用实时荧光PCR方法鉴定转基因玉米T14/T25

以实时荧光PCR技术鉴定商业化种植的转基因玉米T14/T25品系。根据转基因玉米T14/T25转入的外源基因质粒图谱,设计转基因引物和探针进行PCR和实时荧光PCR检测,建立了转基因玉米品系鉴定的实时荧光PCR方法。实验结果表明,用TaqMan探针可检测到T14/T25产生的荧光信号,而对其他玉米品系则检测不到荧光信号,为转基因产品的鉴定检测提供了新方法。

木霉菌T25生物学特性的研究

温度对T25菌株菌丝生长和孢子产生影响显著,30℃时菌丝生长最快,25℃时产孢量最大。T25在pH值2-10范围内均可生长,pH值5-6时生长最快,pH值为6时孢子产生量最大。光照处理对菌丝生长影响显著,并且明显促进孢子产生。淀粉、蔗糖分别为菌丝生长和产孢的最佳碳源。硫酸铵和蛋白胨为菌丝生长和产孢的最佳氮源。不同维生素对菌丝生长和孢子产生的作用不同,VB1＋VH、VB6对菌丝生长和产孢最有利。微量元素对菌丝生长有一定的促进作用,Ca2＋有利于孢子的产生。

转基因玉米T25基体标准物质协同实验研究

对转基因玉米125转化体特异性荧光定量PCR方法的关键参数进行了方法验证，选择了7家实验室采用经过验证的方法对3个水平的转基因玉米125基体标准物质进行协同实验研究。通过比较分析各参与实验室的实验条件、标准曲线的参数，进一步证明该方法室间重复性好。经统计学分析各参与实验室的数据等精度，因此计算各实验室的总平均值做为标准物质的标准值。3个水平的基体标准物质的标准值和扩展不确定度（k=2）分另Ⅱ为1．17％±0．22％、2．17％±0．38％和9．81％±2．30％。

一种基于AT25T1024 FLASH的高速SPI接口设计

从一种军用板卡的实际需求出发,对SPI接口在设计中有诸如FPGA资源和管脚等限制的情况下,快速加载配置数据的方法进行了分析。并基于ATMEL公司的AT25F1024FLASH器件,描述了高速SPI接口的设计原理和方法,具有一定的实用性和可行性。

转基因玉米T25数字PCR方法的建立与验证

转基因安全管理和标识制度的实施需要标准化的检测方法和转基因检测标准物质,标准物质是获得准确、可靠、可比检测结果的保证。转基因玉米T25为我国批准进口用作加工原料的转基因植物。为加强对T25的监管,以T25基体标准物质为研究对象,建立数字PCR方法,并选择8家实验室,采用数字PCR联合定值测定。结果表明,T25/Adh1二重数字PCR系统具有良好的扩增特异性。初始模板量在100~10 000拷贝·μL^-1之间可获得稳定、可靠的检测结果。通过多实验室协同定值说明T25/Adh1二重数字PCR方法准确、可靠。T25基体标准物质的量值为1.001 2,相对不确定度为0.001 6。研究表明建立的T25/Adh1二重数字PCR方法可以用于转基因玉米T25的定量检测,为转基因成分定量检测提供了物质基础和技术保证。

摇床T25细胞培养瓶流体力学与传质特性研究

细胞培养技术是生物医药产业的支柱,以实现微小体积内的高密度、高通量细胞培养为目的,系统地研究了常用于单层静态培养的T25方瓶置于翘板摇床上在不同操作条件下的流体力学特性和传质性能。结果表明,振荡可以显著提高方瓶的传质速率并降低混合时间,使高密度培养成为可能,但瓶盖上的空气滤膜在高转速时成为传质速率的限制因素;培养瓶对称轴与摇床旋转轴平行时,其相对位置对混合和传质无明显影响,但当二者成45°角时,相同转速下混合时间显著缩短;使用自定义函数实现了基于动态网格的CFD模拟,对不同转速下方瓶内剪切应力和能量耗散在时间与空间上分布进行了分析,为基于T25培养瓶开发一次性高通量微型反应器提供了数据支持和理论基础。

BST25T型客车由电力机车供电后的电气系统适应性改造

BST25T型客车原设计由发电车或内燃机车集中供电(三相四线380/220V),不会遇到过分相区停电问题,但改由电力机车供电后,客车供电系统在过分相区时会周期性断电,造成用电负载非连续工作。为解决该问题,制定了增加不间断电源装置,改造供电控制系统、空调系统及负载控制系统的方案,以保证电力机车过分相区时客车电气系统能连续工作。

感受Full HD 厦华LC37T25Y液晶电视试用

随着央视高清频道的启动以及近期液晶电视价格的持续走低,大屏幕液晶电视逐渐成为许多消费者追棒的热点。特别是具有1920×1080 Full HD分辨率的液晶电视更是受到关注,一来满足国人一步到位的心理需求,二来的确为将来的各种应用打下坚实的基础。厦华LC37T25Y就是其中一款深受关注的产品,下面就一起来看看Full HD的实力吧。

