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长链非编码RNA NCK1-AS1作为海绵体与TCF4竞争结合miR-153-5p调节乳腺癌细胞侵袭、炎症和凋亡
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作者 杨婵婵 杨文辉 +3 位作者 张文涛 乔龙飞 佘明豪 赵亚鹏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期777-782,共6页
目的:研究LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p调节转录因子4(TCF4)对乳腺癌细胞生长、运动和炎症因子的影响。方法:以乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7作为体外研究对象,将裸鼠作为体内研究对象。RT-qPCR检测组织和细胞中LncRNA NCK1-AS1、miR-153... 目的:研究LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p调节转录因子4(TCF4)对乳腺癌细胞生长、运动和炎症因子的影响。方法:以乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7作为体外研究对象,将裸鼠作为体内研究对象。RT-qPCR检测组织和细胞中LncRNA NCK1-AS1、miR-153-5p和TCF4表达;TargetScan预测与双荧光素酶报告实验验证LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p的靶向关系;Transwell检测细胞侵袭;ELISA检测炎症因子水平;流式细胞术检测凋亡;Western blot检测TCF4、c-myc、c-jun蛋白水平;裸鼠皮下注射MDA-MB-231细胞建立移植瘤模型;免疫组化检测Caspase-3、VEGF阳性细胞百分比。结果:LncRNA NCK1及TCF4在癌组织和细胞中高表达,而miR-153-5p则低表达。与对照组比较,LncRNA NCK1-AS1干扰抑制乳腺癌细胞侵袭和炎症反应,并促进其凋亡。LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p存在靶向关系。与对照组相比,LncRNA NCK1-AS1干扰和miR-153-5p过表达降低了细胞TCF4、c-myc和c-jun表达,而TCF4转染上调TCF4、c-myc和c-jun表达。与sh-NC组比较,shNCK1-AS1组裸鼠肿瘤体积、重量降低,NCK1-AS1表达降低,miR-153-3p表达升高,Caspase-3阳性细胞百分比升高,VEGF阳性细胞百分比降低,TCF4、c-myc和c-jun蛋白表达降低。结论:LncRNA NCK1-AS1和miR-153-3p通过TCF4调节乳腺癌细胞侵袭、炎症和凋亡。 展开更多
关键词 LncRNA NCK1-AS1 tcf4 免疫组化 双荧光素酶报告实验 乳腺癌
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LEF-1协助TCF-1决定蛋白免疫应答中滤泡辅助T细胞的功能
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作者 张瑜 杨燕 +3 位作者 谢东京 谢谆怡 黄煌 周新元 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期93-101,共9页
目的探讨在蛋白免疫应答中转录因子TCF-1与LEF-1在滤泡辅助T细胞的分化与功能中的地位。方法对他莫昔芬诱导的条件敲除Tcf7与Lef1小鼠采用NP-KLH联合铝佐剂免疫或者NP-CGG联合完全弗氏佐剂免疫,分析应答过程中滤泡辅助T细胞的分化与功能... 目的探讨在蛋白免疫应答中转录因子TCF-1与LEF-1在滤泡辅助T细胞的分化与功能中的地位。方法对他莫昔芬诱导的条件敲除Tcf7与Lef1小鼠采用NP-KLH联合铝佐剂免疫或者NP-CGG联合完全弗氏佐剂免疫,分析应答过程中滤泡辅助T细胞的分化与功能,检测蛋白免疫应答中T细胞与B细胞TCF-1与LEF-1的表达量,并用脾脏嵌合小鼠模型验证TCF-1与LEF-1对于滤泡辅助T细胞功能的重要性。结果Tcf7与Lef1敲除小鼠的滤泡辅助T细胞分化是正常的,而B细胞应答严重缺陷。同时,Tcf7敲除小鼠的B细胞应答也是缺陷的,而Lef1敲除小鼠的B细胞应答是完整的;TCF-1与LEF-1在滤泡辅助T细胞中大量表达,而在B细胞中不表达;脾脏嵌合小鼠模型提示,在有正常滤泡辅助T细胞的帮助下,B细胞中TCF-1与LEF-1的缺失不会导致B细胞应答缺陷。结论在蛋白免疫应答中,TCF-1与LEF-1对于滤泡辅助T细胞的分化是不重要的,LEF-1协助TCF-1通过影响滤泡辅助T细胞的功能而影响B细胞应答。 展开更多
关键词 蛋白免疫 滤泡辅助T细胞 B细胞应答 tcf-1 lef-1
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TAK1与TCF-4在非小细胞肺癌中表达及其相关性的初步研究 被引量:2
