TC2N基因促进黑色素瘤的生长及其机制

目的初步探讨TC2N基因对皮肤黑色素瘤(skin cutaneous melanoma,SKCM)发生的影响及其作用机制。方法使用人类蛋白质图谱(The Human Protein Atlas,HPA)和肿瘤基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析TC2N在SKCM中的表达及与临床病理特征的关系。利用人黑色素瘤A375构建TC2N基因的过表达细胞模型,采用CCK-8法检测TC2N在细胞增殖中的作用。利用TC2N基因敲除小鼠构建皮肤黑色素移植瘤模型,观察并测量移植瘤的生长,通过免疫组化测定Ki67在移植瘤组织中的表达,分析肿瘤细胞的增殖。此外,进行基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)探索TC2N表达与ERK/MAPK信号通路的相关性,并利用RT-qPCR和Western blot法检测相关基因CyclinD1、c-Myc、CDK2和CyclinE1在体内外的mRNA及蛋白表达水平。结果与正常皮肤组织比较,SKCM组织中TC2N的表达水平更高,且TC2N基因的高表达与SKCM患者的临床病理分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05)。体外细胞实验发现,过表达TC2N基因后,A375细胞的增殖能力显著增加(P<0.05)。敲除小鼠皮下移植瘤模型结果显示,与TC2N^(+/+)小鼠比较,TC2N-/-小鼠肿瘤质量和体积明显降低(P<0.05),提示TC2N基因敲除后显著抑制SKCM的生长。GSEA富集分析提示TC2N与MAPK信号通路显著相关(P<0.01),且TC2N基因与ERK/MAPK下游基因表达呈正相关(P<0.01)。体内外实验均发现,TC2N表达显著促进ERK与p-ERK表达,且影响ERK相关分子CyclinD1、c-Myc、CDK2和CyclinE1的mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01)。结论TC2N基因可能通过激活ERK/MAPK信号通路促进皮肤黑色素瘤的生长。

SH3TC2促进结直肠癌的发生与进展——基于生信分析

目的:基于TCGA和GTEx样本数据信息挖掘在结直肠癌中异常表达且与预后相关的基因,以期提高其诊疗效果和改善预后生存。方法:利用GEPIA 2.0可视化分析平台对公共数据库中癌及癌旁1034个组织标本数据进行差异表达和预后生存相关mRNA筛选,使用FunRich软件通过韦恩图筛选共同差异基因并进行GO和KEGG富集分析,再通过GEPIA2.0和UALCAN数据库进行关键差异基因的表达和预后验证;接着通过TIMER2.0数据库探索关键基因的表达水平与免疫细胞浸润的相关性;最后通过STRING数据库在线进一步分析关键基因的蛋白相互作用网络。结果:共筛选到11106个差异表达基因(结肠癌5337个,直肠癌5769个),与二者预后OS及DFS相关的500个基因取交集,筛选出BGLAP、COQ2、CRLF1、PREX2、SH3TC2、PTPRM、ZNF154、HOXA4等8个表达差异基因且与预后生存DFS相关。验证后发现BGLAP、COQ2、CRLF1、PREX2、PTPRM、ZNF154、HOXA4可能在癌症的不同阶段发挥促癌、抑癌的双重功能;仅SH3TC2在结直肠癌中高表达(P<0.01),而预后生存分析表明高表达患者预后DFS显著更短(P<0.01),与预后OS无统计学差异(P>0.05);其表达水平与肿瘤免疫浸润评估显示结肠癌与CD4+T细胞浸润相关性,最高仅0.124(P=0.013),直肠癌中与免疫细胞浸润相关性无统计学意义(P>0.05);STRING数据库分析提示SH3TC2与SBF2、LITAF、MTMR2、MTMR2、GDAP1等蛋白相互作用可能性较大。结论:SH3TC2在结直肠癌中高表达,且高表达患者预后DFS更短,有可能是结直肠癌新的潜在诊断和预后DFS判断的标志物;SH3TC2表达水平在结直肠癌中与免疫细胞浸润相关性较弱。

