环孢菌素A对慢性再生障碍性贫血患者T-bet、GATA-3、相关信号分子、细胞因子及Th1/Th2的影响

本研究探讨转录因子T-bet、GATA-3及相关信号通路在慢性再生障碍性贫血(CAA)免疫发病中的作用,从Th细胞失衡、转录因子及相关信号通路水平研究环孢菌素(CsA)治疗慢性AA的免疫调节机理。采用实时荧光定量PCR(real-time FQ-PCR)检测慢性AA患者治疗前和CsA治疗6月后外周血单个核细胞(PBMNC)T-bet、GATA-3及STAT4、STAT6mRNA表达;采用流式细胞术、酶联免疫吸附法(ELISA)检测慢性AA患者治疗前和CsA治疗6月后外周血Th1、Th2比例及PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12、IL-4水平,并与正常人进行比较。结果表明:慢性AA患者PBMNC T-bet、STAT4mRNA表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、Th1/Th2比值、PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12表达均明显高于正常组(p<0.01),经CsA治疗6月后,患者T-bet、STAT4表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ、IL-12表达均有所下降,但T-bet、STAT4、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ表达仍未达到正常水平,GATA-3、STAT6mRNA表达、Th2比例、IL-4表达在治疗前后与正常人比较均无明显差异(p>0.05)。结论:IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化及Th平衡向Th1型偏移在AA免疫异常的发病过程中起到关键的作用;CsA能通过下调IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化及纠正Th1过度极化而减轻AA异常亢进的细胞免疫,解除造血抑制。

再障小鼠骨髓淋巴细胞Th1/Th2细胞亚群漂移与转录因子T-bet和GATA-3的调控作用

目的:探讨再生障碍生贫血(再障)小鼠骨髓淋巴细胞的Th1/Th2细胞亚群的漂移与转录因子T-bet和GATA-3的调控作用。方法:建立再障小鼠模型,取再障和正常组小鼠骨髓淋巴细胞,在终浓度为15 mg/L植物血凝素(PHA)条件下培养,用双抗体夹心ELISA方法检测小鼠骨髓淋巴细胞培养上清Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4、IL-10水平;用RT-PCR技术检测小鼠骨髓淋巴细胞转录因子T-bet和GATA-3 mRNA表达强度。结果:再障小鼠IL-2、IFN-γ水平及转录因子T-bet mRNA表达显著高于正常组(P<0.01);而IL-4、IL-10水平及GATA-3 mRNA表达水平明显低于正常组(P<0.01)。结论:再障小鼠出现Th细胞向Th1亚群漂移现象,导致机体Th1细胞的优势应答状态,从而诱导细胞毒性T淋巴细胞对造血干细胞的细胞毒作用,而T-bet表达增强与GATA-3低表达可能是再障Th1优势分化的重要原因。

SOCS3和Th1/Th2相关细胞因子在非酒精性脂肪性肝病中的表达及意义

目的研究SOCS3和Th1/Th2相关细胞因子在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的表达及其相互关系和临床意义。方法取30例NAFLD患者(NAFLD组)和30例健康体检者(对照组)为研究对象,分别应用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)法和ELISA法检测外周血SOCS3mRNA和Th1/Th2相关细胞因子IFN-γ、IL-4的表达,观察并比较两组之间的差异。结果 NAFLD组SOCS3mRNA的表达较对照组显著升高(P<0.01);NAFLD组IFN-γ的水平较对照组明显升高(P<0.01),而IL-4的水平则无明显变化(P>0.05)。结论 NAFLD患者外周血Th1型细胞因子占优势,Th1/Th2失衡,IFN-γ的大量表达导致炎症反应,进而促进了NAFLD的发生发展;SOCS3可能是导致NAFLD进展的危险因素。

