芪蚣抗纤方(QF)拆方中软坚散结药对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGFβ-1定性定量表达的影响

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)拆方中软坚散结药(蜈蚣、山慈姑)对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGFβ-1定性定量表达的影响。方法:猪血清攻击法诱导免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,随机分为模型组、软坚散结药大剂量干预组、软坚散结药小剂量干预组,另设正常对照组,整个实验过程共8周。免疫组化法检测肝组织TGF-β1相关表达;酶标仪ABC-ELISA法测血清TGF-β1含量。结果:免疫组化显示:正常组大鼠肝脏仅TGFβ1微弱表达,模型组较正常组TGFβ1阳性信号明显增强(P<0.01),软坚散结药干预后大鼠肝脏TGFβ1表达比模型组明显下调,(小剂量P<0.01,大剂量P<0.05),大、小剂量组与模型组相比有差异。血清TGF-β1含量:与模型组相比,软坚散结药大、小剂量干预后动物血清中的TGFβl显著降低(P<0.01)。结论:芪蚣抗纤方(QF)中软坚散结药大、小剂量对免疫损伤性大鼠肝纤维化形成和逆转均有影响,对促肝纤维化细胞因子TGFβ-1均有很好调节作用,对临床上应用软坚散结药治疗肝纤维化有一定的指导意义。

重症肌无力患者IL-18、TGFβ-1的表达

目的探讨白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)、转化生长因子β-1(transforming growth factorβ-1,TGFβ-1)在重症肌无力发病机制中的作用。方法采用基因芯片技术对30例重症肌无力患者和30名正常人外周血单个核细胞TGFβ-1、IL-18mRNA表达水平进行分析,采用酶联免疫吸附试验的方法检测血清IL-18、TGFβ-1水平,对重症肌无力患者病情按临床绝对评分法进行评分,并比较其临床意义。结果 MG患者外周血清IL-18、TGFβ-1水平显著高于正常组水平(t=6.18,P<0.01),MG患者基因芯片检测IL-18Ratio值为2.026,TGFβ-1Ratio值为2.34,结果具有一致性,Ⅱ型、Ⅲ型MG患者IL-18水平高于Ⅰ型患者,与患者临床绝对评分呈正相关(r=0.827,P<0.05)。结论 IL-18、TGFβ-1均参与重症肌无力发病机制,IL-18血清水平可能与重症肌无力病情轻重程度相关。

软肝冲剂对CCl_4肝纤维化大鼠TGFβ_1mRNA表达的影响

目的 :研究软肝冲剂对CCl4肝纤维化大鼠转化生长因子 β1(TGFβ1)mRNA表达的影响 ,从分子水平探讨软肝冲剂促进肝细胞再生、阻止肝纤维化、肝硬化形成的作用机制。方法 :采用Northern blot方法检测CCl4肝纤维化大鼠TGFβ1mRNA表达。结果 :Northern blot杂交显示 ,实验第 45、90天 ,模型组、中药各组和西药秋水仙碱组大鼠肝脏TGFβ1mRNA表达均较正常组增强 (P <0 0 1)。但中药各组和西药秋水仙碱组TGFβ1mRNA表达水平均低于模型组(P <0 0 1)。其中中药高剂量组TGFβ1mRNA表达水平均低于中药低剂量组和西药秋水仙碱组 (P <0 0 1)。结论 :软肝冲剂能调节CCl4肝纤维化大鼠TGFβ1mRNA表达 ,促进肝细胞再生 ,抑制肝纤维化、肝硬化的形成。

