lncRNA01296在食管癌组织中的表达及其对食管癌TE-2细胞增殖和迁移的影响

目的:探究lncRNA01296在食管癌组织中的表达及其对食管癌TE-2细胞增殖和迁移的影响。方法:收集2017年1月至2018年9月承德医学院附属医院肿瘤科收治的36例食管癌组织及相应的癌旁组织,并培养人正常食管上皮细胞(HEEC)及人食管癌细胞系EC A109、TE-1及TE-2。用qPCR检测癌组织及EC A109、TE-1及TE-2细胞中lncRN A01296、小核核糖核蛋白A(SNRPA)及神经生长因子(NGF)mRNA的表达水平。重组慢病毒干扰载体转染食管癌细胞系及相应对照细胞系,分别分为干扰1组、干扰2组及对照组,WB实验检测转染后细胞SNRPA及NGF蛋白的表达水平,MTS实验检测转染后TE-2细胞的增殖能力,Transwell实验检测TE-2细胞侵袭和迁移能力。结果:lncRNA01296、SNRPA及NGF mRNA在食管癌组织及细胞系中呈高表达(均P<0.01),且lncRNA01296、SNRPA及NGF mRNA在低分化的TE-2细胞中表达高于其他癌细胞(均P<0.05)。干扰1组和干扰2组lncRNA01296、NGF mRNA表达水平明显低于对照组(均P<0.01),而SNRPA mRNA表达水平与对照组无明显差异(P>0.05);干扰1组和干扰2组SNRPA及NGF蛋白表达水平明显低于对照组(均P<0.01)。敲减48、72h后,干扰1组及干扰2组TE-2细胞相对增殖能力明显低于对照组(P<0.05或P<0.01);对照组、干扰1组及干扰2组侵袭细胞数分别为(72.0±6.3)、(36.6±4.3)及(33.9±3.7)个,迁移细胞数分别为(85.2±9.9)、(47.5±8.1)及(43.8±6.5)个,干扰1组及干扰2组侵袭及迁移细胞数显著低于对照组(均P<0.01);结论:lncRNA01296可通过上调SNRPA表达促进NGF介导的食管癌细胞的增殖和迁移,为临床食管癌诊断和治疗提供新的靶点。

IQGAP1在食管鳞状细胞癌中的表达及其对TE-2细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨具有IQ结构域的GTP激酶活化蛋白1(Ras GTPase-activating-like protein, IQGAP1)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织与细胞中的表达及其对TE-2细胞增殖及侵袭能力的影响。方法:收集2015年1月至2016年12月郑州大学附属肿瘤医院125例ESCC手术切除的癌及癌旁组织标本,以及ESCC细胞系TE-2、TE-3、ECA109和正常食管上皮细胞株Het-1A。用免疫组化染色法检测癌组织中IQGAP1的表达,分析其表达水平与临床病理特征的关系;用qPCR和Western blotting检测ESCC细胞中IQGAP1 mRNA和蛋白的表达。用si-IQGAP1(阳性转染组)、si-CTRL(阴性对照组)质粒转染TE-2细胞,用MTT法、Transwell小室法和Western blotting分别检测沉默IQGAP1对TE-2细胞增殖、侵袭能力以及上皮钙黏蛋白和神经钙黏蛋白表达的影响。结果:IQGAP1在ESCC组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05),其高表达与肿瘤分期和分级密切相关(均P<0.05);IQGAP1 m RNA和蛋白在TE-2、TE-3、ECA109细胞中表达水平显著高于Het-1A细胞(均P<0.05)。沉默IQGAP1后,与阴性对照组和空白组比较,阳性转染组TE-2细胞中IQGAP1 mRNA及蛋白的表达水平明显下降(均P<0.05);细胞的增殖和侵袭能力显著降低(均P<0.05),上皮钙黏蛋白表达水平升高(P<0.05),神经钙黏蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论:IQGAP1在ESCC组织中高表达,敲减IQGAP1可抑制ESCC细胞的增殖和侵袭能力,其在ESCC的发生发展过程中起重要的作用。