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作者 齐泽铖 李旭 +2 位作者 郭英伟 徐晓文 王晓军 《广州医药》 2023年第6期17-22,共6页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中转化生长因子β激活激酶1(TAK-1)与T细胞因子-4(TCF-4)在mRNA以及蛋白水平的表达情况及其相关性,并分析两者与NSCLC患者临床病理因素的关系。方法收集NSCLC手术标本51例,每例均包含肺癌组织及配对癌... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中转化生长因子β激活激酶1(TAK-1)与T细胞因子-4(TCF-4)在mRNA以及蛋白水平的表达情况及其相关性,并分析两者与NSCLC患者临床病理因素的关系。方法收集NSCLC手术标本51例,每例均包含肺癌组织及配对癌旁组织,所有患者的术后诊断均经病理结果证实,通过RT-PCR以及Western blot法检测TAK1、TCF-4在癌组织及配对癌旁组织中的表达情况,并通过SPSS进一步分析两者的相关性及其与临床病理因素的关系。结果TAK1与TCF-4 mRNA以及蛋白水平在NSCLC患者癌组织中均高表达,其中TAK1蛋白的表达与NSCLC的TNM分期(P=0.022)、淋巴结转移(P=0.014)相关,TCF-4蛋白的表达与NSCLC的TNM分期相关(P=0.045)。TAK1在NSCLC组织中的表达与TCF-4呈正相关(r=0.427,P=0.002)。结论TAK1 mRNA及蛋白水平在NSCLC组织中均高表达,并与TCF-4呈正相关,TAK1有可能成为NSCLC诊断及预后的一个潜在靶标,并且TAK1与TCF-4的联合应用有可能成为一种更为理想的NSCLC辅助诊断及临床治疗方法。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 转化生长因子激活激酶1 T细胞因子-4 WNT/Β-CATENIN信号通路
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NGX6对Wnt/β-catenin通路β-catenin/TCF/LEF转录活化的影响 被引量:7
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作者 刘芬 沈守荣 +4 位作者 李宏韬 王晓艳 彭娅 廖曼甜 郭勤 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期985-991,共7页
目的:探讨NGX6基因对结肠癌Wnt信号转导通路β-catenin/TCF/LEF转录活化的影响,明确NGX6在Wnt/β-catenin信号转导通路中的作用机制。方法:(1)构建β-catenin野生型真核表达载体pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT),(2)转染外源性pcDNA3.1(+)-β... 目的:探讨NGX6基因对结肠癌Wnt信号转导通路β-catenin/TCF/LEF转录活化的影响,明确NGX6在Wnt/β-catenin信号转导通路中的作用机制。方法:(1)构建β-catenin野生型真核表达载体pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT),(2)转染外源性pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT)及pCMV-myc-NGX6于COS-7细胞,TCF-4荧光素酶报告质粒检测转染NGX6前后TCF-4的转录活性。(3)无外源性β-cate-nin,pCMV-myc-NGX6单独转染COS-7细胞及结肠癌SW620细胞,TCF-4荧光素酶报告质粒检测TCF-4的转录活性,并采用Western blot的方法检测两组细胞核内β-catenin及TCF-4的表达。结果:(1)成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT);(2)pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT)与pCMV-myc-NGX6共转染COS-7细胞较pcDNA3.1(+)-β-catenin(WT)单独转染时TCF-4荧光素酶活性明显下降(P<0.05);(3)无外源性β-catenin,pCMV-myc-NGX6转染COS-7及SW620细胞后TCF-4荧光素酶活性较空白质粒转染组下降(P<0.05);(4)NGX6转染COS-7及SW620后核内β-catenin及TCF-4的表达下降。结论:NGX6对结肠癌中Wnt/β-catenin通路的β-catenin/TCF/LEF转录活化具有负性调节作用,其作用机制可能与NGX6抑制β-catenin的核转位有关。 展开更多
关键词 NGX6基因 结肠癌 信号转导 WNT/Β-CATENIN tcf/lef
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紫色球海胆Tcf/lef基因的生物信息学分析 被引量:2
