H5Nx禽流感病毒交叉反应性CD4^(+) T细胞表位预测

【目的】评估预先存在的H5Nx交叉反应性免疫记忆,为人类H5禽流感病毒的防治和广谱疫苗的研发提供理论数据。【方法】利用生物信息学方法筛选人源H5Nx禽流感病毒与季节性流感病毒的共同保守的交叉反应性CD4^(+) T细胞表位,进一步分析保守表位嵌套CD8^(+) T细胞表位和B细胞表位情况以及在中国人群中的覆盖率。【结果】92.3%(513/555)的H5Nx CD4^(+) T细胞表位在季节性甲型流感病毒中具有交叉反应性,其中172个表位嵌套CD8^(+) T细胞表位和5个表位嵌套B细胞表位。这些表位与相应HLA-DRB1等位基因在全世界人群中的覆盖率为88.65%。【结论】由于反复接触季节性甲型流感病毒,人群中存在一定水平的的H5Nx交叉反应性免疫记忆,能够为H5Nx感染提供部分保护。

NSUN2通过m^(5)C修饰介导系统性红斑狼疮患者中CD4^(+)T细胞的活化

目的:探究mRNA的m^(5)C甲基转移酶NSUN2对系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4^(+)T细胞活化的影响。方法:通过慢病毒感染和有限稀释法构建NSUN2稳定敲除的Jurkat细胞单克隆株,Western blot和免疫荧光检测Jurkat细胞中NSUN2的敲除效果,Dot blot检测NSUN2敲除后m^(5)C的修饰水平变化。使用抗人CD3/CD28抗体刺激Jurkat细胞活化,分别在24 h和48 h使用流式细胞术检测Jurkat细胞活化标志物CD69和CD25的表达水平,RT-qPCR检测Jurkat细胞活化后IL-2和TNF-α的转录水平;建立NSUN2^(+/-)小鼠模型,使用磁珠分离CD4^(+)T细胞,通过体外诱导细胞活化,进一步评价NSUN2的敲低对CD4^(+)T细胞活化的影响。使用Arraystar mRNA表观转录组芯片检测NSUN2敲除后Jurkat细胞中基因m^(5)C修饰水平和表达水平,获得受NSUN2调控的m^(5)C修饰的靶基因,利用GO和KEGG富集分析获得NSUN2调控的重要信号通路,结合SLE患者CD4^(+)T细胞中差异的m^(5)C修饰基因集,筛选获得受NSUN2调控的且与SLE疾病相关的靶基因,并进一步利用GO和KEGG等分析NSUN2调控系统性红斑狼疮CD4^(+)T细胞功能的潜在通路。结果:采用CRISPR-Cas9技术,成功获得NSUN2敲除的Jurkat细胞单克隆株,与NSUN2-NC组相比,NSUN2-KO组m^(5)C修饰水平下调,Jurkat细胞的活化标志物CD69和CD25表达水平上调,活化相关细胞因子IL-2和TNF-α表达水平上调(P<0.05);与野生型小鼠相比,NSUN2^(+/-)小鼠Naive CD4^(+)T细胞的活化标志物CD69的表达水平上调。机制上发现,Jurkat细胞中存在受NSUN2调控的基因集,GO和KEGG富集显示这些基因与T细胞活化过程相关。结合SLE患者CD4^(+)T细胞中差异的m^(5)C修饰基因集,筛选获得受NSUN2调控且与SLE疾病相关的靶基因集,GO和KEGG富集分析证实这些基因集与CD4^(+)T细胞功能相关。结论:NSUN2的敲除/敲低促进了Jurkat细胞和小鼠Naive CD4^(+)T细胞的活化,初步筛选出NSUN2调控SLE患者CD4^(+)T细胞活化的靶基因集及其潜在信号通路。

