PCR检测非霍奇金淋巴瘤IgH和TCRβ基因重排

目的 探讨PCR方法检测IgH和TCRβ基因重排在非霍奇金淋巴瘤 (NHL)诊断中的临床意义。 方法 用PCR方法检测 40例非霍奇金淋巴瘤和 5例慢性淋巴结炎的基因重排情况。结果 2 0例B细胞NHL中检测出 19例IgH基因重排 ,2 0例T细胞NHL中检测出 17例TCRβ基因重排。 结论 PCR方法检测NHL中IgH和TCRβ基因重排具有敏感、特异的优点 ,在非霍奇金淋巴瘤的诊断中具有重要价值。

用TCRβ可变区基因阵列反映疾病的淋巴细胞克隆变化

将正常脐带血TCRβ(T细胞受体 β)重排基因制备成基因阵列 ,观察能否反映肿瘤或自身免疫病患者的淋巴细胞克隆的变化。方法 采用RT -PCR扩增混合 1 0例脐带血的cDNA不同家族的TCRβ可变区基因全部序列 ,经测序胶或SS CP电泳后 ,电转移到尼龙膜上 ,制成TCRβ可变区基因阵列。用同位素α - 32 PdCTP标记正常成人、脐带血、待检患考的TCRβ基因 ,与基因阵列杂交。结果 :从测序胶排列的基基阵列发现 ,正常成人及脐带血呈正常高斯分布 ,即呈多克隆性 ;一些肿瘤患者T淋巴细胞克隆有少数几个克隆的异常增生 ,即呈寡克隆性 ;1例急性T淋巴细胞白血病患者仅在Vβ1 6见单一的条带扩增 ,呈单克隆性。结论 :该基因阵列可以反映正常人淋巴细胞的克隆分布和疾病时出现的淋巴细胞变化。

内毒素耐受状态下胸腺细胞TCRβ链CDR3区多态性和长度的变化

目的研究内毒素耐受状态下小鼠胸腺T细胞TCRβ链CDR3多态性和长度的变化,并探讨其意义。方法以5mg/kg浓度LPS腹腔注射C57BL/6小鼠建立内毒素耐受模型,5 mg/kg浓度生理盐水腹腔注射72 h后为对照组,提取对照组、模型后72 h实验组和8 d实验组的小鼠胸腺组织RNA,并逆转录为c DNA;以22条TRBV基因家族序列设计上游引物,TRBJ1-1基因家族序列设计下游引物,PCR扩增出完整的TCRβ链CDR3区;毛细管电泳技术分析TCRβ链CDR3区的多态性和长度。结果正常小鼠胸腺样本多数呈现中间高两边低的正态性分布的TCRβ链CDR3谱型峰图,少数呈现偏峰、寡峰或低峰;LPS注射后72 h胸腺样本TCRβ链CDR3区呈现数量不等的偏峰、寡峰和低峰;模型8 d胸腺样本大多呈现多峰。此外,与正常组相比,模型72 h和8 d胸腺样本TCRβ链CDR3区产物长度均发生了不同程度的变化。结论内毒素耐受状态下,小鼠胸腺细胞TCRβ链CDR3区的多态性和长度均发生了明显改变,为后续进一步研究该状态下胸腺细胞发育及功能变化提供前期实验基础。

半滑舌鳎外周血T淋巴细胞的分离、鉴定及TCRβ基因免疫应答分析

为开展半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)免疫学研究提供细胞平台,利用密度梯度离心法分离半滑舌鳎外周血淋巴细胞,采用短期细胞培养法分离悬浮淋巴细胞,悬浮淋巴细胞在含有0.3μg/m L的PHA的DMEM完全培养基,于24℃条件下可连续培养3—4d左右,采用自制的尼龙毛柱可将悬浮淋巴细胞中的非黏附淋巴细胞和黏附淋巴细胞成功分离;利用流式细胞仪结合特异抗体检测对非黏附淋巴细胞和黏附淋巴细胞进行鉴定,结果表明,非黏附细胞与鼠抗人FTIC-CD3单克隆抗体特异结合,为T样淋巴细胞;黏附细胞和鼠抗人FTICCD19单抗特异结合,为B样淋巴细胞。T细胞表面抗原受体TCRβ基因可特异性的在非黏膜细胞中表达,而在黏附细胞中不表达,证明分离获得的非黏膜细胞为T淋巴细胞,采用q RT-PCR(Quantitative Real-Time PCR)方法检测TCRβ基因表达,结果表明,TCRβ基因在半滑舌鳎肝、脾、头肾、后肾、小肠、胃、血液、鳃、皮肤、肌肉、心脏、脑、卵巢组织中均有表达,其中在肠、胃、脾、头肾中表达量较高;鳗弧菌感染后TCRβ基因在肝、脾、鳃中呈现明显的上调表达,且表达峰值出现在感染后72—96h,表明TCRβ基因在获得性免疫应答中起重要作用。

