肺腺癌组织中前列腺素内过氧化物合酶2表达水平与表皮生长因子受体基因突变的相关性分析

目的 分析肺腺癌组织中前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)表达水平与表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的相关性。方法 选取57例肺腺癌患者为研究对象,收集肺腺癌组织及其相应癌旁组织。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测癌组织及癌旁组织中PTGS2 mRNA表达水平;采用免疫组织化学法分析PTGS2蛋白表达;采用RT-PCR法检测癌组织及癌旁组织EGFR基因突变情况。分析肺腺癌患者临床病理参数与PTGS2 mRNA水平、EGFR基因突变情况的关系。采用Spearman秩相关分析探讨肺腺癌患者EGFR基因突变情况与PTGS2 mRNA水平的相关性。结果 57例肺腺癌患者中,5例癌旁组织EGFR基因突变型患者,其对应癌组织也均发生突变,且为同一突变类型。26例(45.61%)癌组织EGFR基因突变型患者,未发现双重突变,其中19外显子突变17例(29.82%),均为缺失突变;21外显子突变9例(15.79%),均为L858R点突变。癌组织中PTGS2mRNA表达水平、PTGS2蛋白阳性率及EGFR基因突变型比例高于癌旁组织,EGFR基因野生型比例低于癌旁组织(P<0.01)。肺腺癌患者性别、TNM分期、吸烟与PTGS2 mRNA表达水平、EGFR基因突变情况有关(P<0.05或0.01)。EGFR基因突变型PTGS2 mRNA表达水平高于EGFR基因野生型(P<0.01)。肺腺癌患者EGFR基因突变与PTGS2 mRNA表达水平呈正相关(r=0.512,P<0.01)。结论 肺腺癌患者癌组织中PTGS2mRNA表达水平及PTGS2蛋白阳性率升高,且与EGFR基因突变关系密切,二者可能共同影响疾病进程。

生物钟相关基因CLOCK及褪黑素受体MT1和MT2基因与2型糖尿病患者肠道菌群及炎症因子相关性分析

目的:探讨生物钟基因CLOCK及褪黑素受体MT1和MT2基因与2型糖尿病(T2DM)患者肠道菌群及炎症因子的相关性。方法:选择T2DM患者80例为观察组,选择同期进行健康体检者80例为对照组。检测两组血清CLOCK、MT1和MT2基因水平,以及超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-18水平。检测两组粪便中肠杆菌、双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、双歧杆菌/肠杆菌丰度。分析观察组血清CLOCK、MT1和MT2基因水平与T2DM患者肠道菌群及炎症因子的相关性。结果:观察组血清CLOCK、MT1、MT2基因水平明显较对照组低(均P<0.05)。观察组肠杆菌水平明显较对照组高,双歧杆菌、乳杆菌、双歧杆菌/肠杆菌水平明显较对照组低(均P<0.05)。观察组hs-CRP、IL-6、TNF-α、IL-18水平明显较对照组高(均P<0.05)。观察组血清CLOCK、MT1、MT2基因水平与肠杆菌、hs-CRP、IL-6、TNF-α、IL-18水平呈负相关,与双歧杆菌、乳杆菌、双歧杆菌/肠杆菌水平呈正相关(均P<0.05)。结论:血清生物钟相关基因CLOCK、MT1和MT2基因与T2DM患者肠道菌群及炎症因子均有一定相关性,可作为潜在的诊断指标及治疗靶点。

Nrf2基因编辑小鼠模型的构建

目的:构建核因子-红细胞2相关因子2(Nuclear factor-erythroid 2 related factor 2,Nrf2)全身性敲除(Nrf2-KO)、心肌细胞特异性敲除(Nrf2-Flox)和心肌细胞过表达(Nrf2-CTG)3种基因编辑小鼠,为探究Nrf2在心血管代谢性疾病中的具体作用机制提供研究工具。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Nrf2-KO小鼠和Nrf2-Flox小鼠,利用转基因技术构建Nrf2-CTG小鼠。基因编辑小鼠7~10日龄时剪脚趾组织提取DNA,用PCR和琼脂糖凝胶电泳进行基因型判定并测序。结果:⑴Nrf2-KO F0代、F1代和F2代小鼠基因组扩展样本在目的条带处(约750 bp)均有清晰单一的阳性条带,野生型小鼠在目的条带处(约2931 bp)有阳性条带;采用Nrf2-wt-F1/Nrf2-wt-R1引物对F2代小鼠基因组野生型小鼠在目的条带处(约495 bp)有阳性条带,Nrf2-KO鼠无该目的条带。F0代小鼠基因组缺失碱基为Founder小鼠敲除的碱基;⑵Nrf2-Flox F0代、F1代小鼠基因组扩展样本在目的条带处(约150 bp)均有清晰单一的阳性条带。野生型小鼠无该目的条带;⑶Nrf2-CTG F0代、F1代鼠基因组扩展样本在目的条带处(约251 bp)均有清晰单一的阳性条带,野生型小鼠无该目的条带。结论:利用CRISPR/Cas9技术和转基因技术成功构建Nrf2-KO小鼠模型、Nrf2-Flox小鼠模型及Nrf2-CTG小鼠模型。