糖尿病肾病患者外周血Th1/Th2变化及其与PI3K/AKT通路相关性

目的:探讨糖尿病肾病患者外周血Th1/Th2变化及其与PI3K/AKT通路的相关性。方法:选取2020年9月—2021年9月我院肾内科收治入院的确诊为糖尿病肾病患者100例为观察组,同时选取来我院健康体检的78例健康体检者为健康对照组,对比分析两组细胞因子IFN-γ、IL-4水平及外周血Th1/Th2细胞比例的变化,测定PI3K mRNA、AKTmRNA的表达,采用Pearson分析,判断外周血IFN-γ、IL-4水平与PI3K mRAN、AKT mRNA的相关性。结果:观察组IFN-γ水平较对照组高,IL-4水平较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05);观察组外周血Th1细胞数多于对照组,Th2细胞数少于对照组,Th1/Th2细胞比例高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组外周血中PI3K mRNA、AKT mRNA水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);外周血INF-γ水平与PI3K mRNA、AKT mRNA均呈正相关(P<0.05),外周血IL-4水平与PI3K mRNA、AKT mRNA均呈负相关(P<0.05)。结论:糖尿病肾病患者外周血Th1细胞水平升高,而Th2细胞水平下降,且Th1/Th2水平升高可能过度激活PI3K/AKT信号通路,导致糖尿病肾病。

地塞米松对哮喘大鼠T-bet/GATA-3的影响

目的:探讨地塞米松对转录因子T-bet/GATA-3的影响。方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组与地塞米松组,每组10只。于第1、8天腹腔注射卵白蛋白,第15天雾化吸入卵白蛋白引喘,每日一次,共14次。地塞米松组于实验开始后第15天起,按0.5 mg/kg予以腹腔注射地塞米松,每日一次,共14次。流式细胞术测脾及外周血Th1、Th2含量,免疫组化法及免疫印迹法测T-bet、GATA-3蛋白表达,逆转录聚合酶链反应测T-bet、GATA-3mRNA的表达。结果:模型组与正常组比较,脾与外周血中Th1、Th2含量有非常显著性增多(P<0.01);肺组织中T-bet、GATA-3蛋白与mRNA的表达亦有非常显著性升高(P<0.01)。而地塞米松组与模型组比较,T-bet/GATA-3有显著(P<0.05)或非常显著(P<0.01)性升高。结论:Tbet/GATA-3是影响Th1/Th2平衡的关键转录因子,地塞米松可提高T-bet/GATA-3比值,从而减轻哮喘的发作。

“邵氏五针法”对慢性哮喘大鼠GATA-3/T-bet表达的影响

目的:探讨“邵氏五针法”对慢性哮喘大鼠Thl/Th2细胞失衡相关因子的影响。方法:SD大鼠40只按随机数字表法分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,通过HE染色观察各组大鼠肺组织病理学变化,通过酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清白介素(IL)-5、γ干扰素(IFN-γ)含量,荧光定量PCR检测各组大鼠肺组织中GATA结合蛋白3(GATA-3)、T盒子转录因子(T-bet)mRNA表达水平。结果:肺组织病理显示针刺组和艾灸组大鼠气道炎症较模型组明显减轻,针刺组和艾灸组大鼠血清中IL-5含量及肺组织中GATA-3mRNA表达明显低于模型组,血清IFN-γ含量及肺组织T-betmRNA表达明显高于模型组。结论:针刺和艾灸能降低哮喘大鼠气道炎症,抑制Th2特异性转录因子GATA-3的表达,促进Thl特异性转录因子T-bet的表达,可能通过纠正Th1/Th2失衡,调控哮喘大鼠免疫功能,从而降低哮喘大鼠的气道高反应性及慢性炎症,达到防治哮喘的作用。

归参汤对免疫抑制小鼠血清中IL-2、TNF-α和脾细胞Th1/Th2细胞因子的影响

为了探讨归参汤(GST)对免疫抑制小鼠血清中IL-2、TNF-α和脾细胞Th1/Th2细胞因子的影响。本试验采用环磷酰胺制造免疫抑制模型,利用双抗夹心ELISA法,观察归参汤对小鼠血清中IL-2、TNF-α的影响;RT-PCR法观察归参汤对小鼠脾细胞中INF-γ、IL-4、T-bet和GATA-3的mRNA表达的影响。结果显示:归参汤高剂量组可以显著增加免疫抑制小鼠血清中IL-2、TNF-α的含量(P<0.01),提高INF-γ的表达(P<0.05),降低IL-4的含量(P<0.05),升高T-bet(P<0.05),降低GATA-3的表达(P<0.05)。归参汤的免疫增强作用与升高血清中IL-2、TNF-α有关,且升高INF-γ/IL-4纠正免疫抑制小鼠Thl/Th2细胞因子的比例紊乱,其机制可能部分归因于对T-bet和GATA-3的mRNA表达的影响。