富脯氨酸蛋白11在食管癌组织中的表达及其对TE-2细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨富脯氨酸蛋白11(PRR11)在食管癌组织中的表达及其在体外对人食管癌TE-2细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:选取2016年10月至2018年10月郑州大学第二附属医院胸外科经病理确诊为食管癌患者80例,收集其手术切除的食管癌组织及相应的癌旁组织标本。用qPCR检测食管癌组织或细胞系中PRR11 mRNA的表达水平,Log-rank Test法分析食管癌组织中PRR11 mRNA的表达与患者一般资料、组织学分级、淋巴结转移、浸润深度及TNM分期的关系,Kaplan-Meier曲线分析法分析PRR11 mRNA与食管癌患者预后的关系。以慢病毒shRNA表达载体感染食管癌TE-2细胞,构建敲低PRR11的细胞系及相应的对照细胞系作为本研究的shPRR11#1、shPRR11#2及对照组,qPCR及WB实验分别验证细胞株中PRR11 mRNA及蛋白的表达水平,MTT实验检测感染后细胞的增殖能力,Transwell实验检测其侵袭和迁移能力。结果:PRR11 mRNA在食管癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05),PRR11 mRNA的过表达与食管癌的组织学分级、淋巴结转移、浸润深度及TNM分期均显著相关(均P<0.05),PRR11高表达与食管癌患者预后不良显著相关(P<0.05);shPRR11#1、shPRR11#2组细胞中PRR11 mRNA及蛋白表达显著低于对照组细胞(P<0.05或P<0.01)。shPRR11#1、shPRR11#2组细胞的增殖能力低于对照组(P<0.05或P<0.01),Transwell侵袭及迁移实验结果显示,shPRR11#1、shPRR11#2组平均每个视野内细胞数均显著低于对照组(P<0.01)。结论:PRR11高表达于食管癌组织中,与食管癌的发生、进展及患者预后密切相关;体外实验也证明了敲低PRR11表达可以抑制食管癌的增殖、侵袭和迁移能力,是潜在的食管癌靶标。

环氧化酶-2选择性抑制剂抑制人食管癌细胞的生长及其诱导凋亡

目的:探讨NS-398对食管癌细胞的生物学效应及可能的作用机制.方法:常规方法培养食管癌Eca-109和TE-13细胞,以不同浓度NS-398(5,10,20,40,80μmol/L)处理24,48,72h.采用四甲基唑蓝法(MTT)检测NS-398对Eca-109和TE-13细胞生长的抑制作用;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡及COX-2,Bcl-2,Bax蛋白的表达;TUNEL法检测2种细胞凋亡情况;用放射免疫分析(RIA)检测培养液上清中前列腺素E2(PGE2)含量.结果:NS-398可抑制2种细胞的生长,并随药物浓度的增高及作用时间的延长抑制率逐渐增高,并使2种细胞产生的PGE2明显降低.NS-398使2种细胞G0/G1期细胞显著增多,S期细胞显著减少(Eca-109:F=22.39,P<0.01;TE-13:F=46.99,P<0.01),并引起了明显的细胞凋亡.NS-398使2种细胞COX-2和Bcl-2表达显著减少,而Bax表达显著增高.COX-2和Bcl-2的表达呈显著正相关(Eca-109:r=0.925,P<0.01;TE-13:r=0.925,P<0.01),COX-2和Bax表达呈显著负相关(Eca-109:r=-0.937,P<0.01;TE-13:r=-0.703,P<0.01)、Bax和bcl-2表达呈显著负相关(Eca-109:r=-0.926,P<0.01;TE-13:r=-0.753,P<0.01).结论:NS-398可抑制食管癌细胞的增殖并可诱导其凋亡,应用COX-2选择性抑制剂对食管癌进行化学预防或辅助治疗具有可能性.

