C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体的压缩力学特性

对比分析C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体的压缩力学性质,确定不同部位的椎间盘与相邻椎体是否具有不同的压缩力学性质。人死后1 h内解剖取出死者C1-S1脊柱标本,以线锯切取C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体标本各13个。在日本岛津电子万能实验机上进行实验。实验速度为5mm/min,以统计分析和t检验的方法处理实验数据。L4-5组椎间盘与相邻椎体最大载荷大于T12-L1和C5-6组,差异显著(P<0.01);C5-6组最大位移大于L4-5组和T12-L1组,差异显著(P<0.01);L4-5组椎间盘与相邻椎体最大应力大于C5-6和T12-L1组,差异显著(P<0.01);C5-6组椎间盘与相邻椎体最大应变大于L4-5和T12-L1组,差异显著(P<0.01)。C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体标本的压缩力学性质有一定区别。

AdipoR2介导C2C12肌管细胞促进3T3-L1前体脂肪细胞的糖代谢能力

[目的]本文旨在探究脂联素受体2(AdipoR2)在C2C12肌管细胞与3T3-L1前体脂肪细胞共培养体系中对3T3-L1前体脂肪细胞葡萄糖吸收与消耗能力的影响。[方法]利用siRNA干扰AdipoR2基因表达,同时利用Transwell细胞培养小室对这2种细胞进行了共培养并检验相关基因的表达水平和细胞葡萄糖消耗能力的变化。[结果]使用siRNA干扰AdipoR2基因的表达后,3T3-L1前体脂肪细胞的AdipoR2基因和葡萄糖转运蛋白基因Slc2a1和Slc2a4表达水平显著下降,3T3-L1前体细胞每单位所消耗的葡萄糖量也显著下降。而在与C2C12细胞共培环境下,3T3-L1前体细胞中AdipoR2基因和葡萄糖转运蛋白Slc2a1、Slc2a4基因表达水平显著上调。同时,3T3-L1前体细胞单位消耗的葡萄糖量显著上升。进一步研究发现,AdipoR2能够有效调节3T3-L1前体脂肪细胞内葡萄糖转运蛋白基因的表达水平与葡萄糖的消耗能力。[结论]在C2C12肌管细胞共培体系中,AdipoR2能够加速3T3-L1前体脂肪细胞对葡萄糖的吸收。

牛UCP3和MYH1基因启动子在C2C12和3T3-L1细胞中的启动活性分析

为阐明牛解偶联蛋白3(uncoupling protein 3,UCP3)和肌球蛋白重链1(myosin heavy chain 1,MYH1)基因启动子的核心区及其在小鼠C2C12和3T3-L1两种细胞株中的启动活性,本研究利用PCR、双荧光素酶和脂质体转染等方法进行关岭牛UCP3和MYH1基因启动子的扩增、重组载体构建和启动子活性分析。结果显示,试验成功构建了pGL3-Basic-UCP3-pro和pGL3-Basic-MYH1-pro重组真核表达载体,分别转染至小鼠C2C12和3T3-L1细胞后发现,UCP3、MYH1基因启动子的核心区分别为UCP3-P6(-385^+3 bp)和MYH1-P5(-255^+15 bp)区域;pGL3-Basic-MYH1-P2~pGL3-Basic-MYH1-P5在C2C12细胞中启动子活性均高于3T3-L1细胞,表明MYH1基因启动子活性在成肌细胞C2C12中较高。本研究阐明了UCP3和MYH1基因启动子的核心区及其启动子活性,为进一步研究UCP3和MYH1基因的转录调控机理提供了科学依据。

硬膜外T12-L1或L1-L2置管PCEA在妇科腹腔镜手术后镇痛的比较

目的:比较行硬膜外T12-L1置管和硬膜外L1-L2置管用于妇科腹腔镜手术患者术后镇痛的效果。方法:选取于2016年6月-2017年4月在宜宾市第二人民医院麻醉科接受妇科腹腔镜手术的患者164例,ASAI或Ⅱ级,随机分为T组(n = 82)和L组(n = 82),术前分别在T12-L1 (T组)和L1-L2 (L组)行硬膜外穿刺置管,镇痛泵的配置均为100 ml内50 ug舒芬太尼与0.894%的甲磺酸罗哌卡因22 ml,两组均行PCEA。观察并记录两组患者首次按压镇痛泵的时间,术后首次下床活动时间,术后4、8、12、24和48 h患者的疼痛VAS评分,BCS舒适度评分,术后48 h内舒芬太尼及罗哌卡因的使用情况;记录术后恶心呕吐、尿潴留、双下肢麻木、眩晕、皮肤瘙痒等不良反应的发生情况。结果:两组患者均未观察到硬膜外穿刺相关并发症。T组患者术后首次按压镇痛泵的时间明显长于L组(P <0.05),首次下床活动时间明显早于L组(P <0.05);与L组比较,T组术后8 h、12 h、24 h的VAS评分降低,BCS评分升高(P <0.05);术后0~12 h、12~24 h、24~36 h T组使用舒芬太尼和罗哌卡因剂量明显小于L组(P <0.05)。T组术后恶心呕吐、眩晕,皮肤瘙痒等不良反应的发生情况的发生率与L组无明显差异,尿潴留、双下肢麻木发生率明显低于L组。结论行硬膜外T12-L1置管较L1-L2置管PCEA能够更加有效地为妇科腔镜手术患者提供理想的术后镇痛效果,并且可以减少术后阿片类及局部麻醉药物用量及不良反应的发生,有利于促进患者康复。

