基于TGF-β_(1)/Smads信号通路探讨大蒜素对2型糖尿病大鼠肾纤维化的影响

目的:探讨大蒜素对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠肾纤维化和TGF-β_(1)/Smads信号通路的影响以及大蒜素对T2DM所致肾纤维化的作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和大蒜素低剂量组(5 mg/kg)、大蒜素中剂量组(10 mg/kg)、大蒜素高剂量组(20 mg/kg),每组10只。正常对照组大鼠常规饲养,其余各组采用高糖高脂饲料喂养加腹腔注射链尿佐菌素的方法复制T2DM大鼠模型。造模完成后,大蒜素各剂量组大鼠腹腔注射相应剂量大蒜素溶液,正常对照组及模型组腹腔注射等剂量生理盐水,每天1次,共4周。干预4周后,测定各组大鼠空腹血糖水平,称量体质量;生化分析法测定24h尿蛋白(24 hour urine protein,24h UP)、血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)表达水平;苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)进行肾组织病理学检查;Masson染色进行肾组织纤维化检查并计算胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法检测肾组织中转化生长因子β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))、磷酸化Smad2(phospho-Smad2,p-Smad2)、p-Smad3蛋白表达以及Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ,ColⅢ)表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肾小球增大、系膜基质增厚、肾小管上皮细胞空泡变性、炎性细胞浸润,大鼠空腹血糖、24h UP、BUN、SCr、CVF、TGF-β_(1)、p-Smad2、p-Smad3、Col I、ColⅢ均升高,体质量下降;与模型组比较,大蒜素中、高剂量组大鼠空腹血糖水平降低、体质量升高(P<0.05),24h UP和血清BUN、SCr水平降低(P<0.01),病理学改变改善;与模型组比较,大蒜素低、中、高剂量组大鼠肾组织纤维化改善,肾组织CVF降低(P<0.01);与模型组比较,大蒜素中、高剂量组大鼠肾组织TGF-β_(1)、p-Smad2、p-Smad3、Col I、ColⅢ蛋白表达下调(P<0.01)。结论:大蒜素对T2DM大鼠肾纤维化具有抑制作用,其机制可能与大蒜素调控TGF-β_(1)/Smads信号通路进而抑制细胞外基质生成有关。

依普拉芬对新生大鼠颅盖骨成骨细胞BMP-2和TGF-β_1 mRNA表达的影响

目的 研究依普拉芬对体外培养的原代大鼠成骨细胞BMP-2（Bone Morphogenic Protein-2,骨形态发生蛋白-2）和TGF-β1（Transforming Growth Factor-β1,转化生长因子-β1）mRNA表达的影响,探讨其预防绝经后骨质疏松的机制.方法 体外分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞,取第二代细胞,将不同浓度的依普拉芬加入培养液,72 h后用RT-PCR技术检测各组细胞BMP-2和TGF-β1mRNA表达情况.结果 与阴性对照组比较,各浓度组的依普拉芬均可使成骨细胞BMP-2和TGF-β1mRNA表达量显著增加（P＜0.01）,其中,依普拉芬浓度在10^-8～10^-5 mol/L之间作用最为显著.结论 10^-8～10^-5mol/L浓度范围内的依普拉芬均可促进成骨细胞BMP-2和TGF-β1mRNA的表达,从而间接促进其增殖和分化,增加骨形成.

补肾化痰方对去卵巢大鼠骨组织中BMP-2和TGF-β_1表达的影响

目的:观察补肾化痰方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织中骨形态发生蛋白2(BMP-2)、转化生长因子β(1TGF-β1)表达的影响。方法:50只大鼠随机分为模型组、假手术组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,除假手术组外,其他各组大鼠行双侧卵巢切除术,术后3个月治疗组开始灌胃给药,连续8 w;处死大鼠,免疫组化检测大鼠胫骨组织中BMP-2、TGF-β1的表达。结果:补肾化痰方低、高剂量组大鼠BMP-2、TGF-β1表达水平均明显高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾化痰方能改善骨代谢,对去卵巢大鼠骨质疏松症有较好的治疗作用。

