类风湿关节炎患者外周血TCRαβ^+CD4^-CD8^-T细胞与FAS介导的凋亡关系研究

目的:检测类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)患者外周血中TCRαβ+细胞、CD4-CD8-细胞、TCRαβ+CD4-CD8-T细胞(Double negative T cells,DNT细胞)及各细胞亚群表面凋亡相关蛋白FAS的表达情况,探讨RA患者TCRαβ+CD4-CD8-T细胞与FAS介导的凋亡之间的关系。方法:选取24例RA患者以及24例同期健康查体者作为研究对象,检测所有研究对象外周血TCRαβ+细胞、CD4-CD8-细胞、TCRαβ+CD4-CD8-T细胞的数量及表面凋亡相关蛋白FAS的表达情况,并分析以上指标与类风湿因子(Rheumatoid factors,RF)、白细胞数(White blood cell,WBC)、急性时相反应蛋白(C-reactive pro-tein,CRP)以及血沉(Erythrocyte sedimentation rate,ESR)之间的相关性。结果:RA患者外周血TCRαβ+细胞、CD4-CD8-细胞与健康对照相似,TCRαβ+CD4-CD8-T细胞数量显著高于健康对照(0.82±0.38 vs.0.57±0.26,P=0.013),TCRαβ+CD4-CD8-T细胞表面的FAS的表达增高(1.23±0.69 vs.0.80±0.45,P=0.016),并与TCRαβ+CD4-CD8-T细胞数量呈显著正相关关系(r=0.809,P=0.000);TCRαβ+细胞及其表面表达的FAS受体、CD4-CD8-细胞及其表面表达的FAS受体、TCRαβ+CD4-CD8-T细胞及其表面表达的FAS受体与RF、WBC、CRP以及ESR之间均无相性(P>0.05)。结论:RA患者外周血中TCRαβ+CD4-CD8-T细胞及其表面表达的FAS受体显著增加,表明TCRαβ+CD4-CD8-T细胞对FAS介导的凋亡敏感性增加,可能会导致免疫反应性T细胞的比例失调。RA患者中TCRαβ+CD4-CD8-T细胞及其表面表达的FAS受体与疾病活动性指标之间无相关关系,TCRαβ+CD4-CD8-T细胞及其表面表达的FAS受体在RA患者的发病机制中的作用还有待于进一步探讨。

抗TCRαβ单抗联合供体骨髓细胞输注诱导小鼠皮肤移植耐受的研究

探讨抗TCRαβ单克隆抗体联合大剂量供体骨髓细胞输注方法对同种异基因小鼠皮肤移植耐受诱导的促进作用。第 0天 ,C5 7BL/ 6 (H 2 b,B6 )小鼠尾静脉注入 2× 10 8BALB/c (H 2 d,B/c )来源的骨髓细胞 ,同时腹腔注射抗TCRαβ单克隆抗体5 0 0 μg ;第 6天进行皮肤移植 ;在不同的时间对B6小鼠进行迟发型超敏反应 (DTH )、混合淋巴细胞反应 (MLR )等耐受状态进行检测 ,并进行MLR的IL 2逆转实验、过继转移实验和嵌合状态分析以初步探讨耐受形成机制。结果显示 ,经抗TCRαβ单克隆抗体联合大剂量供体骨髓细胞输注处理的B6小鼠的供体皮肤移植物平均存活 5 0 4d ,显著长于其他各组 (P <0 0 0 1)。相对于正常对照组小鼠 ,耐受B6小鼠在DTH和MLR中均表现出显著的低反应性 (P <0 0 0 1)。IL 2逆转实验结果表明克隆无能参与了移植耐受的形成。体内、外过继转移实验均显示耐受B6小鼠脾细胞中存在抑制细胞活性。嵌合体检查结果表明在耐受B6小鼠的胸腺和脾脏中均形成了混合嵌合体 ,在皮肤移植后第 15、 30和 70天时脾脏内供体来源嵌合体水平依次为 15 86 % ,10 5 7%和 1 77% ,胸腺中依次为 8 19% ,5 72 %和 1 87% ,嵌合体水平随时间而下降。这些表明 ,抗TCRαβ单抗联合大剂量供体骨髓细胞输注可以在异基因成年小?