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作者 瞿飞 赵楠 +2 位作者 焦传珍 孙淑红 刘小林 《水产科学》 CAS 北大核心 2008年第1期32-35,共4页
利用生物信息学方法寻找与人类Ⅱ型糖尿病相关的Tcf7L2基因在紫色球海胆中的同源基因Tcf/lef,对该基因的序列、外显子信息、编码蛋白及其理化性质进行分析,并预测其编码蛋白的结构与功能,构建其同源基因的系统进化树,旨在为今后的研究... 利用生物信息学方法寻找与人类Ⅱ型糖尿病相关的Tcf7L2基因在紫色球海胆中的同源基因Tcf/lef,对该基因的序列、外显子信息、编码蛋白及其理化性质进行分析,并预测其编码蛋白的结构与功能,构建其同源基因的系统进化树,旨在为今后的研究提供一定的依据。 展开更多
关键词 紫色球海胆 tcf/lef 生物信息学
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TCF-4在肺癌中高表达并与肺癌的进展有关 被引量:15
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作者 杨连赫 徐洪涛 +9 位作者 王妍 刘洋 赵月 戴顺东 韦强 苗原 韩阳 杨志强 刘楠 王恩华 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第2期214-219,共6页
背景与目的T细胞因子4(Tcellfactor4,TCF-4)是Wnt信号传导通路的重要分子,但其mRNA及蛋白在肺癌组织及细胞系中的表达情况和意义的相关研究较少。本研究的目的是检测TCF-4在肺癌组织和细胞系中的表达情况,并探讨其与肺癌的临床病理因素... 背景与目的T细胞因子4(Tcellfactor4,TCF-4)是Wnt信号传导通路的重要分子,但其mRNA及蛋白在肺癌组织及细胞系中的表达情况和意义的相关研究较少。本研究的目的是检测TCF-4在肺癌组织和细胞系中的表达情况,并探讨其与肺癌的临床病理因素和生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学(S-P法)检测120例肺鳞癌和肺腺癌患者及10例癌旁正常肺组织中TCF-4的表达;应用免疫荧光法检测肺癌细胞系及HBE(人正常支气管上皮)细胞系中TCF-4的表达水平及亚细胞定位;应用RT-PCR方法检测九种肺癌细胞系中TCF-4mRNA的表达水平。结果在120例肺鳞癌和肺腺癌组织标本中,96例为TCF-4高表达(80.0%),其中包括37例同时有细胞浆和核表达(30.8%)。TCF-4的高表达水平与患者的TNM分期正相关(P=0.022),10例癌旁正常肺组织无TCF-4表达。免疫荧光显示TCF-4蛋白在正常支气管上皮细胞系中表达极弱,而在肺癌细胞系中则出现明显的表达,主要定位于细胞核。TCF-4的mRNA在不同组织学类型的肺癌细胞系中的表达并不一致,巨细胞癌细胞系中相对较高,而腺癌细胞系中表达较低。结论TCF-4的高表达与肺癌的进展密切相关,有效抑制TCF-4在肺癌中的高表达可能成为肺癌治疗的新途径。 展开更多
关键词 T细胞因子4 肺肿瘤 肿瘤标志物 免疫组织化学 免疫荧光
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鳖甲煎丸对Wnt信号通路中β-catenin/TCF4复合物活性及信号分子cyclin D1、MMP-2的影响 被引量:16
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作者 文彬 孙海涛 +4 位作者 贺松其 程旸 贾文燕 樊尔艳 庞杰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1758-1762,共5页
目的探讨鳖甲煎丸抗肝细胞癌转移侵袭的分子机制。方法使用含鳖甲煎丸药物血清培养肝癌细胞Hep G2,48 h后采用免疫荧光技术检测Wnt/β-catenin通路信号分子β-catenin蛋白表达水平,双荧光素酶检测法检测β-catenin/TCF4复合物的活性,采... 目的探讨鳖甲煎丸抗肝细胞癌转移侵袭的分子机制。方法使用含鳖甲煎丸药物血清培养肝癌细胞Hep G2,48 h后采用免疫荧光技术检测Wnt/β-catenin通路信号分子β-catenin蛋白表达水平,双荧光素酶检测法检测β-catenin/TCF4复合物的活性,采用RT-PCR技术检测cyclin D1与MMP-2基因转录水平,Western blot技术检测cyclin D1与MMP-2的蛋白表达水平。结果含鳖甲煎丸药物血清可降低肝癌细胞Hep G2细胞核中β-catenin蛋白的表达水平,抑制β-catenin/TCF4复合物的活性,明显下调cyclin D1、MMP-2的基因转录及其蛋白的表达水平。结论鳖甲煎丸可抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制肝癌细胞Hep G2的生长、粘附和转移。 展开更多
关键词 肝癌细胞 鳖甲煎丸 β-catenin/tcf4复合物 CYCLIN D1 MMP-2 CYCLIN D1 MMP-2
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miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路抑制胃癌细胞系生长侵袭能力的体外研究 被引量:9