Washburn T25五弦贝司

T25出自Washburn的Taurus系列，这个系列包含的贝司有T12、T14、T14Q、T24和T24的五弦版本T25。T24和T25还获得了美国著名贝司杂志《Bass Player》编辑评选的出众做工奖。

阿特拉斯·科普柯 PowerROC T25 DC在华初体验

阿特拉斯·科普柯PowerROC T25 DC型钻机刚于进入中国市场不久,就开始发挥其功效.位于广西壮族自治区玉林市境内的北流胴天采石场日前成为了阿特拉斯·科普柯PowerROCT25 DC型钻机在中国的第一个用户. 北流胴天采石场位于广西壮族自治区玉林市境内,是一家规模适中的石灰岩采石场,月开采量在10万t左右.该采石场的总经理谭胴天对采石场开采的工艺颇有研究,把矿山12m的台阶设计得井井有条,钻机、挖掘机、卡车以及各种机械设备配合恰当,互不妨碍.谭经理对于钻机的生产能力有明确的要求:200 m/天.在对市场现有机型进行细致研究之后,谭经理联系到了阿特拉斯·科普柯在华的销售人员,并于近日投入生产.

2012“航博会”杯T25三体帆船赛圆满收帆

做为第十届中国国际航海博览会的重要板块——2012"航博会"杯T25三体帆船赛,于5月25日至27日在青岛奥帆中心隆重举行。25日的启航仪式上,中国国际贸易促进委员会副会长王锦珍,青岛奥帆城市发展促进会常务副会长、青岛市重大国际帆船赛事(节庆)活动组委会副主席臧爱民,

OVC T25小接口耳塞

继T10、T11之后,OVC日前又乘胜追击,推出了一款专为手机和超薄播放器设计的耳塞——T25。它有两大卖点,分别是时尚的外观和专门为音乐手机、超薄MP3设计的2．5mm插头。外观方面,OVC T25耳塞圆润动感,耳塞线纤细,耳塞整体采用了灰蓝色调,并使用了OVC首创的铝合金入耳结构腔体,不仅轻巧坚固。

RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响

目的:探讨RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响。方法:选取2017年1月至2019年1月于本院就诊的134例胃癌患者术后癌组织标本作为研究对象,另选取其中62例胃癌患者相应的癌旁组织标本及40例同期非胃癌患者正常胃黏膜组织标本进行对照,检测癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达情况,分析其对胃癌预后及生存时间的影响。结果:RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在癌组织中的阳性率均明显高于癌旁组织和正常胃黏膜组织(P<0.05)。胃癌患者术后平均生存时间为(28.61±1.34)个月,其中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2阳性患者的生存时间均短于阴性患者(P<0.05)。RhoA(+)、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(+)、MYBL2(+)是胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:检测RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达可作为胃癌病情严重程度、预后及生存时间评估的重要补充手段。

转基因玉米质粒分子国家标准样品的构建

本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品。研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等。均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定。采用PicoGreen DNA分子荧光定量方法定值标准样品。多家单位合作定值,确定标准样品的标准值及其不确定度。所研制的转基因玉米质粒分子标准样品获得了国家标准样品证书,适用于转基因产品的定量和定性测定。

25T型客车空调新风调节系统故障及优化措施研究

25T型客车在运用过程中多次发生新风门故障,造成新风调节功能失效,影响乘客乘坐舒适度。通过对YW25T型车安装的KLD45TD型空调机组新风调节装置的结构组成及工作原理分析,并通过新风调节系统误报故障现象和原因分析,得出发生新风门误报故障的原因为DC600 V电源装置电磁兼容特性不良产生较高的谐波干扰PLC 525线。最后利用电容器隔直通交的原理,在PLC 525端子与DC24 V负线之间并接无极性电容,提高了电路的稳定性,有效地消除了因DC600 V电源谐波含量高而产生的干扰电压所引起的新风调节系统误报故障。文中提到的处理方法已处理此类新风门故障10余起,均取得了较好的效果,为客车干扰类故障处理方面提供了新的思路和方法。

外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌患者腹腔镜根治术后预后的预测价值

目的分析外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌(CC)患者腹腔镜根治术后预后的预测价值。方法招募2018年9月至2020年9月于儋州市人民医院接受腹腔镜根治术治疗的早期CC患者204例,根据患者术后随访期间预后情况分为预后不良组(43例)和预后良好组(161例)。比较两组临床资料。采用Spearman秩相关分析外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平的相关性。采用多因素logistic回归分析早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的预测价值。结果预后不良组CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)水平,术后切缘阳性占比以及术中宫旁浸润占比高于预后良好组,CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,早期CC患者外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平呈负相关(r_(s)=-0.478,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的CEA、CA125、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平是促进早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立危险因素(P<0.05),较高的CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平是抑制早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良(P<0.05),两项指标联合可进一步提高预测效能[AUC(95%CI)=0.939(0.898~0.979),P<0.001],灵敏度和特异度分别为86.00%、88.20%。结论外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平与早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良有关,二者能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良。

