Toll样受体2在人绒毛外滋养细胞和绒癌细胞中的表达及意义

目的通过体外实验研究Toll样受体2(TLR2)在人早孕绒毛外滋养细胞株TEV-1及绒癌细胞株BeWo中的表达,初步探讨TLR2在绒癌发生发展中的作用和意义。方法体外培养TEV-1及BeWo细胞株,RT-PCR检测其TLR2 mRNA表达水平;免疫细胞化学检测TLR2蛋白的定位和半定量表达。结果 (1)TEV-1及BeWo细胞均表达TLR2,且定位于细胞膜和细胞浆。(2)TLR2的mRNA及蛋白表达水平在BeWo细胞明显高于TEV-1细胞(P<0.05)。结论 BeWo细胞明显高表达的TLR2可能与绒癌的发生、发展、转移和免疫耐受有关。

白介素24在子痫前期胎盘的表达及与基质金属蛋白酶2关系的研究

目的:研究IL-24在子痫前期胎盘的表达及rhIL-24对TEV-1细胞MMP-2蛋白活性表达的影响,探讨二者与子痫前期发病机制的关系。方法:RT-PCR检测子痫前期及正常足月孕妇胎盘中IL-24 mRNA的表达;明胶酶谱检测0、10、50、100、500ng/mlrhIL-24作用后TEV-1细胞的MMP-2活性;Western blot检测不同浓度rhIL-24作用后TEV-1细胞的MMP-2蛋白表达。结果:子痫前期组胎盘组织中IL-24 mRNA表达显著高于正常足月组(P<0.05)。当rhIL-24浓度≥50ng/ml后,TEV-1细胞中MMP-2蛋白活性表达均明显降低(P<0.05),并呈一定的浓度依赖性。结论:IL-24异常升高,抑制了滋养细胞MMP-2的分泌及活性,使其侵袭力下降,从而在子痫前期发病中起一定作用。

肽聚糖通过TLR2诱导人绒毛外滋养细胞的凋亡及意义

目的初步研究肽聚糖通过Toll样受体2(TLR2)诱导人早孕绒毛外滋养细胞株TEV-1细胞的凋亡及其意义。方法免疫细胞化学检测TLR2蛋白在TEV-1细胞的定位表达,不同浓度肽聚糖刺激TEV-1细胞后AnnexinV/PI流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果①TEV-1细胞表达TLR2,且定位于细胞膜和细胞浆。②30μg/ml肽聚糖刺激TEV-1细胞24小时后与对照组比较,细胞凋亡率无明显增加(8.17±0.1%,P>0.05),而刺激时间延长至48h可诱导出明显增加的细胞凋亡(16.03±1.51%,P<0.01);大剂量组80μg/ml肽聚糖刺激TEV-1细胞24h、48h均可诱导明显增加的细胞凋亡(14.13±1.06%和51.67±1.56%,P<0.01)。结论人绒毛外滋养细胞株TEV-1表达TLR2,肽聚糖可通过TLR2诱导TEV-1细胞凋亡,且存在时间和剂量依赖性,提示宫内感染时G+菌可能通过TLR2介导胎盘滋养细胞凋亡来影响妊娠的结局。

二氯化钴化学缺氧对细胞滋养层细胞凋亡及侵润的影响

目的:研究二氯化钴(CoCl2)诱发化学缺氧对培养的细胞滋养层细胞凋亡及侵润的影响。方法:采用MTT和流式细胞术检测细胞滋养层细胞的增殖和凋亡,并运用Transwell体外侵润实验检测化学缺氧对细胞滋养层细胞侵润能力的影响。结果:CoCl2可抑制细胞滋养层细胞增殖,并促进其凋亡,以缺氧24h最为明显(P<0.05)。CoCl2诱导细胞滋养层细胞缺氧24h,对其侵润及运动有显著抑制作用(P<0.05)。结论:CoCl2诱导缺氧抑制细胞滋养层细胞增殖并促进其凋亡,同时也抑制了细胞滋养层细胞的侵润。

IL-24、pY397FAK在子痫前期胎盘中的表达

目的:检测IL-24、pY397FAK在子痫前期胎盘中的表达及人类重组蛋白IL-24(rhIL-24)对TEV-1细胞pY397FAK蛋白表达的影响,探讨它们在子痫前期发病中的关系。方法:免疫组化SP法检测子痫前期组及正常足月组孕妇胎盘中IL-24和pY397FAK的分布与表达;Western blot检测不同浓度rhIL-24作用后TEV-1细胞的pY397FAK蛋白表达。结果:与正常足月组相比,子痫前期组胎盘组织中IL-24表达强度显著升高(P<0.05),pY397FAK表达强度显著降低(P<0.05)。当rhIL-24≥50ng/ml后,TEV-1细胞中pY397FAK蛋白表达逐渐降低(P<0.05),并呈一定的浓度依赖性。结论:胎盘组织中IL-24的异常升高导致pY397FAK磷酸化蛋白的产生减少,滋养细胞侵蚀能力下降,从而参与了子痫前期的发生。