动态测定外周血Tc1/Tc2比值对评估老年慢性阻塞性肺病复发的价值研究

目的检测不同吸烟状态的C和D级慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血CD8^+T淋巴细胞中TC1百分比和TC2百分比,探讨动态测定外周血TC1/TC2比值对评估老年COPD患者1年内复发的价值。方法选取2018年7月-2019年8月浦南医院呼吸科住院的C级和D级AECOPD老年患者90例,根据吸烟状态不同分为3组:吸烟组(n=30)、戒烟组(n=30)h和不吸烟组(n=30)。在入院时、出院时、6个月及12个月,采用流式细胞仪测定患者外周血CD8^+T淋巴细胞中IFN-和IL-4水平,以及血常规、hs-CRP、血清IL-6和IL-8浓度,记录患者肺功能(FEV1%)和CAT问卷评分等,并记录12个月内患者急性加重次数,计算不同时间点外周血TC1/TC2比值与其他指标的关系,分析其相关性。结果吸烟组COPD患者1年内急性加重次数明显高于戒烟组和不吸烟组,3组患者1年内的病死率分别为:16.67%、10.00%、3.30%,吸烟组病死率高于戒烟组和不吸烟组。入组时,3组外周血CD8^+T淋巴细胞中TC1百分比、TC2百分比、TC1/TC2比值、血hs-CRP、IL-6、IL-8浓度差异均有统计学意义(P<0.05),而WBC、FEV1%、CAT评分差异均无统计学意义(P>0.05)。随访1年后,3组患者外周血TC1百分率、TC2百分率、TC1/TC2比值、IL-6、IL-8有统计学差异(P<0.05),其他指标均无统计学差异。3组入院时,外周血TC1百分比、TC2百分比、TC1/TC2比值、IL-6、IL-8浓度、血WBC、血hs-CRP、CAT评分均高于出院时和随访1年后,而FEV1%低于出院时(P<0.05);吸烟组入院时TC1百分比、TC1/TC2比值高于戒烟组和不吸烟组,而TC2百分比低于戒烟组和不吸烟组(P<0.05);3组外周血TC1/TC2比值与IL-6、IL-8呈正相关(P<0.05),而与FEV1%呈负相关(P<0.05)。结论COPD患者外周血中TC1/TC2比值可能与慢性阻塞性肺疾病急性加重有关。

Th1/Th2及Tc1/Tc2在胃癌患者外周血中的漂移及意义

目的:研究胃癌患者外周血Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移状况,并分析其免疫预存状态.方法:2008-10-21/2008-12-05中国人民解放军总医院普通外科新入院的术前胃癌患者外周血样本25例,同期健康献血员正常对照组外周血样本25例.四色流式细胞仪检测胃癌患者及正常对照人群外周血激活的淋巴细胞内细胞因子(IFN-γ、IL-4),并分析Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移状态.结果:胃癌患者外周血Th1/PBL、Tc1/PBL、Th1/Th2、Tc1/Tc2比值均较正常对照组明显减少(6.242%±4.078%vs3.047%±1.710%,14.171%±8.984%vs6.393%±5.235%,3.127%±3.633%vs1.172%±0.300%,17.200%±25.930%vs3.252%±8.732%,均P<0.01).结论:胃癌患者Th1及Tc1细胞比例减少,并出现Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移现象,提示胃癌患者预存免疫状态低下,机体抗肿瘤免疫功能抑制.