CO_(2)激光联合派特灵、卡介菌多糖核酸治疗尖锐湿疣疗效及对T细胞亚群、生活质量的影响

目的探讨CO_(2)激光联合派特灵、卡介菌多糖核酸治疗尖锐湿疣的疗效及对患者T细胞亚群、生活质量的影响。方法选取2020年1月—2021年6月邯郸市中心医院收治的尖锐湿疣患者86例,随机分为研究组与对照组,每组43例。对照组应用CO_(2)激光及卡介菌多糖核酸治疗,研究组在对照组治疗基础上联合派特灵治疗,2组均以3个月为1个疗程。比较2组治疗效果以及CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、白细胞介素-17(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)水平及生活质量。结果研究组的治疗总有效率和复发率分别为95.35%(41/43)和11.63%(5/43),对照组分别为79.07%(34/43)和39.53%(17/43),2组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。治疗后2组患者的CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IFN-γ均显著升高(P均<0.05),CD8^(+)、IL-17均显著降低(P均<0.05);研究组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IFN-γ均显著高于对照组(P均<0.05),CD8^(+)、IL-17均显著低于对照组(P均<0.05)。治疗后,2组躯体功能、心理功能、物质生活状态及社会功能评分均显著升高(P均<0.05),且研究组各项评分均显著高于对照组(P均<0.05)。结论CO_(2)激光联合派特灵、卡介菌多糖核酸治疗尖锐湿疣的疗效更好,可明显改善患者生活质量,机制可能与调节炎性细胞因子水平,增强机体免疫功能有关。

2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖对人食管癌细胞的抗增殖研究

目的探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)对人食管癌细胞Eca-109和TE-1的增殖及其细胞周期的影响。方法采用体外细胞培养,通过MTT比色分析法观察不同浓度COPADG对Eca-109及TE-1细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测药物对细胞周期的影响;透射电镜下观察细胞的形态学变化。结果COPADG能有效的抑制人食管癌细胞Eca-109及TE-1的增殖,且存在时间及剂量依赖性(P<0.01);不同浓度的COPADG作用48 h之后,流式细胞仪检测均显示G0/G1期细胞比例增加(P<0.01),而S期细胞比例减少(P<0.01),在Eca-109细胞中出现了典型的凋亡峰;电镜下可观察到凋亡的典型形态学变化。结论COPADG能有效抑制人食管癌细胞Eca-109及TE-1的增殖,改变其细胞周期分布,导致明显的G0/G1期阻滞,并在一定浓度下诱导肿瘤细胞凋亡。

纳米细菌在肾结石形成过程中的作用研究

目的探究纳米细菌(NB)损伤人肾小管上皮细胞HK-2并导致晶体滞留的机制。方法应用肾结石患者尿液培养的NB,实验分为5组:对照组(胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、NB组(NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、COM组(一水草酸钙,COM悬液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、nHAP组(纳米级羟基磷灰石,nHAP、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)和四环素干扰组(TET+NB,四环素、NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)。将HK-2细胞分别与各组作用物共培养6、12、24 h后,用光学显微镜观察HK-2细胞的形态学变化;超声粉碎细胞后检测Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)含量。结果HE结果可见,nHAP组和四环素干扰组中HK-2细胞的损伤程度明显低于NB组(P<0.05)。共同培养12、24 h后,NB组和COM组Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均低于对照组,H_(2)O_(2)含量均高于对照组(P<0.05),nHAP组Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均低于对照组(P<0.05),四环素干扰组Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均高于NB组(P<0.05)。共同培养6、12、24 h后,NB组和COM组MDA含量均高于对照组(P<0.05),四环素干扰组MDA含量均低于NB组(P<0.05);COM组LDH含量均高于对照组(P<0.05),nHAP组、四环素干扰组LDH含量均低于COM组(P<0.05)。结论HK-2细胞损伤的原因可能是NB通过诱导脂质过氧化反应造成的,NB作用时间越长,损伤程度越重。四环素在一定程度上可以阻止NB对HK-2细胞的损伤。