类胰岛素生长因子Ⅱ(IGF2)基因多态性与鸡体脂性状的相关研究

以肉鸡和3个地方品种(北京油鸡,石岐杂,白耳鸡)以及海兰蛋鸡为试验材料,用1对引物对类胰岛素生长因子Ⅱ(IGF2)基因的外显子2进行SNPs检测,探讨IGF2基因作为影响鸡脂肪性状候选基因的可能性。利用测序和单链构象多态(SSCP)的方法进行SNPs检测和基因型的分析。X2检验表明,139处点突变的基因型在各品种间差异极显著(P<0.01)。3种基因型与肉鸡屠体性状的最小二乘分析结果表明,BB基因型个体的腹脂重和腹脂率显著低于AB基因型的个体。初步推断IGF2基因可能是影响鸡脂肪性状的主效基因或与主效基因连锁,推测可以利用该位点对鸡的脂肪性状进行标记辅助选择。

抗氧化基因核因子E2相关因子2对百草枯中毒肺损伤小鼠的保护作用

目的通过体外构建携带抗氧化基因核因子E2相关因子2（Nrf2）的骨髓间充质干细胞（BMSC），观察Nrf2对百草枯所致肺损伤模型小鼠的保护作用。方法构建携带有Nrf2基因的过表达慢病毒并转染BMSCs，建立携带有抗氧化基因Nrf2的BMSCs体系。将120只清洁级Balb／c小鼠按随机数字表法分为正常对照组、P0染毒模型组、BMSCs治疗组、携带空载基因的BMSCs治疗组（BMSC—Cherry治疗组）、携带Nrf2基因的BMSCs治疗组（BMSC—Nrf2治疗组）5组，每组24只。腹腔注射PQ溶液25mg／kg复制小鼠PQ中毒肺损伤模型，正常对照组给予等体积生理盐水；BMSC治疗组、BMSC—Cherry治疗组、BMSC—Nrf2治疗组于制模后6h经球后注射相应的BMSCs0．3mL，每只1×106个。制模后处死小鼠取肺组织，用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测肺组织Nrf2蛋白表达；留取血液标本，用化学比色法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）等氧化应激指标，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症指标，用原位末端缺刻标记试验（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡情况。结果与正常对照组比较，制模后3d和21d，PQ染毒模型组、BMSC治疗组、BMSC—Cherry治疗组、BMSC—Nrf2治疗组的Nrf2蛋白表达均显著升高，且以BMSC—Nff2组21d升高最明显（灰度值：3．52±0．26比1．00±0．12，P〈0．05）。PQ染毒模型组血清MDA、IL-1β、TNF-α水平均较正常对照组明显升高，SOD、GSH均较正常对照组明显降低；用BMSC、BMSC—Cherry、BMSC—Nrf2干预后，随着时间延长，各组MDA、IL-1β和TNF-α水平均较PQ染毒模型组逐渐降低，SOD、GSH均较P0染毒模型组逐渐升高，以BMSC—Nrf2组制模后21d变化最显著（MDA（umol／L）：2．09±0．28比3．11±0．11，SOD（kU／L）：23．88±0．68比16．12±0．87，GSH（ixm01]L）：2．92±0．21比2．33±0．15，IL-1β（ng／L）：55．58±4．54比87．23±9．28，TNF-α（ng／L）：179．25±9．40比228．38±13．30，均P〈0．05J。与正常对照组比较，PQ染毒模型组TUNEL染色阳性细胞明显增多[（45．06±6．78）％比（3．11±0．99）％]；与PQ染毒模型组比较，BMSC治疗组、BMSC-Cherry治疗组、BMSC—Nrf2治疗组阳性细胞明显减少【（30．34±1．79）％、（26．25±4．97）％、（18．00±3．15）％比（45．06±6．78）％]，且以BMSC—Nrf2治疗组下降最明显（P〈0．05）。结论BMSCs及携带有抗氧化基因Nrf2的BMSCs均能有效减轻PQ所致肺损伤，且以BMSCs—Nrf2的作用更显著；其保护作用可能与拮抗体内氧化应激和炎症因子等有关。