特发性血小板减少性紫癜患儿Th1/Th2、Tc1/Tc2亚群漂移的研究

目的 :探讨特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患儿外周血Th/Tc、Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞的平衡状态。方法 :收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血 ,分离纯化得T细胞 ,以PE标记的抗CRTH2单抗和Cy5标记的抗CD4、CD8单抗作双色流式细胞术 ,分析ITP患儿Th/Tc、Th1/Th2、Tc1/Tc2比例的变化。结果 :ITP患儿外周血T细胞与健康儿童相比 ,Th细胞百分率及Th/Tc比例明显下降 (P <0 0 5 ) ,Tc细胞百分率无明显变化 (P >0 0 5 ) ;Th1及Th2细胞百分率明显下降 (P <0 0 5 ) ,Tc1及Tc2细胞百分率无明显变化 (P >0 0 5 ) ,Th1/Th2及Tc1/Tc2比例明显升高 (P <0 0 5 )。结论 :ITP患儿外周血存在细胞免疫功能低下及T细胞亚群漂移 ,Th1及Tc1细胞比例升高 ,呈明显Th1类细胞优势。

表面处理对TC2钛合金电偶腐蚀的影响

针对航空Ti合金与不同表面处理状态下Al合金、高强钢之间的偶合 ,研究了在 3 5 %NaCl溶液中 ,阳极化、镀铜、镀镉、磷化等处理方法对异接金属腐蚀的影响作用 ;采用电偶实验方法研究了上述表面处理方法对电偶电流大小 ,及电偶电流随时间变化规律的影响 ;结合扫描电镜、能谱分析 。

天花粉蛋白通过激活CD8Tc2亚群诱导人体免疫抑制

为了探讨天花粉蛋白(Tk)诱导免疫抑制的机制,采用抗原非特异性T淋巴母细胞增殖系统,筛选了37个Tk致敏的抑制性T细胞系。分析表明,健康人体内Tk相关抑制性T细胞的频率为5.0×10-7～10.8×10-7,该细胞系属CD8+TCRαβ+,细胞因子表达格局呈现向IL-4和IL-10明显偏移和IFN-γ分泌明显下降的格局。结合我们已有关于CD8+T细胞介导Tk相关应答而不显示细胞毒性的工作,可从表型和功能分析上确认,Tk针对体外人体淋巴细胞增值的免疫抑制,由CD8Tc2细胞介导。

TC2钛合金Nd:YAG激光焊接工艺及微观组织

为修复飞机TC2钛合金结构裂纹,应用YAG激光器进行了TC2钛合金的焊接实验。利用扫描电镜(SEM)和电子显微硬度仪分析了工艺参数对焊缝形貌和焊缝截面显微硬度的影响。结果表明:随着电流的升高,焊缝的熔宽逐渐增加,焊缝截面形貌由钉型向X型转变;随着焊接速度的增大,焊缝的熔宽呈减小趋势。采用电流150A、脉宽10ms、频率4Hz、焊接速度2.0mm/s的工艺参数可获得宏观质量良好的焊缝。焊缝熔合区可能为针状马氏体α′交织成的网篮组织;热影响区为75μm左右的环形带,其组织可能是由等轴的α相和针状马氏体组成,靠近熔合线部分较之远离熔合线的区域针状马氏体数量更多且更加密集,靠近熔合线区域有逐渐减弱的再结晶,再结晶尺寸明显大于基材;焊缝截面的显微硬度呈明显的阶梯状分布,基材的硬度在310～350HV0.5之间,熔合区的硬度在500～600HV0.5之间,熔合区硬度相对于基材提高了60%左右。

Th1/Th2、Tc1/Tc2亚群在乙肝肝硬化患者中的作用

目的 :探讨乙肝肝硬化患者外周血 (PBMC)中CD4 + 和CD8+ T细胞内Th1和Th2类细胞的平衡状态 ,探明Th1、Th2类细胞在乙肝肝硬化中的作用。方法 :乙肝肝硬化患者CD4 + T细胞和CD8+ T细胞中IFN γ+ 和IL 4 + 细胞的百分率 ,观察乙肝肝硬化患者Th1 Th2、Tc1 Tc2比例的变化。结果 :乙肝肝硬化患者PBMC中CD4 ,CD8细胞 ,CD4 CD8比值与健康对照者相比无统计学差异 (P >0 0 5 ) ,Th1细胞及Tc1细胞百分率为 8 8% ,9 0 % ,较健康对照者 7 5 % ,7 7%升高 (P <0 0 5 )。结论 :乙肝肝硬化患者外周血T细胞亚群发生Th1类偏移 。