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作者 苏娟 张庆瑜 +3 位作者 康春生 张安玲 王涛 张洁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期65-69,共5页
目的:研究miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路对SGC7901胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法:化学合成miR-200a mimics,采用脂质体Lipofectamine 2000转染胃腺癌细胞SGC7901,qRT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blo... 目的:研究miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路对SGC7901胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法:化学合成miR-200a mimics,采用脂质体Lipofectamine 2000转染胃腺癌细胞SGC7901,qRT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blot检测转染后目的蛋白的表达,TOP/FOP荧光素酶检测β-catenin/TCF-4活性,Transwell、划痕实验检测细胞迁移侵袭能力、MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布的改变。结果:脂质体介导的miR-200amimics转染SGC7901后,β-catenin/TCF-4蛋白的表达均降低,β-catenin的表达出现了细胞核向胞浆的转移。TOP荧光素酶活性下降2.27倍,而FOP荧光素酶活性基本不变。转染miR-200amimics组细胞的增殖活性、迁移、侵袭能力比空白组和阴性对照组明显下降,细胞周期出现G_0/G_1期阻滞。结论:提高miR-200a表达可以降低β-catenin/TCF-4信号通路的活性,抑制SGC7901的生长侵袭迁移能力。 展开更多
关键词 miRNA-200a β-catenin/tcf-4 胃癌 侵袭
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KMnO_4用于麦草浆TCF漂白的研究 被引量:5
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作者 陈嘉川 杨桂花 李昭成 《中国造纸学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期51-55,共5页
探讨了KMnO4对纸浆的漂白作用和活化作用。结果表明,KMnO4是一种良好的漂白剂和活化剂,具有替代O3漂白的可能性。O—Mn—P和O—Mn—Q—P漂序可将NaOHAQ麦草浆漂至80%ISO,从而彻底避免了氯化有机... 探讨了KMnO4对纸浆的漂白作用和活化作用。结果表明,KMnO4是一种良好的漂白剂和活化剂,具有替代O3漂白的可能性。O—Mn—P和O—Mn—Q—P漂序可将NaOHAQ麦草浆漂至80%ISO,从而彻底避免了氯化有机物的生成。 展开更多
关键词 麦草浆 tcf漂白 纸浆 AQ 漂白作用 漂白剂 生成 KMNO4 氯化 替代
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奥曲肽对结肠癌SW480细胞Wnt通路β-catenin/TCF及下游靶基因表达的影响 被引量:7
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作者 肖忠盛 王松 +2 位作者 梁庆模 龙建武 李卫 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2013年第6期366-370,共5页
目的研究不同浓度奥曲肽对结肠癌SW480细胞增殖以及对SW480细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响,阐明其抗肿瘤的作用机制。方法采用MTT比色法测定不同浓度奥曲肽对SW480细胞增殖的抑制作用;应用Westernblot法分析不同浓度奥曲肽对SW48... 目的研究不同浓度奥曲肽对结肠癌SW480细胞增殖以及对SW480细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响,阐明其抗肿瘤的作用机制。方法采用MTT比色法测定不同浓度奥曲肽对SW480细胞增殖的抑制作用;应用Westernblot法分析不同浓度奥曲肽对SW480细胞核中β—catenin、TCF-4及Wnt信号通路下游靶分子C—myc、CyclinDl蛋白表达的影响。结果奥曲肽可抑制SW480细胞的增殖,并在10-10~10-8M浓度范围内呈剂量依赖性,在48h内呈时间依赖性,浓度为10-8M时抑制作用最强,浓度为10-11M以下对细胞增殖无抑制作用。浓度为10-6、10-8、10-10M的奥曲肽对β—catenin蛋白、TCF-4蛋白、C—myc蛋白及CyclinDl蛋白的表达有明显抑制作用,与未经奥曲肽处理的细胞比较有统计学意义(均P〈0.01)。结论奥曲肽对Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用可能是通过减少β—catenin在细胞核内的聚集,抑制TCF-4的激活,从而抑制下游靶基因C—myc及CyclinDl。 展开更多
