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拟南芥转录因子TDF1的原核表达及多克隆抗体制备 被引量:3
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作者 周茜 曹志林 +1 位作者 俞俞 杨仲南 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2010年第2期175-180,共6页
在拟南芥花药发育过程中,MYB家族转录因子TDF1在调控绒毡层发育及后期功能上起到关键的作用.利用PCR方法扩增TDF1基因并克隆到原核表达载体pET-32a.将表达载体TDF1-pET32a转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG成功诱导表达了分子量约为56KD的T... 在拟南芥花药发育过程中,MYB家族转录因子TDF1在调控绒毡层发育及后期功能上起到关键的作用.利用PCR方法扩增TDF1基因并克隆到原核表达载体pET-32a.将表达载体TDF1-pET32a转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG成功诱导表达了分子量约为56KD的TDF1融合蛋白.该融合蛋白主要以包涵体形式存在,分离出包涵体后进行可溶性处理作为抗原免疫家兔.制备出的多克隆抗血清经ELISA测定效价为1∶2560,Western blot检测表明该抗血清与TDF1融合蛋白识别良好.TDF1抗体的制备有助于进一步从生化水平上研究TDF1在花药发育中的功能. 展开更多
关键词 原核表达 拟南芥 转录因子 tdf1 融合蛋白 多克隆抗体
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转录因子TDF1对拟南芥雄性不育突变体atms1的温敏调控机制研究
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作者 郑亚洁 高贝 +2 位作者 夏群芳 周树敏 张卫 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2014年第3期259-265,共7页
TDF1作为MYB家族的转录因子,参与了胼胝质的降解过程,并控制绒毡层的分化从而影响着花粉粒的正常发育.以一株通过甲基磺酸乙酯(EMS)诱变Col-0野生型拟南芥获得的温敏雄性不育突变体atms1(ambient temperature-sensory male sterility1)... TDF1作为MYB家族的转录因子,参与了胼胝质的降解过程,并控制绒毡层的分化从而影响着花粉粒的正常发育.以一株通过甲基磺酸乙酯(EMS)诱变Col-0野生型拟南芥获得的温敏雄性不育突变体atms1(ambient temperature-sensory male sterility1)对温度敏感机制进行了研究.通过构建TDF1反义RNA表达载体,在atms1突变体背景下抑制TDF1的表达来观察突变体花粉育性的变化,发现在27℃时的atms1突变体花粉的育性得以恢复.这一结果表明在花粉发育的过程中TDF1对ATMS1m具有一定的调控作用. 展开更多
关键词 atms1 温敏雄性不育 tdf1 花药育性 Real—time PCR
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A Genetic Pathway for Tapetum Development and Function in Arabidopsis 被引量:34
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作者 Jun Zhu Yue Lou Xiaofeng Xu Zhong-Nan Yang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2011年第11期892-900,共9页
In anther development, tapetal cells take part in complex processes, including endomitosis and apoptosis (programmed cell death). The tapetum provides many of the proteins, lipids, polysaccharides and other molecule... In anther development, tapetal cells take part in complex processes, including endomitosis and apoptosis (programmed cell death). The tapetum provides many of the proteins, lipids, polysaccharides and other molecules necessary for pollen development. Several transcription factors, including DYT1, TDF1, AMS, MS188 and MS1, have been reported to be essential for tapetum development and function in Arabidopsis thaliana. Here, we present a detailed cytological analysis of knockout mutants for these genes, along with an in situ RNA hybridization experiment and double mutant analysis showing that these transcription factors form a genetic pathway in tapetum development. DYT1, TDF1 and AMS function in early tapetum development, while MS188 and MS1 are important for late tapetum development. The genetic pathway revealed in this work facilitates further investigation of the function and molecular mechanisms of tapetum development in Arabidopsis. 展开更多
关键词 anther development genetic pathway pollen development TAPETUM transcription factor DYT1 tdf1 AMS MS188 MS1.
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