肿瘤坏死因子受体2基因多态性与SLE易感性的相关性

为探讨肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)第六外显子基因多态性与系统性红斑狼疮(SLE)易感的相关性,采用病例对照研究的方法,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP)检测50例SLE患者和117例健康对照人群的TNFR2第六外显子的基因型和等位基因,SLE患者组TNFR2第六外显子基因型196R/R、196M/R和等位基因196R的频率明显比对照组高,经χ2检验,其差异具有统计学意义。(两组基因型之间:χ2=6.23P=0.044;两组等位基因之间:χ2=6.39P=0.011)。结果表明TNFR2第六外显子基因多态性与SLE的易感性相关。

降钙素基因相关肽对大鼠成骨细胞表达转录因子RUNX2的影响

目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对大鼠颅盖骨来源成骨细胞RUNX2因子表达水平的影响,进一步了解CGRP促进成骨的作用机制。方法:用酶消化法培养原代大鼠成骨细胞并鉴定;MTT法筛选促进成骨细胞增殖的有效浓度,将含有不同浓度CGRP的条件培养基加入大鼠成骨细胞培养体系中,药物作用48 h后,用半定量RT-PCR和Western blotting方法检测大鼠成骨细胞转录因子RUNX2在mRNA和蛋白水平的表达。结果:当CGRP浓度在10-8～10-6mol/L范围时,对成骨细胞增殖有明显促进作用,增殖率分别为71.9%,142.1%,321.0%,P<0.05;浓度为10-7和10-6mol/L的CGRP作用于成骨细胞48 h后,转录因子RUNX2在mRNA水平的表达量明显上调,分别增强(46.2±11.2)%和(58.6±14.0)%,P<0.05;转录因子RUNX2的蛋白表达变化趋势与其mRNA的表达变化趋势基本一致。结论:一定浓度的CGRP对大鼠成骨细胞转录因子RUNX2的表达有直接促进作用,RUNX2可能参与了CGRP刺激成骨细胞增殖反应的机制。

趋化因子CCR5、CCR2和SDF1基因多态性与HBV感染相关性初步研究

HBV引起的肝损伤和机体的免疫应答状态有关,由基因决定的免疫应答能力可以影响感染的持续性、临床症状和结局.

Runt相关基因2/核心结合因子a1在小鼠牙周组织发育中的免疫组化定位研究

目的探讨Runt相关基因2/核心结合因子a1(Runx2/Cbfa1)在小鼠牙周组织发育过程中的时空表达及意义。方法建立BALB/c小鼠牙周发育动物模型,采用免疫组化方法检测Runx2/Cbfa1在小鼠出生后各期牙周组织发育中的表达及特点。结果Runx2/Cbfa1在牙齿发育过程中的表达具有时空特异性,在牙根开始发育之前,仅在牙槽骨及成骨细胞中表达;当牙根开始发育即从第11天以后各期,在根部牙周膜细胞、成牙骨质细胞及成骨细胞中均呈阳性表达,但牙槽骨呈阴性表达。结论Runx2/Cbfa1在成牙骨质细胞及成骨细胞的分化及牙植骨的形成具有重要作用,可能在牙周组织的发育中发挥作用。

二亚硝基哌嗪对转基因小鼠TNF受体相关因子2和p16的表达

目的研究二亚硝基哌嗪(N,N′-dinitrosopi- perazine,DNP)对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖与TNF受体相关因子2(TNF receptor-associated Factor 2,TRAF2)、p16基因表达的影响及两者关系。方法HE染色法观察转基因小鼠组(TC)、转基因小鼠DNP诱导组(T1)和野生小鼠组(CC)、野生小鼠DNP诱导组(CI)鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖特征;免疫组织化学染色法检测小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织中TRAF2、p16基因的表达水平。结果TI、TC、CI和CC组小鼠鼻腔或鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为90%、10%、0和0。与TC、CI和CC组相比,TI组TRAF2基因表达水平显著增高(P<0.01),而p16基因表达水平显著降低(P<0.01);TRAF2和p16基因表达水平在TC和CC组之间的差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖活性增加,DNP可提高其增殖活性,而细胞增殖活性增加与TRAF2基因表达水平上调和p16基因表达水平下调密切相关。

