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c-Myc通过lnc-TBL1XR1-5影响口腔鳞状细胞癌的发生发展
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作者 符妙婷 朱友明 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第9期1564-1572,1582,共10页
目的研究c-Myc调节的长链非编码RNA TBL1XR1-5(lnc-TBL1XR1-5)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)进展的影响。方法根据c-Myc的表达对TCGA数据库中头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)样本进行生物信息学分析,筛选出c-Myc表达密切相关的lnc-TBL1XR1-5。实时定... 目的研究c-Myc调节的长链非编码RNA TBL1XR1-5(lnc-TBL1XR1-5)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)进展的影响。方法根据c-Myc的表达对TCGA数据库中头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)样本进行生物信息学分析,筛选出c-Myc表达密切相关的lnc-TBL1XR1-5。实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测c-Myc和lnc-TBL1XR1-5在OSCC癌组织和癌旁组织中的表达关系,分析其在HOK、HN6、CAL27细胞系中表达差异,c-Myc过表达和敲低对lnc-TBL1XR1-5的影响。双荧光素酶报告基因测定用于验证c-Myc与lnc-TBL1XR1-5启动子区的结合。RNA荧光原位杂交(RNA FISH)用于确定lnc-TBL1XR1-5在OSCC细胞系中的定位。通过qRT-PCR、细胞计数、CCK-8、集落形成等实验观察lnc-TBL1XR1-5的过表达或敲低对OSCC细胞增殖的影响,并通过划痕实验、Transwell实验等观察lnc-TBL1XR1-5的过表达或敲低对OSCC细胞迁移的影响,最后通过观察培养基颜色和pH变化观察lnc-TBL1XR1-5的过表达或敲低对OSCC细胞代谢的影响。结果c-Myc对lnc-TBL1XR1-5在OSCC细胞系和组织中的表达具有正调控作用。通过双荧光素酶报告基因测定验证了c-Myc与lnc-TBL1XR1-5启动子区的结合。RNA FISH显示lnc-TBL1XR1-5定位于OSCC细胞的细胞核。lnc-TBL1XR1-5的过表达促进了OSCC细胞系的迁移、代谢和增殖,而敲低则具有相反的作用。结论c-Myc在OSCC中正向调节lnc-TBL1XR1-5,lnc-TBL1XR1-5促进OSCC的迁移、增殖和代谢。 展开更多
关键词 长链非编码RNA C-MYC 口腔鳞状细胞癌 lnc-tbl1xr1-5 细胞增殖 细胞迁移
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miR-767-5p通过调控TBL1XR1蛋白表达抑制人卵巢癌细胞系侵袭
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作者 冷海娜 张艳 +2 位作者 王晓栋 张学友 李洪利 《基础医学与临床》 2023年第3期408-414,共7页
目的探索miR-767-5p和转导素β1X连锁受体蛋白1(TBL1XR1)对卵巢癌进展的影响以及作用机制。方法数据库分析:使用GEO、miRPATH数据库和RStudio对miR-767-5p进行KEGG(京都百科全书)富集分析,并在GEO数据集低表达和高表达microRNA中各选择... 目的探索miR-767-5p和转导素β1X连锁受体蛋白1(TBL1XR1)对卵巢癌进展的影响以及作用机制。方法数据库分析:使用GEO、miRPATH数据库和RStudio对miR-767-5p进行KEGG(京都百科全书)富集分析,并在GEO数据集低表达和高表达microRNA中各选择差异表达倍数TOP5的microRNAs,按照差异倍数由低到高排列;miRDB等数据库预测miR-767-5p可结合的靶基因并取交集,结合Open Target Platform、GEPIA等数据库筛选出目的基因;GEPIA、THPA数据库分析TBL1XR1在人体各器官表达量分析、免疫组化分析以及生存曲线分析。实验验证:双荧光素酶报告基因实验验证miR-767-5p和TBL1XR1存在结合靶点;Western blot检测卵巢癌细胞系(OC3、SKOV-3、HO-8910)和正常卵巢上皮细胞系(IOSE80)中TBL1XR1的表达;在SKOV-3细胞中转入miR-767-5p过表达质粒与TBL1XR1过表达质粒后,Western blot检测TBL1XR1表达量,Tanswell小室法检测细胞侵袭。结果数据库分析:选择低表达差异倍数最高的miR-767-5p作为目的microRNA进行后续研究;miR-767-5p参与多种癌的相关通路,且miR-767-5p、TBL1XR1与乳腺癌、卵巢癌等联系密切;TBL1XR1在卵巢癌中呈现高表达,且与患者预后不良相关。实验验证:miR-767-5p和TBL1XR1可靶向结合(P<0.05);相对于IOSE80细胞,TBL1XR1在OC3、SKOV-3、HO-8910细胞中呈现明显高表达;转入miR-767-5p过表达质粒后,TBL1XR1表达量降低,卵巢癌细胞侵袭性降低(P<0.05),而同时转入TBL1XR1过表达质粒后可在一定程度上减弱这种影响。结论miR-767-5p通过调控TBL1XR1的表达抑制人卵巢癌细胞系的侵袭。 展开更多
