Barth综合征两兄弟及其TAZ基因新突变

目的分析2例TAZ基因新突变导致的Barth综合征患者的临床特点,探讨代谢性心肌病的防控及急性代谢危象诱发因素、生化诊断、治疗及预防。方法分析2例Barth综合征患者临床资料。结果哥哥出生时正常,运动发育落后,迁延性腹泻。10个月时注射疫苗,次日起反应差,嗜睡,拒奶,手脚浮肿,呼吸困难,检查发现心脏扩大、心力衰竭,6天后夭折。弟弟亦运动发育落后,体重不增。3个月时接种百白破疫苗,24小时后发热,无力。血液中性粒细胞显著降低,肌酸激酶及同工酶轻度升高。心脏彩色超声检查显示左心室心肌肥厚,左室心尖肌小梁显著增多。尿有机酸分析发现3-甲基戊烯二酸升高。家系全外显子基因分析,两兄弟X染色体TAZ基因c.221A>C突变,为未报道的错义突变,来源于其母亲,确诊为Barth综合征。弟弟经中链脂肪酸、辅酶Q10、左卡尼汀、酒石酸美托洛尔等治疗,病情显著好转。结论Barth综合征是导致心肌病的遗传代谢病,感染、疲劳、接种疫苗等应激刺激可能诱发潜在Barth综合征患者的代谢危象。

TAZ基因重组质粒的构建与表达

目的构建重组质粒TAZ-pcDNA3.1及TAZ-pEGFP-C2,并应用Western Blot检测TAZ蛋白在细胞内的表达情况,初步探索TAZ分子促进细胞增殖和迁移的作用机制。方法通过PCR扩增获得TAZ基因片段,胶回收后连接T载体,蓝白斑筛选,转化,提质粒,酶切,用T4DNA Ligase连接,亚克隆进入pEGFP-C2和pcDNA3.1获得新的重组质粒,分别转染HEK293细胞,智能型荧光细胞监测仪观察TAZ分子在细胞内的分布情况,Western Blot检测其在细胞内的表达情况。结果重组质粒经双酶切鉴定和测序证明构建成功,荧光照片显示TAZ分子分布在细胞核和细胞浆中,Western Blot检测结果表明转染有重组质粒TAZ-pcDNA3.1的HEK293细胞中有大量TAZ蛋白表达。结论成功构建了两种重组质粒,并初步验证了TAZ蛋白的细胞定位,为进一步研究其促进增殖和迁移的作用机制奠定了基础。

TAZ诱导性过表达慢病毒载体的构建、鉴定及诱导过表达TAZ神经母细胞瘤细胞株的建立

神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童最常见且致死性极高的实体肿瘤之一[1]。由NB所致死亡人数占所有儿童肿瘤死亡总数的15%[2]。分子靶向治疗是近年肿瘤领域研究的热点[3]。TAZ是一个包含WW-domain结构域的转录共激活子,参与多种肿瘤细胞的增殖、调控肿瘤转移,并能预测部分肿瘤患者的预后情况[4]。针对Oncomine肿瘤数据库NB肿瘤组织的生物信息学分析发现,TAZ基因在NB肿瘤组织中呈高表达,且随着NB的恶化,表达逐渐升高。而TAZ是否参与NB的形成及恶化尚未完全明确。

Barth综合征3例临床表现及基因突变分析

目的探讨Barth综合征(BTHS)的临床表现、诊断、治疗及转归。方法回顾性分析2013年6月至2014年10月经基因检测确诊的3例BTHS患儿的临床资料。结果 3例患儿均为男性,其中2例为双胞胎。3例患儿均以心肌病和心功能不全为主要表现,同时合并不同程度的左室心肌疏松,其中2例诊断为左室心肌致密化不全(LVNC);3例患儿均有运动发育迟缓和肌无力表现,生长发育落后;尿液3-甲基戊烯二酸(3-MGCA)水平显著增高,其中1例合并中性粒细胞减少;3例患儿均检测到TAZ基因突变,2例双胞胎患儿检测到1个新的错义突变c.527A>G(p.H176R),另外1例患儿检测到1个已知的无义突变c.367C>T(p.R123X),突变均来源于患儿母亲。随访过程中2例双胞胎分别于生后7个月和7个半月死亡,另1例目前存活。结论 BTHS是引起儿童心肌病的原因之一,对于合并有肌无力、中性粒细胞减少、3-甲基戊烯二酸尿症等表现的男性心肌病患儿,尤其是合并LVNC时,需要重视BTHS的筛查。

Barth综合征1例临床及基因突变分析

目的探讨Barth综合征(BTHS)的临床表现及遗传学特征。方法回顾分析1例BTHS患儿的临床资料。结果患儿,男,10月龄,以左室增大,爆发性心肌炎,心力衰竭,肌无力,单核细胞增多,低血糖,乳酸性酸中毒,腹泻,面部异常等为主要表现。基因测序显示TAZ基因存在一个错义突变(c.406 C>T,p.Cys 136 Arg),突变来自患儿母亲。结论扩充了中国BTHS的基因突变谱及临床特征。

