急性B淋巴细胞白血病BCL-2抑制剂耐药细胞系的构建及耐药机制研究

目的:利用急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞系RS4;11构建对BCL-2抑制剂耐药的耐药细胞系,并探讨其可能的耐药机制。方法:采用BCL-2抑制剂navitoclax和venetoclax小剂量低浓度递增的方法间歇诱导RS4;11细胞系,构建RS4;11/Nav和RS4;11/Ven耐药细胞系,通过MTT法检测不同药物浓度下细胞的存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,转录组测序技术(RNA-seq)检测RS4;11耐药细胞系和亲本细胞系中的差异表达基因(DEGs),RRT-PCR检测耐药细胞系与亲本细胞系中差异表达基因的mRNA表达水平,Western blot检测耐药细胞系和亲本细胞系中BCL-2家族抗凋亡蛋白的表达水平。结果:成功构建了对BCL-2抑制剂耐药的耐药细胞系RS4;11/Nav和RS4;11/Ven,RS4;11/Nav对navitoclax的耐药指数为328.655±47.377,RS4;11/Ven对venetoclax的耐药指数为2 894.027±300.311。流式细胞术检测细胞凋亡发现,相比耐药细胞系,RS4;11亲本细胞系明显被BCL-2抑制剂抑制,而耐药细胞系的凋亡率基本未受药物的影响。Western blot检测结果表明,BCL-2家族抗凋亡蛋白在耐药细胞系中的表达无明显增多。RNA-seq、RT-PCR和Western blot检测发现EP300在耐药细胞系中的表达较亲本细胞系明显增高(P<0.05)。结论:小剂量低浓度递增间歇诱导法可成功构建对BCL-2抑制剂耐药的B-ALL细胞系,并且其耐药机制可能与EP300的表达上调有关。

姜黄素调节B淋巴瘤细胞p300和HDAC1的研究

p300是一种具有组蛋白乙酰化酶活性的转录辅助因子,HDAC1是一种组蛋白去乙酰化酶。本研究查明姜黄素对B-NHL细胞株Raji细胞增殖的影响,并探讨这种影响与p300以及HDAC1转录调节表达的关系。以不同浓度(6.25-50μmol/L)的姜黄素作用于体外培养的Raji细胞,用MTT法检测细胞生长抑制率,Annexin-V-FITC/PI双标流式细胞术检测细胞的凋亡率和应用RT-PCR和Westernblot法检测Raji细胞中HDAC1和p300的mRNA表达和蛋白含量的变化。结果表明:姜黄素对Raji细胞抑制作用呈明显的时效和量效关系。24小时的IC50为25μmo/L;姜黄素能够诱导Raji细胞凋亡,凋亡率为14.38%-61.18%,并呈浓度依赖性。姜黄素明显抑制HDAC1和p300的活性和表达。在IC50浓度时,随着时间的延长,其p300和HDAC1mRNA表达和蛋白含量逐渐降低,呈时间依赖性,与对照组相比有显著性(P<0.05)。结论:姜黄素对B细胞淋巴瘤细胞系Raji细胞具有抗肿瘤细胞的增殖作用,并促进其凋亡。姜黄素能够抑制转录共激活因子p300及组蛋白去乙酰化酶HDAC1活性和表达,可能是其作用机制之一。

伴EP300-ZNF384融合基因阳性的急性B淋巴细胞白血病临床特点分析

目的:探讨与分析对EP300-ZNF384融合基因阳性的急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者的临床及实验室特征,以期提高对此少见类型疾病的认识。方法:收集并回顾性分析本院自2017年2月至2018年2月收治的37例B-ALL的临床资料,对检出EP300-ZNF384融合基因阳性3例患者的临床、实验室特征及治疗情况进行深入分析。结果:8.1%的B-ALL患者检测出EP300-ZNF384融合基因。3例患者R显带核型分析均为正常核型,在免疫分型上均表达有CD13或CD33等髓系标志。3例患者均对于传统化疗敏感。结论:EP300-ZNF384阳性的B-ALL可能是一类具有独特临床特点与实验室检测特征的B-ALL亚型,可能对当前化疗方案敏感,可能预后良好。