抗TCRαβ单抗促进异基因皮肤移植耐受的研究

目的探索抗 TCRαβ单抗诱导异基因成年小鼠皮肤移植耐受的作用。方法经 C5 7BL / 6 (H - 2 b,B6 )小鼠尾静脉注射 BAL B/ c小鼠 (H - 2 d)脾细胞 ,2 d后腹腔注射环磷酰胺 (CP) ,随后两次尾静脉注射抗小鼠 - TCRαβ的单克隆抗体 ,然后进行皮肤移植 ,观察皮肤存活期并对耐受小鼠的 ML R、DTH等耐受状态进行了检查。结果耐受 B6小鼠获得了供体特异性皮肤移植耐受 ,供体皮肤移植存活时间明显延长 ,ML R和 DTH检查证明 B6小鼠对 BAL B/ c小鼠的脾细胞的反应性、特异性降低 ,而仍保持对无关第三者小鼠的免疫反应。结论使用注射脾细胞 ,环磷酰胺及抗 TCRαβ单抗的方法在

TCRαβ分子识别抗原肽-MHC复合物的争议问题探讨

T细胞抗原受体（TCR）是T细胞表面的特征性标志分子，其与CD3分子组成的TCR．CD3复合体，是进行抗原识别，发挥细胞免疫重要功能的基础。一般认为．TCR必须识别抗原肽一MHC分子复合物才能活化T细胞，

TCRαβ^+CD4^-CD8^-细胞在胚胎胸腺器官培养中的发育特征

为研究TCRαβ^+CD4^- CD8^-双阴性(DN)胸腺细胞在胚胎胸腺中的发育特征,采用胚胎胸腺器官培养(FTOC)体系、免疫荧光标记与流式细胞仪检测技术,对FTOC体系中不同发育阶段(第9天和第18天)的TCRαβ^+DN细胞的增殖、分化及凋亡特性进行了分析。结果表明,抗CD3单抗能够显著促进FTOC第18天的TCRαβ^+DN细胞的增殖,对FTOC第9天的TCRαβ^+DN细胞作用相对较弱。IL-7能够促进FTOC第9天的TCRαβ^+DN细胞向TCRαβ^+CD4^+/CD8^+SP细胞分化;对FTOC第18天的TCRαβ^+DN细胞促分化作用明显减弱。胸腺基质细胞系MTEC5细胞可调节IL-7的促分化作用。同时,实验发现在FTOC体系中的TCRαβ^+DN细胞是一群不易凋亡的细胞,从而对该特殊亚群胸腺细胞的发育分化特性获得了新的认识。

TCRαβ基因结构与重排

ＴＣＲαβ基因是由Ｖ，（Ｄ），Ｊ，Ｃ等不同基因片段组成的，α和β链编码基因在结构上各有其特点，ＴＣＲαβ基因的重排与分子表达是在胸腺内完成的，这一过程受等位基因排斥等机制的严格调控，从而确保了Ｔ细胞只能产生来自一个等位基因重排编码的克隆特异的αβＴＣＲ分子。

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞TCRαβ和TCRγδ的表达研究

目的检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞TCRαβ和TCRγδ的表达,评价慢性乙型肝炎患者的细胞免疫状态,并初步探究随病情发展TCRαβ和TCRγδ表达率的变化趋势。方法流式细胞术测定38例慢性乙型肝炎、14例乙型肝炎肝硬化患者淋巴细胞中TCRαβ、TCRγδ的表达率。结果TCRαβ在慢性乙型肝炎患者中的表达率明显低于正常对照组(P<0.01)。慢性乙型肝炎各组之间TCRαβ的表达率比较:重度组和乙型肝炎肝硬化组表达率显著低于轻度组(P<0.01,P<0.01),乙型肝炎肝硬化组显著低于中度组(P<0.05)。而TCRγδ在慢性乙型肝炎各组之间比较以及与正常对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞中TCRαβ表达能力显著低于正常人,并随病情进展,其表达能力逐渐降低,提示慢性乙型肝炎患者外周血T细胞免疫功能下降。