关键词 卵巢癌 侵袭 miR-767-5p 转导素β1X连锁受体蛋白1(tbl1xr1)
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干扰TBL1XR1表达调控c-Met/PI3K/Akt通路对胰腺癌细胞生物学行为影响的实验研究 被引量:7
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作者 张银鹏 孙金兵 +3 位作者 宗洋 陆晓雷 符炜 顾剑峰 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2021年第2期97-103,共7页
目的探讨干扰TBL1XR1表达对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响,及其可能分子机制。方法体外培养胰腺癌细胞AsPC-1,分为空白对照组、阴性对照组(转染scramble shRNA),si-TBL1XR1组(转染TBL1XR1 shRNA),AMG-458组(加入... 目的探讨干扰TBL1XR1表达对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响,及其可能分子机制。方法体外培养胰腺癌细胞AsPC-1,分为空白对照组、阴性对照组(转染scramble shRNA),si-TBL1XR1组(转染TBL1XR1 shRNA),AMG-458组(加入c-Met抑制剂AMG-458)和si-TBL1XR1+HGF组(在TBL1XR1 shRNA转染细胞中加入c-Met激活剂HGF)。采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测各组TBL1XR1相对表达量。采用CCK-8法、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭的活性。细胞免疫荧光法检测细胞EMT表型。Western blotting法检测c-Met/PI3K/Akt信号通路和EMT相关蛋白的表达。结果GEPIA在线分析结果显示,胰腺癌组织中TBL1XR1表达水平高于正常组织;TBL1XR1低表达组OS优于高表达组。H6C7细胞中TBL1XR1相对表达量为1.00±0.05,低于胰腺癌AsPC-1、Capan-1、PANC-1、CFPAC-1、BxPC-3细胞(1.85±0.08、1.08±0.05、1.36±0.10、1.28±0.08、1.60±0.13),差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,si-TBL1XR1组和AMG-458组中细胞增殖、迁移、侵袭活性降低(P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白比值和c-Met蛋白、Vimentin蛋白表达均下调,E-cadherin蛋白表达上调(P<0.05)。与si-TBL1XR1组比较,si-TBL1XR1+HGF组细胞增殖、迁移、侵袭活性则被逆转,同时p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白比值和c-Met蛋白、Vimentin蛋白表达上调,且E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05)。结论干扰TBL1XR1表达可抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭活性,其机制是与抑制c-Met/PI3K/Akt信号通路以及阻止EMT表型转化有关。 展开更多
关键词 胰腺癌 tbl1xr1 c-Met/PI3K/Akt通路 增殖 EMT
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TBL1XR1 induces cell proliferation and inhibit cell apoptosis by the PI3K/AKT pathway in pancreatic ductal adenocarcinoma 被引量:6
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作者 Jian-Feng Gu Wei Fu +4 位作者 Hai-Xin Qian Wen-Xiu Gu Yang Zong Qian Chen Long Lu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2020年第25期3586-3602,共17页
BACKGROUND Pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC) is one of the deadliest solid tumors. Identification of diagnostic and therapeutic biomarkers for PDAC is urgently needed. Transducin(β)-like 1 X-linked receptor 1(TB... BACKGROUND Pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC) is one of the deadliest solid tumors. Identification of diagnostic and therapeutic biomarkers for PDAC is urgently needed. Transducin(β)-like 1 X-linked receptor 1(TBL1 XR1) has been linked to the progression of