S100B及P300对颞叶癫痫患者记忆的评价

目的探讨癫痫患者血清S100B浓度与学习记忆的关系。方法 (1)用酶联免疫吸附法(ELISA)检测63例癫痫患者及40例对照组的血清S100B浓度。(2)分组将63例癫痫患者依照临床记忆量表(CMS)分为优秀癫痫组15例;中等癫痫组20例;差等癫痫组28例;(3)认知功能评价CMS及失匹配负波(P300)评估记忆功能。结果血清S100B浓度优秀癫痫组、中等癫痫组、差等癫痫组、对照组100.43±4.44,132.46±11.9,186.33±37.14,140.08±34.55 pg/m L,差等癫痫组血清S100B浓度高于优秀癫痫组、中等癫痫组、对照组(P<0.05)。差等癫痫组P300潜伏期比优秀癫痫组、中等癫痫组、对照组延长(P<0.05)。P300波幅各组之间差异没有统计学意义。记忆商值优秀癫痫组、中等癫痫组、对照癫痫组及差等癫痫组的记忆商值依次减低,差异有统计学意义(P<0.05)。优秀癫痫组、中等癫痫组及对照组血清S100B浓度、P300潜伏期差异没有统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示差等癫痫组血清S100B浓度与相应的P300潜伏期呈正相关(r=0.616,P=0.006)。与相应的记忆商值呈负相关(r=-0.596,P=0.007)。结论血清S100B浓度有可能作为观察癫痫患者学习记忆是否受损的血液生化指标。

脑白质变性与诱发电位P300、脑电图、血浆载脂蛋白B的相关性研究

目的:探讨头颅CT未显示脑白质变性的轻度认知损害(MCI)患者的事件相关电位(ERP)P300、脑电图(EEG)和血浆载脂蛋白B的特点,为早期血管性痴呆的诊断提供帮助。方法:对60例MCI患者行头颅CT检查,根据有无脑室周围、半卵圆区、皮质下白质斑片状影,将上述患者分为脑白质变性组及非脑白质变性组,均进行P300、EEG及血浆载脂蛋白B检查,进行相关性分析,并与健康老年组32例做比较。结果:脑白质变性组与非脑白质变性组P300检查比较,P300峰潜伏期有显著延长,部分非脑白质变性患者P300峰潜伏期有轻度延长,与健康组相比有显著差异;脑电图检查,脑白质变性组以δ、θ波为主,轻-中度异常比例显著高于非脑白质变性组,非脑白质变性组以α、β波为主;健康老年组以α波为主;血浆载脂蛋白B化验,各组之间无显著差异。结论:P300潜伏期延长提示MCI患者可能有早期血管性痴呆;EEG颞部θ波增多提示MCI患者可能有早期血管性痴呆。载脂蛋白B化验未见明显差异,在本次研究中对于早期血管性痴呆诊断无确切临床意义。

慢性精神分裂症患者血清S100B水平与事件相关电位P300的相关性

目的:探讨慢性精神分裂症患者血清S100B水平与事件相关电位P300(Event-related potential P300,P300)的关系。方法:随机将年龄在18~60岁之间符合ICD-10及CCMD-3诊断标准的慢性精神分裂症患者40例作为研究组,选择40例健康者作为对照组。同时检测血清S100B水平及以P300评定认知功能,并将结果加以分析、比较。结果:与对照组相比,研究组CZ、PZ点的N1、P2、N2、P3潜伏期均明显延长(t=2.24~3.85,P<0.05或0.01),研究组CZ、PZ点的N2、P3波幅明显降低(t=3.04~5.26,P<0.01);研究组的血清S100B水平高于对照组(t=4.15,P<0.01);CZ、PZ点P300潜伏期与血清S100B水平呈正相关(r=0.35~0.48,P<0.05或0.01),CZ、PZ点P300波幅与血清S100B水平则呈负相关(r=-0.48^-0.58,P<0.01)。结论:慢性精神分裂症患者血清S100B水平高于健康者并且认知功能存在损害,其认知功能损害可能与血清S100B水平有关。

基于FTA的B737-300空调系统故障诊断研究

飞机因其结构复杂,组成部件繁多,要检测的参数很多,而且各种参数之间存在着复杂关系,故障现象也多种多样,最常见的也有几万种,这就决定了飞机的故障诊断是一项非常复杂的工作。文章阐述了故障树分析法(Fault tree analysis,FTA),并以B737-300为研究对象,把两者有机的结合起来,并在故障树的建立和定性定量分析的基础上进行空调系统故障诊断,使空调系统能够正常安全运作,尽最大可能保证旅客的安全,为旅客提供一个舒适安逸的生存环境。

JBN-300B冲击试验机的改造

以AT89C2051单片机为核心组成的JBN 300B冲击试验机智能型自动控制系统,依据半自动冲击机原理,用单片机微处理器AT89C051与传统的机械产品相结合,使传统机械产品得以简化,控制智能化。消除了冲击过程中瞬间电流过大,造成控制电路元件损坏的现象。