特异性TCRαβ基因转染T细胞促进抗肿瘤免疫的研究

目的:研究肝癌特异性TCR基因TCRVα12.2-Vβ7.1转染T细胞后,促进T细胞识别肿瘤抗原,活化抗肿瘤免疫反应的效果。方法:构建重组腺病毒Ad5F35-TRAV-TRBV,以之感染T细胞并优化最佳感染条件。钙黄绿素染色法检测T细胞对不同肿瘤靶细胞株的杀伤活性。Annexin V-PI双染法检测靶细胞凋亡比例。流式细胞术检测T细胞表面FasL表达比例。ELISA法检测T细胞作用于靶细胞后IFN-γ与IL-2分泌水平。结果:成功将TCRVα12.2-Vβ7.1基因片段构建入嵌合型腺病毒载体,获得重组腺病毒Ad5F35-TRAV-TRBV。感染复数为100时,重组腺病毒有最高转染效率。感染3天后,TCRVα12Vβ7阳性细胞比例超过25%。特异性TCR基因转染有效促进T细胞杀伤AFP阳性肝癌细胞,特异性裂解率显著提高(P<0.001)。特异性TCR基因转染有效促进T细胞诱导靶细胞凋亡(P<0.001)。同时,T细胞表面FasL表达比例上升(P<0.001)。TCR基因转染T细胞作用于AFP抗原阳性靶细胞后IFN-γ分泌显著提高(P<0.001)。结论:重组腺病毒Ad5F35-TRAV-TRBV成功介导肿瘤特异性TCR基因转染T细胞。TCR基因转染可有效促进T细胞识别抗原阳性肿瘤细胞,并发挥抗肿瘤免疫效应。

TCRαβ^+CD4^+CD8^-胸腺髓质细胞的表型分析

本实验综合分析了CD4^+CD8^-胸腺髓质细胞多种表面分子的表达情况。通过抗体加补体的2次杀伤和panning方法,分离出CD4^+CD8^-胸腺髓质细胞,进行直接或间接荧光抗体染色,利用流式细胞仪分析细胞表型。发现CD4^+CD8^-胸腺细胞均为TCRαβ阳性,但CD69,HSA,Qa-2,3G11,6C10分子呈现异质性表达。利用多个表面分子组合进行双染FACS分析,推测CD4SP胸腺细胞由不成熟到发育成熟,迁出胸腺,可分为7个阶段:(1)3G11^-6C10^+CD69^+HSA^(hi),(2)3G11^+6C10^+CD69^+HSA^(hi),(3)3G11^+6C10^-CD69^+HSA^(int),(4)3G11^+6C10^-CD69^-HSA^(int)Qa-2^-,(5)3G11^+HSA^(lo/-)Qa-2^(lo),4阶段还可进一步分化为(6) 3G11^-HSA^(lo)Qa-2^-,(7) 3G11^-HSA^(lo/-)Qa-2^(hi)。Qa-2^+的5,7两阶段细胞已达到最终成熟,并可迁出胸腺。

TCRαβ^+/CD19^+细胞去除的亲缘单倍型移植挽救性治疗范可尼贫血转急性髓系白血病1例伴文献复习

目的探讨,TCRαβ^+/CD19^+细胞去除的亲缘单倍型移植的安全性及不良反应。方法通过1例由范可尼贫血转化为急性髓性白血病M5的患儿进行TCRαβ^+/CD19^+细胞去除的单倍型移植治疗,并对其中优势及并发症结果进行分析。结果患者出现早期移植排斥,分析导致植入失败的原因,植入失败后紧急使用HLA10/10相合无关供者进行非血缘异基因造血干细胞移植,后顺利植入,随访9个月余,状态良好。结论 TCRαβ^+/CD19^+细胞去除的造血干细胞移植是一种有效的体外去T方式,有其明显优势,还有一些问题仍需继续探究解决。