子宫内膜腺癌组织中人类RUNT相关转录因子3与果蝇zeste基因增强子同源物2的表达

目的:检测子宫内膜腺癌组织中人类RUNT相关转录因子3(RUNX3)和果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)的表达。方法:采用免疫组化SP法检测60例子宫内膜腺癌、40例子宫内膜增殖症和20例正常增生期子宫内膜组织中RUNX3与EZH2蛋白的表达。结果:子宫内膜腺癌、子宫内膜增殖症与正常增生期子宫内膜组织RUNX3蛋白的阳性表达率分别为43.3%(26/60)、67.5%(27/40)与95.0%(19/20),3组间相比,差异有统计学意义(χ2=18.090,P<0.001);上述3种组织中EZH2蛋白的阳性表达率分别为75.0%(45/60)、42.5%(17/40)与15.0%(3/20),3组间相比,差异有统计学意义(χ2=25.041,P<0.001)。RUNX3蛋白的表达与子宫内膜腺癌的组织分化程度、TNM分期及浸润深度有关(χ2=-3.561,-2.367,5.370,P均<0.05),EZH2蛋白的表达与子宫内膜腺癌的组织分化程度及浸润深度有关(χ2=-3.084,5.568,P均<0.05)。子宫内膜腺癌组织中RUNX3和EZH2蛋白的表达相关(rP=0.330,P=0.007)。结论:RUNX3蛋白表达缺失和EZH2蛋白过度表达在子宫内膜腺癌的发生与发展中起重要作用,高表达的EZH2可能在一定程度上参与调控RUNX3基因的表达下调。

TFF2基因调控相关因子在胃癌中的作用及调控机制

三叶因子家族（trefoil factor family,TFF）是胃肠道黏液细胞分泌的具有一个或多个三叶结构域的小分子蛋白质多肽,主要功能是保护黏膜、促进损伤黏膜修复.近年来的研究表明,TFF2与肿瘤尤其是胃癌关系密切.现就TFF2的结构及其调控相关因子在胃癌发生、发展中的作用机制做一综述.

结肠癌病灶内Runt相关转录因子2与增殖基因、抑癌基因、血管新生分子的相关性研究

目的:探讨结肠癌病灶内Runt相关转录因子2(RunX2)与增殖基因、抑癌基因、血管新生分子的相关性。方法:90例原发性结肠癌患者作为结肠癌组、68例良性结肠息肉患者作为结肠息肉组,对比两组病灶组织中RunX2及增殖基因、抑癌基因、血管新生分子表达量的差异,进一步采用Pearson检验评估结肠癌组织中RunX2表达量与增殖基因、抑癌基因、血管新生分子表达量的相关关系。结果:结肠癌组病灶中RunX2mRNA的表达量高于结肠息肉组。结肠癌组病灶中增殖基因GTPBP4、HOXB7、ZNF331、ADAM17、HSP60 mRNA的表达量高于结肠息肉组;抑癌基因ATF3、FOXN3、OTUD1、NDRG2mRNA的表达量低于结肠息肉组;血管新生分子Musashi 1、NF-κB、RegⅣ、STAT3mRNA的表达量高于结肠息肉组。结肠癌病灶中RunX2mRNA表达量与上述增殖基因、抑癌基因、血管新生分子表达量直接相关。结论:结肠癌病灶内RunX2异常高表达,且具体表达量与癌细胞的增殖活性、血管新生活性均呈正相关,是导致结肠癌发生发展的重要分子靶点。

生长相关癌基因α与趋化素样因子超家族2在胃癌组织的表达

研究表明，趋化因子及其受体可能在肿瘤生长、浸润和转移等生物学行为中起着重要的作用旧。趋化因子生长相关癌基因（growth-related oncogene,GRO）和趋化素样因子超家族（chemokine-like factor superfamily member, CKLFSF）可能参与了肿瘤的生物学行为，但与胃癌的关系目前尚不清楚。本研究通过检测胃癌组织GROcL和CKLFSF2表达，探讨其与胃癌的发病机制的关系。

