T2毒素在灌流大鼠肠肝中的首过效应和代谢动力学

建立并用大鼠在体肠-肝灌流标本研究了T2毒素在大鼠肠肝中的首过效应和代谢转化动力学,T2毒素在大鼠肠肝中的主要代谢产物是HT2,3′-OHHT2和其葡萄糖醛酸结合物,T2毒素具有显著的肠肝首过效应,当毒素(42μg·ml^(-1))由上肠系膜动脉恒速单次灌流(8 ml·min^(-1))肠-肝标本时,穗态肝、肠抽提率分别为0.978和0.454,总有效清除率为7.91 ml·min^(-1),T2毒素在循环灌流大鼠肠-肝标本中的消除半衰期为6.5min,主要代谢产物HT2,3′-OHHT2的生成半衰期分别为8.5和38.5 min,结果表明,T2毒素经消化道中毒后,在肠和肝的首过代谢下能很快地转化为产物,因此,毒素在体内的毒效作用主要由其代谢产物表现出来。

T2毒素在原位灌流大鼠小肠中的吸收和代谢动力学

应用原位肠灌流标本研究了T2毒素在大鼠小肠中的吸收和代谢功力学,T2毒素对小肠标本进行血管灌流时消除半衰期为46.9 min.主要代谢产物HT2毒素的生成半衰期为12.9 min.当T2毒素由十二指肠注射后再进行灌流时,可同时发生吸收前和吸收后的小肠代谢转化,并主要以HT2,3’-OHHT2等代谢产物的形式吸收,此时毒素在小肠中的吸收和消除半衰期分别为33.0和25.6 min,实验结果表明肠道也是代谢消除T2毒素的主要器官,尤其在消化道中毒时,毒素将经历显著的肠道首过代谢.

T2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

合成并鉴定T 2毒素人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源T 2毒素多克隆抗血清。采用琥珀酸酐法将T 2毒素活化为T 2HS,T 2HS在碳二亚胺(EDC)作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原T 2 BSA和检测抗原T 2OVA,经鉴定后,分别按30、50μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔4周,最后1次免疫10d后,断尾采血,制备多抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定其敏感性和特异性。结果表明,免疫的6只小鼠效价均达到了1∶104以上,2号小鼠多抗血清的敏感性最好,其半数抑制质量浓度(IC50)为324ng/mL,且具有良好的特异性。成功合成了T 2毒素人工抗原,制备了多克隆抗体血清,为T 2毒素单克隆抗体的制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。

T2毒素对小鼠外周血象和骨髓造血干、祖细胞的作用

T2毒素2.3 mg/kg(相当LD_(30))单次ip后测定小鼠外周血象,BMNC及骨髓CFUs、CFU—GM、CFU—E和BFU—E的改变以了解T2毒素血液毒理的特征.外周血中WBC总数明显减少,RBC和pt无变化.T2毒素虽不影响CFUs的数量,但对CFU—GM、CFU—E和BFU—E均有杀伤作用,中毒后2 h三种细胞存活率达最低值分别为正常的27％、48％和57％,恢复速度甚快,5 d内全部正常.三种细胞的T2毒素剂量活存曲线均为指数坪型.分析了各类造血干细胞对T2毒素敏感性不同的原因可能与各种细胞固有特性和细胞增殖状态有关。

抑制肠道细菌丛和非特异性羧酸酯酶对T2毒素在原位灌流大鼠小肠袢中代谢的影响

预先用新霉素和头孢氨苄抑制肠道细菌丛后，Ｔ２毒素在灌流小肠袢内的代谢速度明显减慢，ｔ１／２β由正常的２６ｍｉｎ延长为１３１ｍｉｎ．主要代谢产物ＨＴ２的生成减少．Ｔ２毒素羟化生成３′－羟基ＨＴ２的反应被抑制．当Ｔ２毒素对预先用二异丙基氟磷酸酯抑制酯酶的小肠袢进行肠系膜一门脉血管灌流时．Ｔ２毒素的ｔ１／２β由正常的４７ｍｉｎ延长至１２０ｍｉｎ，ＨＴ２的生成部分被抑制，而３′－ＯＨＨＴ２的生成量显著增加．同时抑制肠道细菌丛和酯酶．Ｔ２毒素在小肠中的代谢转化基本被阻断．实验结果表明，Ｔ２毒素在大鼠小肠中的代谢转化反应主要在肠道细菌丛酶系统和非特异性羧酸酯酶的共同作用下进行．抑制肠道细菌丛酶系统可同时减少Ｔ２毒素在小肠中的水解和羟化反应．而抑制酯酶仅能减少水解反应．与此同时轻化产物增加．