关键词 结肠癌 奥曲肽 WNT β-catenin tcf-4 C-myc CYCLIND1
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miR-454-3p靶向TCF-4对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响 被引量:3
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作者 肖飞 辛世永 +4 位作者 任小强 邵长帅 高中伟 张建国 郑伟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1437-1442,共6页
目的探讨miR-454-3p与TCF-4的靶向关系,以及对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响。方法miR-454-3p mimic和(或)pLV-TCF-4转染GRC-1细胞后,采用qRT-PCR法检测miR-454-3p和TCF-4 mRNA水平;Western blot法检测TCF-4蛋白的表达;双荧光... 目的探讨miR-454-3p与TCF-4的靶向关系,以及对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响。方法miR-454-3p mimic和(或)pLV-TCF-4转染GRC-1细胞后,采用qRT-PCR法检测miR-454-3p和TCF-4 mRNA水平;Western blot法检测TCF-4蛋白的表达;双荧光素酶报告实验验证miR-454-3p与TCF-4的靶向关系;MTT法检测细胞增殖情况;Hoechst染色检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移能力;体外侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果miR-454-3p mimic抑制TCF-4 mRNA和蛋白的表达;pLV-TCF-4缓解miR-454-3p对TCF-4蛋白表达的抑制作用。miR-454-3p mimic与TCF-4野生型报告载体共转,荧光素酶活性降低;与TCF-4突变型报告载体共转后,荧光素酶活性无明显变化。与GRC-1组相比,miR-454-3p mimic转染到GRC-1细胞后,细胞增殖倍数明显降低(P<0.01),细胞凋亡率由(5.08±1.21)%增加到(23.12±1.82)%,伤口愈合率由(58.43±6.32)%降低到(32.15±5.16)%,侵袭细胞数目由113.54±9.27减少至51.21±6.03;共转染miR-454-3p mimic和pLV-TCF-4后,能够逆转上述改变。结论miR-454-3p可通过靶向TCF-4抑制人肾癌细胞GRC-1的增殖和迁移,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 肾肿瘤 tcf-4 miR-454-3p 增殖 凋亡 迁移
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Frat1与TCF4在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达的相关性及意义 被引量:4
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作者 张勇 曹红一 王恩华 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第6期1175-1178,共4页
目的:研究Frat1与TCF4在NSCLC中的表达及其意义。方法:用免疫组化SP法对95例原发性NSCLC患者手术标本中Frat1和TCF4的表达进行检测。结果:在NSCLC中Frat1表达与肺癌组织的低分化、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05);TCF4的表达与淋巴... 目的:研究Frat1与TCF4在NSCLC中的表达及其意义。方法:用免疫组化SP法对95例原发性NSCLC患者手术标本中Frat1和TCF4的表达进行检测。结果:在NSCLC中Frat1表达与肺癌组织的低分化、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05);TCF4的表达与淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05);Frat1的表达与TCF4的表达有相关性(P<0.05)。结论:Frat1和TCF4在NSCLC中与肺癌的侵袭和转移等恶性表型有关,Frat1和TCF4在癌组织中的表达有相关性。 展开更多
关键词 Frat1 tcf4 WNT信号通路 NSCLC 免疫组化
