T790M基因突变阳性的肺腺癌并骨转移患者个体化治疗远期疗效及预后的相关因素分析

目的:探讨T790M突变的肺腺癌骨转移患者接受个体化综合治疗的疗效及预后的相关因素。方法:回顾性分析68例经个体化综合治疗的T790M突变的肺腺癌骨转移患者的临床资料,采取化疗、放疗、靶向分子药物、单抗类药物、双磷酸盐等综合治疗,观察疗效及预后,分析相关因素。结果:个体化综合治疗有效率为60.3%(41/68),中位生存期为23个月。无放疗、T790M耐药基因突变无合并KRAS耐药基因突变、既往化疗类型为辅助化疗、N1期、孤立的骨转移灶、化疗交替奥希替尼治疗、转移器官个数少、以及ECOG评分<2分对远期疗效有显著影响(P<0.05)。多因素分析显示,T790M耐药基因突变无合并KRAS耐药基因突变(P=0.012)、转移器官个数0或1个(P=0.000)、化疗有无交替奥希替尼(P=0.020)及孤立的骨转移灶为影响T790M突变的肺腺癌骨转移患者联合治疗后远期疗效的保护因素。结论:T790M耐药基因突变无合并KRAS耐药基因突变肺癌患者经化疗、靶向分子药物等综合治疗获得了较长的生存时间,化疗联合靶向分子药物、双磷酸盐类药物等综合治疗为T790M突变的肺腺癌骨转移患者提供了有潜力的治疗模式。

扶正解毒方药调控T790M及c-Met改善吉非替尼获得性耐药

目的:探讨扶正解毒方药改善吉非替尼获得性耐药的作用机制。方法:建立肺癌干细胞荷瘤小鼠模型,随机分为生理盐水组、吉非替尼组、扶正解毒方药联合吉非替尼组、扶正中药联合吉非替尼组、解毒中药联合吉非替尼组,测定荷瘤小鼠抑瘤率,应用ARMS法检测肿瘤组织T790M突变,RT-PCR法检测肿瘤组织c-Met基因扩增。结果:吉非替尼单药对肺癌干细胞荷瘤小鼠抑瘤率为31.02%;解毒中药联合吉非替尼组为33.43%;扶正中药联合吉非替尼组为37.51%;扶正解毒方药联合吉非替尼组为45.11%。上述各组与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);扶正解毒方联合吉非替尼组与吉非替尼单药组比较差异有统计学意义(P<0.05);吉非替尼单药组T790M基因突变和c-Met基因扩增显著增加,与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<0.01),扶正解毒方药联合吉非替尼组能够降低T790M基因突变和c-Met基因扩增,与吉非替尼单药组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:扶正解毒方药能够改善吉非替尼获得性耐药,其作用机制与降低T790M突变及抑制c-Met扩增有关。

酪氨酸激酶抑制剂在分子靶向治疗中对耐药非小细胞肺癌患者角蛋白、PAX-8及DNA EGFR基因T790M突变的影响

目的探讨表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)在分子靶向治疗中对耐药非小细胞肺癌(NSCLC)患者角蛋白、配对盒基因8(PAX-8)及对血浆中EGFR基因耐药位点T790M突变的影响。方法回顾性选取2018年1月至2019年1月延安市人民医院收治的52例耐药NSCLC患者作为研究对象,均予以EGFR-TKIs治疗。分析两组患者的近期疗效;分析患者治疗前后临床特征和CK、PAX-8阳性表达的分布;复发转移及CK、PAX-8表达的关系;比较治疗前后的EGFR基因耐药位点T790M突变情况;比较CK、PAX-8表达及T790M突变与术后生存时间。结果NSCLC患者治疗4周时的有效率、稳定率分别为59.62%、88.46%,高于治疗1周时(26.92%、75.00%),差异均有统计学意义(P<0.05)。NSCLC患者治疗4周时的CK、PAX-8阳性表达率分别为17.31%、21.15%,显著低于治疗前(40.38%、63.46%),差异均有统计学意义(P<0.05)。淋巴结上的CK、PAX-8阳性表发复发转移率分别为61.90%、72.73%,较阴性表达(35.48%、36.84%)均显著偏高,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗4周时血浆中的EGFR基因耐药位点T790M突变率为13.46%,显著低于治疗前(69.23%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后5年总生存率为65.38%(34/52),CK、PAX-8及T790M阳性表达者的生存率均显著低于阴性者。结论耐药NSCLC患者的CK、PAX-8及DNA EGFR基因耐药位点T790M阳性表达越高预后效果越差,针对这3项指标的具体阳性表达情况科学、合理的予以EGFR-TKIs治疗可有效地降低CK、PAX-8阳性表达及DNA EGFR基因耐药位点T790M变异,有较好的临床应用与推广价值。