肠出血性大肠埃希菌O157:H7紧密黏附素C300与LTB融合蛋白B细胞表位预测

目的对肠出血性大肠埃希菌O157：H7紧密黏附素C300与黏膜佐剂不耐热肠毒素（LTB）融合蛋白二级结构及B细胞识别表位进行预测,为开发新型疫苗提供理论依据.方法采用DNA star软件中的Protean预测软件对Intim in C300与LTB融合蛋白的亲水性指数、β-转角、柔韧性、表面可及性和抗原指数进行预测.结果在融合蛋白N端第1-10、20-30、110-120、210-220、300-310、350-360、380-390和415-420区段可能是α-螺旋中心,在N端第195-205、300-320、335-350和390-410区段形成4个大的β-折叠中心区域,在各β-折叠区间存在均匀且较丰富的转角区域.融合蛋白的蛋白柔性区域可能位于N端第20-35、52-65、75-85、105-115、150-160、172-188、260-275和372-388区域,这些区域有一定幅度的折叠或摆动,可形成较复杂的三级结构.亲水性区域位于第50-60、70-80、155-165、190-200、240-250、260-270、330-340和375-385区段,这8个区域作为抗原表位可能性大.结论通过生物信息学技术分析,可有效地预测融合蛋白二级结构和B细胞表位,为人工合成优势肽段进行肠出血性大肠埃希菌O157：H7的重组疫苗研制提供理论依据.

p300/CBP相关因子对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响及机制研究

目的探讨p300/CBP相关因子(PCAF)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的作用及机制。方法组织块贴壁法获取大鼠原代VSMC,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒转染VSMC以下调PCAF表达。选择1μg/ml的脂多糖作为VSMC迁移诱导剂。将实验分为4组:不添加脂多糖(对照组)、1μg/ml脂多糖刺激(A组)、Ad-绿色荧光蛋白(GFP)腺病毒转染+1μg/ml脂多糖刺激(B组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染+1μg/ml脂多糖刺激(C组)。采用Transwell实验检测细胞迁移水平。免疫荧光染色实验检测VSMC中NF-κB p65的核转位情况。Western blot检测PCAF、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65蛋白表达水平。结果 Western blot结果显示,与对照组比较,A组和B组PCAF和磷酸化NF-κB p65蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组PCAF和磷酸化NF-κB p65蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验结果显示,与对照组比较,A组和B组穿出小室细胞数明显增多,差异有统计学意义[(766.30±40.86)个/视野、(794.00±76.36)个/视野vs (202.70±22.59)个/视野,P<0.05];与B组比较,C组穿出小室细胞数明显减少,差异有统计学意义[(337.00±82.95)个/视野vs (794.00±76.36)个/视野,P<0.05]。免疫荧光染色实验结果显示,与对照组比较,A组和B组细胞核内NF-κB p65蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,C组细胞核内NF-κB p65蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调PCAF的表达可明显抑制VSMC迁移,其机制可能与下调PCAF后抑制NF-κB信号通路介导的炎性反应有关。

EHEC O157:H7紧密黏附素C300与LTB融合基因克隆与序列分析

目的构建肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7紧密黏附素C-端免疫保护片段与肠黏膜佐剂大肠埃希菌不耐热肠毒素B亚单位（LTB）的融合基因克隆载体,为进一步研究EHEC O157：H7重组疫苗奠定了基础.方法设计引物采用PCR技术从EHEC O157：H7基因组中扩增Intimin C300的编码基因,从肠产毒性大肠埃希菌基因组中扩增LTB的编码基因,分别构建克隆载体pUC18-C300和pUC18-LTB,采用酶切位点相连技术,构建pUC19-C300-LTB克隆载体,并测序.结果从EHEC O157：H7基因组中扩增出了900 bp的目的片段,从肠产毒素大肠埃希菌基因组扩增出了275 bp的目的片段,分别插入载体pUC18和pUC19,经酶切及测序鉴定与目的序列一致.结论克隆出EHEC O157：H7的紧密黏附素C-端免疫保护片段与不耐热肠毒素B亚单位基因,并成功构建融合基因克隆载体,测序正确.

二甲双胍对糖尿病患者血维生素B_(12)、同型半胱氨酸及事件相关电位P300的影响研究

目的研究与观察二甲双胍对糖尿病患者维生素B_(12)、同型半胱氨酸及事件相关电位P300的影响。方法选取2013年10月—2017年9月期间该院收治的76例糖尿病患者为研究对象,将其随机分为对照组(常规糖尿病治疗组)38例和观察组(常规治疗加二甲双胍组)38例。比较两组患者治疗前及治疗后不同时间的血清维生素B_(12)、同型半胱氨酸及事件相关电位P300检测结果。结果治疗前及治疗后2、4个月两组患者的血清维生素B_(12)、同型半胱氨酸及事件相关电位P300检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后6个月观察组的血清维生素B_(12)及P300波幅均低于对照组,血清同型半胱氨酸及P300潜伏期均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍对糖尿病患者维生素B_(12)、同型半胱氨酸及事件相关电位P300的影响较大,因此对采用二甲双胍治疗的患者应重视对上述指标的监测与调控。