TNNI3与TAZ基因变异所致罕见心脏病一个家系的研究

目的鉴定1例罕见心脏病家系(Barth综合征以及肥原性心肌病)的遗传学病因,为该家系提供遗传咨询及生育指导。方法选取2021年7月9日于南方医科大学附属深圳市妇幼保健院就诊的1个罕见心脏病家系作为研究对象。收集家系成员的临床资料,对患儿及其父母进行家系全外显子组测序(Trio-WES),对家系其他成员进行Sanger测序验证,对变异进行生物学信息分析。参照美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南判断变异的致病性。结果Trio-WES检测显示先证者携带TAZ基因c.542G>A(p.G181A)半合子变异,该变异遗传自其母亲;此外,其母亲还携带TNNI3基因c.557G>A(p.R186Q)变异。经Sanger测序验证,先证者姨母与外祖母同样携带该变异。参照ACMG相关指南,TAZ基因c.542G>A(p.G181A)评定为可能致病性变异(PS2_Strong+PM2_Supporting+PP3),TNNI3基因c.557G>A(p.R186Q)评定为致病性变异(PP1_Strong+PS4_Strong+PP3+PP4+PM2_Supporting)。结论TAZ基因c.542G>A(p.G181A)可能是先证者患Barth综合征的遗传学病因,TNNI3基因c.557G>A(p.R186Q)变异可能为先证者母亲、姨母及外祖母患肥厚型心肌病的遗传学病因。上述发现拓展了TAZ基因的变异谱,为该家系的临床诊断提供了参考。

干扰TAZ基因对舌鳞癌细胞CAL27增殖凋亡的影响及其机制

目的探讨干扰TAZ基因后对舌鳞癌细胞CAL27增殖和凋亡的影响以及可能的分子调控机制。方法实验分为干扰组和对照组,将稳定干扰TAZ基因的慢病毒载体转染至舌鳞癌细胞CAL27中作为干扰组,并以非特异性序列转染CAL27细胞作为对照组。利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)及Western blotting检测干扰效率,CCK-8细胞活力实验及Ed U染色法检测转染后细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,Western blotting检测与周期及凋亡相关蛋白的表达情况。结果干扰TAZ基因后,RT-PCR和Western blotting检测结果显示,TAZ mRNA和蛋白表达水平明显降低; CCK-8细胞增殖活力检测及Ed U染色法显示细胞增殖能力降低;细胞早期凋亡和晚期凋亡比例均增多; G0/G1期细胞比例增多,而G2/M期细胞减少。同时,干扰TAZ基因后,周期相关蛋白CYCLIN D1、CDK4和CDK6等表达水平降低;而凋亡相关蛋白Bax、cleaved Caspase9表达水平均升高,Bcl-2表达水平降低。结论干扰TAZ基因可以通过调控细胞周期和凋亡相关蛋白的表达,来影响舌鳞癌细胞的增殖和凋亡。

Barth综合征1例

1病例资料患儿,男,2岁9个月,2015年8月因＂活动后气促、发绀2＋年,腹泻半个月,发热2d＂收治我院心内科。表现为活动后气促,吃奶时暂停、吞咽欠佳,无进行性面色苍白及呼吸困难,活动量较同龄儿明显减少,无蹲踞。粗大、精细运动、言语发育均较同年龄同性别儿童明显落后（8＋月抬头,1岁独坐,2岁独走,步态不稳,现不能跑、爬楼;1＋岁可玩手、抓物、对指、乱画,现不能用筷子;7＋月可描话。

Barth综合征合并心肌病、室性心律失常临床及基因分析

目的 探讨Barth综合征(BTHS)临床表型及遗传学特征,扩充中国BTHS的基因突变谱及临床表型。方法 收集3例BTHS患者的临床资料,包括病史、体格检查及生化检查,对先证者及其家系成员抽取外周血,采用二代高通量测序技术进行基因检测,并采用Sanger测序法进行位点验证及家系验证。结果 3例BTHS患者均为男性,围生期均无明显异常,发病年龄在3个月~1岁,有BTHS的特殊面容,均有肌张力低下,运动发育落后,2例双上肢有狭窄环,就诊时均以吃奶差为主诉入院,入院时有心力衰竭表现;3例均合并外周血中性粒细胞减低,2例心脏超声为扩张型心肌病表现,其中1例存在心肌致密化不全,第3例为肥厚型心肌病表现;3例经基因检测均检测到TAZ基因突变,且突变均来源于母亲,病例1为c.646+2T>C(splicing)位点突变,病例2为c.364_370+23delTGCCGAGGTG AGCTGCTCCTCCAGCGAGTG(p.C122fs*15)位点突变,病例3为C857delinsAGGCAGAA(CpGln 287fs)突变,均未收录在HGMD、ClinVar数据库,为未见文献报道的新突变。随访过程中2例分别于确诊后1个月、2个月死亡,均死于恶性室性心律失常,另1例在随访当中,仍存活。结论 BTHS是引起儿童心肌病的原因之一,对于有特殊面容,合并有肌张力低下或肌无力、上肢有狭窄环、中性粒细胞减少的男性心肌病、心力衰竭患儿,尤其是合并扩张性心肌病,需要重视BTHS的基因筛查,确诊后需加强对心律失常的管理。

Barth综合征1例报道

目的对1例TAZ基因突变的Barth综合征(BTHS)患者进行临床表现、影像学特征、肌肉病理、基因测序分析,以提高临床医生对此病的认识。方法收集1例BTHS患者的临床及实验室资料进行分析,并通过复习相关文献对疾病进行简要总结。结果患者为14岁男性,自幼生长发育迟缓,因四肢无力2个月余入院,查体示双侧转颈、耸肩力弱及四肢肌力减弱。血常规示中性粒细胞计数减少;尿有机酸检测示3-甲基戊烯二酸升高。影像学检查示双侧臀大肌及双侧胫骨干骺端周围肌肉FS TWI异常信号。肌肉病理示轻度肌源性损害。基因检测证实患者及其母亲为TAZ基因c.589G>A突变。结论Barth综合征是一种具有临床和遗传异质性的疾病,其发病形式多样。当患者出现不明原因的中性粒细胞减少或心肌病变等表现,应考虑该病可能。早期诊断和对症支持治疗可提高患者的生存质量。