腹腔镜辅助远端胃癌D2根治术对肿瘤相关因子水平的影响分析

目的:探究腹腔镜辅助远端胃癌D2根治术治疗进展期胃癌对血清胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)、胃泌素-17(gastrin-17,G-17)、低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)及结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)水平的影响。方法:选取2017年10月至2021年11月在中部战区总医院进行远端胃癌D2根治术治疗的患者110例进行临床及随访研究,根据治疗方法的不同分为腹腔镜组及开腹组,每组55例。比较2组患者围手术期情况,血清PG、G-17、HIF-1α及MACC1水平,以及生存情况差异。结果:腹腔镜组切口长度、术中出血量、排气时间、进食时间、首次下床时间、住院时间均明显低于开腹组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后7 d,腹腔镜组患者血清PGⅠ水平明显高于开腹组(P<0.05),G-17、HIF-1α及MACC1水平低于开腹组(P<0.05)。术后早期,腹腔镜组患者的并发症总发生率低于开腹组(5.45%vs.20.00%)(P<0.05)。腹腔镜组术后1、2、3年的生存率分别为90.91%、80.00%、78.18%,开腹组术后1、2、3年的生存率分别为87.27%、74.55%、70.91%,死亡率均无统计学意义(P>0.05)。log-rank检验腹腔镜组及开腹组治疗的患者生存状态比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:腹腔镜辅助远端胃癌D2根治术治疗进展期胃癌的效果及安全性较好,可促进患者术后早期康复,改善患者PG、G-17、HIF-1α及MACC1水平。

人Runt相关转录因子3、zeste基因增强子同源物2蛋白表达与局部进展期直肠癌新辅助化疗敏感性的关系

目的探究人Runt相关转录因子3(RUNX3)和zeste基因增强子同源物2(EZH2)在直肠癌中的表达情况和相关性,探究RUNX3和EZH2蛋白表达与局部进展期直肠癌患者XELOX方案新辅助化疗敏感性的关系。方法31例术前未经抗肿瘤治疗的直肠腺癌患者的癌组织和癌旁组织作为癌组和癌旁组,实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应检测两组中RUNX3和EZH2 mRNA相对表达量,同时采用免疫组织化学法检测两组中RUNX3和EZH2的蛋白表达情况,分析RUNX3和EZH2在癌组织和癌旁组织中的表达差异;将26例术前行3周期XELOX方案新辅助化疗的局部进展期直肠癌患者的治疗前活检蜡块作为治疗前组,其术后病理蜡块作为治疗后组,病理肿瘤缩退学分级评估患者新辅助化疗疗效,采用免疫组织化学法检测两组中RUNX3和EZH2的蛋白表达情况,分析两基因蛋白表达模式与新辅助化疗疗效的关系。结果与癌旁组相比,癌组RUNX3 mRNA的表达下调,蛋白的阳性表达率降低(P=0.001),EZH2 mRNA的表达上调,蛋白的阳性表达率升高(P=0.022);癌组中RUNX3和EZH2的mRNA表达呈负相关(r=-0.599,P=0.000);12例接受新辅助化疗的患者达到TRG0~TRG2级,新辅助化疗总体有效率为46.15%(12/26);与治疗前组相比,治疗后组RUNX3蛋白阳性表达率有上升趋势,但差异无统计学意义(P=0.163),EZH2蛋白阳性表达率有下降趋势,但差异无统计学意义(P=0.095);治疗前组RUNX3阳性表达的患者新辅助化疗有效率为75.00%(9/12),EZH2阴性表达的患者新辅助化疗有效率为77.78%(7/9),RUNX3+/EZH2-的患者新辅助化疗有效率为100%(7/7),高于其他蛋白表达模式(P=0.019),多因素Logistic回归显示RUNX3蛋白的表达情况是患者新辅助化疗疗效的影响因素。结论RUNX3在直肠癌组织中阳性表达率低于癌旁组织,EZH2在直肠癌组织中阳性表达率高于癌旁组织,二者在直肠癌中的表达呈负相关;XELOX方案新辅助化疗可能会对直肠癌中RUNX3和EZH2的表达产生影响;RUNX3高表达和EZH2低表达的局部进展期直肠癌患者XELOX方案新辅助化疗更敏感。

