宫颈尖锐湿疣中hTERC基因扩增和CD105表达的意义

目的:探讨h TERC基因扩增和CD105在宫颈尖锐湿疣(candyloma acuminatum,CA)中的表达及其临床意义。方法:分别采用免疫荧光原位杂交(FISH)和免疫组化方法检测宫颈CA组织中h TERC基因扩增和CD105的表达。67例宫颈CA中单纯性CA 31例,CA-CINⅠ级19例,CA-CINⅡ级11例,CA-CINⅢ级6例;宫颈癌35例;正常宫颈黏膜24例作为对照。结果:宫颈正常黏膜、宫颈CA和宫颈癌中h TERC基因扩增率分别为0.0%、25.4%和80.0%,差异有统计学意义(P<0.01);CD105标记的微血管密度(MVD)亦存在明显差异(P<0.01)。宫颈CA中,h TERC基因扩增率和MVD呈显著正相关(P<0.05),均随CIN级别的升高而增加,其中CA-CINⅠ级与CA-CINⅡ级之间差异有统计学意义(P<0.01);两者表达在复发组均显著高于未复发组(P<0.05)。结论:h TERC基因扩增和CD105表达在宫颈CA复发并向高级别CIN转化过程中扮演着重要角色,对宫颈CA患者检测h TERC基因扩增和CD105表达有助于临床筛查高危CA患者。

荧光原位杂交技术检测宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中TERC基因的扩增及临床意义

目的:应用荧光原位杂交(FISH)技术检测宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌中TERC基因的扩增,探讨其在宫颈病变筛查中的意义。方法:筛选门诊就诊宫颈疾病患者宫颈脱落细胞标本120例,其中液基细胞学检查正常者20例,病理学检查CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌各25例。采用双色间期FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因扩增,以正常标本的检测结果建立阈值。结果:①CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌中每例的异常细胞百分率均大于阈值(P<0.05),异常细胞百分率随病理学分级病变严重程度增高而增高(P<0.01)。②2∶3、2∶4、2∶5和4∶4以上类型在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌所占百分率比较,差异有高度统计学意义(均P<0.01),其中宫颈癌与CINⅠ比较,2∶3类型所占比例明显下降(P<0.001),2∶4、2∶5和4∶4以上类型所占比例明显升高(P<0.001)。③不同细胞学分级中,异常细胞百分率随其病变严重程度增高而增高(P<0.01),2∶3、2∶5和4∶4以上类型在ASCUS、LSIL和HSIL中的百分率差异有高度统计学意义(均P<0.01),其中HSIL与ASCUS比较,2∶3类型所占比例明显下降(P<0.01),2∶5和4∶4类型所占比例明显升高(P<0.01)。④在低级别及高级别CIN中,细胞学LSIL及HSIL检出率分别为10例(40.00%,10/25)及31例(62.00%,31/50),FISH技术检测出低级别与高级别CIN的敏感度均明显高于细胞学检查(P<0.05)。结论:CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌均有TERC基因扩增,其拷贝数随病理学及细胞学分级严重程度增加而增加。应用FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因扩增对宫颈病变筛查及对病变进展预测具有一定价值。

FISH技术检测宫颈组织TERC基因扩增

目的应用荧光原位杂交技术(FISH)检测子宫颈病变组织中人端粒酶RNA(TERC)基因异常扩增的临床意义。方法应用双色荧光原位杂交技术(FISH)检测195例宫颈组织TERC基因的异常扩增。结果①195例各类宫颈病变中,慢性宫颈炎33例,ClN134例,CIN2/3(包括原位癌)37例,宫颈鳞状细胞癌30例,宫颈腺癌61例,用FISH检测TERC基因的阳性表达率分别是3.03%(1/33)、29.41%(10/34)、72.97%(27/37)、100%(30/30)、91.80%(56/61),子宫颈鳞癌与腺癌TERC基因的表达较宫颈上皮内瘤变各组差异有统计学意义(P<0.05)。TERC基因的扩增阳性率随着宫颈病变程度增加呈逐渐上升趋势,且TERC扩增在子宫颈鳞癌与腺癌患者中无明显差异性;②TERC基因异常扩增与高危型HPV感染呈正相关。结论应用FISH技术检测TERC基因的异常扩增可以作为组织学诊断困难的病变确诊、病变预测及治疗后风险评估的手段。