various human cancers. Nevertheless, the function and role of TBL1 XR1 in pancreatic cancers are unclear.AIM To elucidate the function and potential mechanism of TBL1 XR1 in the development of PDAC.METHODS Ninety patients with histologically-confirmed PDAC were included in this study. PDAC tumor samples and cell lines were used to determine the expression of TBL1 XR1. CCK-8 assays and colony formation assays were carried out to assess PDAC cell viability. Flow cytometry was performed to measure the changes in the cell cycle and cell apoptosis. Changes in related protein expression were measured by western blot analysis. Animal analysis was conducted to confirm the impact of TBL1 XR1 in vivo.RESULTS Patients with TBL1 XR1-positive tumors had worse overall survival than those with TBL1 XR1-negative tumors. Moreover, we found that TBL1 XR1 strongly promoted PDAC cell proliferation and inhibited PDAC cell apoptosis. Moreover, knockdown of TBL1 XR1 induced G0/G1 phase arrest. In vivo animal studies confirmed that TBL1 XR1 accelerated tumor cell growth. The results of western blot analysis showed that TBL1 XR1 might play a key role in regulating PDAC cell proliferation and apoptosis via the PI3 K/AKT pathway.CONCLUSION TBL1 XR1 promoted PDAC cell progression and might be an effective diagnostic and therapeutic marker for pancreatic cancer. 展开更多
关键词 Pancreatic ductal adenocarcinoma tbl1xr1 PROLIFERATION PI3K/AKT pathway
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上皮性卵巢癌组织TBL1XR1、PPA1的表达及其与临床病理参数和预后的关系研究 被引量:3
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作者 许明浩 周士源 +2 位作者 周明 初学 高星 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第10期1988-1991,1967,共5页
目的:探讨上皮性卵巢癌组织中转导素β1X连锁受体蛋白1(TBL1XR1)和无机焦磷酸酶(PPAl)的表达及二者与临床病例参数和患者预后的关系。方法:收集2011年2月至2015年4月入住我院的并进行手术切除的88例上皮性卵巢癌患者的组织样本,采用免... 目的:探讨上皮性卵巢癌组织中转导素β1X连锁受体蛋白1(TBL1XR1)和无机焦磷酸酶(PPAl)的表达及二者与临床病例参数和患者预后的关系。方法:收集2011年2月至2015年4月入住我院的并进行手术切除的88例上皮性卵巢癌患者的组织样本,采用免疫组化的方法检测88例组织样本和相对应的癌旁组织中TBL1XR1和PPAl的表达情况,同时分析TBL1XR1和PPAl表达情况与上皮性卵巢癌患者临床病理参数之间的关系;随访至2019年9月,绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析TBL1XR1和PPAl表达与上皮性卵巢癌患者预后的关系。结果:上皮性卵巢癌组织中TBL1XR1高表达率为48.86%(43/88),TBL1XR1的表达与FIGO分期、病理分级和淋巴结转移相关(P<0.05);Kaplan-Meier分析结果显示上皮性卵巢癌组织中TBL1XR1高表达的患者具有相对较差的预后。PPAl在上皮性卵巢癌组织中高表达率为40.91%(36/88),同样的PPAl的表达与病理分级、淋巴结转移和FIGO分期相关(P<0.05);Kaplan-Meier结果分析表明PPAl高表达的患者具有相对较短的预后生存期。结论:上皮性卵巢癌组织样本中TBL1XR1和PPAl均存在表达,并且二者的表达情况与上皮性卵巢癌患者的预后生存紧密相关,TBL1XR1和PPAl的过表达可能是上皮性卵巢癌患者的不利预后因素,或可作为上皮性卵巢癌患者潜在的预后生物标志物。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 tbl1xr1 PPAl 临床病理参数 预后
