lncRNA TCONS00815878对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响

猪骨骼肌发育是一个复杂的生物学过程,其中骨骼肌卫星细胞分化是影响骨骼肌发育的重要环节。近年来发现长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在骨骼肌卫星细胞分化中具有重要作用。为探究lncRNA TCONS00815878对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响,本研究利用qRT-PCR技术检测出生7 d内大白仔猪6种组织(心脏、脾脏、肺脏、肾脏、背肌和腿肌)及从胚胎期到出生后5个不同时间点(35 d、45 d、55 d胚胎及产后第7 d和第200 d后腿肌肉组织)TCONS00815878的表达情况;利用反义核苷酸(antisense oligonucleotides,ASO)在猪骨骼肌卫星细胞中敲低TCONS00815878,检验分化标记基因MyoD、MyoG和MyHC表达情况;通过生物信息学分析预测TCONS00815878靶基因,并利用DAVID软件在线预测其靶基因的功能与通路。结果表明:TCONS00815878在猪心肌和腿肌中高表达;仔猪出生后7 d内,TCONS00815878在猪肌肉组织中表达量不断升高,第7 d达到高峰;在猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化过程中,TCONS00815878在分化期表达量不断上升,且在分化30 h表达量达到峰值;敲低TCONS00815878后,MyoD、MyoG和MyHC基因表达量降低,其中MyoD表达量显著下降(P<0.05)。此外,功能预测结果发现,其靶基因富集到糖酵解和丙酮酸代谢等与骨骼肌卫星细胞分化相关的多个生物学过程。本研究推测,lncRNA TCONS00815878可能对猪骨骼肌卫星细胞的分化起促进作用。