不同缺氧时间点对小鼠心脏成纤维细胞旁分泌TGF-β1和BMP-2的影响

目的:探讨不同缺氧时间点对小鼠心脏成纤维细胞旁分泌TGF-β1、BMP-2蛋白和mRNA的影响。方法:将体外分离培养的第2代小鼠心脏成纤维细胞,分别缺氧0、12、24、48 h。ELISA法和RT-PCR法检测不同时间点心脏成纤维细胞旁分泌TGF-β1、BMP-2的蛋白和mRNA水平。结果:相较于缺氧0 h,缺氧12 h后TGF-β1的蛋白和mRNA表达呈上调趋势,但24 h、48 h后逐步下调;而BMP-2在缺氧12 h、24 h后,蛋白和mRNA表达均逐步上调,48 h后mRNA水平下调。与缺氧24 h相比,缺氧48 h后TGF-β1和BMP-2的蛋白以及mRNA表达均下调。结论:不同缺氧时间诱导的心脏成纤维细胞旁分泌TGF-β1和BMP-2的变化,可能参与了心肌纤维化的病理过程。

鹿茸对实验型骨折愈合过程中TGF-β_1 和BMP-2的表达影响

目的 :观察应用鹿茸后骨折愈合过程中 ,TGF -β1 、BMP -2的表达变化 ,以进一步探讨其促进骨折愈合的机理。方法 :将雄性大鼠 60只随机分为 4组 :生理盐水组A、伤科接骨片组B、鹿茸低剂量组C、鹿茸高剂量组D。按标准模型方法造模 ,不作任何固定 ,分笼饲养 ,术后第 2天灌药 ,于术后 7、14、2 1天分别将每组处死 5只大鼠 ,取出骨标本 ,制成切片。测量骨痂厚度 ,利用免疫组化染色及图像分析测定TGF -β1 、BMP -2表达强度。结果 :在骨折愈合过程中 ,实验组和对照组的骨痂厚度及骨痂组织中TGF -β1 、BMP -2的含量存在着差异 ,实验组和伤科接骨片组的染色峰值出现在第 2周 ,对照组出现在第 3周。结论 :高剂量鹿茸能够增加大鼠骨折端骨痂厚度 ,提高骨折愈合质量 ,并能增加TGF -β1 、BMP -2在骨痂组织中表达 。

芪倍合剂对UC小鼠模型TGF-β1/Smad2信号通路及Th17/Treg平衡、炎性细胞因子表达的影响

目的探究芪倍合剂对溃疡性结肠炎(UC)小鼠模型转化生长因子(TGF)-β1/Smad2信号通路及T辅助细胞(Th)17/调节T细胞(Treg)平衡、炎性细胞因子表达的影响。方法30只小鼠随机分为对照组、UC组和UC+芪倍合剂组,每组10只。UC组和UC+芪倍合剂组通过葡聚糖硫酸钠构建UC模型,UC+芪倍合剂组通过芪倍合剂灌肠。比较两组结肠黏膜病变情况、外周血炎性细胞因子Th17、Treg和TGF-β1/Smad2信号通路水平。结果与对照组比较,UC组干预后每日疾病活动指数(DAI)评分、结肠病变程度、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、Th17、Treg、Th17/Treg及结肠黏膜和淋巴细胞中的TGF-β1/Smad2通路水平显著升高,IL-4水平显著降低(P<0.05)。UC+芪倍合剂组干预后DAI评分、结肠病变程度、TNF-α、IL-1、Th17、Treg、Th17/Treg及结肠黏膜和淋巴细胞中TGF-β1/Smad2通路水平显著低于UC组,IL-4水平显著高于UC组(P<0.05)。结论芪倍合剂可以通过抑制结肠黏膜和淋巴细胞中TGF-β1/Smad2通路抑制炎性反应和调节Treg/Th17细胞平衡,从而起到缓解UC的作用。