TERC基因在宫颈肿瘤中的表达及意义

目的探讨宫颈肿瘤脱落细胞中TERC基因扩增与病情进展的相关性。方法采用荧光原位杂交技术检测102份宫颈肿瘤脱落细胞中TERC基因扩增情况,以正常宫颈脱落细胞为对照组。结果 CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈浸润癌TERC阳性率分别为25.0%、63.6%、69.2%、95.5%,均显著高于对照组;随病情进展,阳性率和扩增倍数逐渐升高,P<0.01。结论 TERC基因扩增与宫颈肿瘤密切相关,可促进宫颈癌的发生及发展。

FISH技术检测TERC基因在子宫颈上皮内瘤变1级与2级鉴别诊断中的实用价值

目的采用FISH技术检测TERC基因在子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)不能明确1级或2级(CIN1/2)病变组织中的扩增,探讨其在CIN分级中的临床病理实用意义。方法选取子宫颈组织标本42例,其中正常子宫颈鳞状上皮20例,CIN1/2级22例(其中初步诊断1级8例,2级14例)。采用FISH技术检测石蜡包埋组织中TERC基因的扩增情况。结果正常子宫颈鳞状上皮中TERC基因无扩增,CIN1/2级组织中TERC基因的扩增率为22.7%(5/22),77.3%(17/22)的TERC基因无扩增;其中初步诊断1级8例,1例TERC基因扩增;初步诊断2级14例,4例TERC基因扩增,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在石蜡包埋组织切片难以确定CIN1/2级时,应用FISH技术进行TERC基因检测,TERC基因扩增者可考虑为CIN2级,建议临床积极处理;无扩增者,考虑为CIN1级,可保守处理;FISH技术具有临床病理实用价值。

宫颈脱落细胞不同制片方法对FISH检测TERC基因实验结果的影响

目的探讨利用双色间期荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization，FISH）检测人宫颈脱落细胞端粒酶（TERC）基因不同制片的最佳方法。方法采集门诊就诊的114例患者的宫颈脱落细胞，分另q采用新鲜细胞直接涂片（45例）、液基薄层细胞学（TCT）剩余液体直接制片（37例）和TCT低渗制片（32例）三种取材制片方法，应用双色间期FISH法检测宫颈脱落细胞的TERC基因表达，对比取材刺片的最佳方法。结果在直接涂片法、TCT制片法和TCT低渗法三种制片过程中，TERC基因的杂交成功率分别是55．1％，34．7％，81．3％，其中TCT低渗组杂交成功率明显高于其他两组，差异有统计学显著性意义（P〈0．05）。直接涂片法、TCT制片法、TCT低渗制片法的平均裸核细胞比例分别为24％，15％，62％，TCT低渗法高于其他两种方法，与其他两组比较差异有统计学显著性意义（P〈0．05）。三种制片方法的玻片背景清晰度比例分别为33．3％，35．2％和68．8％。结论应用双色间期FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因，以TCT低渗制片法简便快速，杂交成功率最高。

FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因

目的利用荧光原位杂交技术(FISH)检测宫颈病变患者宫颈脱落细胞中TERC基因,评价该技术诊断价值。方法选择2007年12月至2009年4月宫颈上皮内瘤变(CIN)患者91例和健康对照者20例,利用FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因,计数不平衡扩增细胞,比较其在各级宫颈病变中的表达差异。结果对照组、CINⅠ/湿疣、CINⅡ、CINⅢ及以上患者的宫颈脱落细胞中,每100个细胞中TERC基因不平衡扩增细胞分别为(0.1±0.3)个、(0.6±1.3)个、(1.7±2.1)个、(2.5±4.4)个。CINⅡ及以上病变组TERC基因不平衡扩增与对照组和CINⅠ/湿疣组有显著性差异(P=0.018,P=0.002)。结论随宫颈病变加重,TERC基因不平衡扩增细胞增加,FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因扩增可以辅助诊断宫颈癌前病变。

