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环形泰勒虫TA13815蛋白的原核表达及反应原性分析
1
作者
戚姣姣
蒋晨
赵洪喜
《农业科学研究》
2023年第1期15-21,共7页
为研究环形泰勒虫(Theileria annulata)TA13815蛋白功能,对环形泰勒虫虫体蛋白TA13815基因的核苷酸序列及编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,构建pET30a-TA13815重组表达载体,并对其进行原核表达及反应原性分析。SDS-PAGE结果显示...
为研究环形泰勒虫(Theileria annulata)TA13815蛋白功能,对环形泰勒虫虫体蛋白TA13815基因的核苷酸序列及编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,构建pET30a-TA13815重组表达载体,并对其进行原核表达及反应原性分析。SDS-PAGE结果显示,蛋白的分子质量大约为29.663 ku,主要以包涵体形式表达,条带位置显示蛋白的分子质量比预期大,蛋白可能存在翻译后修饰。通过qPCR分析环形泰勒虫3个不同发育阶段,结果显示TA13815 mRNA在3个阶段均有表达,且在裂殖体阶段表达量最高。本试验成功表达了环形泰勒虫TA13815重组蛋白,该重组蛋白有较好的反应原性,且能与抗His标签蛋白的单克隆抗体和环形泰勒虫阳性血清发生特异性反应,而与健康牛血清无交叉反应。TA13815蛋白与东方泰勒虫的核苷酸和蛋白同源性均小于68%,表明该重组蛋白可作为间接ELISA诊断方法的备选抗原。
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关键词
环形泰勒虫
ta13815蛋白
原核表达
反应原性分析
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职称材料
题名
环形泰勒虫TA13815蛋白的原核表达及反应原性分析
1
作者
戚姣姣
蒋晨
赵洪喜
机构
宁夏大学农学院
出处
《农业科学研究》
2023年第1期15-21,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31760727)
宁夏自然科学基金项目(2021AAC03011)。
文摘
为研究环形泰勒虫(Theileria annulata)TA13815蛋白功能,对环形泰勒虫虫体蛋白TA13815基因的核苷酸序列及编码蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,构建pET30a-TA13815重组表达载体,并对其进行原核表达及反应原性分析。SDS-PAGE结果显示,蛋白的分子质量大约为29.663 ku,主要以包涵体形式表达,条带位置显示蛋白的分子质量比预期大,蛋白可能存在翻译后修饰。通过qPCR分析环形泰勒虫3个不同发育阶段,结果显示TA13815 mRNA在3个阶段均有表达,且在裂殖体阶段表达量最高。本试验成功表达了环形泰勒虫TA13815重组蛋白,该重组蛋白有较好的反应原性,且能与抗His标签蛋白的单克隆抗体和环形泰勒虫阳性血清发生特异性反应,而与健康牛血清无交叉反应。TA13815蛋白与东方泰勒虫的核苷酸和蛋白同源性均小于68%,表明该重组蛋白可作为间接ELISA诊断方法的备选抗原。
关键词
环形泰勒虫
ta13815蛋白
原核表达
反应原性分析
Keywords
Theileria annula
ta
ta
13815
protein
prokaryotic expression
reactivity analysis
分类号
S855.9 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
环形泰勒虫TA13815蛋白的原核表达及反应原性分析
戚姣姣
蒋晨
赵洪喜
《农业科学研究》
2023
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