TCP11基因在宫颈癌中表达的意义

目的探讨TCP11基因在宫颈癌组织和细胞中的表达水平以及与HPV感染、患者临床特征和预后之间的关系。方法运用UALCAN数据库及GEPIA数据库分析TCP11基因在宫颈癌中的表达及其与宫颈癌患者年龄和肿瘤分级的关系;运用The Human Protein Atlas(HPA)数据库、UALCAN数据库及Gene Expression Profiling Interactive Analysis(GEPIA)数据库分析TCP11基因的表达与宫颈癌患者生存率的关系;运用UALCAN数据库分析在宫颈癌中TCP11基因启动子甲基化状态。运用组织芯片分析TCP11基因在正常宫颈及宫颈癌组织中表达水平。利用第二代杂交捕获技术(HC-2)检测所收集样本HPV感染情况。体外培养HaCaT细胞(一种永生化的上皮细胞)及宫颈癌SiHa、HeLa、C33A细胞,利用Western blot、qRT-PCR分别检测宫颈癌细胞中TCP11蛋白和mRNA表达水平。结果运用HPA、UALCAN、GEPIA数据库分析发现TCP11基因在宫颈癌组织中高表达,且与宫颈癌患者生存率显著相关(P<0.05);TCP11基因表达与宫颈癌患者的年龄及肿瘤分级无显著相关性(P>0.05)。组织芯片结果统计发现TCP11基因在宫颈癌组织中高表达(P<0.05)。与HaCaT细胞相比,TCP11蛋白和mRNA在宫颈癌SiHa、HeLa、C33A细胞系中均显著升高(P<0.05)。HC-2结果显示TCP11基因的表达可能不受HPV感染的影响(P>0.05)。结论 TCP11基因在宫颈癌组织及细胞中高表达,其表达水平与患者预后相关且可能不受HPV感染的影响。

鼠Tcp11l1基因的结构与表达分析

为了分析鼠Tcp11l1基因的结构和表达,从小鼠睾丸组织总cDNA中扩增鼠Tcp11l1基因的开读框架(Open reading frame,ORF),定向克隆到真核表达载体pEGFP-N1,构建融合表达质粒pTcp11l1-EGFP,转染HEK293细胞,荧光显微镜下观察Tcp11l1基因的亚细胞定位;设计跨小鼠Tcp11l1基因两个外显子的引物,RT-PCR分析此基因在小鼠各组织中的表达情况.并利用生物信息学的方法对鼠Tcp11l1基因的结构进行初步预测.转染pTcp11l1-EGFP后在胞质中能明显看到绿色荧光信号,而在胞核和胞膜中无绿色荧光信号,表明鼠Tcp11l1蛋白定位于细胞质;RT-PCR分析结果表明,鼠Tcp11l1基因在小鼠各组织中广泛表达.生物信息学结果表明,鼠Tcp11l1和鼠Tcp11的蛋白具有相同的TCP11结构域,不能确定是否存在跨膜序列.鼠Tcp11l1基因和鼠Tcp11基因具有相似的亚细胞定位和TCP11结构域,表明这两个基因可能具有相似的受体功能.但是与Tcp11特异表达于睾丸组织的延长精细胞和精子不同,Tcp11l1为广泛表达,说明Tcp11l1可能在多种组织细胞中发挥作用.

人TCP11L2和鼠Tcp1112基因的定位及表达的初步研究

目的观察人TCP11L2和鼠Tcp1112基因在细胞中的表达及定位和Tcp1112基因的表达谱研究。方法用RT-PCR法从正常人和鼠睾丸组织中分别扩增得到人TCP11L2基因和鼠Tcp1112基因的开放读码框全长cDNA并定向克隆到真核表达载体pEGFP-N1质粒中,构建了pEGFP-TCP11L2和pEGFP-Tcp1112融合基因表达载体,然后以脂质体介导转入MDCK细胞中,荧光显微镜下观察融合基因的表达情况;RT-PCR检测鼠Tcp1112基因在组织中的表达情况。结果在转染重组真核表达载体pEGFP-TCP11L2、pEGFP-Tcp1112的MDCK细胞中,荧光主要集中在细胞核外区域,而在转染空白载体pEGFP-N1的细胞中,荧光布满整个细胞;RT-PCR检测鼠Tcp1112为多组织表达。结论人TCP11L2和鼠Tcp1112蛋白能在MDCK细胞中高效表达,表达的蛋白定位在细胞核外区域,鼠Tcp1112的多组织表达提示该基因与鼠Tcp11基因功能的不同。