缬沙坦下调糖尿病大鼠肾皮质葡萄糖转运蛋白1和TGFβ_1 mRNA的表达

观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏皮质葡萄糖转运蛋白 1(GLUT1 )和转化生长因子 β1 (TGFβ1 )mRNA表达的影响 ,以探讨其保护肾功能的机理。用链尿佐菌素腹腔注射法复制糖尿病大鼠模型 ,动物随机分为糖尿病组、缬沙坦治疗组及对照组 ;分别于实验第 4、6周末测定大鼠平均动脉压、血糖、血肌酐、尿肌酐、肾重 体重、尿白蛋白排泄率及平均肾小球面积和平均肾小球体积。用逆转录 PCR(RT PCR)法对肾皮质GLUT1及TGFβ1 mRNA表达进行半定量分析。在第 4周及第 6周末 ,各组大鼠平均动脉压无差异 ,治疗组肌酐清除率、肾重 体重、尿白蛋白排泄率及肾小球平均面积和平均体积均显著低于同时期的糖尿病组。糖尿病组GLUT1 及TGFβ1mRNA表达较正常组显著增高 ,治疗组二者表达均有所下降。缬沙坦能够下调糖尿病大鼠肾皮质GLUT1 及TGFβ1mRNA表达 ,具有保护肾脏的作用。

鸡冠花黄酮类对成骨细胞增殖和TGFβ_1的作用

目的 探讨鸡冠花黄酮类化合物对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和转化生长因子 - β(TGFβ1)表达的影响作用 ,为临床骨质疏松症的预防和治疗提供参考。方法 提取新生大鼠颅骨成骨细胞制作体外培养模型 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测定鸡冠花黄酮类化合物对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替吡啉测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,SP免疫组化法研究鸡冠花黄酮类化合物对成骨细胞TGFβ1表达的影响。结果 鸡冠花黄酮类化合物可以促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖 ,并显著性促进成骨细胞分化。对第 3代成骨细胞TGFβ1表达进行图像分析 ,培养 3d ,鸡冠花黄酮类化合物剂量在 0 5以上组TGFβ1表达阳性 ,培养 5d ,所有实验TGFβ1均表达阳性促使成骨细跑合成TGFβ1的免疫组化阳性表达。结论 鸡冠花黄酮类化合物可以提高成骨细胞的增殖和分化 ,并有促进分泌TGFβ1的功能 ,对于预防骨质疏松症的发生有重要的参考价值。

糖尿病肾病TGF-β_1,Ⅳ型胶原水平变化的临床意义及辛伐他汀的治疗作用

目的 :探讨血清转化生长因子 β1 (TGF β1 ) ,Ⅳ型胶原水平变化在糖尿病肾病患者中的临床意义及其在辛伐他汀治疗后的变化 .方法 :糖尿病患者 80例根据尿白蛋白排泄率(UAER)分为糖尿病无肾病组 (A组 ) 36例和糖尿病肾病组 (B组 ) 4 4例 .B组接受辛伐他汀治疗 .分别采取所有患者于辛伐他汀治疗前和治疗后 6 ,1 2和 2 4wk的静脉血和 2 4h尿 .用ELISA法测定不同时期、用辛伐他汀治疗后糖尿病肾病患者血清TGF β1 ,Ⅳ型胶原水平 ,以黄柳酸比浊法测定 2 4h尿中总蛋白含量 .4 0例健康者作为对照组 .结果 :糖尿病患者血中TGF β1 ,Ⅳ型胶原水平较对照组明显升高 (A组均为P <0 .0 5 ,B组均为P <0 .0 1 ) ,B组较A组患者血中TGF β1 ,Ⅳ型胶原水平明显升高 (均为P <0 .0 5 ) .用辛伐他汀治疗后尿中蛋白含量减少 ,血中TGF β1 ,Ⅳ型胶原水平逐渐降低 .结论 :TGF β1 和IV型胶原可能在糖尿病肾病的发病过程中起重要作用 .辛伐他汀治疗糖尿病肾病的机制可能是通过抑制TGF β1

肝硬化患者外周血中TGFβ_1和ET-1的表达

目的 研究肝硬化患者外周血中转化生长因子 β1 (TGFβ1 )及血浆内皮素 - 1(ET- 1)的表达 ,并探讨其与肝脏贮备功能和食管静脉曲张的关系。方法 采用标准生物学方法即 TGFβ1 对水貂肺上皮细胞生长抑制的方法及放免法分别检测 72例肝硬化患者及 2 4例正常人血清 TGFβ1 及血浆 ET- 1水平。结果 肝硬化组血清TGFβ1 (11.77± 1.32 ng/ m l)及血浆 ET- 1(78.37± 17.5 4pg/ ml)水平明显高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ;ET- 1水平与肝功能及食道静脉曲张程度相关分析显示 ET- 1水平越高则肝脏贮备功能越差 (r=0 .94) ,食道静脉曲张程度越重 (r=0 .87) ;TGFβ1 含量与肝脏贮备功能及食道静脉曲张程度无关 (r=0 .11及 0 .0 3)。结论 TGFβ1 和 ET- 1可能是参与肝硬化病理生理过程的重要神经肽。ET- 1可作为反映肝硬化程度、判断预后的参考指标。