结直肠癌T细胞克隆TCRβ基因CDR3区氨基酸序列的初步分析

目的 通过建立结直肠癌肿瘤浸润性淋巴细胞 (tumorinfiltratinglymphocytes ,TIL)和术前外周血 (peripheralbloodlymphocytes ,PBL)中抗肿瘤T细胞克隆的TCRβ基因谱型 ,确定抗肿瘤T细胞克隆的分子特征。方法 采用RT PCR方法扩增结直肠癌TIL和PBL的TCRβ基因的 2 4个不同V家族基因片段 ,经过测序凝胶分离和特殊银染色 ,结合测序结果确定TCRβ基因谱型。 结果 结直肠癌患者具有TIL和 /或PBL中T淋巴细胞的克隆性增殖。有些T细胞克隆表达相同的CDR3区氨基酸基序。CDR3区不同位点具有特征性的疏水性和极性氨基酸以及甘氨酸的分布。结论 通过分析结直肠癌抗肿瘤T细胞克隆特征性的CDR3区氨基酸序列 ,将有益于发现新的抗肿瘤免疫治疗方法。

急性炎性脱鞘性多神经根神经病TCRβ链基因重排的研究

急性炎性脱鞘性多神经根神经病（ａｃｕｔｅｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｄｅｍｙｅｌｉｎａｔｉｎｇｐｏｌｙｒａｄｉｃｕｌｏｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ，ＡＩＤＰ）为一种主要累及脊神经、颅神经的周围神经系统疾病，病变部位神经髓鞘脱失，伴大量淋巴细胞浸润，严重时可有轴索...

TCRβ链CDR3谱系与病毒感染相关研究进展

T细胞受体（T cell receptor，TCR）是T淋巴细胞特异性识别抗原的受体，也是所有T细胞的特征性表面标志。T细胞应答是通过TCR互补决定区（Complementary determining region，CDR）与各种特异的抗原结合，从而产生各种克隆T细胞，不同克隆T细胞具有不同长度或序列的TCRCDR3区，

cHL IgH和TCRβ基因重排检测的研究

目的 探索检测cHL IgH和TCRβ基因重排的意义。方法 对32例cHL病例石蜡存档切片进行了TCRβ及IgH基因FRⅢ区的重排检测。结果 31.3％(10/32)出现IgH基因克隆重排单带,9.1％(3/32)出现TCRβ基因克隆重排单带,其中一例呈双克隆基因重排。结论 本研究证实部分cHL可能来源于B细胞,但仍不能除外T细胞来源。

同卵、异卵、非双胞胎外周血TCRβ链假基因和功能性CDR3受体库前后5年动态变化分析

目的:初步探讨个体遗传因素对V(D)J重组过程中的偏向性影响和TCR的MHC-自身肽耐受的选择效应。方法:采用高通量测序技术分析同卵双胞胎(MZ)、异卵双胞胎(DZ)和非双胞胎(NT)外周血中TCRβ链假基因CDR3受体库与功能性CDR3受体库前后5年的动态变化。结果:TRBV基因取用,V-J配对,核苷酸的插入和删除前后5年的动态变化在MZ之间更为一致;而CDR3区TRBJ基因取用、AA取用、AA长度分布和Overlap前后5年的动态变化在MZ、DZ和NT之间无显著差异。结论:本实验提示遗传因素可能对外周血总T细胞CDR3受体库的偏向性产生影响。