荧光原位杂交检测宫颈脱落细胞hTERC基因实验方法比较观察

目的:探讨荧光原位杂交技术检测端粒酶基因(hTERC)实验方法的最佳方案。方法:采集海医附院收治的140例患者的宫颈脱落细胞,分别应用液基取材刷、无菌棉签取材法;生理盐水低渗、TCT低渗、直接取液滴片、TCT直接低渗4种制片方法;水浴和直接消化法;甲酰胺法和共变性法,通过检测宫颈脱落细胞hTERC基因表达成功率,对比实验方法的最佳方案。结果:取材方法中液基取材刷与无菌棉签的细胞数量满意率分别为95.5%、14.3%,2种方法差异有统计学意义(P<0.05);生理盐水低渗、TCT低渗、直接取液滴片、TCT直接低渗4种方法杂交成功率分别是80.0%、84.8%、46.2%、82.1%,其中直接取液滴片与其他法差异有统计学意义(P<0.05),其他方法之间比较差异无统计学意义(P>0.05);2种消化法中水浴和直接法杂交成功率分别为88.9%、94.1%,差异无统计学意义(P>0.05),杂信号比例分别为16.7%、45.6%,差异有统计学意义(P<0.05);2种变性法中甲酰胺法和共变性法杂交成功率分别为72.3%、96.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:荧光原位杂交技术检测宫颈脱落细胞hTERC基因时,以液基取材刷取材细胞数量多,TCT低渗方法制片效果最好,水浴法和共变性杂交成功率最高。

TERC基因在肺鳞状细胞癌中的表达

目的:探讨端粒酶RNA(TERC)基因在肺鳞状细胞癌组织中的表达。方法:RT-PCR法检测TERC基因水平的表达情况。结果:肺鳞状细胞癌组织中TERC基因的表达高于癌旁正常组织。结论:TERC基因在肺鳞状细胞癌组织中表达上调,表明其可能参与了肺癌的发生发展,为恶性肿瘤的早期诊断和治疗提供理论支持。

TERC基因、HPVL1蛋白在宫颈癌筛查中的应用研究

目的探讨染色体端粒酶RNA基因(TERC)、人乳头瘤病毒蛋白L1(HPVL1)在宫颈癌筛查中的应用研究。方法选择2015年9月—2017年9月在我院妇科门诊体检有性生活的女性1 280例,进行TCT、HPV、TERC、HPVL1检测,有任一阳性结果者均进行阴道镜下活检及病理诊断,评价4种筛查的敏感度、特异度及约登指数,分析不同筛查方法诊断价值。结果联合筛查中TCT+HPV+TERC或HPVL1的约登指数最高,真实性最好。随着宫颈恶变的严重程度增加,TCT、HPV阳性表达率上升,各组间TCT、HPV阳性表达率比较无差异(P>0.05);TERC基因检测阳性率上升,HPVL1蛋白阳性表达下降,各组间TERC、HPVL1阳性表达率分别比较有差异(P<0.05)。结论 HPVL1能较好地预测宫颈癌变的情况;TERC能够诊断宫颈癌的病变程度及预后情况。TCT+HPV联合TERC或HPVL1能更准确地预测宫颈癌发生发展情况。

FISH技术检测TERC基因在CIN等级诊断中的应用

目的:研究FISH技术检测TERC基因在子宫颈上皮内瘤变1级与2级鉴别诊断中的价值。方法:选取50例宫颈组织标本为研究对象,均采用FISH技术检测,分析TERC基因的扩增情况。结果:在正常的子宫颈鳞状上皮中,TERC基因没有扩增,20例初步诊断为2级的患者中,有8例TERC基因扩增,10例初步诊断为1级的患者中,有1例TERC基因扩增,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:采用石蜡包埋组织切片难以对CIN1/2级进行鉴别时,要采用FISH技术检测,如果TERC基因扩增,则判定为CIN2级;TERC基因不扩增,则判定为CIN1级。