手术治疗T790M基因突变阳性肺腺癌并四肢长骨骨转移患者的临床疗效

目的比较手术和非手术治疗肺腺癌并四肢长骨转移T790M基因突变阳性患者的临床疗效。方法选择2016年7月-2018年12月在海南省东方市东方医院、海南省第三人民医院、海南省人民医院以及海南医学院第一附属医院就诊的肺腺癌并四肢长骨转移T790M基因突变阳性患者36例。根据治疗方式分为手术组(n=17)和非手术组(n=19),手术组行肿瘤切除+肢体功能重建术,非手术组行微创(含介入)治疗或放疗,比较两组患者的临床疗效。结果手术组视觉模拟疼痛评分法(visual analogue scale,VAS)评分下降比例、Ennecking评分增加比例、Kanofsky评分增加比例均高于非手术组(88.2%vs 52.6%,χ^2=5.360,P=0.021;82.4%vs 47.4%,χ^2=4.760,P=0.029;70.6%vs 36.8%,χ^2=4.100,P=0.043);手术组和非手术组有效率和疾病控制率差异无统计学意义(52.9%vs 47.4%,χ^2=0.111,P=0.738;76.5%vs 78.9%,χ^2=0.032,P=0.858);生存分析结果显示,手术组中位生存期高于非手术组(12.0个月vs 9.0个月,χ^2=5.009,P=0.024)。结论手术治疗可缓解T790M基因突变阳性肺腺癌并四肢长骨转移患者的疼痛,改善肢体功能,延长生存期。

奥希替尼治疗获得性表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂耐药T790M突变肺腺癌晚期1例

报告1例使用奥西替尼治疗表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)基因19外显子缺失突变耐药后T790M突变肺腺癌晚期患者。患者,女,72岁,无明显诱因出现左侧胸闷、气喘5 d于当地医院治疗,查胸部CT示双侧胸腔积液,右肺中叶占位,并纵隔淋巴结肿大。为求进一步治疗遂来郑州大学第一附属医院,入院完善相关检查,PET-CT示右肺中叶软组织肿块代谢较活跃,考虑肺癌,建议结合病理诊断;双侧锁骨上区、纵隔及右肺门多发淋巴结肿大,代谢活跃,考虑转移。不符合手术指征,未进行手术治疗,第1次CT引导下经皮肺穿刺活检确诊肺腺癌,基因检测示EGFR基因第19外显子缺失突变,于2017年11月29日开始服用吉非替尼,至2018年12月4日停止服用。期间复查CT发现右上肺结节较前增大,第2次CT引导下经皮肺穿刺活检结果示肺腺癌,基因检测示EGFR基因18外显子缺失突变,合并EGFR基因第20外显子T790M突变,于2018年12月4日开始服用奥希替尼至今,复查未见异常。