B737-300飞机自动增压失效故障分析

增压系统的可靠工作对保障机上人员的生命安全至关重要,为迅速准确地确定增压系统故障,提高航线的排故效率,针对B737-300飞机自动增压系统失效的故障,介绍了故障树的建立依据和方法,并对飞机增压控制系统可靠性进行定性分析和定量分析,该方法在实际航线排故中已得到了初步验证,对提高增压系统排故效率具有重要的参考价值。

TH_PKU-300B挥发性有机物快速在线监测系统常见故障及解决

针对TH_PKU-300B挥发性有机物快速在线监测系统运行中常见的FID谱图基线不稳定、丙烷峰展宽拖尾、高沸点组分响应下降、GC/MS一直停留在预运行状态、热解析过程中GC进样口压力报警、控制软件温度显示故障、采样体积达不到设定值等故障,分析其产生原因,并提出相应的解决办法和预防措施,同时对TH_PKU-300B系统运维工作提出相关建议。

脑白质病变病人BNDF、S100B、P300与认知功能障碍的相关性研究

目的探讨血清脑源性神经生长因子(BDNF)、S100B蛋白、事件相关电位P300与脑白质病变病人认知功能障碍的相关性。方法选取河北中石油中心医院神经内科2015年8月—2017年8月收治的脑白质病变病人83例,依据Fazekas评分标准分为3组,其中轻度组35例,中度组25例,重度组23例。入院时检测并比较3组蒙特利尔评分量表(MoCA)评分、血清BDNF、S100B水平及P300潜伏期及波幅,同时比较3组临床资料。入院后给予所有病人依达拉奉注射液治疗14 d,比较治疗前及治疗后1个月血清BDNF、S100B水平、P300潜伏期及波幅,分析不同认知障碍水平(MoCA评分)与BDNF、S100B、P300的相关性。结果3组性别、年龄、受教育年限、体质指数(BMI)、吸烟史、饮酒史、糖尿病、病灶数目及部位比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高血压患病率比较,轻度组<中度组<重度组,差异有统计学意义(P<0.05)。MoCA评分、血清BDNF、P300波幅比较,轻度组>中度组>重度组;血清S100B、P300潜伏期比较,轻度组<中度组<重度组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。治疗前MoCA评分、血清BDNF水平、P300波幅明显低于治疗后;治疗前血清S100B、P300潜伏期明显高于治疗后,且差异均有统计学意义(P均<0.05)。S100B、P300潜伏期与MoCA评分呈负相关(r值分别为-0.609,-0.488,P<0.01),BDNF、P300波幅与MoCA评分呈正相关(r值分别为0.436,0.422,P<0.01)。结论脑白质病变病人S100B、P300潜伏期随认知功能损伤程度加重而逐渐升高,BDNF、P300波幅随认知功能损伤程度加重而逐渐降低。BDNF、S100B、P300可作为早期发现脑白质病变病人认知功能障碍的筛查指标。

TS-300B制冷机组在煤矿局部降温的应用

针对煤矿高温、高湿已成为影响生产安全的重要因素之一的情况,介绍了TS-300B型制冷机的工作原理、主要技术参数,以及在平煤四矿和十三矿的应用情况。总结了TS-300B型移动式制冷机的主要特点及应用体会。

浅析B737—300机型增压系统

西南公司目前在飞的B737—300型飞机一共还有6架,飞机比较老旧,其增压系统全是CPCS(座舱压力控制系统)的飞机。从去年的故障反映来看,增压故障占到总故障的20%,为了在面对故障时我们有更好的处置和决断,我们有必要对本公司B737—300型飞机CPCS增压系统进行研讨。

水泥车用B_2-300柴油机的技术改造

针对ACF－700B／T815和AC-400C／T815水泥车用B2—300柴油机存在功率显著下降，柴油和机油消耗过多，性能指标落后，故障频繁等问题，对该型柴油机的活塞组、燃油供给系统和配气机构等做了技术改造。通过1年的施工作业，证明改造的B2—300柴油机已恢复原功率，部分性能指标有所提高，柴油机工作转速由原来的1150r／min提高到1500r／min，满足油田施工工艺技术要求。与改造前相比，每台柴油机节约柴油4．63L／h，机油1．01L／h。改造后的3台柴油机在1999年共运转2024h，节约柴油9371．12L，机油2044．24L，折合节约油料资金3万多元。每台水泥车的月平均维护保养费由2992．53元降至1309．43元。

关于B737-300飞机F/D飞偏及消失的故障分析

B737-300飞机的飞行指引F/D,是自动驾驶接通情况下用于机组监控飞机有无按照预定轨迹飞行,以及非自动驾驶情况下为机组提供操纵指引显示的重要系统,它是FCC(飞行控制计算机)的一项重要功能。本文通过对FCC系统工作原理的描述,并进一步将抽象的理论,即自动控制原理的负反馈理论结合到排故分析中去,最终通过故障机理清除了故障。