TGFβ_1在子宫颈鳞癌细胞及细胞外基质中的表达

目的 :探讨细胞生长调节因子TGFβ1在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及其意义。方法 :采用免疫组织化学SP方法 ,检测 31例子宫颈鳞癌组织中TGFβ1的表达。结果 :TGFβ1在宫颈鳞癌细胞浆及细胞外基质中均可见表达。分化越差 ,临床分期越晚 ,癌细胞中的阳性表达率越低 ,细胞外基质中的阳性表达率越高。宫颈鳞癌细胞中 ,低分化组TGFβ1表达阳性率与高分化及中分化组相比 ,差异具有显著性 (P <0 .0 5 ) ,高与中分化组间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。在宫颈鳞癌细胞外基质中 ,高分化组TGFβ1表达阳性率与低分化及中分化组相比差异具有显著性 (P <0 .0 5 ) ,中与低分化组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。胞浆和细胞外基质中的阳性率在临床分期Ⅰ和Ⅱ期 ,Ⅰ期和Ⅲ期间差异均具有显著性 (P <0 .0 5 ) ,Ⅱ期和Ⅲ期间差异不具有显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :TGFβ1的表达下调与宫颈鳞癌细胞分化程度、临床分期有关 。

保肝复功水煎剂对大鼠肝纤维化TGFβ1、TIMP1、MMP1表达的影响

目的:为了探讨保肝复功水煎剂抗肝纤维化的作用机理。方法:通过四氯化碳致小鼠肝损伤模型,利用基因芯片技术研究TGFβ1、MMP1及TIMP1在肝组织中的表达情况。结果:保肝复功水煎剂干预性治疗使实验组大鼠肝组织MMP1表达上调,TIMP1、TGFβ表达下调。结论:保肝复功水煎剂在肝组织中具有明显使MMP1表达上调,TIMP1、TGFβ表达下调的作用,从而促进了胞外基质的降解,抑制发挥肝纤维化的作用。

DDPH对心肌肥厚大鼠PCNA,TGFβ_1,Collagen Ⅲ蛋白表达水平的影响

目的 研究PCNA、TGFβ1、CollagenⅢ型在心肌组织的表达及DDPH的作用。方法 用部分狭窄腹主动脉方法 ,从术后第 4周开始 ,ig不同剂量的DDPH (2 5、5 0mg·kg-1·d-1)持续 8wk。用免疫组织化学方法检测PCNA、TGFβ1、CollagenⅢ蛋白表达的变化。 结果 术后 12wk ,发现肥厚组心肌组织PCNA、TGFβ1、CollagenⅢ表达水平分别是对照组的 1 5、1 4和 2 4倍。而DDPH两个给药组蛋白表达水平明显低于肥厚组 ,但仍高于对照组。结论 DDPH对大鼠腹主动脉部分狭窄所致心肌肥厚PCNA、TGFβ1、Col lagenⅢ表达水平的增加有一定逆转作用。

人脑胶质瘤免疫抑制因子TGFβ_2及TGFβ_1的基因表达

目的 研究人脑胶质瘤主要免疫抑制因子转化生长因子TGFβ2 及TGFβ1的基因表达与其胶质瘤恶性程度的关系。方法 采用Northern杂交、免疫组化和Western杂交法检测了 5 0例胶质瘤、3例恶性胶质瘤体外细胞系和 8例正常脑组织TGFβ2 的表达水平。同时检测其同型异构体TGFβ1的表达水平。结果 正常脑组织几无TGFβ2 和TGFβ1表达 ,而胶质瘤均表达 2 .8和 /或 5 .1kb的TGFβ2 mRNA片段和约 2 5 0 0 0u及 30 0 0 0u的蛋白 ;TGFβ2 和TGFβ1表达水平随肿瘤恶性程度增高而增高。结论 TGFβ2 和TGFβ1表达水平与肿瘤恶性程度呈正相关 ,TGFβ2 和TGFβ1可作为恶性胶质瘤免疫基因治疗的候选基因。