FISH技术检测宫颈癌和宫颈上皮内瘤样病变的TERC基因

目的:检测宫颈癌和宫颈上皮内瘤样病变中的3号染色体和TERC基因的扩增情况。方法:采用双色荧光原位杂交技术(FISH)以hTERC/CSP3 DNA探针检测64例宫颈癌及36例宫颈上皮内瘤样病变脱落细胞中的TERC基因的表达率。结果:CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌TERC基因阳性表达率分别为16.67%(2/12)、50.00%(4/8)、81.25%(13/16)、95.31%(61/64),正常组、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌的TERC基因阳性量分别为2.3±1.4,3.8±2.9,7.4±2.4,17.8±16.9,47.6±26.2,阳性率随着病变程度的加重而增高。宫颈癌病理检查与荧光原位杂交法对TERC基因阳性情况表达比较,无统计学差异。正常组与CINⅠ、CINⅡ,CINⅠ与CINⅡ基因阳性表达量比较均无统计学意义(P>0.05);而正常组与CINⅢ,CIN I与CINⅢ比较有明显统计学差异(P<0.001),CINⅡ与CINⅢ比较有统计学差异(P<0.05)。结论:FISH技术能定量检测TERC基因并可鉴别细胞的癌变,可作为宫颈癌的诊断手段之一。检测TERC扩增可以帮助确定低分化病变的高风险和降低细胞学检查的假阴性。

h-TERC基因及c-MYC基因的表达及其与HPV感染宫颈病变的相关性

目的 研究h-TERC及c-MYC的表达及其与HPV感染、宫颈病变的相关性,借此寻找更为有效且实用的宫颈癌筛查方法。方法 选取2010年8月至2011年12月在上海交通大学医学院附属仁济医院妇科门诊就诊者共1000例,分别行TCT检测、HPV-DNA检测(SPR法)、h-TERC和c-MYC基因检测(FISH法),对任一结果阳性者行阴道镜及宫颈病理活检,以病理结果为诊断金标准。结果 1000例中TCT异常占10.6%;HPV异常占11.2%;h-TERC基因异常占6.4%;c-MYC基因异常占5.6%。213例按要求行阴道镜及宫颈活检,结果提示宫颈慢性炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌发生率分别为:74.6%、14.6%、6.6%、3.3%和0.9%。相应的h-TERC阳性率分别为18.2%、58.1%、64.3%、85.7%、100.0%;c-MYC阳性率分别为20.1%、35.5%、50.0%、57.1%、100.0%;HPV阳性率分别为45.3%、67.7%、78.6%、85.7%、100.0%。随着病理学等级的上升,HPV感染者中h-TERC和c-MYC的阳性率也升高。结论 h-TERC、c-MYC基因扩增与宫颈细胞组织学异常及HPV感染密切相关,可能是较好的宫颈癌筛查指标。

TERC基因对宫颈高级别病变(≥CINⅡ)诊断价值的Meta分析

目的系统评价TERC基因对宫颈高级别病变(≥CINⅡ)的诊断价值。方法计算机检索PubMed、EMbase、e Cochrane Library等数据库,检索时间截至2012年3月31日。按照纳入和排除标准筛选文献、提取资料并根据诊断性试验准确性质量评价工具(QUADAS)评价质量后,采用Meta-Disc 1.4软件进行Meta分析。结果最终纳入12篇文献,共7 894例患者。Meta分析结果显示:TERC基因诊断宫颈高级别病变的合并灵敏度、特异度和诊断比值比分别为0.81[95%CI(0.80,0.82)]、0.83[95%CI(0.82,0.84)]和17.37[95%CI(8.77,34.41)]。结论 TERC基因单独检测宫颈高级别病变的诊断价值中等,可作为临床诊断的一种辅助方法。

如何利用TERC基因做好宫颈癌临床筛查分流及随访工作

宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,占恶性肿瘤死亡原因的3%[1]。研究证实人染色体端粒酶（human telomerase RNA component,h TERC）基因与宫颈癌的发生和进展有着密切的关系。