基于CRISPR/Cas9技术敲除PD-L1对非小细胞肺癌PC-9/T790M细胞吉非替尼耐药敏感性的影响

目的:探讨在具有T790M突变的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中应用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除程序性细胞死亡配体1(PD-L1)后对吉非替尼耐药敏感性的影响,阐明PD-L1对PC-9/T790M细胞耐药敏感性的作用机制。方法:常规体外培养PC-9细胞和PC-9/T790M细胞,经CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除PC-9/T790M细胞中PD-L1后,分为PC-9、PC-9/T790M和Cas9 PC-9/sgRNA 3组细胞。采用Western blotting法检测各组细胞中PD-L1蛋白表达水平,CCK-8法检测5、10和20 mmol·L-1吉非替尼干预24、48和72 h后各组细胞存活率。体内实验中检测吉非替尼干预后各组移植瘤体积,HE染色观察移植瘤组织病理形态表现。结果:Western blotting法检测,经CRISPR/Cas9编辑后敲除PD-L1的sgRNAl#组与PC-9、PC-9/T790M、sgRNA2#和sgRNA3#组比较,PD-L1蛋白表达水平最低。CCK-8法检测,在应用药物干预前Cas9 PC-9/sgRNA组细胞增殖活性与PC-9组、PC-9/T790M组比较,差异无统计学意义(P>0.05),10 mmol·L-1吉非替尼干预72 h后PC-9组和Cas9 PC-9/sgRNA1#组细胞存活率与PC-9/T790M组比较明显降低(P<0.01)。体内实验,与PC-9/T790M组比较,吉非替尼干预后PC-9组和Cas9 PC-9/sgRNA1#组裸鼠移植瘤体积明显减少(P<0.05);PC-9组和Cas9 PC-9/sgRNA1#组移植瘤细胞呈现中、重度坏死,而PC-9/T790M组移植瘤组织病理形态无明显变化。结论:在耐药PC-9/T790M细胞中应用CRISPR/Cas9编辑技术敲除PD-L1能够明显提高吉非替尼的药物敏感性。

EGFR基因靶向治疗非小细胞肺癌的研究进展

非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)是现阶段临床发现的肺癌患者中发病率最高的一种类型,治疗手段匮乏,效果不甚理想,目前临床中研究热点是EGFR基因在NSCLC靶向治疗中的作用。表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)是基于EGFR基因作用而开发出来,用于治疗EGFR基因突变阳性的NSCLC患者。本文综述了EGFR基因靶向治疗非小细胞肺癌的研究进展。

补中益气汤联合吉非替尼治疗肺腺癌随机平行对照研究

[目的]观察补中益气汤联合吉非替尼治疗肺腺癌疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将60例住院患者按病志号抽签简单随机分两组。对照组30例吉非替尼250mg,早餐后1h温服。治疗组30例补中益气汤,升麻、柴胡各3g,炙甘草、陈皮各6g,当归9g,土炒白术、人参各12g,炙黄芪15g等,1剂/d,水煎1000mL,早、中、晚口服;吉非替尼治疗同对照组。连续治疗3个月为1疗程。观测临床表现、基因T790M突变携带率、基因T790M突变时间、不良反应。连续治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组CR20例,PR8例,SD1例,PD1例,总有效率93. 33%;对照组CR14例,PR9例,SD4例,PD3例,总有效率90. 00%;治疗组疗效优于对照组两组间无明显差异(P> 0. 05)。基因T790M突变携带率两组间无明显差异(P> 0. 05),基因T790M突变时间治疗组优于对照组(P <0. 01)。不良反应发生率治疗组略低于对照组,两组间无明显差异(P> 0. 05)。[结论]补中益气汤联合吉非替尼治疗肺腺癌,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。