颜面播散性粟粒性狼疮皮损中TGFβ_1的检测

目的 探讨转化生长因子β1 (TGFβ1 )在颜面播散性粟粒性狼疮 (LMDF)发病中的作用。方法 采用免疫组化SP法检测 20例LMDF皮损中TGFβ1,并以 10例正常皮肤组织作对照。结果 LMDF组TGFβ1 阳性率和着色程度均明显高于对照组(P<0. 05)。结论 TGFβ在LMDF的发病中可能起重要作用。

TGFβ_1及其受体在着床期小鼠子宫内膜中转录和表达状况的研究

目的 :为进一步探讨转化生长因子 ( transforming growth factorβ1,TGFβ1)在胚泡着床过程中的生物学作用。方法 :本文通过原位杂交和免疫组化方法 ,检测了 TGFβ1及其受体在着床前后小鼠子宫内膜中的转录和表达状况。结果 :受精后 d4,子宫内膜腔上皮、腺上皮和基质细胞 TGFβ1及其受体转录和表达均较未孕期增强。受精后 d5～ 6 ,TGFβ1及其受体免疫组化和原位杂交阳性着色主要分布于初级蜕膜带 ( primary decidual zone,PDZ)。随着胚泡植入的进行 ,PDZ区蜕膜细胞 TGFβ1及其受体的转录和表达增强。结论 :TGFβ1可能是小鼠胚泡着床过程中的一个重要调节因子。

成年大鼠持续性脑缺血后TGFβ_1蛋白表达与凋亡的关系

目的 :观察成年大鼠持续性局灶脑缺血后 TGFβ1 蛋白表达与缺血后凋亡的关系。方法 :单侧大脑中动脉近端电凝术建立大鼠持续性局灶脑缺血模型。缺血后 1h,实验组经尾静脉注射氟美松 (5 mg/ kg) ,对照组注射相同容积的生理盐水。缺血后 3h～ 12 0 h取材 ,分别用免疫组织化学 SP法和原位末端标记 TUNEL法标记 TGFβ1 蛋白表达细胞和凋亡细胞。结果 :持续性局灶脑缺血后 TGFβ1 蛋白呈双相性 ,主要分布在梗塞灶周围区域。TGFβ1 的表达可被氟美松抑制 ,同时缺血后神经细胞凋亡也加重。结论 :大鼠持续性局灶脑缺血后梗塞灶周围区域 TGFβ1 蛋白表达可能有减轻缺血后神经细胞凋亡的作用。

TGFβ_1与周细胞在乳腺癌血管生成中的关系及意义

目的 分析TGFβ1 与周细胞在乳腺癌血管生成中的相互关系及作用。方法 取 5 0例手术切除乳腺癌新鲜标本 ,采用免疫组织化学染色、原位杂交技术 ,结合体视学分析方法 ,研究TGFβ1 及周细胞在乳腺癌中的表达情况。结果 TGFβ1 蛋白质可表达在新生血管周细胞的胞浆中 ,同时也可表达于乳腺癌癌细胞及新生血管内皮细胞 ;TGFβ1mRNA主要表达在血管周细胞的胞浆中 ,只有极少数癌细胞呈弱阳性表达。乳腺癌中TGFβ1 mRNA的表达与周细胞的表达正相关 ,P <0 0 1。结论 提示周细胞通过TGFβ1