TC2模型中的top-Higgs粒子在大型强子对撞机上单体产生过程的研究

TC2模型是受人关注的新物理模型之一,但此模型的正确性需要高能物理实验来检验.欧洲核子中心的大型强子对撞机(LHC)的即将投入运行无疑为此模型的检验提供了契机.对TC2模型的中性特征粒子top-Higgs在LHC上单体产生的过程进行了计算.研究结果表明,在大多数合理的参数空间内,这个过程的散射截面能够达到数十个pb的量级,因此,这个反映过程值得关注.

复发性生殖器疱疹患者外周血Tc1/Tc2亚群检测及意义

目的检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者不同病期外周血CD8+T细胞IFNγ和IL4的水平,分析其与病程、复发次数间的关系,探讨其在RGH发病中的作用。方法应用流式细胞仪对30例发作期、20例发作间歇期患者和15名健康志愿者外周血CD8+T细胞IFNγ和IL4的水平进行检测。结果发作期患者外周血Tc1百分率显著低于正常对照组(P<0.001),其中近半年复发≥3次者呈极显著性降低(P<0.001);Tc1/Tc2比值显著低于正常对照组(P<0.05);发作期患者的复发次数与Tc1和Tc1/Tc2比值显著相关(P均<0.05);在发作间歇期近半年复发≥3次患者外周血Tc1百分率显著低于正常对照组(P<0.05),发作间歇期患者的复发次数与Tc1显著相关(P<0.05)。结论近期反复发作患者外周血Tc1细胞水平低下和Tc1/Tc2比例失衡,Tc1细胞水平低下是潜伏单纯疱疹病毒活化和RGH复发的重要原因之一。

二期梅毒患者外周血Th1/Th2及Tc1/Tc2的研究

目的探讨CD4+T细胞(Th细胞)和CD8+T细胞(Tc细胞)亚群在梅毒发病机理中的作用及其相互关系。方法采用流式细胞术检测经三色荧光抗体染色的二期梅毒患者外周血CD4+/IFN-γ+(Th1),CD4+1/IL-4+(Th2),CD4+/IFN-γ+/IL-4+(Tho),CD8+/IFN-γ+(Tc1),CD8+/IL-4+(Tc2),CD8+/IFN-γ+/IL-4+(Tc0)细胞含量。结果梅毒组Th1细胞含量、Th1/Th2,Tc1/Tc2比值均明显低于正常对照组(P<0.01),而Tc0和Tc2细胞含量显著高于正常对照组,其他细胞两组间无显著性差异(P>0.05)。结论二期梅毒患者Th1/Th2及Tc1/Tc2比值失衡,可能是机体不能完全清除梅毒螺旋体造成其潜伏体内形成长期感染的重要因素之一。

TC2钛合金异型件热成形工艺研究

针对TC2钛合金异型零件的成形难题,设计了沿型面压边结构和中心顶出结构的2种成形工装,采用在不同温度下热成形的工艺方法。最后得出此种异型零件的适宜成形温度及成形工装结构。

TC2钛合金薄板CO_2激光焊接接头组织与性能研究

试验研究了TC2钛合金CO2激光焊接接头的组织与静态力学性能。研究表明,高功率下焊接接头的横截面形貌随着线能量的增大由X型向U型转变,低功率时焊接接头的横截面形貌随着线能量的增大由T型向U型转变。激光焊接接头的焊缝区显微组织由α、针状马氏体α′和少量β相组成。力学性能分析表明,焊缝区的硬度比母材高约60 HV,热影响区硬度最低且相邻位置变化较大,静态拉伸时焊接试片一般断裂于接头热影响区附近,强度为945-975 MPa。