四川阿坝大骨节病病区粮食和T2毒素对大鼠骨关节发育的影响

目的探讨四川阿坝大骨节病(Kaschin-Beck disease,KBD)病区粮食(病粮)和T2毒素干预对大鼠骨关节发育的影响。方法78只断乳的Wistar大鼠,雌雄各半,体重60～65 g。随机分为3组:A组(24只)为病粮饲料喂养;B组(30只)为普通饲料+T2毒素喂养;C组(24只)为普通饲料喂养。分组喂养4周后,组织标本行HE和Masson染色。结果A组和C组在喂养中无死亡,B组有12只死亡。A组大鼠毛发色泽暗,活动较少,体重每周增加8～12g,平均(10.3±2.1)g;B组大鼠毛发色泽暗,活动少,体重每周增加12～16g,平均(14.3±2.1)g;C组大鼠毛发色泽光亮,活动如常,体重每周增加15～20 g,平均(17.7±3.5)g。A组体重增加较B组和C组少(P<0.05);B组体重增加较C组少(P<0.05)。第1周时,A组和B组的骺板在骺板各细胞带均无坏死;第2周时,A组有1只、B组有2只出现肥大细胞带灶状坏死;第4周时,A组有7只、B组有6只出现肥大细胞带灶状坏死和片状坏死,其中A组有2只、B组有3只出现增殖细胞带灶状坏死。C组在第1～4周均未出现坏死。A组和B组骺板胶原Masson染色较C组明显减弱,染色不均匀,软骨细胞坏死区胶原染色消失。第1、2周时,各组大鼠干骺端骨小梁排列整齐,无明显差异;第4周时,C组干骺端骨小梁排列整齐、紧密,B组和A组干骺端均出现较多的成纤维细胞,骨化线不整齐,A组较B组明显。结论病粮和T2毒素干预下大鼠骺板软骨细胞出现灶状及片状坏死,干骺端均出现较多的成纤维细胞,骨化线不整齐;且病粮较T2毒素干预明显,提示病粮中有其他致病因素存在。

饲料中T2毒素对家禽的危害及其脱毒研究进展

T2毒素是饲料中广泛存在的一种真菌毒素,对家禽具有很强的毒性作用。综述T2毒素对家禽生长的影响、作用机制及脱毒措施。

T2毒素对大鼠红细胞膜脂流动性及脂质过氧化的影响

Ｔ２毒素对大鼠红细胞膜脂流动性及脂质过氧化的影响彭双清，杨进生（北京毒物药物研究所，北京１００８５０）Ｔ２毒素是倍半萜类两歧性分子，极易与膜发生作用［１］．它能抑制ＤＮＡ，ＲＮＡ和蛋白质的合成，引起ＤＮＡ单链断裂及多核蛋白体分裂，以及与巯基酶相结合［...

T2毒素对机体内稳态的影响

通过对小鼠微循环观察和大鼠血液酸碱平衡分析试验,研究了T2毒素对机体内稳态的影响。T2毒素单次ip 3.67 mg/kg可引起小鼠严重的微循环障碍。单次sc 0.6 mg/kg可引起大鼠急性代谢性酸中毒,并出现呼吸代偿,表现为反射性过度换气,代偿程度为非完全性,不是复合性酸碱平衡紊乱。

T2毒素单克隆抗体及试剂盒的制备

制备T2单克隆抗体并确定其基本特性,为后期快速检测方法建立奠定基础。利用自制的多抗血清和单克隆抗体,建立酶联免疫吸附试验(ELISA)快速测定方法。结果显示,该方法灵敏、特异,可为大量样本测定储备条件。

大骨节病病区病户主食中T－2毒素检出报告

用ＥＬＩＳＡ法检查大骨节病病区病户面粉１５份，其中１０份Ｔ－２毒素为阳性，全距为２．０～１５４９．４ｎｇ／ｇ，均数４６８．７ｎｇ／ｇ；病区村、镇市售面粉８份，其中７份阳性．全距为２．５～８８５．３ｕｇ／ｇ，均数２４４．０ｎｇ／ｇ；基本控制病区样品４份，阳性１份，含量３５．６ｎｇ／ｇ。；非病区面粉１５份，阳性１０份，全距２．０～２４８．７ｕｇ／ｇ，均数８４．２ｎｇ／ｇ．在前述各地采集的大米、小米、黄米等粒状食粮均没有或仅有痕迹量的Ｔ－２毒素检出。对Ｔ－２毒素致大骨节病的病因学意义作了扼要讨论。