白藜芦醇通过下调LRP5/6表达抑制小鼠乳腺癌4T1细胞增殖

目的通过体外实验研究白藜芦醇(RES)抑制小鼠乳腺癌4T1细胞增殖的作用机制。方法将处于对数生长期小鼠乳腺癌4T1细胞消化后接种于3.5 cm细胞皿中,分别加入0、2.5、5、10、20μmol/L的RES干预72 h,使用倒置显微镜拍照观察法和台盼蓝计数法检测RES干预后细胞密度和活细胞浓度;Western blot检测低密度脂蛋白相关受体结合蛋白5(LRP5)、低密度脂蛋白相关受体结合蛋白6(LRP6)蛋白表达量。再将细胞分为对照组、RES组,分别加入0μmol/L和前述所筛选的最佳干预浓度的RES干预72 h,Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)核蛋白表达量。接着将细胞分为siCtr组、siLRP5组、siLRP6组、siβ-catenin组,siCtr组给予正常培养,siLRP5组加入LRP5小干扰RNA(siRNA)沉默LRP5基因,siLRP6组加入LRP6 siRNA沉默LRP6基因,siβ-catenin组加入β-catenin siRNA沉默β-catenin基因,使用倒置显微镜拍照和台盼蓝计数检测上述4组细胞密度和活细胞浓度;Western blot检测LRP5、LRP6和β-catenin蛋白表达量。最后将细胞分为Vector组、Vector+RES组、LRP5组、LRP5+RES组、LRP6组、LRP6+RES组、N端缺失的β-catenin突变体组(β-cateninΔN组)、β-cateninΔN+RES组,Vector组给予正常培养,Vector+RES组加入前述所筛选的最佳干预浓度的RES干预,LRP5组加入过表达LRP5质粒,LRP5+RES组加入过表达LRP5质粒联合RES最佳干预浓度,LRP6组加入过表达LRP6质粒,LRP6+RES组加入过表达LRP6质粒联合RES最佳干预浓度干预,β-cateninΔN组加入过表达β-cateninΔN质粒,β-cateninΔN+RES组加入过表达β-cateninΔN质粒联合10μmol/L的RES干预。使用倒置显微镜拍照和台盼蓝计数检测上述8组细胞密度和活细胞浓度;Western blot检测LRP5、LRP6和β-catenin蛋白表达量。结果与0μmol/L RES组比较,10、20μmol/L RES组细胞密度和活细胞浓度均降低(P<0.05),对LRP5、LRP6蛋白表达下调显著(P<0.05),故后续选用10μmol/L浓度的RES进行干预。与对照组比较,RES组β-catenin核蛋白表达量下调(P<0.05);与siCtr组比较,siLRP5组、siLRP6组和siβ-catenin组细胞密度和活细胞浓度降低(P<0.05);与Vector组比较,Vector+RES组细胞密度和活细胞浓度降低(P<0.05);与Vector+RES组比较,LRP5+RES组、LRP6+RES组和β-cateninΔN+RES组细胞密度和活细胞浓度升高(P<0.05)。结论白藜芦醇可阻止小鼠乳腺癌4T1细胞增殖,其机制与通过下调LRP5、LRP6表达抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关。

系统性红斑狼疮患者外周血CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞上PD1表达及意义

目的探讨程序性死亡分子1(PD1)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞上的表达及临床意义。方法流式细胞术检测47例SLE患者、35例健康对照者(HC)外周血PD1^(+)CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞百分率和CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达平均荧光强度(MFI),比较两组之间的差异,分析其与SLE临床、实验室指标、浆母细胞的相关性,并分析其预测SLE的价值。结果(1)SLE患者PD1^(+)CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞百分率高于HC,差异有统计学意义(P=0.0083,U=540.5);SLE患者CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI高于HC,差异有统计学意义(P<0.0001,U=187.0)。(2)SLE患者PD1^(+)CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞百分率与补体C3(r_(s)=-0.3352,P=0.0228)、抗SSA抗体(P=0.0166,t=2.5)、抗组蛋白抗体(P=0.0303,t=2.3)、治疗(P=0.0202,t=3.4)、浆母细胞比例(r_(s)=0.3871,P=0.0072)相关;SLE患者CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI与系统性红斑狼疮疾病活动性评分(SLE-DAI)(r_(s)=0.4031,P=0.0050)、红细胞沉降率(r_(s)=0.3561,P=0.0177)、C-反应蛋白(r_(s)=0.3374,P=0.0289)、红细胞(r_(s)=-0.2970,P=0.0426)、血红蛋白(r_(s)=-0.3029,P=0.0385)、血细胞比容(r_(s)=-0.3816,P=0.0081)、淋巴细胞计数(r_(s)=-0.3937,P=0.0062)、淋巴细胞百分比(r_(s)=-0.3912,P=0.0065)、中性粒细胞百分比(r_(s)=0.3150,P=0.0311)、NLR(r_(s)=0.3730,P=0.0098)、LMR(r_(s)=-0.4315,P=0.0025)、dNLR(r_(s)=0.3150,P=0.0311)、anti-Ro52(P=0.0295,t=63.5)、治疗(P=0.0355,W=21)、浆母细胞比例(r_(s)=0.3158,P=0.0306)相关。(3)逻辑回归分析显示CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI是SLE的危险因素。(4)ROC曲线分析显示CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI预测SLE的AUC为0.886,构建了基于CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI和HGB的预测模型,预测模型的AUC为0.979,预测模型与SLEDAI呈正相关(r_(s)=0.3136,P=0.0303)。结论SLE患者升高的外周血PD1^(+)CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞百分率、CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI与疾病严重程度及活动性相关,且构建了基于CXCR5^(-)CD4^(+)T细胞PD1表达MFI和HGB的SLE预测模型。