天花粉蛋白诱导小鼠Th2/Tc2亚群分化与MHC背景相关

为阐明天花粉蛋白 (Tk )诱导免疫抑制和基因调控的机制 ,应用ELISA方法动态测定小鼠OVA特异性T淋巴细胞培养上清液中T细胞亚群相关细胞因子的含量 ,观察Tk对高、低易感品系小鼠T细胞分泌细胞因子格局的影响。发现Tk作用下 ,高易感品系C5 7BL/ 6 (H 2 b)IL 4、IL 10分泌量大幅度增高 ,IFN γ显著下降 ;而低易感品系C3H/He (H 2 k)相应的细胞因子变化极小。上述结果表明 :(1)Tk可诱导功能性T细胞亚群向Th2 /Tc2方向分化 ,并导致OVA特异性T细胞增殖受抑 ;(2 )T细胞亚群分化与MHC背景密切相关。

TC2模型中Top-pion介子在ILC上的产生

在顶色辅助的人工色(TC2)模型框架下,研究了中性top-pion介子∏0t和带电top-pion介子∏t-的联合产生过程e+e-→W+∏t0∏t-.研究结果表明在TC2模型合理的参数空间内,其产生截面可达到10 fb的量级,并且产生截面随质心能量的升高而增大,在未来的高能直线对撞机上可产生足够多的事例.另外,味改变耦合∏t0t-c的存在,使得实验能通过背景非常干净的衰变道∏t0→t-c来探测∏t0.因此通过此过程可在将来的高能直线对撞机实验中探测到top-pion介子的明显信号.

光子对撞机上TC2模型下top-pion介子对产生过程

在TC2模型下通过γγ→πt+πt-过程研究了对产生带电top-pion介子.结果表明,对于γγ→πt+πt-过程,其产生截面能够达到100fb量级.在年积分亮度为500fb-1的高能直线对撞机上,通过γγ→πt+πt-过程,每年能收集到数以千计的πt+πt-事例.有如此多的事例数和干净的背景,带电top-pion介子应该能在光子对撞机上被观测到.因此,该研究能帮助寻找带电top-pion介子,并为检验TC2模型提供很好的理论依据.

乙型肝炎外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2表达失衡的临床意义

目的探讨Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞因子在乙型肝炎中的表达及临床意义。方法采用流式细胞术分析乙型肝炎患者外周血不同T淋巴细胞亚群中细胞因子(IFN-γ、IL-4)的表达,分别比较急慢性乙型肝炎以及慢性轻、中、重度肝炎IFN-γ、IL-4表达水平的变化。结果慢性肝炎Th2、Tc2细胞高于急性肝炎(P<0.01;P<0.05);相对于轻度组,中度Th1、Tc1以及重度组Th1、Tc1均有升高(P<0.01),相对于中度组,重度组Th1、Tc1亦有增高(P<0.05;P<0.01)。结论乙型肝炎外周血Th2、Tc2与炎症慢性化有关;随着慢性乙型肝炎活动程度的加剧Th1、Tc1细胞逐渐增多。

慢性乙型重型肝炎患者外周血Th1/Th2,Tcl/Tc2的表达

分析慢性乙型重型肝炎患者外周血Th1/Th2 ,Tc1/Tc2的表达特点,探讨其与重型肝炎的关系。用流式细胞仪检测31例重型肝炎和2 0例正常对照者外周血T细胞胞内细胞因子IFN -γ、IL - 4的百分率,发现:1 重型肝炎Th1、Th2、Tcl分别为(2 7 .4 1±4 . 88) %、(3 .4 8±2 . 6 7) %、(43 .85±12 . 98) % ,显著高于正常对照,且以Th1和Tcl表达为主;2 重症期与恢复期相比,康复后Th1、Th2、Tcl显著下降,尤以Tcl下降更明显(P均<0. 0 1) ;3 生存组与死亡组比较,Th1、Tcl无显著性差异(P >0 . 0 5 )。Th1、Th2、Tcl与重型肝炎的发生转归有密切关系,动态检测可作为监测病情和判断预后的指标。