糖皮质激素对重症肌无力患者血清IL-18、TGFβ-1水平的干预作用

目的探讨糖皮质激素(GC)对重症肌无力(MG)患者血清外周血白介素18(IL-18)和转化生长因子β-1(TGFβ-1)水平的干预作用。方法随机选取在我院治疗的52例重症肌无力患者为干预组,按照年龄和性别匹配60例健康对照组,采用ELISA检测干预组的患者糖皮质激素治疗前,治疗后血清IL-18,TGFβ-1水平以及健康对照组的血清IL-18,TGFβ-1水平,采用临床绝对和相对记分法判定临床疗效。结果干预组患者的血清IL-18,TGFβ-1水平与对照组差异显著(P<0.05);治疗后干预组血清IL-18水平明显下降(P<0.05),TGFβ-1水平明显升高(P<0.05)。结论糖皮质激素可以抑制IL-18,并且提高血清TGFβ-1水平进一步有效调节重症肌无力患者的细胞免疫功能。

TGF-β_1对INF-γ诱导肺鳞癌细胞β_2-M表达的影响

目的 探讨TGF β1 对肺鳞癌细胞MHCⅠ类抗原表达的影响。方法 以原代培养的人肺鳞癌细胞为对象 ,采用免疫荧光法 ,通过流式细胞仪分别检测加入rhINF γ及rhTGF β1 +rhINF γ肺鳞癌细胞 β2 M的表达状况。结果 rhINF γ能显著诱导肺鳞癌细胞 β2 M的表达 (P <0 0 1) ,但这种诱导作用在各组癌细胞中均能被rhTGF β1 显著抑制 (P <0 0 1) ,且与其分化程度无关。结论 TGF β1 对INF γ诱导人肺鳞癌细胞MHCⅠ类抗原表达有明显抑制作用。

GW501516通过TGFβ-Smad3信号途径促进人脐静脉内皮细胞PAI-1的表达

为探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体δ(peroxisome proliferator-activated receptor-δ,PPARδ)激动剂GW501516对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)表达的影响及机制,采用siRNA、TGFβ-Smad3信号通路阻滞剂等处理细胞,经实时定量PCR、Western blot方法分别检测细胞中PAI-1及磷酸化Smad3蛋白的表达.结果显示,与对照组比较,GW501516可诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中PAI-1表达,且此效应呈浓度和时间依赖性(P<0.05);siRNA沉默PPARδ的表达后,可阻抑GW501516对HUVEC细胞PAI-1表达的促进作用;TGFβ-Smad3信号通路抑制剂SB-431542与SIS3均可降低HUVEC细胞pSmad3蛋白的表达,而细胞PAI-1表达也随之降低.结果提示,GW501516可促进HUVEC细胞PAI-1的表达,其机制可能与TGFβ-Smad3信号通路有关.

TGFβ_1反义RNA对腹膜间皮细胞分泌细胞外基质的影响

目的 :研究转化生长因子 β1(TGFβ1)反义RNA对体外培养的人腹膜间皮细胞 (HPMC)细胞外基质合成与分泌的影响。方法 :将反义TGFβ1基因真核表达载体转染HPMC ,用ELISA法检测转染细胞上清液中纤维连接蛋白 (FN)和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂 (PAI 1)的蛋白质水平 ;用半定量逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)法检测转染细胞内FN ,PAI 1和胶原Ⅰ (ColⅠ )的mRNA表达 ,并与未转染HPMC对照组和转染空载体组比较其变化。结果 :TGFβ1反义RNA转染HPMC后 ,与对照组相比 ,转染 2 4h后 ,FN ,ColⅠ ,PAI 1mRNA分别下调 17% ,2 6 % ,9.6 % ;转染 4 8h后FN ,PAI 1蛋白含量亦明显下降 (P <0 .0 5 )。结论 :人反义TGFβ1基因真核表达载体可抑制HPMC合成细胞外基质 。

nm23和TGFβ_1在人体非小细胞肺癌中的表达及其临床病理关系的探讨

目的 探讨转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因在人非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达水平及其临床病理关系。方法 应用免疫组化方法对 83例人非小细胞肺癌组织中转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因表达蛋白水平进行了研究。结果 nm2 3和TGFβ1表达水平与肺癌的TNM分期、细胞分化程度及肺癌的转移有密切关系 (P <0 .0 5 )。结论 nm2 3、TGFβ1基因表达水平同时降低 ,预示肺癌的转移和预后不良。