高通量TCR免疫组库技术在艾滋病中的应用及前景分析

T细胞受体(TCR)免疫组库是机体所有TCR的总和,TCR免疫组库的多样性与HIV识别和免疫逃逸密切相关。高通量免疫组库测序技术能够检测分析TCR组库的所有序列,真实反映所有TCR的遗传信息,全面揭示TCR组库的复杂性和多样性。通过高通量测序技术分析TCR免疫组库变化可监测HIV患者诊疗情况、疾病进展及预后,同时有助于疫苗研发、病毒库清除及临床疗效评价,从而为丰富HIV/AIDS防治思路和靶点提供依据。

单细胞TCR测序在肿瘤免疫治疗中的应用

T细胞受体(TCR)序列可作为分辨T细胞特异性的唯一标签,因其多样性的特征,在特定时间内个体循环系统中所有TCR构成的TCR组库可以反映个体的抗肿瘤免疫状态。单细胞TCR测序技术能够在单细胞水平上检测编码TCR双链的基因序列和表达量等信息,包括获得TCR的α链和β链的配对信息,从而在细胞水平上更为准确地探索TCR组库的异质性,还可结合其他技术将TCR序列与基因组、转录组、蛋白质组等多组学信息成套配对,精准展现细胞水平上的多角度信息。因该技术具有高通量、高分辨率的优势而被广泛应用于肿瘤免疫治疗相关研究,为探索TME中T细胞功能、发展T细胞受体工程化T细胞(TCR-T)疗法、预测免疫检查点抑制剂(ICI)疗效等提供重要依据,成为重要的筛选工具,期待该技术的发展使更多肿瘤患者受益。

基于TCR模型的台风极值降雨强度预测

近些年台风带来的强降雨与洪水灾害给沿海城市造成严重的经济损失和人员伤亡,极端降雨环境多数是在台风作用下产生的,且极值降雨强度是城市防洪排涝、排水规划和工程设计的雨量计算依据。为更加合理准确地预测极值降雨,文章引入热带气旋降雨(tropical cyclone rainfall,TCR)模型,利用蒙特卡罗(Monte Carlo)技术模拟香港地区的极值降雨强度。对比相关规范与历史数据,该方法能较好地预测极值降雨强度,为后续台风降雨灾害危险性分析和排水工程建设研究提供一定的参考。

TCR DNA疫苗在自身免疫病中的研究进展

自身免疫病(AID)是由于机体对自身抗原失去耐受,免疫系统攻击自身组织或细胞引起组织器官或细胞损伤,并出现一定临床表现的疾病。研究证明,在AID的治疗中,致病性T细胞可以被TCR疫苗选择性抑制或杀伤,应用前景很广阔。本文从TCR疫苗的作用机制、相关疾病以及疫苗的安全性等方面,对其在AID领域的研究现状进行简要综述。

非霍奇金淋巴瘤Ig和TCR_β链基因重排与相关抗原的表达

用１４种抗人白细胞的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）与２种多克隆抗体（ＰｃＡｂ）和人类免疫球 蛋白（Ｉｇ）基因簇重链（ＩｇＨ）ＪＨ、Ｃμ、轻链（ＩｇＬ）Ｃκ、Ｏλ以及Ｔ细胞受体β链（ＴＣＲβ）基因作为 探针，以 ＡＢＣ及 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交法对１１例非霍奇金恶性淋巴瘤（ＮＨＬ）的抗原表达与 Ｉｇ基因簇、ＴＣＢβ基因重排作了研究。结果显示：抗原表达和基因重排具有非常明确的相关性（Ｐ ＝０．００２）。从ＩｇＬ的κ链重排中还显示了基因的重排早于基因的表达。研究证实基因重排的检测能更敏感地反映ＮＨＬ的亚型以及肿瘤的分化阶段。

一款全能竞赛战驹是如何炼成的?——捷安特巅峰“十”代TCR系列公路车大揭秘

熟悉捷安特(Giant)的车友们对于TCR一定不会陌生,TCR是Total Compact Road(全能紧凑公路车)的缩写,为追求最快的GC选手(在多日赛特别是大环赛上竞争总冠军的车手)而生。1997年,初代TCR一经推出就亮相环法赛场,虽然当时人们对这种从未出现过的压缩车架有争议。

Hepatology International|表达靶向HBV抗原的TCR-T细胞治疗肝移植后复发的肝细胞癌患者具有良好的安全性和可行性:Ⅰ期临床试验结果

来自广州中山医科大学第三附属医院的Yang与来恩生物医药有限公司的Koh等研究了表达靶向HBV抗原的TCR-T细胞治疗肝移植后复发的肝细胞癌(HCC)患者的疗效,发表了临床Ⅰ期试验结果。该研究临床Ⅰ期试验共有6例符合条件的HCC复发患者入组.