肿瘤微环境中CD4^(+)T细胞浸润、MFAP5与膀胱癌患者预后关系的临床研究

目的:研究肿瘤微环境中CD4^(+)T细胞浸润、微纤维相关蛋白5(MFAP5)与膀胱癌(UCB)患者预后的关系。方法:选取2018年1月至2018年12月济宁医学院附属滕州市中心人民医院病理科保存的80例UCB组织及癌旁正常组织,检测癌组织、癌旁组织中CD4^(+)T细胞密度及MFAP5表达。分析不同临床分期、疾病分级、分化程度患者CD4^(+)T细胞密度及MFAP5表达。根据患者病灶CD4^(+)T细胞密度,将71例患者分为CD4^(+)T细胞低密度组45例(<中位数)、高密度组26例(≥中位数);根据患者病灶中MFAP5表达,将71例患者分为MFAP5低表达组48例(0~4分)、高表达组23例(5~12分)。对比分析各组患者复发、转移、生存情况(进展生存期、总生存期、二年生存率)。结果:与癌旁组织相比,癌组织CD4^(+)T细胞密度、MFAP5表达、阳性率均升高(P<0.05)。UCB发展过程中CD4^(+)T细胞、MFAP5表达存在明显差异,与临床分期Ta~T1期、病理分级G_(1)、G_(2)级、高分化患者相比,临床分期T_(2)~T_(4)期、病理分级G3级、低分化患者CD4^(+)T细胞密度及MFAP5表达升高(P<0.05)。与低密度组相比,高密度组无进展生存期、总生存期缩短,二年生存率降低,复发率、转移率升高(P<0.05);与低表达组相比,高表达组无进展生存期、总生存期缩短,二年生存率降低,复发率、转移率升高(P<0.05)。结论:UCB中CD4^(+)T细胞浸润、MFAP5表达与患者分期、疾病分级、分化程度呈正相关。CD4^(+)T细胞浸润密度高、MFAP5高表达患者预后复发率、转移率较高,生存率较低,是影响患者预后的敏感指标。

髓系细胞缺失ATG5对疟原虫特异性CD4+T细胞免疫记忆形成的影响

目的研究髓系细胞缺失ATG5对疟原虫特异性CD4^(+)T细胞免疫记忆形成的影响。方法构建髓系细胞特异缺失ATG5的条件敲除小鼠,在其感染约氏疟原虫Plasmodium yoelii(P.yoelii)17XNL自愈后1个月、3个月和6个月分别再次感染该虫株,观察其原虫率变化。同时采用流式细胞术检测髓系细胞ATG5条件缺失感染自愈小鼠疟原虫特异性免疫记忆CD4^(+)T细胞频率和数量的变化。结果成功构建髓系细胞ATG5条件缺失实验小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(+))。与对照组(ATG5^(f/f)-LysM cre^(-))相比,初次感染P.y 17XNL的实验组小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(+))原虫血症明显低于对照组小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(-))。在上述感染小鼠自愈后1个月、3个月和6个月再次感染P.y 17XNL,结果发现感染小鼠原虫血症与初次感染相比,均显著降低,且所有感染小鼠在攻击后6~8 d内完全清除体内疟原虫。流式检测后发现,ATG5^(f/f)-LysM cre^(+)与ATGf/f-LysM cre^(-)小鼠感染自愈后3个月或6个月,其脾脏疟原虫特异性免疫记忆CD4^(+)T细胞频率和数量均无统计学差异。结论P.y 17XNL感染自愈小鼠可以有效诱导宿主免疫记忆,但髓系细胞缺失ATG5不影响疟原虫特异性CD4^(+)T细胞免疫记忆形成。