早期肺癌合并肺部感染患者病原菌分布及外周血EGFR-T790M基因突变分析

目的分析早期肺癌合并肺部感染患者病原菌分布及外周血ctDNA检测样本中EGFR-T790M基因突变情况。方法将2016年8月-2017年12月因早期肺癌合并肺部感染疾病于医院治疗的125例患者作为研究对象,采用微生物鉴定仪器检测患者致病菌株,并统计其占比情况,对常见致病菌进行药敏试验,明确具体用药方案,采用超级扩增阻碍突变系统对患者外周血血液样本中EGFR-T790M基因突变情况进行检测。结果 125例早期肺癌合并肺部感染患者痰液标本中共分离出144株病原菌,其中革兰阴性菌79株占54.86%,革兰阳性菌38株占26.39%,真菌27株占18.75%;铜绿假单胞菌对氨苄西林/舒巴坦耐药株数最多,对亚胺培南耐药株数最少;125例患者中,11例患者出现EGFR-T790M基因突变,结果显示:使用过TKIs药物治疗的患者EGFR-T790M基因突变发生率高于未使用TKIs药物治疗的患者(P<0.001)。结论早期肺癌合并肺部感染患者病原菌以革兰阴性菌为主,其次为革兰阳性菌,综合药敏试验结果可考虑采用亚胺培南与万古霉素进行治疗,但实际用药情况还需根据患者自身情况决定。临床中对EGFR-T790M基因突变情况进行检测可有效预测患者病情变化,并指导改善用药。

非小细胞肺癌EGFR-T790M突变药物的研究进展

原发性肺癌(简称肺癌)是常见的恶性肿瘤之一,发生率居恶性肿瘤首位。非小细胞肺癌(NSCLC)约占所有肺癌的80%。近年来,表皮生长因子受体–酪氨酸激酶抑制(EGFR-TKI)在NSCLC治疗中起到重要作用;随着EGFR-TKI在临床上的广泛应用,耐药问题日益加剧;T790M基因突变是导致EGFR-TKI获得性耐药最主要的机制。全球新批准并上市的治疗NSCLC EGFR-T790M突变的药物有brigatinib、奥莫替尼、atezolizumab等;处于上市申请阶段的有丁磺氨酸、阿拉莫林盐酸盐、ABP-215;处于研发阶段的主要有naquotinib、TG-4010等。对近年来处于研发后期的NSCLC治疗药物进行详细介绍,同时对抗NSCLC药物的未来发展方向进行了展望,以期为抗NSCLC药物的研发提供参考。

南方红豆杉水提物抑制T790M突变及c-MET扩增导致的吉非替尼耐药体外研究

目的研究南方红豆杉水提物抑制T790M突变及c-MET扩增所致吉非替尼耐药机制。方法应用MTT法检测不同浓度南方红豆杉水提物(0.25、0.5、1、2、4 mg/mL)和吉非替尼(3、6、12、18、30μmol/L)对H1975、H820细胞株增殖的影响,根据结果筛选最佳后续实验药物浓度,计算各组半数抑制浓度(IC50)和两药联合指数(CI);将对照组(1640培养液)、南方红豆杉组(0.25μmol/L)、吉非替尼组(3μmol/L)及联合组(南方红豆杉0.25μmol/L+吉非替尼3μmol/L)H1975和H820细胞药物处理72 h后,采用Western Blot检测EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT及PI3K蛋白表达,采用qRT-PCR检测EGFR、PI3K及AKT mRNA表达。结果在H1975和H820细胞中联合组达到IC50所需的吉非替尼浓度明显小于吉非替尼组,且CI<1。在H1975细胞中,与对照组比较,南方红豆杉组EGFR、p-EGFR、PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05),吉非替尼组AKT蛋白表达降低(P<0.05),联合组EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT及PI3K蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。与吉非替尼组比较,南方红豆杉组EGFR、p-EGFR、p-AKT蛋白表达降低(P<0.01),联合组EGFR、p-EGFR、PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P<0.01)。在H820细胞中,与对照组比较,南方红豆杉组EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达下调(P<0.01),联合组p-EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达降低(P<0.01)。与吉非替尼组比较,南方红豆杉组EGFR、p-AKT蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05),联合组p-EG-FR、PI3K、p-AKT蛋白表达降低(P<0.01)。在H1975及H820细胞中,与对照组比较,吉非替尼组AKT及PI3K mRNA表达降低(P<0.01,P<0.05),南方红豆杉组及联合组EGFR、AKT及PI3K mRNA表达降低(P<0.01)。与吉非替尼组比较,联合组EGFR、AKT及PI3K mRNA表达降低(P<0.01)。结论南方红豆杉水提物能增强吉非替尼对H1975、H820细胞增殖抑制作用,可抑制T790M突变和c-MET扩增所致的吉非替尼耐药,其机制与抑制EGFR/PI3K/AKT通路有关。

