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稳定过表达幼虫巨大致死基因2(LLGL2)的食管鳞癌细胞系的建立
1
作者
胡琼
谢富安
+1 位作者
洪笑迁
刘宽灿
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期342-346,共5页
目的构建人幼虫巨大致死基因2(LLGL2)慢病毒表达载体,并建立稳定表达的人食管鳞癌KYSE450细胞系和TE-1细胞系。方法 PCR扩增人LLGL2全长基因序列,连接插入至pCDH-CMV-IRES-GFP-EF1-Puro慢病毒载体中,并对重组质粒进行双酶切及测序验证...
目的构建人幼虫巨大致死基因2(LLGL2)慢病毒表达载体,并建立稳定表达的人食管鳞癌KYSE450细胞系和TE-1细胞系。方法 PCR扩增人LLGL2全长基因序列,连接插入至pCDH-CMV-IRES-GFP-EF1-Puro慢病毒载体中,并对重组质粒进行双酶切及测序验证。将重组质粒pCDH-CMV-LLGL2-IRES-GFP-EF1-Puro和PHR、水疱性口炎病毒G蛋白(VSVG)共转染HEK293T细胞进行病毒包装,利用该病毒液感染KYSE450细胞和TE-1细胞。经嘌呤霉素筛选建立LLGL2稳定过表达的KYSE450细胞系和TE-1细胞系,用Western blot法检测LLGL2的表达情况。结果双酶切和测序分析,成功构建pCDH-CMVLLGL2-IRES-GFP-EF1-Puro慢病毒表达载体质粒。Western blot法检测结果显示,与对照组相比,感染病毒液的细胞LLGL2蛋白水平明显增高。结论成功建立了稳定过表达LLGL2基因的KYSE450细胞系和TE-1细胞系。
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关键词
LLGL2
慢病毒载体
KYSE450
细胞系
te-1细胞系
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题名
稳定过表达幼虫巨大致死基因2(LLGL2)的食管鳞癌细胞系的建立
1
作者
胡琼
谢富安
洪笑迁
刘宽灿
机构
厦门大学附属东方医院
南京军区福州总医院全军临床检验医学研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期342-346,共5页
基金
国家自然科学基金(81302068)
文摘
目的构建人幼虫巨大致死基因2(LLGL2)慢病毒表达载体,并建立稳定表达的人食管鳞癌KYSE450细胞系和TE-1细胞系。方法 PCR扩增人LLGL2全长基因序列,连接插入至pCDH-CMV-IRES-GFP-EF1-Puro慢病毒载体中,并对重组质粒进行双酶切及测序验证。将重组质粒pCDH-CMV-LLGL2-IRES-GFP-EF1-Puro和PHR、水疱性口炎病毒G蛋白(VSVG)共转染HEK293T细胞进行病毒包装,利用该病毒液感染KYSE450细胞和TE-1细胞。经嘌呤霉素筛选建立LLGL2稳定过表达的KYSE450细胞系和TE-1细胞系,用Western blot法检测LLGL2的表达情况。结果双酶切和测序分析,成功构建pCDH-CMVLLGL2-IRES-GFP-EF1-Puro慢病毒表达载体质粒。Western blot法检测结果显示,与对照组相比,感染病毒液的细胞LLGL2蛋白水平明显增高。结论成功建立了稳定过表达LLGL2基因的KYSE450细胞系和TE-1细胞系。
关键词
LLGL2
慢病毒载体
KYSE450
细胞系
te-1细胞系
Keywords
LLGL2
lentiviral expression vector
KYSE450 cells
te-
1
cells
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
Q25 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
稳定过表达幼虫巨大致死基因2(LLGL2)的食管鳞癌细胞系的建立
胡琼
谢富安
洪笑迁
刘宽灿
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
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