桂芍知母汤及其加味对佐剂性关节炎大鼠Th1/Th2漂移的影响

目的:通过对桂芍知母汤及加味对佐剂性关节炎大鼠INF-γ、IL-4、T-bet、Gata-3表达影响的研究,分析其对Th漂移的影响。方法:以桂芍知母汤及桂芍知母加活血方、桂芍知母加藤类方为干预因素,采用佐剂性关节炎大鼠模型,检测大鼠足肿胀度的变化,ELISA法检测血清INF-γ、IL-4水平,Rt-QPCR检测足掌软组织T-bet、Gata-3mRNA表达;以INF-γ/IL-4、T-bet/Gata-3比值代表Th漂移方向。结果:桂芍知母组(17.325g/kg)、桂芍知母加活血组(21g/kg)与桂芍知母加藤类组(25.2 g/kg)均能显著降低足肿胀度,下调INF-γ,上调IL-4;使T-bet表达减弱,Gata-3表达增强(P<0.05或P<0.01),INF-γ/IL-4与T-bet/Gata-3比值趋势相同,相关性分析提示两者有密切关系。结论:桂芍知母汤及加味能有效缓解AA大鼠局部炎症反应,其免疫调控机理与促进Th细胞向左漂移有关。

乌司他丁对脓毒症患者Th1/Th2和HMGB1表达的影响

目的探讨乌司他丁治疗脓毒症对患者辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2(Th1/Th2)失衡及高迁移率族蛋白1(HMGB1)的影响。方法选取2016年2月-2018年3月医院收治的70例脓毒症患者,随机数字表法分为对照组与研究组,每组35例。患者入院后均给予补液、抗感染、营养支持、纠正电解质紊乱、原发病等常规治疗,研究组在此基础上给予乌司他丁静脉注射治疗,持续治疗7 d。比较两组患者治疗前、治疗第三天、第七天,干扰素-γ(IFN-γ)/白细胞介素-4(IL-4)、转录因子T-bet/转录因子GATA-3及HMGB1表达情况。结果两组患者治疗前IFN-γ/IL-4、 T-bet/GATA-3水平比较差异无统计学意义,治疗第三天两组患者IFN-γ/IL-4、 T-bet/GATA-3均较治疗前呈下降趋势,并在治疗第七天时回升,且研究组高于对照组(P<0.05);治疗后HMGB1表达均呈下降趋势,且研究组低于对照组(P<0.05)。结论乌司他丁治疗脓毒症对减轻患者Th1向Th2方向漂移有一定价值,能够促进患者Th1/Th2尽早恢复平衡,对维持患者机体免疫力的稳定有一定价值;同时药物还能够抑制脓毒症患者HMGB1表达,减轻患者炎症反应,改善其预后。

Tc1和Tc2细胞及其相关因子的失衡在糖尿病患者外周血表达水平及其机制探讨

目的:探讨Tc1和Tc2细胞及其相关因子的失衡在糖尿病患者外周血表达水平及机制。方法:选取2015年5月-2017年5月在我院就诊的40例糖尿病患者作为观察组,同期进行体检的40例健康志愿者作为对照组。采用流式细胞术检测观察组和对照组人群外周血中Tc1和Tc2细胞数目,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中细胞因子白细胞介素-4(IL-4)与γ-干扰素(IFN-γ)的水平,实时定量PCR检测外周血中T-bet和GATA-3的表达水平。结果:观察组外周血中Tc1细胞比例、Tc1/Tc2比值显著高于对照组,而Tc2细胞比例显著低于对照组(P<0.05)。相关性分析显示Tc1细胞比例及Tc1/Tc2比值与患者血糖成正相关,而Tc2细胞比例与患者血糖成负相关(P<0.05)。观察组血清IFN-γ的表达水平显著高于对照组,而IL-4表达水平显著低于对照组(P<0.05)。观察组T-bet相对表达量显著高于对照组,而GATA-3相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。结论:糖尿病患者外周血中Tc1和Tc2细胞失衡,细胞因子IFN-γ和IL-4表达异常,T-bet和GATA-3参与糖尿病患者中Tc1和Tc2细胞失衡的调控。