人类TCRαβ家族V基因的进化研究

目的:了解人类TCRα家族V基因(TCRAV)和TCRβ家族V基因(TCRBV)的进化特征。方法:采用MEGA3.1软件对人类TCRAV和TCRBV基因分别构建进化树,并估算基因复制的发生时间;采用FEL法检测TCRAV和TCRBV编码序列正选择和负选择位点。结果:进化树显示TCRAV和TCRBV的基因分组在进化过程中已经维持了相当长的时间。TCRAV已经不受正选择作用,TCRBV基因序列的CDRs区域检测到两个正选择位点。结论:人类TCRαβ家族V基因的进化特征为研究TCR基因在机体免疫及疾病防治提供了理论分析基础。

高通量TCR免疫组库技术在艾滋病中的应用及前景分析

T细胞受体(TCR)免疫组库是机体所有TCR的总和,TCR免疫组库的多样性与HIV识别和免疫逃逸密切相关。高通量免疫组库测序技术能够检测分析TCR组库的所有序列,真实反映所有TCR的遗传信息,全面揭示TCR组库的复杂性和多样性。通过高通量测序技术分析TCR免疫组库变化可监测HIV患者诊疗情况、疾病进展及预后,同时有助于疫苗研发、病毒库清除及临床疗效评价,从而为丰富HIV/AIDS防治思路和靶点提供依据。

单细胞TCR测序在肿瘤免疫治疗中的应用

T细胞受体(TCR)序列可作为分辨T细胞特异性的唯一标签,因其多样性的特征,在特定时间内个体循环系统中所有TCR构成的TCR组库可以反映个体的抗肿瘤免疫状态。单细胞TCR测序技术能够在单细胞水平上检测编码TCR双链的基因序列和表达量等信息,包括获得TCR的α链和β链的配对信息,从而在细胞水平上更为准确地探索TCR组库的异质性,还可结合其他技术将TCR序列与基因组、转录组、蛋白质组等多组学信息成套配对,精准展现细胞水平上的多角度信息。因该技术具有高通量、高分辨率的优势而被广泛应用于肿瘤免疫治疗相关研究,为探索TME中T细胞功能、发展T细胞受体工程化T细胞(TCR-T)疗法、预测免疫检查点抑制剂(ICI)疗效等提供重要依据,成为重要的筛选工具,期待该技术的发展使更多肿瘤患者受益。

基于TCR模型的台风极值降雨强度预测

近些年台风带来的强降雨与洪水灾害给沿海城市造成严重的经济损失和人员伤亡,极端降雨环境多数是在台风作用下产生的,且极值降雨强度是城市防洪排涝、排水规划和工程设计的雨量计算依据。为更加合理准确地预测极值降雨,文章引入热带气旋降雨(tropical cyclone rainfall,TCR)模型,利用蒙特卡罗(Monte Carlo)技术模拟香港地区的极值降雨强度。对比相关规范与历史数据,该方法能较好地预测极值降雨强度,为后续台风降雨灾害危险性分析和排水工程建设研究提供一定的参考。

TCR DNA疫苗在自身免疫病中的研究进展

自身免疫病(AID)是由于机体对自身抗原失去耐受,免疫系统攻击自身组织或细胞引起组织器官或细胞损伤,并出现一定临床表现的疾病。研究证明,在AID的治疗中,致病性T细胞可以被TCR疫苗选择性抑制或杀伤,应用前景很广阔。本文从TCR疫苗的作用机制、相关疾病以及疫苗的安全性等方面,对其在AID领域的研究现状进行简要综述。

一款全能竞赛战驹是如何炼成的?——捷安特巅峰“十”代TCR系列公路车大揭秘

熟悉捷安特(Giant)的车友们对于TCR一定不会陌生,TCR是Total Compact Road(全能紧凑公路车)的缩写,为追求最快的GC选手(在多日赛特别是大环赛上竞争总冠军的车手)而生。1997年,初代TCR一经推出就亮相环法赛场,虽然当时人们对这种从未出现过的压缩车架有争议。

Hepatology International|表达靶向HBV抗原的TCR-T细胞治疗肝移植后复发的肝细胞癌患者具有良好的安全性和可行性:Ⅰ期临床试验结果

来自广州中山医科大学第三附属医院的Yang与来恩生物医药有限公司的Koh等研究了表达靶向HBV抗原的TCR-T细胞治疗肝移植后复发的肝细胞癌(HCC)患者的疗效,发表了临床Ⅰ期试验结果。该研究临床Ⅰ期试验共有6例符合条件的HCC复发患者入组.