TCP11 Survivin基因结合肿瘤标志物在Ⅰ~Ⅱ期宫颈癌新辅助化疗短期疗效中的预测价值

目的 探究TCP11、Survivin基因结合肿瘤标志物在Ⅰ~Ⅱ期宫颈癌新辅助化疗短期疗效中的预测价值,提高早期预测准确率。方法 选取2020年1月—2021年1月温州市中医院收治的接受新辅助化疗治疗的Ⅰ~Ⅱ期宫颈癌患者105例作为宫颈癌组,宫颈良性疾病患者60例作为宫颈良性病变组、行健康体检的女性60例作为健康组。测定3组鳞状细胞癌抗原(SCCAg)、糖类抗原125(CA125)及糖类抗原153(CA153)等肿瘤标志物、TCP11及Survivin基因表达情况,分析3组上述指标表达的差异。宫颈癌患者均接受卡铂联合紫杉醇新辅助化疗方案治疗,依据患者短期疗效将宫颈癌患者分为有效组(69例)和无效组(36例),对比分析TCP11、Survivin基因及肿瘤标志物在两组间的表达差异,评价各指标对患者短期疗效的预测价值。结果 宫颈癌组TCP11、Survivin基因表达量、肿瘤标志物SCCAg、CA125、CA153表达水平均显著高于宫颈良性病变组和健康组[(3.72±0.58)vs.(1.34±0.21)vs.(0.12±0.03)、(2.96±0.53)vs.(1.20±0.10)vs.(0.23±0.05)、(2.18±0.67) ng/ml vs.(1.00±0.20) ng/ml vs.(0.28±0.06) ng/ml、(27.85±4.72) U/ml vs.(19.06±2.31) U/ml vs.(10.12±1.11) U/ml、(20.96±2.97) U/ml vs.(14.52±1.28) U/ml vs.(9.23±1.02) U/ml],差异均有统计学意义(F=71.968、59.620、32.831、42.920及44.368,均P<0.05)。TCP11、Survivin基因在宫颈癌组中的阳性率显著高于宫颈良性病变组(76.19%vs.21.67%,80.00%vs.26.67%),差异有统计学意义(χ^(2)=46.151、45.489,均P<0.05)。宫颈癌患者新辅助化疗后TCP11、Survivin基因表达量、肿瘤标志物SCCAg、CA125、CA153表达水平均显著低于化疗前[(2.10±0.24)vs.(3.72±0.58)、(1.87±0.42)vs.(2.96±0.53)、(1.67±0.36) ng/ml vs.(2.18±0.67)ng/ml、(23.51±2.14) U/ml vs.(27.85±4.72)U/ml、(16.78±2.11) U/ml vs.(20.96±2.97)U/ml],差异均有统计学意义(t=26.450、16.520、6.871、8.581及11.760,均P<0.05)。有效组患者TCP11、Survivin基因表达量、肿瘤标志物SCCAg、CA125、CA153表达水平均显著低于无效组[(1.89±0.23)vs.(4.35±0.57)、(1.05±0.21)vs.(3.24±0.48)、(1.12±0.37)ng/ml vs.(3.33±0.53)ng/ml、(20.01±3.44)U/ml vs.(30.92±4.51) U/ml、(14.52±1.86)U/ml vs.(22.31±2.14) U/ml],差异均有统计学意义(t=31.390、32.500、24.940、13.830及19.330,均P<0.05)。宫颈间质浸润深度、淋巴结转移、合并脉管转移、化疗前TCP11、Survivin基因表达量、肿瘤标志物SCCAg、CA125及CA153表达水平均为影响宫颈癌患者新辅助化疗短期疗效的独立危险因素(均P<0.05)。ROC曲线显示,在各指标预测中以TCP11基因预测价值最高(AUC=0.887,95%CI:0.773~0.915,P<0.05);相比于各指标单项预测,各项联合对Ⅰ~Ⅱ期宫颈癌新辅助化疗短期疗效中的预测价值最高(AUC=0.909,95%CI:0.709~0.913,P<0.05)。结论 TCP11、Survivin基因及肿瘤标志物在Ⅰ~Ⅱ期宫颈癌中均升高,且新辅助化疗后表达降低,与患者新辅助化疗短期疗效密切相关,可作为早期预测患者短期疗效的特异性指标。

受精促进肽对哺乳动物精子受精能力的促进作用研究进展

受精促进肽和腺苷酸一起调控腺苷酸环化酶 /cAMP信号通路 ,起初促进获能和随后抑制顶体的丢失 ,从而提高人及哺乳动物精子受精能力。现就受精促进肽在这一调控过程中的作用进行综述 ,并对其可能的作用机理进行讨论。