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宿主基因TBL1XR1沉默对水疱性口炎病毒复制的影响
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作者 孙诗惠 王仁铃 +3 位作者 宋德光 贺文琦 高丰 关继羽 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2277-2281,共5页
为揭示转导蛋白(β)样1X连接受体1(TBL1XR1)对水疱性口炎病毒(VSV)复制的影响,首先设计并构建沉默TBL1XR1的shRNA表达载体,并以其作为包装慢病毒的穿梭质粒,同骨架质粒共转染239T细胞后,成功包装出表达shTBL1XR1的慢病毒颗粒。以慢病毒... 为揭示转导蛋白(β)样1X连接受体1(TBL1XR1)对水疱性口炎病毒(VSV)复制的影响,首先设计并构建沉默TBL1XR1的shRNA表达载体,并以其作为包装慢病毒的穿梭质粒,同骨架质粒共转染239T细胞后,成功包装出表达shTBL1XR1的慢病毒颗粒。以慢病毒感染小鼠巨噬细胞RAW264.7并建立TBL1XR1表达沉默的细胞系,同时构建不靶向任何基因的对照细胞系。最后,用VSV感染TBL1XR1沉默细胞系,并通过荧光定量PCR方法检测VSV的复制能力。结果发现,对TBL1XR1进行沉默能显著抑制VSV的复制,推测TBL1XR1及其相关复合物在VSV侵染过程中起到了一定的辅助作用。研究结果不仅为揭示VSV的致病机理奠定基础,也对VSV的疫病防控起到一定的指导作用。 展开更多
关键词 水疱性口炎病毒 病毒复制 巨噬细胞 转导蛋白(β)样1X连接受体1(tbl1xr1)
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转导蛋白β样1X连接受体1表达对卵巢癌A2780细胞增殖和迁移的影响
7
作者 褚秀 金蔚 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2024年第4期331-337,共7页
目的:研究转导蛋白β样1X连接受体1(transducin beta-like 1X-linked receptor,TBL1XR1)在卵巢癌患者组织中表达,及其对卵巢癌A2780细胞增殖和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测10对卵巢癌组织、癌旁组织中及人卵巢癌I... 目的:研究转导蛋白β样1X连接受体1(transducin beta-like 1X-linked receptor,TBL1XR1)在卵巢癌患者组织中表达,及其对卵巢癌A2780细胞增殖和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测10对卵巢癌组织、癌旁组织中及人卵巢癌IOSE80、A2780、CP70、SKOV-3中TBL1XR1 mRNA表达,筛选TBL1XR1 mRNA高表达细胞株。选择4~6周龄雌性BALB/C裸鼠,建立卵巢癌人源肿瘤异种移植(patient-derived tumor xenografts,PDTX)模型;将10只模型鼠均分为siR-NC组和si-TBL1XR1组,每组5只,分别给予siR-NC、si-TBL1XR1局部注射,10 mg/kg,每3 d注射1次,18 d后取各组瘤组织,计算其体积与重量。取卵巢癌A2780细胞,将其分为siR-NC组、si-TBL1XR1组、pcDNA3.1组和pcDNA3.1-TBL1XR1组,分别予以siR-NC、si-TBL1XR1、pcDNA3.1空载质粒和pcDNA3.1-TBL1XR1质粒处理;采用蛋白免疫印迹法检测各组卵巢癌细胞周期蛋白表达,MTT比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡细胞比例,以及Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力。结果:卵巢癌组织中TBL1XR1 mRNA表达明显高于癌旁组织(P<0.05);人卵巢癌A2780细胞系TBL1XR1 mRNA表达明显高于卵巢癌IOSE80、CP70、SKOV-3细胞系(P<0.05)。与siR-NC组相比,第18天si-TBL1XR1组瘤体积明显减小(P<0.05),重量明显降低(P<0.05)。与siR-NC组相比,si-TBL1XR1组促癌细胞周期蛋白表达明显降低(P<0.05),与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-TBL1XR1组表达则明显升高(P<0.05);与siR-NC组相比,si-TBL1XR1组卵巢癌细胞迁移数明显降低(P<0.05),早期凋亡和晚期凋亡细胞比例明显升高(P<0.05);与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-TBL1XR1组卵巢癌细胞迁移数明显增多(P<0.05),早期凋亡和晚期凋亡细胞比例明显降低(P<0.05)。结论:TBL1XR1在卵巢癌组织中呈高表达,降低TBL1XR1 mRNA表达可抑制卵巢癌A2780细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 卵巢癌 转导蛋白β样1X连接受体1(tbl1xr1) 人源肿瘤异种移植模型 细胞周期
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微小RNA-199对胃癌细胞增殖和迁移的影响 被引量:1
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作者 闫超 张连海 +3 位作者 陕飞 李双喜 贾永宁 李子禹 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期528-533,共6页