关岭黄牛MSTN启动子真核报告载体的构建与启动活性研究

采用PCR技术扩增牛MSTN基因启子,亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,构建重组报告载体pGL3-BasicMSTN-promoter。将重组报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter与内参质粒pRL-TK用脂质体法瞬时共转染小鼠成肌细胞系C2C12和小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1,通过双荧光素酶活性检测其启动子活性。测序结果表明,成功构建了牛MSTN基因真核报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter,瞬时转染试验表明,pGL3-Basic-MSTN-promoter在C2C12细胞和3T3-L1细胞中的启动子活性分别为pGL3-Basic空载体的14.53倍、5.02倍。研究结果为进一步研究MSTN基因的表达调控机制奠定了基础。

关岭牛MyoDⅠ基因启动子报告质粒的构建及活性验证

为了克隆关岭牛MyoDⅠ基因启动子并验证其启动活性,根据GenBank中牛的MyoDⅠ基因序列设计PCR引物,用PCR技术扩增牛MyoDⅠ基因的启动子,构建重组克隆载体pUCmT-MyoDⅠ;并通过PCR扩增、限制性酶切、测序及生物信息学分析对阳性克隆进行鉴定;构建报告质粒pGL3-MyoDⅠ,并将其转染小鼠C2C12、3T3-L1细胞系,检测其24h后的双荧光素酶活性。实验结果获得了关岭牛MyoDⅠ基因启动子,其序列长度为993bp,并成功构建了MyoDⅠ启动子报告质粒;双荧光素酶活性检测表明pGL3-MyoDⅠ在小鼠C2C12细胞中的表达是pGL3空载体40.65倍,在小鼠3T3-L1细胞中的表达是空载体的1.13倍,MyoDⅠ启动子在小鼠C2C12细胞中的表达高于3T3-L1细胞(**p<0.01)。结果表明关岭牛MyoDⅠ基因启动子具有启动活性,在小鼠骨骼肌细胞中特异性表达。

基于督脉理论辨治脊髓疾病——中医脑病理论与临床实证研究（八）

脊髓充贯椎骨管腔、传导脑髓神机、调控躯体神机、脊髓濡养全身躯体及脏腑、脑脊液循环代谢自有常度。督脉循行脊髓,反映脊髓的大部分功能,督脉为通真之路,脊髓为脏真聚所。例举颈脊髓外伤后遗症神经源性膀胱并神经源性直肠、T12-L1水平椎管内多发性肿瘤术后、脊髓空洞症3个医案,阐释了脊髓病变以脏腑经络病变为基础,具有易虚损、易痹阻、易共病的病机特征。脊髓疾病属于督脉病变的一部分,治疗上以恢复督脉阴阳水火升降之通道为原则,要同时兼顾督脉病和髓病的用药特点。治督脉应与相关经脉同治,形神同治;虚者治肾命为主,实者通经络为要,治神者参考脑病;治髓虚实主于肝胆,尚用风药。脊髓疾病用药不拘定法,必须辨病辨证,分别轻重缓急处理。

地塞米松体外诱导胰岛素抵抗细胞模型的建立

目的:探讨在体外建立方便可靠的肝胰岛素抵抗细胞模型、脂肪细胞胰岛素抵抗模型和肌细胞胰岛素抵抗模型的方法。方法:3T3-L1小鼠前脂肪细胞、C2C12小鼠成肌细胞分别诱导分化为成熟的脂肪细胞和肌细胞。采用地塞米松(EDX)诱导人肝细胞Hep G2以及分化成熟的Hep G2、C2C12细胞,以葡萄糖氧化酶法检测细胞对葡萄糖的消耗情况。结果:1μmol/L DEX作用24 h和48 h均能抑制细胞葡萄糖消耗,撤掉DEX,胰岛素抵抗细胞模型在48 h内维持稳定。对于Hep G2和C2C12细胞,DEX造模48 h优于24 h;但对于3T3-L1细胞,DEX造模24 h和48 h对细胞葡萄糖消耗影响无显著性差异。结论:DEX可诱导3T3-L1、Hep G2、C2C12细胞产生胰岛素抵抗,这种细胞模型简便稳定。