SUMO1T95R点突变小鼠模型的构建、表型及应用

目的构建SUMO1T95R点突变小鼠模型,并鉴定小鼠肌球蛋白的SUMO化修饰位点。方法采用同源重组方式在ES细胞中完成点突变,构建SUMO1 T95R点突变小鼠模型;采用小鼠基因鉴定技术鉴定T95R小鼠模型构建是否成功;检测T95R点突变小鼠与野生鼠的体重及血糖变化差异;采用肌球蛋白提取方案提取纯化肌球蛋白,并采用高分辨质谱技术鉴定SUMO化位点。结果小鼠基因鉴定技术确定T95R小鼠模型构建成功;T95R点突变纯合小鼠与野生型小鼠体重及血糖变化趋势一致。在T95R纯合小鼠检测到肌球蛋白新的SUMO1修饰位点。结论本实验室构建了一种特殊的SUMO1点突变小鼠模型,为鉴定SUMO化蛋白的修饰位点提供了简便可行的方法,新的SUMO化位点的发现有助于研究肌球蛋白的生理病理功能。