TCR基因多样性评估肝细胞癌患者免疫力的临床研究

目的 探讨特异性T细胞受体(TCR)基因的多样性对原发性肝细胞癌患者免疫力水平的评估。方法 4例原发性肝细胞癌患者采用抗PD-1单克隆抗体HX008联合贝伐珠单抗或仑伐替尼治疗,分别于患者治疗前和治疗后对外周血中的TCR进行高通量基因测序,同时进行血常规、凝血系列、肝功、肾功、离子、血糖、AFP、心肌酶谱以CT检查,监测不良事件的发生。结果 两例患者治疗后出现免疫力升高,治疗前、后免疫力健康值分别为0.029767(差)、0.126303(良)和0.044906(差)、0.132530(良),最大TCR克隆占比分别为29.76%,9.85%和1.62%,2.63%。两例患者治疗后出现免疫力降低,治疗前、后免疫力健康值分别为0.107826(良)、0.178684(优)和0.067897(中)、0.169535(优),最大TCR克隆占比分别为3.48%、2.72%和5.15%、3.56%。结论 TCR基因的多样性可以客观准确地评估原发性肝癌患者的免疫状态、机体对疾病与治疗的反应,为开发新的免疫治疗靶点以及预后监测指标提供实验基础及研究依据。

1580mm热轧带钢35kVTCR型静止型动态无功补偿装置(SVC)介绍

1580mm热轧带钢35kV电源供电系统主要负荷为9台6000kW交-交变频主传动轧机、2台1200kW直流传动立辊轧机、1台1500kW直流传动转鼓式飞剪,为了控制轧机注入系统的谐波电流量,抑制电压波动,提高功率因数,保证轧钢过程稳定、节能、提高轧机效率,并保证轧机供电设备本身及其他用电设备的安全运行,在供电母线安装一套SVC无功补偿装置,进行电能质量治理。

CRISPR/Cas9敲除内源TCR增强TCR-T细胞对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的杀伤

目的:基于CRISPR/Cas9基因编辑技术制备无内源TCR的TCR-T细胞并鉴定其在体外杀伤HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的功能。方法:培养健康志愿者外周血CD8^(+)T细胞和Jurkat细胞,CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除CD8+T、Jurkat细胞的TCR基因,制备过表达转基因TCR的重组慢病毒,在敲除内源性TCR的CD8^(+)T和Jurkat细胞中用慢病毒过表达转基因TCR制备TCR-T细胞,多色FCM检测TCR-T细胞中TCR和CD3的表达水平,荧光素酶活性实验检测TCR-T细胞对HPV16阳性SiHa细胞的杀伤效率。结果:CRIPSR/Cas9基因编辑技术高效地敲除了外周血CD8^(+)T细胞和Jurkat细胞中的TRAC和TRBC基因,敲除效率分别为(81.4±4.5)%、(98.5±0.07)%,制备的无内源TCR的TCR-T细胞高效表达转基因TCR,在外周血CD8^(+)T和Jurkat细胞中表达率为(66.0±17.8)%、(97.3±2.6)%,敲除内源TRAC和TRBC基因有效增强CD8^(+)T和Jurkat细胞膜表达转基因TCR(均P<0.01),敲除内源TCR增强TCR-T细胞特异性杀伤HPV16阳性的SiHa细胞[(71.4±1.0)%vs(35.1±2.0)%,P<0.01)]。结论:无内源TCR的TCR-T细胞显著增强转基因TCR的表达和对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的靶向杀伤能力,为提高TCR-T细胞的临床疗效提供了实验依据。