光谱法研究Zn^(2+)与TEVp之间的相互作用

为了探究金属离子对TEVp结构和功能的影响,促进TEVp在去除重组蛋白融合标签中的应用,采取荧光光谱、圆二色谱等光谱方法研究TEVp与Zn^(2+)之间的相互作用。紫外光谱及内源荧光实验结果表明,TEVp与Zn^(2+)的相互作用为静态淬灭机制。同步荧光光谱、三维荧光光谱以及圆二色谱实验结果表明,TEVp与Zn^(2+)的结合会引起蛋白构象发生改变,导致TEVp的β-折叠结构降低,α-螺旋结构增加,蛋白色氨酸残基微环境发生改变,造成疏水性增强、极性减弱。

经食管心室调搏终止顽固性阵发性室性心动过速

报道应用经食管心室调傅方法,终止经药物治疗无效的顽固性阵发性室性心动过速7例。食管电极导管插入40—46cm,平均44.3cm,刺激脉冲的脉宽为10ms,采用短阵超速、亚速或程控心室刺激均获成功。认为在顽固性阵发性室性心动过速的紧急处理中,经食管心室调搏亦是一种有效的急救措施。

钴离子对烟草蚀纹病毒蛋白酶结构的影响

烟草蚀纹病毒蛋白酶(Tobacco Etch Virus protease,TEVp)是一种高特异性、高保守的重要工程蛋白,其结构稳定性尤为重要;钴离子(Co^(2+))具有一定的生物毒性.为了解Co^(2+)对TEVp结构的影响,运用内源荧光方法和同步荧光方法探讨Co^(2+)对TEVp结构的调控机理.光谱显示Co^(2+)对TEVp内源荧光有明显的淬灭作用,导致TEVp分子中色氨酸和酪氨酸残基的疏水性增加.在300 K和311 K温度条件下,淬灭常数K_(sv)分别为4.161×10~2L/mol和2.129×10~2L/mol,结合平衡常数K_A分别为6.625×10~3L/mol和5.132×10~3L/mol,且动态荧光淬灭速率常数Kq远大于扩散碰撞淬灭速率常数的最大值2.0×10^(10)L mol^(-1)s^(-1),表明其淬灭机制属于静态淬灭.吉布斯自由能ΔG<0,焓值ΔH<0且熵值ΔS>0,表明Co^(2+)与TEVp的相互作用能够自发进行,且它们之间的主要作用力类型为静电作用力.本研究分析Co^(2+)对TEVp多种荧光光谱性质的影响和Co^(2+)对TEVp结构影响的作用机制,可为TEVp在生物学和生物工程等领域的有效利用奠定基础.