TG-相互作用因子在维甲酸抑制腭突间充质细胞增殖过程中的作用

目的:探索TG-相互作用因子(TGIF)在维甲酸抑制腭突间充质细胞增殖过程中作用。方法:分离、培养妊娠13 d胎鼠腭突间充质细胞。MTT实验检测0~10.0μmol/L全反式维甲酸(atRA)在不同时间点对胎鼠腭突间充质细胞增殖的影响。Western blot检测对照组、5.0μmol/L atRA处理组细胞内TGIF蛋白的表达。TGIF siRNA和control siRNA分别转染胎鼠腭突间充质细胞,并设置空白对照组,Western blot检测TGIF siRNA转染胎鼠腭突间充质细胞后的基因沉默的效果;MTT实验检测TGIF siRNA转染后atRA对胎鼠腭突间充质细胞增殖的影响。结果:0.1~10.0μmol/L的atRA对不同时间点胎鼠腭突间充质细胞的生长均有抑制作用,呈时间-剂量依赖性;且在72 h时,5.0和10.0μmol/L的atRA对胎鼠腭突间充质细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.05)。TGIF siRNA转染后,5.0μmol/L atRA对胎鼠腭突间充质细胞增殖的抑制作用不明显(P>0.05)。结论:atRA对腭突间充质细胞增殖的抑制作用可能主要通过TGIF介导。

TGIF对胃癌细胞株SGC-7901的维甲酸信号通路的影响

目的:探讨TG-相互作用因子(TGIF)对胃癌SGC-7901 细胞株中维甲酸信号通路的影响．方法:在TGIF表达质粒稳定转染SGC-7901细胞后,用 Western blot鉴定高表达TGIF的阳性克隆．在TGIF反义寡核苷酸瞬时转染SGC-7901细胞株后,用RT-PCR检测转染效率．再用1 μmol／L ATRA分别处理稳定转染组或瞬时转染组及其对照组细胞,MTT观察细胞增殖速度的变化,流式细胞术观察细胞凋亡率的变化．结果:稳定转染TGIF表达质粒和瞬时转染TGIF反义寡核苷酸对SGC-7901细胞的增殖和凋亡没有明显影响．但在ATRA作用后,TGIF表达质粒转染组细胞的增殖速度比未转染组和空白质粒转染组细胞快(0．434± 0．035 vs 0．386±0．020,0．360±0．014,P<0．05),而细胞的凋亡率的变化比未转染组和空白质粒转染组细胞小,仅由1．14％增加至1．39％．TGIF反义寡核苷酸转染组细胞的增殖速度比未转染组和突变寡核苷酸转染组细胞慢(0．320±0．044 vs 0．388±0．024,0．409±0．041, P<0．05)．而细胞凋亡率的变化比后两组大,由3．09％上升至10．2％．结论:TGIF能拮抗ATRA抑制SGC-7901细胞增殖和诱导其凋亡的作用,TGIF可能参与了对SGC-7901细胞的维甲酸信号通路的抑制．