沙丁胺醇气雾剂联合硫酸镁对小儿哮喘IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ及T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨沙丁胺醇气雾剂联合硫酸镁对小儿哮喘IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ及T淋巴细胞亚群的影响。方法选取已确诊为哮喘的患儿38例,采用随机数字表法将患者随机分为实验组和对照组,对照组予临床常规方法治疗,实验组采用沙丁胺醇气雾剂联合硫酸镁治疗,疗程1周。观察2组患者IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ、T淋巴细胞亚群、血压、心率、呼吸和临床疗效。结果与对照组相比,实验组患者血清IL-2、IFN-γ水平较高(P<0.05),IL-4、IL-5水平较低(P<0.05);实验组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平较高(P<0.05),血清CD8+较低(P<0.05),实验组总有效率较高(P<0.05)。结论沙丁胺醇气雾剂联合硫酸镁能有效调节哮喘患儿T淋巴细胞亚群比例和细胞因子水平,提高免疫力,改善临床症状。

肝素寡糖对人外周血T细胞分泌白介素-4和白介素-5的影响

目的研究肝素寡糖(Oligs)对人外周血T细胞(PBTLs)分泌白介素-4(IL-4)和白介素-5(IL-5)的抑制作用。方法用3种方法降解肝素并用凝胶过滤色谱法制备肝素寡糖。抽取10例过敏性嗜酸粒细胞性胃肠炎患者的PBTLs用植物凝集素(PHA)和Oligs处理,用ELISA法测定PBTLs培养的上清液分泌IL-4和IL-5的含量。结果Oligs样品浓度5μg/mL时,可显著抑制PBTLs对细胞因子IL-4、IL-5的分泌。但是,不同相对分子质量(Mr)的Oligs对IL-4和IL-5具有不同的作用。对IL-4抑制作用最强的是用过氧化氢降解肝素所得Mr为1 142的四糖。抑制IL-5作用最强的是用β-消除法降解肝素所得Mr为1 806的六糖。结论Oligs对人PBTLs分泌IL-4和IL-5的抑制作用与分子结构密切相关,并且有一个基本结构。对IL-4和IL-5抑制作用最强的分别是四糖和六糖。

5-FU对小鼠乳腺癌4T1细胞株中肿瘤干细胞样细胞的富集作用

目的:探讨以氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)处理并通过荷瘤小鼠模型体内传代的方法富集乳腺癌干细胞样细胞的可行性,为靶向肿瘤干细胞治疗奠定基础。方法:以乳腺癌细胞株4T1皮下接种小鼠制备荷瘤模型,以一定剂量5-FU腹腔注射4周;处死小鼠后取肿瘤组织制成细胞悬液,并接种小鼠制备下一代小鼠荷瘤模型,5-FU处理及再次传代方法同上,共传4代。对照组小鼠给予生理盐水注射,其余处理同模型组。流式细胞术检测各代肿瘤组织中CD44+CD24-/low细胞比例,Hoe-chast 33342染色法检测侧群(side population,SP)细胞的比例,免疫组化法检测CD55和ALDH1蛋白的表达,倒置显微镜观察乳腺癌细胞微球体的形成,小鼠致瘤实验检测不同肿瘤细胞的致瘤能力。结果:各代对照组小鼠模型肿瘤组织中CD44+CD24-/low细胞比例为(11.5±0.9)%,SP细胞比例为(9.7±1.3)%,ALDH1表达阴性,CD55强阳性表达细胞数为(0.6±0.3)%,乳腺癌细胞微球体比例为(0.5±0.2)%;5-FU处理组4代小鼠模型肿瘤组织中CD44+CD24-/low细胞比例分别为(49.8±1.2)%、(56.8%±1.7)%、(66.4±1.5)%、(69.0±1.6)%,SP细胞比例分别为(25.0±1.2)%、(42.6±2.8)%、(58.4±2.1)%、(61.3±2.6)%,ALDH1阳性表达细胞比例为(3.8±0.7)%、(14.1±2.4)%、(25.2±3.1)%、(27.5±2.7)%,CD55强阳性细胞比例为(7.8±1.6)%、(10.1±2.0)%、(15.6±1.4)%、(17.3±1.9)%,乳腺癌细胞微球体形成比例为(5.9±0.4)%;两组各相应指标之间差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。5-FU作用后富集了肿瘤干细胞的第3代肿瘤细胞的致瘤作用显著强于对照组细胞(P<0.05)。结论:5-FU作用并通过荷瘤小鼠体内传代能够富集小鼠乳腺癌4T1细胞株中的肿瘤干细胞样细胞。