目的检测微小RNA(miR)-199在胃癌组织以及胃癌细胞株的表达,探讨miR-199对胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应技术检测miR-199在51例胃癌组织和配对癌旁组织以及胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达,建立m... 目的检测微小RNA(miR)-199在胃癌组织以及胃癌细胞株的表达,探讨miR-199对胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应技术检测miR-199在51例胃癌组织和配对癌旁组织以及胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达,建立miR-199过表达或低表达的胃癌细胞株,采用细胞增殖实验、细胞迁移实验、蛋白免疫印迹技术检测胃癌细胞的增殖、迁移能力的变化及其相关机制。结果 miR-199在胃癌组织中的相对表达量显著低于配对的癌旁组织,差异有统计学意义(0.2635±0.0303比1.6700±0.9613,t=13.95,P<0.001);在胃癌细胞株AGS(0.81,t=9.13,P<0.001)、SGC-7901(0.83,t=8.88,P<0.001)、MKN28(0.58,t=10.80,P<0.001)、KATO-Ⅲ(0.60,t=10.31,P<0.001)、MKN-45(0.27,t=13.10,P<0.001)中的相对表达量显著低于正常胃黏膜上皮细胞GES-1(2.1),差异有统计学意义;在胃癌细胞株MKN-45中,高表达miR-199组细胞的增殖能力、迁移能力较对照组胃癌细胞显著降低,差异有统计学意义(731±13比345±18,t=24.90,P<0.001);在胃癌细胞KATO-Ⅲ中,低表达miR-199组细胞的增殖能力、迁移能力较对照组胃癌细胞显著增强,差异有统计学意义(257±16比657±8,t=32.59,P<0.001)。双荧光素酶报告实验显示miR-199可以直接作用于TBL1XR1的3’非翻译区,调控TBL1XR1的表达。Western blot结果显示高表达miR-199后,TBL1XR1表达水平降低。结论 miR-199在胃癌组织中呈低表达,可能与胃癌细胞的增殖和迁移能力有关,miR-199的作用可能是通过调控TBL1XR1实现的。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA-199 细胞增殖 细胞迁移 tbl1xr1
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基于TCGA数据库筛选宫颈鳞状细胞癌潜在的预后标志物及验证
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作者 颜怡君 杨宏英 +3 位作者 张红平 李政 贾岳 赵敏 《昆明医科大学学报》 CAS 2023年第8期14-26,共13页
目的筛选并验证宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CESC)潜在的miRNA预后标志物,初步探究CESC发生的分子机制。方法利用TCGA数据库中宫颈鳞状细胞癌组织和癌旁组织的miRNA测序信息及患者临床数据,通过生物信息学分析,构... 目的筛选并验证宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CESC)潜在的miRNA预后标志物,初步探究CESC发生的分子机制。方法利用TCGA数据库中宫颈鳞状细胞癌组织和癌旁组织的miRNA测序信息及患者临床数据,通过生物信息学分析,构建了由4个miRNAs(miR-505-5p、miR-142-3p、miR-532-5p、miR-218-1-3p)组成的预测宫颈鳞状细胞癌患者预后的风险模型并进行诊断效果评价,同时应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测21对CESC组织及癌旁正常组织中该4个miRNAs的表达水平,以差异表达显著的miR-505-5p作为研究对象,分析其表达水平与CESC患者各临床病理特征间的关系。在CESC细胞中转染miR-505-5p mimics后通过细胞实验探究miR-505-5p对CESC细胞功能的影响;最后通过生物信息法预测miR-505-5p的可能靶基因,并通过RT-PCR及Western blot实验进行验证。结果通过对TCGA数据库中宫颈鳞状细胞癌相关数据的分析,构建了由4个miRNAs(miR-505-5p、miR-142-3p、miR-532-5p、miR-218-1-3p)组成的预后风险模型,预后风险模型能有效地将CESC患者分为预后不良的高风险组和低风险组;miR-505-5p在收集到的21对CESC组织中的表达低于癌旁组织(P<0.05),其表达量与CESC患者的临床分期和侵袭程度负相关;过表达miR-505-5p后抑制了宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞的增殖(P<0.05)、迁移,促进了凋亡(P<0.05);TBL1XR1作为miR-505-5p的最佳预测靶基因,过表达miR-505-5p后TBL1XR1的RNA水平及蛋白水平下降(P<0.05)。结论miR-505-5p可作为CESC患者的潜在预后标志物,在CESC中miR-505-5p可能通过靶向TBL1XR1发挥抑癌作用。 展开更多
关键词 宫颈鳞状细胞癌 预后标记物 miR-505-5p tbl1xr1
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