氧化苦参碱对 CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞(Tr)和淋巴细胞增殖的影响(英文)

目的通过分析氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)各剂量组对小鼠外周血调节性T细胞(regulatory Tcells,Tr细胞)数量的影响,同时检测OMT对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠淋巴结T细胞增殖的影响,探讨OMT治疗ACD的免疫学作用机制,以期为临床用OMT治疗变态反应性疾病提供更深入的理论和实验依据。方法建立DNFB诱发的小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射(ip),在实验进程的第1、7、14、21和28天小鼠尾静脉采血,抗-CD3、抗-CD4、抗-CD25单抗进行三色免疫荧光标记,流式细胞术检测各组CD4+CD25+T细胞数量。利用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色,流式细胞术检测OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖的影响。实验数据以SPSS10.0以及CELLQuest软件进行处理。结果体外实验证明,在500、125和31μg/mL组的OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖呈剂量依赖性抑制,而在16、8、4和2μg/mL组的OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖起促进作用,但其剂量依赖关系不明显。腹腔注射OMT能明显提高小鼠外周血中CD4+CD25+T细胞的数量,与HCT组比较(P<0.01),与PBS组比较(P<0.01)。结论OMT对小鼠淋巴结T细胞的增殖呈双向作用;腹腔注射OMT能明显提高小鼠外周血中CD4+CD25+T细胞的数量;即OMT对免疫系统的影响呈双向作用,OMT是一种双向免疫调节剂。

体细胞突变体HX-3抗水稻白叶枯病基因的鉴定

以感病杂交稻恢复系明恢 6 3的成熟胚为外植体 ,利用离体筛选技术获得了抗水稻白叶枯病细胞突变体HX 3。连续 8年以我国长江流域白叶枯病代表菌株浙 173(Ⅳ型 )对HX 3的R1 到R9代进行抗性鉴定 ,HX 3的抗病性可以稳定遗传。抗性遗传分析表明HX 3的抗性由 1对显性核基因控制。 1999～ 2 0 0 0年连续两年利用我国、菲律宾和日本的 32个水稻白叶枯病菌株 ,测定HX 3及IRBB1等 13个具不同显性抗病基因的近等基因系抗性 ,HX 3抗谱广 ,且与已知显性抗病基因的抗谱不同。在此基础上 ,以抗白叶枯病近等基因系IRBB4、IRBB7、CBB12和IRBB2 1和HX 3杂交 ,进行等位性分析 ,4个杂交组合的F2 代均出现抗、感分离 ,说明HX 3与这 4个基因不等位。综合以上研究结果 ,HX 3具有 1个新的抗白叶枯病基因 ,暂命名为Xa 2 5 (t)。

连续性血液净化治疗对全身炎症反应综合征及脓毒症患者细胞免疫功能的影响

目的探讨连续性血液净化(CBP)治疗对全身炎症反应综合征(SIRS)及脓毒症(SEPSIS)患者细胞免疫功能的影响。方法 38例行CBP治疗的患者分为SEPSIS组和SIRS组,均行连续血液净化,分别于治疗0、5、10、15、20 h留取EDTA抗凝血标本,用流式细胞分析法测定CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+T细胞亚群频率,并用ELISA方法测定血清中IL-2、IL-10的浓度。同时于0、10和20对患者行APACHE II评分。结果 CBP治疗后SIRS组与SEPSIS组CD3+淋巴细胞及CD4+T细胞亚群均逐渐升高,但SIRS组在治疗后5 h即出现明显升高,而SEPSIS组直至治疗后20 h才出现显著升高。CD4+CD25+亚群在两组均表现逐渐升高,治疗20 h时与0 h相比差异有统计学意义。SIRS组血清中IL-2和IL-10分别于CBP治疗后5 h和10 h开始出现显著降低,而这2种细胞因子在SEPSIS组于治疗前后均未出现明显变化。SEPSIS组患者在治疗之前其APACHE II评分明显高于SIRS组,治疗后两组均呈现APACHE II评分在治疗10 h后开始显著降低。结论 CBP治疗对于高水平的炎症因子有较好的清除作用;还可双向调节T淋巴细胞亚群,改善SIRS患者的免疫系统,促进SEPSIS患者免疫系统的活化及重建,从而达到调节免疫平衡的作用。

自体外周血纯化CD34＋细胞移植对系统性红斑狼疮患者外周血CD4＋CD25＋T细胞表达的影响

目的研究自体外周血纯化造血干细胞移植对系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+CD25+T细胞表达的影响。方法15例接受自体外周血纯化造血干细胞移植的SLE患者列入研究,应用流式细胞技术动态监测移植前及移植后3、6、12、24个月的CD4+CD25+T细胞表达水平。结果自体外周血造血干细胞移植治疗前SLE患者外周血的CD4+CD25+T细胞表达明显低下,移植后3个月出现增高,移植6、12、24个月后达正常水平。复发者外周血CD4+CD25+T细胞的表达水平明显低于非复发者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论自体外周血纯化CD34+细胞移植可通过促进CD4+CD25+T细胞的表达发挥治疗作用。