Microstructures and mechanical properties of as-extruded and heat treated Mg-6Zn-1Mn-4Sn-1.5Nd alloy

The microstructures and mechanical properties of Mg-6Zn-1Mn-4Sn-1.5Nd alloy subjected to extrusion and T5 treatment were investigated using optical microscopy（OM）, X-ray diffractometer（XRD）, scanning electron microscopy（SEM）, electron back scattered diffraction（EBSD）, transmission electron microscopy（TEM）, hardness tests and uniaxial tensile tests. The results showed that the as-cast alloy consisted of α（Mg）, Mn, Mg7Zn3, Mg2 Sn and Mg Sn Nd phases. Dynamic recrystallization has completed during the extrusion process and the average grain size was 7.2 μm. After T5 treatment, the strength increased obviously, the yield strength and ultimate tensile strength of as-extruded alloy were increased by 94 and 34 MPa, respectively. Microstructure characterization revealed that the improvement of strength was determined by the high number density of β′1 rods.

T4态CNTs/ZM5复合材料的研究

对搅拌铸造技术制备的CNTs/ZM5复合材料进行T4固溶处理。研究了碳纳米管(CNTs)对T4态力学性能的影响规律。测试了T4固溶处理后复合材料力学性能,并利用扫描电子显微镜和能谱分析对复合材料断口形貌进行了观察和分析。试验结果表明,CNTs对T4态镁合金(ZM5)有较强的增强效果。采用镀镍处理后的CNTs能更好的和镁基体结合,其增强效果更为明显,但随着CNTs加入量的过多,都会导致偏聚,使力学性能下降。

C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体的压缩力学特性

对比分析C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体的压缩力学性质,确定不同部位的椎间盘与相邻椎体是否具有不同的压缩力学性质。人死后1 h内解剖取出死者C1-S1脊柱标本,以线锯切取C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体标本各13个。在日本岛津电子万能实验机上进行实验。实验速度为5mm/min,以统计分析和t检验的方法处理实验数据。L4-5组椎间盘与相邻椎体最大载荷大于T12-L1和C5-6组,差异显著(P<0.01);C5-6组最大位移大于L4-5组和T12-L1组,差异显著(P<0.01);L4-5组椎间盘与相邻椎体最大应力大于C5-6和T12-L1组,差异显著(P<0.01);C5-6组椎间盘与相邻椎体最大应变大于L4-5和T12-L1组,差异显著(P<0.01)。C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体标本的压缩力学性质有一定区别。

T_4 DNA连接酶介导的5’RACE法克隆大鼠Nor 1全长cDNA

目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/L KCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5’RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5’端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。结果:首轮5’RACE扩增出2.5kb序列后,75A EST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5’RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列。结论:T_4DNA连接酶介导的5’RACE是一种效率较高的克隆mRNA5’端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础。

ABCC4/MRP4和ABCC5/MRP5基因在NK/T细胞淋巴瘤的表达及与临床疗效的关系

背景与目的:NK/T细胞淋巴瘤(natural killer/T cell lymphoma)疗效差,多药耐药(multidrug resistance,MDR)的产生是引起肿瘤产生耐药和化疗疗效降低及失败的原因之一,本文通过研究多药耐药相关蛋白4(ABCC4 multidrug resistance associated protein,ABCC4/MRP)基因和多药耐药相关蛋白5(ABCC5 multidrug resistance associated protein,ABCC5/MRP)基因在NK/T细胞淋巴瘤SNK-6、YTS细胞株和组织中的表达情况,结合临床疗效了解其与预后的关系。方法:应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术和免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常NK细胞相比,ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因在SNK-6、YTS细胞株中高表达(P<0.05);与鼻炎组织相比,ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因在NK/T细胞淋巴瘤患者组织中高表达(P<0.05);ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因表达量的高低和临床疗效呈负相关(P<0.05)。结论:ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因及其表达蛋白影响NK/T细胞淋巴瘤的疗效。

人脊柱C5-6、T6-7、L4-5椎间盘归一化蠕变函数

对 9例 1 9～ 35岁新鲜的C5 6椎间盘、9例新鲜的T6 7椎间盘和 1 0例L4 5椎间盘进行了蠕变实验研究。模拟人体体温 36.5± 0 .5℃ ,对试样施加 30 0N的载荷 ,测得了椎间盘蠕变效应 ,得出其应变 时间曲线 ,经数学处理得出椎间盘蠕变函数和归一化蠕变函数及其曲线。