TCR基因多样性评估肝细胞癌患者免疫力的临床研究

目的 探讨特异性T细胞受体(TCR)基因的多样性对原发性肝细胞癌患者免疫力水平的评估。方法 4例原发性肝细胞癌患者采用抗PD-1单克隆抗体HX008联合贝伐珠单抗或仑伐替尼治疗,分别于患者治疗前和治疗后对外周血中的TCR进行高通量基因测序,同时进行血常规、凝血系列、肝功、肾功、离子、血糖、AFP、心肌酶谱以CT检查,监测不良事件的发生。结果 两例患者治疗后出现免疫力升高,治疗前、后免疫力健康值分别为0.029767(差)、0.126303(良)和0.044906(差)、0.132530(良),最大TCR克隆占比分别为29.76%,9.85%和1.62%,2.63%。两例患者治疗后出现免疫力降低,治疗前、后免疫力健康值分别为0.107826(良)、0.178684(优)和0.067897(中)、0.169535(优),最大TCR克隆占比分别为3.48%、2.72%和5.15%、3.56%。结论 TCR基因的多样性可以客观准确地评估原发性肝癌患者的免疫状态、机体对疾病与治疗的反应,为开发新的免疫治疗靶点以及预后监测指标提供实验基础及研究依据。

CRISPR/Cas9敲除内源TCR增强TCR-T细胞对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的杀伤

目的:基于CRISPR/Cas9基因编辑技术制备无内源TCR的TCR-T细胞并鉴定其在体外杀伤HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的功能。方法:培养健康志愿者外周血CD8^(+)T细胞和Jurkat细胞,CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除CD8+T、Jurkat细胞的TCR基因,制备过表达转基因TCR的重组慢病毒,在敲除内源性TCR的CD8^(+)T和Jurkat细胞中用慢病毒过表达转基因TCR制备TCR-T细胞,多色FCM检测TCR-T细胞中TCR和CD3的表达水平,荧光素酶活性实验检测TCR-T细胞对HPV16阳性SiHa细胞的杀伤效率。结果:CRIPSR/Cas9基因编辑技术高效地敲除了外周血CD8^(+)T细胞和Jurkat细胞中的TRAC和TRBC基因,敲除效率分别为(81.4±4.5)%、(98.5±0.07)%,制备的无内源TCR的TCR-T细胞高效表达转基因TCR,在外周血CD8^(+)T和Jurkat细胞中表达率为(66.0±17.8)%、(97.3±2.6)%,敲除内源TRAC和TRBC基因有效增强CD8^(+)T和Jurkat细胞膜表达转基因TCR(均P<0.01),敲除内源TCR增强TCR-T细胞特异性杀伤HPV16阳性的SiHa细胞[(71.4±1.0)%vs(35.1±2.0)%,P<0.01)]。结论:无内源TCR的TCR-T细胞显著增强转基因TCR的表达和对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的靶向杀伤能力,为提高TCR-T细胞的临床疗效提供了实验依据。

CD4^(-)CD8^(-)TCRγδ^(+)T细胞大颗粒淋巴细胞白血病合并纯红细胞再生障碍性贫血1例并文献复习

本文回顾性分析2021年3月山东大学附属威海市立医院收治的1例CD4^(-)CD8^(-)TCRγδ^(+)T细胞大颗粒淋巴细胞白血病(T-cell large granular lymphocyte leukemia,T-LGLL)合并纯红细胞再生障碍性贫血(Pure red cell aplasia,PRCA)患者的临床资料,并复习相关文献,以提高对CD4^(-)CD8^(-)TCRγδ^(+)T-LGLL合并PRCA的认知,从而减少临床中的误诊及漏诊。