两株耐碱酵母的pH耐受实验观察

对分离鉴定的两株酵母菌用比浊法和Bradford法进行pH耐受范围检测。Trichosporon asahii XJU-1的pH耐受范围为2．0-13．0，最适pH值为8．0。Rhodotonrla mucilaginosa XJU-1的pH耐受范围为3．0-12．0，最适pH值为8．5。比浊法在pH4．0-10．0测出数值比较可靠，而在pH〈4．0和pH≥10．0产生了较大误差。在最适pH时，Bradford法间接测定两酵母的生长量，T．asahii总溶解蛋白为290μg／mL，Rh．mucilaginosa总溶解蛋白为164μg／mL。Bradford法在pH2．0．13．0范围均能较准确地反映出菌株生长状况，数据表明两株酵母有广阔的pH耐受性，它们是耐碱酵母菌的新成员。

Sensititre YeastOne显色药敏板与微量肉汤稀释法检测阿萨希毛孢子菌体外药物敏感性比较研究

目的以CLSI微量肉汤稀释法为参考方法,探讨商品化显色药敏板(Sensititre YeastOne)检测阿萨希毛孢子菌体外药物敏感性的临床应用价值。方法分别用微量肉汤稀释法和Sensititre YeastOne同时检测62株阿萨希毛孢子菌对临床常用7种抗真菌药物的体外敏感性,MIC值读取时间分别为24h和48h。结果微量肉汤稀释法结果显示卡泊芬净和米卡芬净对阿萨希毛孢子菌无体外活性,二者MIC90均为16μg/mL;唑类药物对阿萨希毛孢子菌体外活性较好,培养24h MIC90分别为氟康唑8μg/mL、伏立康唑0.125μg/mL、伊曲康唑0.5μg/mL;4.8%(3/62)阿萨希毛孢子菌对两性霉素B有高MIC值(4μg/mL);经24h培养,Sensititre YeastOne与微量肉汤稀释法检测阿萨希毛孢子菌对7种抗真菌药物的体外MIC一致率(essential agreement,EA)分别为氟康唑93.5%,伏立康唑98.4%,伊曲康唑98.4%,两性霉素B 98.4%,5-氟胞嘧啶88.7%,卡泊芬净100%,米卡芬净100%;培养48h后,二者检测两性霉素B和5-氟胞嘧啶MIC一致率有所下降,分别为83.9%和67.7%;对微量肉汤稀释法而言,培养时间对两性霉素B和5-氟胞嘧啶MIC值影响较大,24h和48hMIC一致率分别为69.4%和53.2%,对Sensititre YeastOne,MIC值明显受培养时间影响的药物仅见于5-氟胞嘧啶,24h和48h MIC一致率为11.3%,其余药物不同MIC读取时间一致率非常好。结论唑类药物对阿萨希毛孢子菌体外抗菌活性较好,Sensititre YeastOne和微量肉汤稀释法检测阿萨希毛孢子菌体外MIC值一致率较高,用于临床阿萨希毛孢子菌体外药物敏感性检测具有一定的实用价值。

阿萨希毛孢子菌对人外周血单核源树突状细胞表型和功能的影响

目的通过体外研究热灭活阿萨希毛孢子菌(Trichosporon asahii,T.asahii)孢子对健康人外周血单核源树突状细胞(dendritic cells,DCs)的表型和功能的影响,探讨DCs在T.asahii感染中可能发挥的作用。方法体外诱导培养正常人外周血DCs,与不同浓度的热灭活T.asahii孢子进行孵育,DCs与T.asahii浓度比分别为1∶1、1∶5和1∶10,RPMI-1640及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激组分别作为空白对照及阳性对照,在显微镜下观察各组DCs形态的变化;瑞氏-姬姆萨染色观察实验组DCs对T.asahii的吞噬情况并计算吞噬率;流式细胞术检测各组DCs表面共刺激分子表达情况。结果诱导孵育过程中DCs形态发生明显改变;24 h时实验组部分DCs内可观察到不止一个被吞噬的T.asahii孢子,吞噬率组间差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,实验组DCs形态发生明显改变,且表面共刺激分子CD80、CD86、CD83表达水平明显升高(P<0.05),但升高水平低于LPS刺激组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论人外周血DCs吞噬热灭活的T.asahii孢子后,形态发生改变,表面分子表达水平升高,DCs进一步成熟。

丝孢酵母菌属显色鉴定的研究

目的比较丝孢酵母菌属与念珠菌在念珠菌显色培养基上不同的显色特点,从而达到对丝孢酵母菌的显色鉴定,为临床诊治丝孢酵母菌病提供依据。方法采用科玛嘉念珠菌显色培养基对18株不同来源的T.asahii临床菌株与该属的6个标准菌株以及38株念珠菌标准菌株与临床菌株进行显色培养,并经BIOMERIEUX VITEK-2-Compact系统鉴定等检测所证实。同时采用扩散法对7种抗真菌药物进行体外敏感性试验。结果丝孢酵母菌在显色培养基上菌落均呈天蓝色,此结果与念珠菌完全不同。所有菌株与VITEK-2-Compact系统鉴定结果一致。所有丝孢酵母菌实验菌株对两性霉素B及沃尔康唑均敏感。所有丝孢酵母菌实验菌株对氟胞密啶及卡泊芬净均耐药。结论科玛嘉念珠菌显色培养基可用于对丝孢酵母菌的鉴定,很适合各级医院的常规检测。两性霉素B及沃尔康唑对丝孢酵母有较强的体外抗菌活性。