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胃癌发生不同阶段E-cadherin和TCF4的联合检测及其对胃癌Lauren's分型的意义 被引量:2
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作者 于秀文 李姗姗 +2 位作者 孙玉荣 王显艳 张春庆 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1031-1034,共4页
目的探讨E-cadherin/TCF4联合检测在慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃癌组织中的表达及其对胃癌Laurens分型的意义。方法随机选取不同黏膜活检标本300例进行免疫组织化学双染色,观察E-cadherin/TCF4表达。结果 E-cadherin/TCF4在慢性... 目的探讨E-cadherin/TCF4联合检测在慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃癌组织中的表达及其对胃癌Laurens分型的意义。方法随机选取不同黏膜活检标本300例进行免疫组织化学双染色,观察E-cadherin/TCF4表达。结果 E-cadherin/TCF4在慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃癌组织的表达差异无统计学意义(P>0.05);在肠上皮化生、非肠上皮化生组织中,差异也无统计学意义(P>0.05)。在肠型胃癌及弥漫型胃癌组织,E-cadherin-/TCF4-、E-cadherin-/TCF4+蛋白表达均为肠型胃癌低于弥漫型胃癌(P<0.01);E-cadherin+/TCF4-、E-cadherin+/TCF4+蛋白表达为肠型胃癌(90.0%)明显高于弥漫型胃癌(55.0%)(P<0.01)。结论 E-cadherin/TCF4协同表达可作为确定胃癌组织学类型的指标,为胃癌的研究提供了一个新的思路及方向。 展开更多
关键词 E-cadherin/tcf4 胃疾病 Lauren's分型 免疫组织化学双染
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TCF4/pcDNA3.0表达载体的构建及其在毛乳头细胞中的表达 被引量:2
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作者 刘毅 郝飞 杨希川 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期130-133,共4页
目的构建TCF4/pcDNA3.0表达载体,为深入研究T细胞因子4(T cell factor4,TCF4)基因在毛乳头细胞生物学功能调控中的作用和机制奠定基础。方法从凝集性生长毛乳头细胞中提取总RNA,RT-PCR获得带有酶切位点的TCF4基因,亚克隆入pCDNA3.0载体... 目的构建TCF4/pcDNA3.0表达载体,为深入研究T细胞因子4(T cell factor4,TCF4)基因在毛乳头细胞生物学功能调控中的作用和机制奠定基础。方法从凝集性生长毛乳头细胞中提取总RNA,RT-PCR获得带有酶切位点的TCF4基因,亚克隆入pCDNA3.0载体中,并通过双酶切和测序确定序列和阅读框正确。稳定转染到毛乳头细胞中进行表达,检测稳定转染前后TCF4表达的变化。结果从人毛囊毛乳头细胞中获得TCF4基因克隆;成功构建了真核表达载体。经过稳定转染在毛乳头细胞中上调了TCF4基因mRNA和蛋白水平表达,促进了毛乳头细胞的增殖和外分泌功能。结论TCF4/pcDNA3.0表达载体能在真核细胞中表达。TCF4基因可以促进毛乳头细胞增殖。 展开更多
关键词 tcf4 PCDNA3.0 表达载体 表达
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卵巢良恶性肿瘤中TCF4和E-cadherin的表达及临床意义 被引量:3
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作者 赵婷婷 沈国栋 胡卫平 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第1期123-126,共4页
目的:探讨TCF4和E-cadherin在卵巢癌中的表达意义。方法:采用免疫组化SP法检测19例卵巢良性囊腺瘤、19例交界性囊腺瘤、50例恶性肿瘤中TCF4和E-cadherin的表达。结果:TCF4在卵巢癌组织、交界性肿瘤中表达明显高于良性囊腺瘤组织(P<0.... 目的:探讨TCF4和E-cadherin在卵巢癌中的表达意义。方法:采用免疫组化SP法检测19例卵巢良性囊腺瘤、19例交界性囊腺瘤、50例恶性肿瘤中TCF4和E-cadherin的表达。结果:TCF4在卵巢癌组织、交界性肿瘤中表达明显高于良性囊腺瘤组织(P<0.05),阳性率分别为76%、63.2%、31.6%。E-cadherin在卵巢良性、交界性肿瘤、卵巢癌中阳性率分别为78.9%、52.6%、36.0%。E-cadherin在卵巢交界性肿瘤及卵巢癌组织中表达明显低于良性肿瘤组织(P<0.05)。E-cadherin及TCF4表达与卵巢癌患者年龄无关(P>0.05),TCF4表达与卵巢癌病理学分级、FIGO分期有关(P<0.05)。结论:TCF4在卵巢癌中表达高于卵巢良性肿瘤和交界性肿瘤,同时与卵巢癌病理学分级、FIGO分期成正相关。而E-cadherin在卵巢癌中表达低于卵巢良性肿瘤和交界性肿瘤,同时与卵巢癌病理学分级、FIGO分期负相关。 展开更多
