T淋巴瘤侵袭诱导基因在卵巢癌细胞株的表达及其意义

目的研究T淋巴瘤侵袭诱导基因1(Tiam1)在卵巢癌侵袭转移方面的作用。方法RT-PCR检测Tiam1和Rac1mRNA的表达;Westernblot法检测Tiam1蛋白质的表达;Boyden小室体外侵袭实验测定癌细胞迁移能力。结果Tiam1mRNA和蛋白质及Rac1mRNA在4株卵巢癌细胞A2780、Caov3、Skov3及SW626中均呈中高度表达;癌细胞平均迁移百分数分别为(27.67±3.2)%、(10±1.0)%、(22.67±2.5)%及(47.67±1.52)%。Tiam1及Rac1表达水平与癌细胞迁移潜能间均呈显著性相关,r分别为0.874和0.814,P=0.003和0.042。结论Tiam1/Rac1信号转导通路在卵巢癌细胞的侵袭和转移过程中起重要作用,为卵巢癌的基因治疗提供了新的靶点。

不同双荧光素酶方法对检测胃癌相关miRNAs靶向基因TIAM1的影响

目的:探讨不同双荧光素酶实验方法对检测胃癌相关miRNAs靶向基因TIAM1的影响。方法:从胃癌细胞系BGC823基因组中提取T-细胞淋巴瘤侵袭转移诱导基因(TIAM1)的3’非编码区(3’-UTR)片段全长,将TIAM1-3’UTR构建在2种不同的荧光素酶基因质粒上,选择8个miRNAs进行双荧光素酶实验研究。结果:miR-10b的抑制物使2种质粒的相对荧光素酶活性均升高;miR-651和miR-653的抑制物使2种质粒的相对荧光素酶活性变化完全相反;miR-10b-5p的抑制物和类似物(mimic)分别使psi-TIAM1-3’UTR的相对荧光素酶活性增高和减弱;而miR-372-3p、miR-373-3p和miR-653-5p的抑制物和类似物处理组荧光素酶活性均升高,miR-335-3p的抑制物和类似物处理组荧光素酶活性均减低。结论:进行双荧光素酶实验时psi-TIAM1-3’UTR这类2种基因位于同一质粒且不以Renilla作为内参的质粒较为合适,并发现miR-10b-5p能够直接靶向作用于TIAM1-3’UTR。

Tiam-1蛋白表达与鼻咽癌生物学行为的关系

目的探讨Tiam-1蛋白与鼻咽癌生物学行为的关系。方法用免疫组化方法检测60例不同临床分期人鼻咽癌组织、20例鼻咽粘膜慢性炎症组织以及6例裸鼠人鼻咽癌转移细胞株模型标本中Tiam-1蛋白的表达。结果Tiam-1蛋白在鼻咽癌组织中的阳性表达率63.33%高于慢性炎症组36.67%(χ2=20.429,P=0.001);Tiam-1蛋白在鼻咽癌组的平均表达得分(2.9167±1.3057)高于鼻咽粘膜慢性炎组(0.7000±0.9234)(t=7.0162,P=0.0000)。Tiam-1蛋白表达在临床T分期之间没有统计学差异(F=2.36,P=0.0811),在有无淋巴结和器官转移的肿瘤组织中均有统计学意义(P=0.0001)。在具有转移特性的人源性鼻咽癌细胞株裸鼠模型肿瘤组织中Tiam-1蛋白均呈高表达。结论Tiam-1与鼻咽癌浸润转移密切相关,提示Tiam-1蛋白可能是鼻咽癌的重要促侵袭转移因子。

结肠癌组织中miR-29b、Tiam1的表达及临床意义

目的探究结肠癌组织中microRNA-29b(miR-29b)、T淋巴瘤侵袭转移诱导基因1(Tiam1)表达及临床意义。方法选取2016年5月~2018年5月于四川省宜宾市第二人民医院治疗的81例结肠癌患者癌组织、癌旁组织,利用实时荧光定量PCR检测miR-29b、Tiaml在结肠癌组织中的表达情况,分析miR-29b、Tiaml表达的相关性及其与患者临床病理特征的关系。结果miR-29b在结肠癌组织中的表达量显著低于癌旁组织(P<0.05),Tiam1在结肠癌组织中的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05);miR-29b、Tiam1表达与细胞分化程度、肿瘤TNM分期、淋巴结转移情况相关(P<0.05);癌组织中miR-29b与Tiam1表达呈负相关(r=-0.381,P<0.05)。结论miR-29b在结肠癌组织中低表达,而Tiam1呈现高表达,miR-29b和Tiam1表达与患者肿瘤TNM分期、细胞分化程度以及淋巴结转移密切相关,两者相互作用共同参与结肠的发生发展及转移。

柠檬苦素调控Tiam1基因表达影响人体血管瘤内皮细胞VEGF/VEGFR2通路及诱导其凋亡的机制研究

目的:研究柠檬苦素Toonaciliatin A对血管瘤内皮细胞(HemEC)增殖、凋亡的影响及潜在作用机制。方法:胶原蛋白酶A分离HemEC细胞,MTT法测定不同浓度Toonaciliatin A对HemEC细胞生存率的影响,流式细胞术测定HemEC细胞凋亡率,Western blot检测蛋白表达,qRT-PCR检测RNA的表达。结果:Toonaciliatin A能够抑制HemEC增殖,促进HemEC细胞凋亡;Toonaciliatin A抑制Tiam1蛋白表达,过表达Tiam1逆转了Toonaciliatin A对HemEC的抑制作用;Toonaciliatin A能够抑制VEGF和VEGFR2蛋白表达,过表达Tiam1逆转了Toonaciliatin A对VEGF和VEGFR2蛋白表达的抑制作用。结论:柠檬苦素类似物Toonaciliatin A通过靶向Tiam1基因抑制VEGF/VEGFR2通路抑制HemEC细胞增殖,促进细胞凋亡。

基质金属蛋白酶-2和T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1蛋白表达与大肠癌生物学特征相关性的实验研究

目的探讨大肠组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiam1）的基因表达与大肠癌生物学特征的相关性。方法应用S-P免疫组化法对46例大肠癌手术切除标本进行抗．＆MMP-2单克隆抗体和Tiam1多克隆抗体免疫组化染色，检测癌组织、癌旁组织、手术切缘区正常组织各区域MMP-2和Tiam1蛋白表达，分析二者与大肠癌临床病理特征之间的关系。结果MMP-2和Tiam1蛋白表达在癌组织与手术切缘区正常组织、癌组织与癌旁组织、癌旁组织与手术切缘区正常组织之间差异均具有统计学意义。癌组织中MMP-2和Tiam1蛋白表达在患者性别、年龄之间差异无统计学意义，而与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结及远处转移、临床TNM分期均呈正相关；且两种蛋白表达同时阳性的大肠癌病例具有更高恶性的生物学特征。结论MMP-2和Tiam1与大肠癌的发生、侵袭和转移具有潜在影响作用，检测MMP-2和Tiam1的表达可作为判断大肠癌病变发展和转移潜能的指标。