奥希替尼治疗晚期T790M突变肺腺癌患者疗效分析

目的探讨奥希替尼在治疗晚期T790M突变肺腺癌患者中的疗效及安全性。方法 T790M突变且既往一线靶向治疗失败的晚期肺腺癌患者64例,分为化疗组22例和奥希替尼组42例,化疗组采用培美曲塞联合卡铂化疗,奥希替尼组口服奥希替尼治疗,分析2组治疗效果及不良反应发生情况。结果奥希替尼组疾病控制率(88.1%)、6个月生存率(78.6%)和1 a生存率(54.8%)明显高于化疗组(68.2%、45.5%、27.3%)(P<0.05);奥希替尼组3级以上不良反应发生率(26.2%)低于化疗组(59.1%)(P<0.05),总不良反应发生率(92.8%)与化疗组(100.0%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论既往一代靶向治疗失败的晚期肺腺癌患者应行T790M检测,奥希替尼治疗T790M突变患者的疗效及安全性均优于联合化疗。

肺腺癌患者预后及EGFR基因T790M突变状况的相关因素分析

目的:探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变肺腺癌患者的预后相关因素以及与靶向治疗后疾病进展患者发生T790M突变相关的因素。方法:收集2015年1月—2018年12月就诊于郑州大学第一附属医院的137例晚期肺腺癌患者的资料。所有患者均携带EGFR基因敏感突变并接受了第一代EGFR-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)靶向治疗。应用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用log-rank法进行单因素分析,COX比例风险回归模型进行多因素分析,回顾性分析患者的临床病理特征和血液学指标与预后的关系,以及与靶向治疗后疾病进展患者发生T790M突变相关的因素。结果:截至随访结束,137例患者中有53例(38.7%)患者出现疾病进展,84例(61.3%)患者病情稳定或缓解,全组患者的中位无进展生存期(progression-free survival,PFS)为16.0个月(1.0~51.0个月),平均PFS为9.1个月。单因素生存分析结果显示,治疗前患者的吸烟状况、转移器官个数、Ki-67增殖指数以及γ-谷氨酰胺转移酶(gamma-glutamyl transferase,γ-GGT)的表达水平与PFS相关(P值均<0.05),而吸烟、器官转移个数超过1个、Ki-67增殖指数≥50%以及γ-GGT表达水平≥58 U/L的患者预后不良。多因素生存分析结果显示,转移器官个数、Ki-67增殖指数和γ-GGT表达水平是独立的预后因素。在53例出现疾病进展的患者中,32例患者接受了二次组织活检及基因检测,其中19例(59.4%)患者为T790M突变阳性,13例(40.6%)患者为T790M突变阴性,Fisher确切概率法检测结果显示年龄与T790M突变状态有关(P=0.029)。结论:转移器官个数、Ki-67增殖指数和γ-GGT的表达水平是肺腺癌患者的独立预后因素,可以作为肺癌靶向治疗疗效的预测因素。在接受第一代EGFR-TKIs靶向治疗后出现疾病进展的患者中,年龄<65岁的患者更可能发生T790M突变。

非小细胞肺癌患者外周血中表皮生长因子受体突变检测的研究进展

非小细胞肺癌（NSCLC）治疗手段以手术、化疗、放疗和靶向治疗为主。随着靶向治疗研究的进展，发现有表皮生长因子受体（EGFR）突变者接受小分子酪氨酸激酶抑制剂（TKI）靶向治疗效果佳，进行这类药物治疗前的筛选是个体化治疗的前提，目前以组织标本基因检测为金标准。但是进展期患者肿瘤组织难以获得，外周血中游离DNA的EGFR突变检测便成为一种选择。文章综述了国内外研究者在外周血（血清、血浆）中进行EGFR外显子19／2l（exonl9／21）及耐药基因外显子20的T790M突变（exon20T790M）检测的情况与进展。