关键词 卵巢癌 WNT/Β-CATENIN tcf4 E-CADHERIN
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胃泌素对人结肠癌细胞Colo320WT中β-catenin/Tcf-4通路的影响 被引量:2
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作者 曹俊 邹晓平 +2 位作者 诸葛宇征 于成功 于红刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期441-443,共3页
目的探讨胃泌素对结肠癌细胞Colo320WT中β-catenin/Tcf-4通路影响。方法10-8mol·L-1胃泌素分别于0、1、6、12、24、48h时间点干预Colo320WT细胞,同时先用10-6mol·L-1胃泌素受体拮抗剂L365,260预干预Co-lo320WT细胞30min,再加... 目的探讨胃泌素对结肠癌细胞Colo320WT中β-catenin/Tcf-4通路影响。方法10-8mol·L-1胃泌素分别于0、1、6、12、24、48h时间点干预Colo320WT细胞,同时先用10-6mol·L-1胃泌素受体拮抗剂L365,260预干预Co-lo320WT细胞30min,再加10-8mol·L-1胃泌素干预至12h。采用免疫共沉淀和免疫印迹检测Colo320WT中TX-100可溶性部分(胞质部分)和不可溶部分(细胞骨架结合部分)中β-catenin的表达及β-catenin/Tcf-4复合物的表达。免疫印迹观察c-Myc和cyclinD1的表达。结果TX-100可溶性部分中β-catenin的量随着胃泌素干预时间呈递减趋势,12h达最小;而TX-100不溶解部分却随时干预时间的呈递增趋势,12h达最大。免疫共沉淀发现胃泌素干预后β-catenin/Tcf-4复合物表达量明显增多。免疫印迹检测到胃泌素干预下的细胞中c-Myc和cyclinD1表达明显增加。胃泌素受体拮抗剂阻断后,则可阻断胃泌素引起的上述效应。结论胃泌素与其受体作用后使结肠癌细胞中β-catenin分布发生转移和活化β-catenin/Tcf-4通路来降低结肠癌细胞的黏附,增加肿瘤细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 胃泌素 CCK-2R 大肠癌 β-catenin/tcf-4通路 侵袭 和转移
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β-catenin和TCF-4在人不同退变程度软骨组织中的表达及意义 被引量:4
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作者 修磊 方晓敏 +3 位作者 李楠 关涛 胡志付 金群华 《宁夏医科大学学报》 2014年第7期759-762,I0002,共5页
目的通过比较正常人与原发性骨关节炎患者的关节软骨组织中β-catenin和TCF-4的表达,探讨其在骨关节炎发病过程中的作用。方法取因膝骨关节炎行全膝关节置换术的40名患者及因创伤行截肢的10名患者所捐献的关节软骨,行番红O-固绿染色,按... 目的通过比较正常人与原发性骨关节炎患者的关节软骨组织中β-catenin和TCF-4的表达,探讨其在骨关节炎发病过程中的作用。方法取因膝骨关节炎行全膝关节置换术的40名患者及因创伤行截肢的10名患者所捐献的关节软骨,行番红O-固绿染色,按改良Mankin评分标准分组。用免疫组化法检测β-catenin的表达;用Western Blot实验方法检测各组β-catenin、TCF-4的表达。结果免疫组化染色发现:β-catenin在无退变组表达为阴性,在轻中度与重度退变组均有表达,以细胞核表达为主,且重度退变组表达明显高于轻中度组(P<0.05)。Western Blot结果显示:β-catenin、TCF-4在退变组软骨组织中表达量均高于无退变组,且重度组表达高于轻中度组(P<0.05)。结论退行性骨关节病软骨组织中β-catenin、TCF-4的表达随软骨组织损伤程度而增加。 展开更多
关键词 Β-CATENIN tcf-4 退变 骨关节炎
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TCF4N剪接异构体在食管癌细胞中的表达研究 被引量:1
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作者 罗超 何刚 +6 位作者 官兴颖 唐敏 刘双 甘生敏 李娟 彭志平 章波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期2476-2480,共5页