用石蜡切片检测端粒酶RNA基因对诊断与鉴别子宫颈上皮内瘤变1级与2级的意义

目的探讨在石蜡切片上用FISH技术检测TERC基因对诊断鉴别诊断CIN 1级与CIN 2级的实用意义。方法选取手术切除及活检的子宫颈组织,有效样本137例,其中正常宫颈鳞状上皮组20例,CIN 1级组46例,CIN 2级组49例,HE染色难以确定CIN 1/CIN 2级组22例。采用FISH技术在石蜡包埋组织上检测TERC基因拷贝数增加的情况。结果正常宫颈鳞状上皮中无TERC基因拷贝数的增加,CIN 1级组中TERC基因扩增率15.2%(7/46),CIN 2级组中TERC基因扩增率47%(23/49),并且出现大量的三倍体、四倍体及非整倍体扩增,2组之间差异有统计学意义(P<0.05)。CIN 1/CIN 2级组中TERC基因扩增率27.8%(5/22)。组间两两比较:正常宫颈鳞状上皮组与CIN 1级组组间比较差异无统计学意义(P>0.05);正常宫颈鳞状上皮组与CIN 2级组组间比较差异有统计学意义(P<0.05);CIN 1级组与CIN 2级组组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。TERC基因扩增在鉴别CIN 1级与CIN 2级中的敏感度为46.9%,特异度为84.7%,准确度为65.0%,阳性预测值为76.6%,阴性预测值为60%。结论当组织学上鉴别CIN 1级与CIN 2级有困难时,在石蜡包埋组织切片上应用FISH技术检测TERC基因,发现拷贝数增加可有助于CIN 2级的确诊,也预测其有恶性进展的风险;反而无TERC基因异常,可确认为CIN1级,无恶性进展风险。TERC基因检测具有实用价值及应用前景。

科学家鉴定出与人类老化有关的基因变异

据美国BIOCOMPARE科技新闻网（2010-03-05）报道,英国莱斯特大学（the University of Leicester）,伦敦帝国大学（King＇sCollege London）以及荷兰Groningen大学的研究人员,首次在科学期刊中宣布他们鉴定出与人类老化具有决定性关系的基因变异,研究人员总共分析了超过50万个基因变异,最后定位出这些与人类生物性老化（biological aging）有关的基因变异位于TERC基因的附近,研究成果发表于近期的《自然遗传学》（Nature Genetics）期刊,由Nilesh Samani教授主导研究进行。

应用双色间期FISH技术中宫颈脱落细胞取材及制片方法的探讨

目的在双色间期荧光原位杂交技术(FISH)中探讨采集宫颈脱落细胞样本及制片的最佳方法。方法采集在北京大学人民医院门诊就诊174例患者的宫颈脱落细胞,应用新鲜细胞直接涂片(60例)、生理盐水制片(31例),TCT剩余液体直接制片(37例)、TCT盐水制片(30例)和TCT低渗制片(16例)五种取材制片方法;并应用双色间期FISH法,检测宫颈脱落细胞的TERC基因表达率,对比取材制片的最佳方法。结果在直接涂片法、盐水制片法、TCT制片法、TCT盐水制片法和TCT低渗法五种制片过程中,TERC基因的杂交成功率分别是55.0%、61.3%、37.8%、53.3%和81.3%,其中TCT低渗法杂交成功率与TCT制片组比较,有显著差异(P<0.05),与其他方法比较,无明显差异(P>0.05);5种制片方法的玻片背景清晰比例分别为38.3%、54.8%、35.1%、60%和75%,各组之间有明显差异(P<0.05);5组的无/少信号比例分别为18.3%、16.1%、37.8%、23.3%和18.8%,其中新鲜制片的直接涂片法和盐水制片法与TCT直接制片法比较,有明显差异(P<0.05),与其他方法比较无差异(P>0.05)。结论在应用双色间期FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因时,以TCT低渗制片和新鲜细胞盐水制片操作方法简单快速,杂交成功率最高。

先天性角化不良研究新进展

先天性角化不良(DC)是一种罕见的遗传性皮肤病,其临床特征为皮肤色素沉着、甲营养不良、黏膜白斑和骨髓增生障碍。分子遗传学研究显示,本病存在遗传异质性,其遗传方式为X连锁隐性遗传、常染色体显性遗传和常染色体隐性遗传3种,目前发现前2种遗传类型的致病基因为DKC1和TERC。该病治疗比较棘手,目前尚无根治方法。

对宫颈上皮内瘤变1级的认识与管理

提高宫颈上皮内瘤变1级(CINⅠ)诊断的准确性并对其进行合理管理一直是研究的热点问题。本文从CINⅠ的病理诊断、病因学、病程进展及与生物学标记物的关系、管理策略四个方面进行论述。