小剂量茶碱对哮喘患者气道CD4^+T细胞、白介素-5和干扰素-γ的影响

目的 :探索小剂量茶碱抗哮喘炎症的可能机制。方法 :1 9名哮喘患者口服茶碱缓释片 (2 0 0mg,bid)治疗 4wk,观察治疗前后患者症状积分和肺功能变化 ,并分别采用直接免疫荧光技术、瑞氏染色和酶联免疫吸附试验 ,检测治疗前后高渗盐水诱导痰中CD4+ T细胞和嗜酸性粒细胞 (Eos)数量以及白介素 5 (IL 5 )和干扰素 γ(IFN γ)水平的变化。结果 :茶碱治疗可使哮喘患者诱导痰中IL 5水平和嗜酸性粒细胞 (Eos)数量显著下降 (P <0 .0 1 ) ,但CD4+ T细胞数量和IFN γ水平无显著性变化 (P >0 .0 5 ) ;患者症状和肺功能明显改善 ,FEV1 .0 和FEV1 .0 %增加(P <0 .0 5 )。平均血浆茶碱浓度为 7.9mg·L- 1 (3 .9～ 1 4.7mg·L- 1 )。结论 :小剂量茶碱可能通过减少哮喘患者气道IL

肺癌患者胸腔积液及外周血CD_4^+CD_(25)^+T细胞、Foxp3基因表达及意义

目的探讨CD4+CD2+5T细胞及Foxp3基因在肺癌发生、发展中的作用及机制。方法流式细胞仪检测32例肺癌合并胸腔积液患者外周血、胸腔积液及30例无胸腔积液肺癌患者外周血、胸腔冲洗液中CD4+CD2+5T细胞水平,RT-PCR法检测特异性转录因子Foxp3基因在胸腔积液及外周血中的表达。结果肺癌合并胸腔积液患者胸腔积液中CD4+CD25+T细胞水平显著高于无胸腔积液患者胸腔冲洗液及外周血;Foxp3基因在肺癌患者外周血和胸腔积液中呈高表达。结论肺癌患者外周血和胸腔积液中增高的CD4+CD2+5T细胞主要是CD4+CD2+5调节性T细胞。CD4+CD25+调节性T细胞可促进肺癌的进一步恶化,其机制可能是抑制肿瘤免疫。

TGF-β_1和COX-2对CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞的调控作用

作为一种抑制性T细胞功能亚群,CD4+CD2+5调节性T细胞(CD4+CD2+5Treg)在维持机体的免疫自稳和免疫耐受方面发挥了关键作用。近年来研究表明,CD4+CD2+5Treg能通过相同的机制削弱机体的抗肿瘤效应。在乳腺癌、卵巢癌、肺癌以及肝癌等多种实体肿瘤和血液恶性肿瘤患者外周血和肿瘤局部微环境中,CD4+CD25+Treg比例增高,且数目与患者肿瘤进展程度和预后、生存率呈负相关,是免疫治疗的新的有效靶点。现就转化生长因子β1和环氧合酶2对CD4+CD2+5Treg参与肿瘤免疫逃逸的调控及作用方式予以综述。

CD4^+ CD25^+调节性T细胞及其相关因子在恶性肿瘤患者胸腔积液及外周血中的表达

目的:探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞及其相关因子在恶性肿瘤患者胸腔积液及外周血中的表达。方法:选取42例恶性肿瘤胸腔积液患者为研究组,38例健康体检者为对照组,采用流式细胞仪(FCM)和酶联免疫法(ELISA)检测研究组胸腔积液和外周血、对照组外周血中CD4^+CD25^+/CD4^+比例、淋巴细胞亚群以及转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果:研究组胸腔积液及外周血中CD4^+CD25^+/CD4^+比例及TGF-β1、IL-10水平均显著高于对照组(P<0.01),且胸腔积液高于外周血(P<0.01),而IFN-γ水平显著低于对照组,且胸腔积液低于外周血(P<0.01)。结论:对恶性肿瘤患者外周血和胸腔积液中CD4^+ CD25^+调节性T细胞及TGF-β1、IL-10和IFN-γ水平进行检测有利于判断病情预后和转归。