核因子E2相关因子2转录调控粒状头样2基因影响上皮性卵巢癌细胞活力

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)及其下游基因粒状头样2(GRHL2)对上皮性卵巢癌是否影响以及增殖细胞在上皮性卵巢癌细胞中Nrf2对GRHL2基因的调控作用。方法采用染色质免疫共沉淀方法检测Nrf2是否与6种候选基因结合。采用Nrf2过表达结合荧光素酶报告基因实验,检测Nrf2对GRHL2基因的转录激活作用。采用Real-time PCR实验,分析卵巢癌患者输卵管上皮组织及不同卵巢癌细胞中Nrf2和GRHL2在mRNA水平的表达。采用Western blotting技术,分析Nrf2过表达和敲降对GRHL2蛋白表达量的影响。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测Nrf2过表达和敲降对卵巢癌细胞活力的影响。结果 Nrf2可以与GRHL2启动子结合,对GRHL2基因有转录激活的作用。Nrf2过表达和敲降分别升高和降低GRHL2蛋白质表达量;并且,在卵巢癌患者输卵管上皮组织及不同类型卵巢癌细胞系中Nrf2和GRHL2 mRNA水平均异常升高;Nrf2过表达和敲降分别升高和降低卵巢癌细胞活力,而GRHL2敲降可显著降低Nrf2过表达对卵巢癌细胞活力的增强作用。结论转录因子Nrf2可通过转录激活GRHL2基因,发挥对卵巢癌细胞活力的增强作用。

LncRNA TUG1介导Nrf2/HO-1信号通路对脂多糖诱导的心肌细胞凋亡的影响

目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)牛磺酸上调基因(TUG)1介导核因子E2相关因子(Nrf)2/血红素氧化酶(HO)-1信号通路对脂多糖诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法 检测脂多糖诱导的心肌细胞中LncRNA TUG1表达量,将生长期脂多糖诱导的心肌细胞分为对照组、上调组、下调组。对照组不做处理,上调组做LncRNA TUG1上调质粒转染,下调组做LncRNA TUG1沉默质粒转染。鉴定LncRNA TUG1转染效率,分析调控LncRNA TUG1对脂多糖诱导的心肌细胞凋亡、氧化应激、炎性反应及Nrf2/HO-1通路蛋白表达量的影响。结果 与对照组相比,上调组LncRNA TUG1、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)表达量、凋亡率、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平显著上升,Bcl-2、Nrf2、HO-1表达量、超氧化物歧化酶(SOD)水平显著下降,下调组LncRNA TUG1、Caspase-3、Bax表达量、凋亡率、LDH、MDA、IL-6、TNF-α水平显著下降,Bcl-2、Nrf2、HO-1表达量、SOD水平显著上升(P<0.05)。结论 脂多糖诱导的心肌细胞经下调LncRNA TUG1干预后凋亡率下降,氧化应激、炎性反应缓解,其机制可能与Nrf2/HO-1信号通路激活有关。

沉默信息调节因子2相关酶1激动剂增强载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的稳定性

目的:探讨沉默信息调节因子2相关酶(SIRT)1对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响及其可能机制。方法:雄性Apo E-/-小鼠随机分为高脂对照组、SIRT1激动剂组、SIRT1激动剂+抑制剂组。高脂饮食16周后,分别予NS、SRT1720、SRT1720和尼克酰胺腹腔注射6周。油红O和苏木精-伊红染色比较3组间动脉粥样硬化斑块大小;油红、Masson染色和免疫组化分别比较3组斑块中脂质、胶原纤维、巨噬细胞和平滑肌细胞成分面积各占斑块总面积的百分比;比较3组胸主动脉粥样硬化斑块易损指数大小。激光显微切割腹主动脉冰冻切片,实时荧光定量PCR法检测SIRT1 m RNA表达。结果:与高脂对照组比,SIRT1激动剂组SIRT1 m RNA表达明显升高(P<0.05),动脉粥样硬化斑块面积明显减少(P<0.05),斑块中脂质和巨噬细胞含量明显减少(P<0.05),斑块中胶原纤维和平滑肌细胞含量明显增加(P<0.05),斑块易损指数也明显减少(P<0.05);SIRT1激动剂+抑制剂组各指标差异均无统计学意义。结论:上调SIRT1能使Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化斑块缩小,并能增强动脉粥样硬化斑块的稳定性。