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利用Inverse PCR快速筛选单个T-DNA拷贝转基因水稻植株的方法
被引量:
7
1
作者
章冰
黄健秋
卫志明
《实验生物学报》
CSCD
1999年第2期207-211,共5页
为了获得单个T-DNA插入拷贝的植株, 我们建立了一套利用Inverse PCR(IPCR)快速检测转基因水稻中T-DNA拷贝数的方法。用IPCR的方法可以扩增出与已知T-DNA序列相邻的水稻基因组DNA未知序列,由此推测转基因水稻植株中T-DNA的拷贝数。我们共...
为了获得单个T-DNA插入拷贝的植株, 我们建立了一套利用Inverse PCR(IPCR)快速检测转基因水稻中T-DNA拷贝数的方法。用IPCR的方法可以扩增出与已知T-DNA序列相邻的水稻基因组DNA未知序列,由此推测转基因水稻植株中T-DNA的拷贝数。我们共对15个转化株系20棵不同植株的DNA进行了IPCR检测。其中12株表现为T-DNA单拷贝插入,3株为双拷贝插入,1株为三拷贝插入。另外4株未检测到T-DNA插入拷贝。IPCR分析结果经过Southern杂交和测序的验证。
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关键词
水稻
转基因
t-dna拷贝
InversePCR
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职称材料
提高水稻插入突变体库利用效率的尝试
被引量:
2
2
作者
张亚芳
潘存红
+5 位作者
李爱宏
汤雯
武茹
陈宗祥
许爱霞
潘学彪
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期844-850,共7页
T-DNA标签法是一种以农杆菌介导的遗传转化为基础来创造插入突变体库,从而高通量地分离和克隆植物功能基因的方法。但由于种种原因,水稻插入突变体库的利用效率较低。为了提高水稻插入突变体库的利用效率,结合水稻一个双拷贝T-DNA插入...
T-DNA标签法是一种以农杆菌介导的遗传转化为基础来创造插入突变体库,从而高通量地分离和克隆植物功能基因的方法。但由于种种原因,水稻插入突变体库的利用效率较低。为了提高水稻插入突变体库的利用效率,结合水稻一个双拷贝T-DNA插入突变体的发现和鉴定研究,通过特异PCR检测、侧翼序列与目标性状的共分离分析,在1个双插入位点均为杂合的植株的后代株系中分拆了2个插入事件,分离出目标性状存在遗传分离且只带有1个插入事件的后代株系,为后续的共分离检测和基因克隆研究打下了重要的基础。由此产生了对插入突变体库中的非串联多拷贝插入标签系进行研究的一些思路和方法,提出来与同行商榷。
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关键词
水稻
t-dna
标签系
双
拷贝
t-dna
插入
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职称材料
题名
利用Inverse PCR快速筛选单个T-DNA拷贝转基因水稻植株的方法
被引量:
7
1
作者
章冰
黄健秋
卫志明
机构
中国科学院上海植物生理研究所
出处
《实验生物学报》
CSCD
1999年第2期207-211,共5页
文摘
为了获得单个T-DNA插入拷贝的植株, 我们建立了一套利用Inverse PCR(IPCR)快速检测转基因水稻中T-DNA拷贝数的方法。用IPCR的方法可以扩增出与已知T-DNA序列相邻的水稻基因组DNA未知序列,由此推测转基因水稻植株中T-DNA的拷贝数。我们共对15个转化株系20棵不同植株的DNA进行了IPCR检测。其中12株表现为T-DNA单拷贝插入,3株为双拷贝插入,1株为三拷贝插入。另外4株未检测到T-DNA插入拷贝。IPCR分析结果经过Southern杂交和测序的验证。
关键词
水稻
转基因
t-dna拷贝
InversePCR
Keywords
Inverse PCR.
t-dna
copy number. Rice (Oryza sativa). Agrobacterium-medinted transformation.
分类号
S511.035 [农业科学—作物学]
Q784 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
提高水稻插入突变体库利用效率的尝试
被引量:
2
2
作者
张亚芳
潘存红
李爱宏
汤雯
武茹
陈宗祥
许爱霞
潘学彪
机构
扬州大学作物遗传生理江苏省重点实验室
江苏里下河地区农业科学研究所
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期844-850,共7页
基金
国家高技术研究发展计划项目(863项目)(编号:2002AA2Z1002)资助~~
文摘
T-DNA标签法是一种以农杆菌介导的遗传转化为基础来创造插入突变体库,从而高通量地分离和克隆植物功能基因的方法。但由于种种原因,水稻插入突变体库的利用效率较低。为了提高水稻插入突变体库的利用效率,结合水稻一个双拷贝T-DNA插入突变体的发现和鉴定研究,通过特异PCR检测、侧翼序列与目标性状的共分离分析,在1个双插入位点均为杂合的植株的后代株系中分拆了2个插入事件,分离出目标性状存在遗传分离且只带有1个插入事件的后代株系,为后续的共分离检测和基因克隆研究打下了重要的基础。由此产生了对插入突变体库中的非串联多拷贝插入标签系进行研究的一些思路和方法,提出来与同行商榷。
关键词
水稻
t-dna
标签系
双
拷贝
t-dna
插入
Keywords
rice
t-dna
tagged line
a line with
t-dna
copies inserted independently
分类号
S511 [农业科学—作物学]
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用Inverse PCR快速筛选单个T-DNA拷贝转基因水稻植株的方法
章冰
黄健秋
卫志明
《实验生物学报》
CSCD
1999
7
下载PDF
职称材料
2
提高水稻插入突变体库利用效率的尝试
张亚芳
潘存红
李爱宏
汤雯
武茹
陈宗祥
许爱霞
潘学彪
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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职称材料
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引证文献
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