目的证实食管癌中TCF4N剪接异构体的存在,并初步探讨其功能。方法采用RT-PCR方法扩增,并PCR产物测序鉴定。克隆TCF4N剪接异构体并构建真核表达载体,将其转染EC109细胞高效表达,检测其对细胞生物学特性的影响。结果在癌细胞株中,TCF4N剪... 目的证实食管癌中TCF4N剪接异构体的存在,并初步探讨其功能。方法采用RT-PCR方法扩增,并PCR产物测序鉴定。克隆TCF4N剪接异构体并构建真核表达载体,将其转染EC109细胞高效表达,检测其对细胞生物学特性的影响。结果在癌细胞株中,TCF4N剪接异构体被证实存在。对比食管癌组织与癌旁组织发现TCF4N异构体在癌组织中表达显著降低(P<0.05)。成功构建了TCF4N表达载体,在EC109细胞中获得高效表达。功能分析显示:增强TCF4N表达可抑制EC109细胞的增殖,影响细胞周期的分布,并抑制TCF4的转录活性。结论在人食管癌中具有抑制功能的TCF4N剪接异构体与食管癌的发生有一定关联。 展开更多
关键词 tcf4 剪接异构体 食管癌 转录活性
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白藜芦醇通过β-catenin/TCF-4信号通路对胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响 被引量:3
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作者 陈茹 王海燕 +2 位作者 苏莹 徐蓉 柳江 《肿瘤药学》 CAS 2018年第1期20-25,共6页
目的分析白藜芦醇通过β-catenin/TCF-4信号通路对胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)实验选择适当的白藜芦醇浓度并探讨其对胃癌细胞系MGC-803生长和增殖的影响,倒置显微镜观察细胞形态学变化,采用荧... 目的分析白藜芦醇通过β-catenin/TCF-4信号通路对胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)实验选择适当的白藜芦醇浓度并探讨其对胃癌细胞系MGC-803生长和增殖的影响,倒置显微镜观察细胞形态学变化,采用荧光实时定量PCR(RT-PCR)法检测Wnt信号通路中β-catenin及TCF-4的m RNA表达水平,Western blot检测β-catenin、TCF-4的蛋白表达水平,Transwell检测MGC-803细胞侵袭能力的变化。结果 MTT结果显示,白藜芦醇能显著抑制MGC-803细胞的生长增殖;倒置显微镜下发现凋亡的MGC-803细胞形态发生明显变化;RT-PCR检测结果表明白藜芦醇可降低β-catenin及TCF-4的m RNA表达;Western blot检测结果表明白藜芦醇可下调β-catenin、TCF-4的蛋白表达,Transwell实验结果表明白藜芦醇使MGC-803细胞的侵袭能力显著下降。结论白藜芦醇可显著抑制胃癌细胞的增殖及侵袭能力,其作用机制可能是通过抑制β-catenin/TCF-4信号通路而实现的。 展开更多
关键词 白藜芦醇 胃癌细胞 β-catenin/tcf-4信号通路
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TCF4对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株生物学行为的影响 被引量:1
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作者 刘燕 熊亚 +3 位作者 宋志强 沈柱 郝飞 杨希川 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期360-363,共4页
目的探讨T细胞因子4(T cell factor 4,TCF4)小干扰RNA(siRNA)对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株TCF4基因表达的抑制作用及对细胞增殖、迁移、侵袭及周期的影响。方法转染TCF4 siRNA至A431细胞株。应用RT-PCR检测A431细胞TCF4 mRNA的表达,Wes... 目的探讨T细胞因子4(T cell factor 4,TCF4)小干扰RNA(siRNA)对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株TCF4基因表达的抑制作用及对细胞增殖、迁移、侵袭及周期的影响。方法转染TCF4 siRNA至A431细胞株。应用RT-PCR检测A431细胞TCF4 mRNA的表达,Western blot检测TCF4蛋白的表达,CCK-8方法检测上述各组细胞增殖率(1、2、3、4 d及5 d),小室迁移实验检测细胞迁移情况,Transwell实验检测侵袭情况,流式细胞仪检测细胞周期(24 h)。结果与未转染A43l细胞株和转染空载体的A431细胞株比较,转染TCF4 siRNA表达载体1、2、3、4 d及5 d的细胞增殖率明显降低(P<0.05);TCF4 siRNA表达载体组细胞迁移和侵袭能力明显下降(P<0.05);细胞周期分析发现转染TCF4siRNA使得A431细胞株出现明显的G2/M期阻滞现象。结论采用TCF4特异性siRNA能够抑制皮肤鳞状细胞癌TCF4的表达,从而抑制皮肤鳞状细胞癌的增殖。 展开更多
关键词 tcf4 鳞状细胞癌 增殖 凋亡 WNT Β-CATENIN信号通路
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