T_2毒素对大鼠心肌能量代谢的影响

目的 探讨 T2 毒素致大鼠心肌损伤的机制。方法 通过慢性毒理学实验 ,运用电镜酶学、生理酶学及高效液相色谱技术 ,观察 T2 毒素对大鼠心肌能量代谢的影响。结果 T2 毒素可使大鼠心肌组织中 ATP含量、线粒体呼吸链呼吸酶、细胞色素氧化酶活力以及 ATP酶活力下降。结论 T2 毒素可能通过损害大鼠心肌能量代谢而导致心肌不可逆损伤 ,加硒或加维生素

T2毒素的纯化及抗肝癌活性的研究

[目的]纯化T2毒素并探讨其抗肝癌活性。[方法]采用萃取法、柱层析法和高效液相色谱法从污染的玉米粒中分离T2毒素,采用MTT法、结晶紫染色法、荧光染色法考察其对两种肝癌细胞数量和形态的影响,划痕实验考察对细胞迁移的影响。[结果]纯化后,T2毒素纯度达到98%;当T2毒素浓度为8μg/mL时,对肝癌细胞的抑制率分别为(95±1.34)%(Hep G2)和(97±2.59)%(SMMC-7721),IC50分别为0.003 77μg/mL和0.003 25μg/mL,且有剂量依赖性。给药24 h后,与对照组相比,贴壁细胞减少,细胞体积缩小,肿瘤细胞迁移能力减弱。[结论]T2毒素能够成为一种潜在的抗肝癌药物。

T-2毒素检测方法及其毒性研究进展

T–2毒素是单端孢霉烯族毒素中毒性最强的一种,广泛存在于自然界中,是污染农作物的主要毒素,经食物摄入后对动物和人类的健康均造成严重威胁,已引起广泛关注,并成为近年来的研究热点。该文从T–2毒素的毒理学意义出发,主要从T–2毒素的分析检测方法以及其毒性作用方面进行详细论述。

贵州省小麦中T—2毒素污染调查

贵州省小麦中Ｔ—２毒素污染调查陈一峰，赵萍，魏桂兰，王伟贵州省食品卫生监督检验所（５５０００４）Ｔ一２毒素是某些粮食作物致病真菌的次生代谢产物，由镰刀菌引致的麦类、玉米等作物的赤霉病，其病菌能产生大量的Ｔ一２毒素。该毒素时人畜的毒性很大，对成年大鼠经...

饲料中T—2毒素检测法的最佳选择

由镰刀菌、木霉等霉菌所产生的T—2毒素及其它单端孢烯霉菌毒素,是饲料的污染物。其特点是,毒性大,对农畜的损害极其严重。为预防该类毒素的中毒,必须有系统地进行饲料中霉菌毒素的检测。俄特列马索夫等对几种T—2毒素检测法作了比较。结果表明:薄层色谱法,当T—2毒素含量【500—800μg/Kg时,就检测不出来,且检测时间要6—7小时,此法适于T—2毒素污染严重的饲料,即】1000μg/Kg情况下的检测;气液色谱法,谷粒中T—2毒素在50μg/Kg时就能检测出来。

1991年河南省水灾区小麦霉变和霉菌毒素检测分析

本文测定了1991年9月河南省遭水灾后的信阳、驻马店、周口三地区新小麦霉菌菌相、霉菌侵染率和霉菌毒素含量。在被检测的24份样品中,霉菌总数在102—108cfu/g之间,共检出霉菌22个属、群或种。优势霉菌主要为根霉、毛霉和黄曲霉。14份小麦染霉率为100％,占58.3％。1份小麦中AFB1含量超标,其含量为25ug/Kg;10份小麦中DoN含量大于1mg/kg,占41.7％,最高含量为3.5mg/Kg;对21份小麦的T—2毒素检测中,18份样品T—2毒素含量大于100ug/Kg,占85.7％,最高含量为1267.9ug/Kg。

3种真菌毒素(ZEN、DON及T2)完全抗原的合成与鉴定

目的:合成玉米赤霉烯酮(ZEN)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和T2 3种真菌毒素的完全抗原。方法:将ZEN半抗原、DON及T2与阳离子化的载体蛋白(BSA和OVA)偶联,制备高特异性的完全抗原。用高性能基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF)检测偶联物及载体蛋白的分子质量,用商品化的ZEN、DON和T2单克隆抗体对偶联物进行免疫滴定验证。结果:平均每个BSA偶联上的ZEN、DON和T2的分子个数分别为20.81,6.03,4.92个,平均每个OVA偶联上的ZEN、DON和T2分子个数分别为7.17,3.05,2.80个,偶联物与ZEN、DON及T2的抗体呈阳性反应。结论:合成的ZEN、DON及T2完全抗原为3种毒素抗体的制备及免疫学方法的建立奠定了基础。