌胃给予丹参水提物灌胃,LY294002组肌内注射PI3K/AKT抑制剂LY294002,假手术组和模型组给予同体积生理盐水灌胃。采用线栓法建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型。观察脑缺血再灌注后大鼠神经功能缺损情况及脑梗死体积,检测缺血脑组织中p-Akt、HIF-1α和Caspase-3蛋白水平的表达。结果造模后,假手术组神经功能评分、脑梗死体积均为0;LY294002组神经功能评分最高,脑梗死体积最大,其次为模型组,丹参组最低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。造模后,丹参组HIF-1α水平最高,其次为模型组与LY294002组,均显著高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05);造模后,丹参组p-Akt水平最高,其次为模型组,LY294002组次之,均显著高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05);造模后,LY294002组Caspase3水平最高,其次为模型组,丹参组次之,均显著高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丹参对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路,上调p-Akt和HIF-1α蛋白表达,降低Caspase-3表达有关。

O2O模式下“少即是多”理念在中式外卖餐盒中的设计与探索

本文以外卖O2O平台下中式外卖餐盒为研究对象,针对其简陋的餐盒、回收率低下等缺陷和不足进行了全面分析,提出"少即是多"的设计理念。探析了它在外卖餐盒设计中的具体应用,力求改善线下外卖餐盒的质量,提高整体品质,以达到少即是多的设计需求。

可溶性肿瘤抗原对小鼠CD_3AK细胞生物免疫功能的影响

目的:观察可溶性肿瘤抗原(STA———由S180 细胞提取)对小鼠CD3AK细胞的体外增殖、体外杀瘤活性以及体内抑瘤作用的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法),分别检测小鼠脾脏单个核细胞的体外增殖活性和杀瘤效应细胞体外杀瘤活性,并通过测定实体瘤质量来分析杀瘤效应细胞的体内抑瘤作用。结果:STA协同增强小鼠CD3 单抗诱导的小鼠脾脏单个核细胞的体外增殖活性。由STA联合小鼠CD3 单抗共同诱导的T- AK细胞,不仅在体外对S180 细胞杀瘤活性强于CD3AK细胞,且在小鼠体内抑制S180 肿瘤细胞的生长和扩散作用也强于CD3AK细胞。

加强银行监管亟待解决的若干问题

改进我国银行监管,应从顺应市场化改革潮流出发,缩小行为监管和合规监管的边界,强化审慎监管和风险监管。从遵循信息对称、权责对称的原则出发,回归管监合一模式,强化市场准入和非现场监管。从降低监管成本出发,树立起监管成本效益核算观念,提高银行监管效率。

s-乘数收敛的Orlicz-Pettis定理(英文)

讨论乘数收敛级数的Orlicz-Pettis型定理.首先给出一个新的Helliger Tplitz拓扑δ(X,X′),然后证明若数列空间s包含c00,则(s,δ(s,sβ))是AK-空间;若数列空间s具有性质G,则(s,c(s,sβ))是AK-空间.

lncRNA-CCAT1通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路对宫颈癌HeLa细胞自噬的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)对宫颈癌HeLa细胞自噬的影响及其可能作用机制。方法:培养宫颈癌HeLa细胞,将CCAT1过表达质粒pcDNA3.1-CCAT1转染至HeLa细胞中,采用qRT-PCR检测转染后细胞中CCAT1的表达水平;CCK8法检测细胞增殖活性;单丹磺酰戊二酸(MDC)染色观察细胞自噬囊泡的聚集情况;Western blot分析CCAT1过表达和PI3K特异性抑制剂LY294002对HeLa细胞自噬以及PI3K/Ak/t mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。结果:过表达CCAT1可显著增加HeLa细胞中CCAT1表达水平并促进细胞增殖,抑制细胞自噬囊泡聚集,降低LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ以及下调Beclin1蛋白表达水平,同时上调p62、p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达。然而,采用LY294002干预可逆转CCAT1过表达对HeLa细胞增殖的促进作用以及自噬的抑制作用。结论:CCAT1过表达可能通过激活PI3K/Ak/t mTOR信号通路抑制宫颈癌HeLa细胞自噬。

CD3AK细胞过继治疗对肝癌患者T淋巴细胞亚群及功能活性的影响

目的 探讨CD3AK细胞过继治疗对原发性肝癌（PLC）患者T淋巴细胞亚群及功能活性的影响。方法 58例 PLC患者分为:CD3AK细胞治疗组（n=37）,对照组（n=21）,另取11例献血员为正常对照。治疗组术后第1天开始输注CD3AK细胞,每天1次,每次输注2x109个细胞,输注前30min静脉注射IL-2100u,连续5d为一个疗程;对照组只给予与治疗组相同的保肝治疗。观察两组T淋巴细胞亚群、IL-2R、细胞增殖功能、NK及LAK活性。结果 治疗组CD4/CD8比值、NK活性、LAK活性、IL-2R表达水平及细胞增殖活力与治疗前和对照组比较,差异均有显著性意义。结论 过继输注CD3AK细胞治疗能够补充肝癌患者有效抗肿瘤活性细胞数量的不足,并能够使T淋巴细胞亚群比例失调和功能低下的状况获得不同程度的改善。