葶苈子对压力负荷大鼠心肌CYP11B1、CYP11B2及TGF-β_1 mRNA表达的影响

目的:研究葶苈子水提液对压力负荷大鼠心肌CYP11B1、CYP11B2及TGF-β1 mRNA表达的影响。方法:腹主动脉不完全结扎法(AAB)制作大鼠心肌肥厚、心室重构模型。药物干预30d后,称重法测定心脏指数(HW/BW)、左室重量指数(LVW/BW),Real-Time PCR反应技术,以Rat 18S为内参照,测定心肌CYP11B1,CYP11B2,TGF-β1 mRNA的表达水平。结果:模型组大鼠心脏指数增高,醛固酮合成基因和转化生长因子β1表达增强。葶苈子水提液能改善心肌肥厚指数,降低大鼠心肌醛固酮合成基因CYP11B1、CYP11B2及TGF-β1的mRNA表达水平。结论:葶苈子水提液可能通过抑制心肌醛固酮合成相关基因CYP11B1、CYP11B2 mRNA表达水平,降低转化生长因子β1的合成而抑制心室重构的发生。

老鼠簕乙醇提取物对肝纤维化大鼠COX-2和TGFβ_1表达的影响

目的研究老鼠簕对CCl4诱导的大鼠肝纤维化肝组织COX-2和TGFβ1表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分成5组:空白对照组、模型对照组、秋水仙碱组、老鼠簕乙醇提取物低剂量组和老鼠簕乙醇提取物高剂量组。除空白对照组外,其余4组用CCl4制备大鼠肝纤维化模型。秋水仙碱组、老鼠簕乙醇提取物低剂量组和老鼠簕乙醇提取物高剂量组分别于4周后给予相应的药物,空白对照组给予等容量的生理盐水,每天1次。8周后处死大鼠,RT-PCR检测肝组织中COX-2和TGFβ1mRNA的表达,用免疫组化方法观察肝组织COX-2和TGFβ1蛋白质的表达。结果①大鼠出现肝纤维化改变;②RT-PCR结果显示,与空白对照组相比,模型对照组COX-2和TGFβ1mRNA表达增强(P<0.01);老鼠簕乙醇提取物干预组(1.0,2.0 g.kg-1)较模型对照组COX-2和TGFβ1mRNA表达减弱(P<0.05);③免疫组化结果显示,模型对照组大鼠肝组织的COX-2和TGFβ1蛋白表达明显增加(P<0.01);老鼠簕乙醇提取物干预组(1.0,2.0 g.kg-1)大鼠肝组织的COX-2和TGFβ1蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论老鼠簕能够抑制肝纤维化大鼠肝组织COX-2和TGFβ1的表达。

人脑胶质瘤免疫抑制因子TGFβ_2及TGFβ_1的基因表达

目的 研究人脑胶质瘤主要免疫抑制因子转化生长因子TGFβ2 及TGFβ1的基因表达与其胶质瘤恶性程度的关系。方法 采用Northern杂交、免疫组化和Western杂交法检测了 5 0例胶质瘤、3例恶性胶质瘤体外细胞系和 8例正常脑组织TGFβ2 的表达水平。同时检测其同型异构体TGFβ1的表达水平。结果 正常脑组织几无TGFβ2 和TGFβ1表达 ,而胶质瘤均表达 2 .8和 /或 5 .1kb的TGFβ2 mRNA片段和约 2 5 0 0 0u及 30 0 0 0u的蛋白 ;TGFβ2 和TGFβ1表达水平随肿瘤恶性程度增高而增高。结论 TGFβ2 和TGFβ1表达水平与肿瘤恶性程度呈正相关 ,TGFβ2 和TGFβ1可作为恶性胶质瘤免疫基因治疗的候选基因。

肝组织TGF-β_1、TIMP-1及MMP-2表达与纤维化关系的实验研究

目的 探讨免疫性肝纤维化肝组织TGF β1、TIMP 1及MMP 2表达与肝纤维化间的关系。方法 2 4只雄性Wistar大鼠尾静脉注射白蛋白建立实验性免疫性肝纤维化模型 ,检测血清HA、ALT、AST、ALB ,流式细胞仪定量分析肝组织TGF β1、TIMP 1、MMP 2和α SMA基因表达量 ,观察大鼠肝组织病理、肝组织Pollak三重染色和Gomori银染色、苦味酸 天狼红染色、Ⅳ型胶原免疫组化、α SMA免疫组化、肝匀浆Hyp测定。结果 随着肝纤维化程度的加重血清HA、ALT、AST、肝组织匀浆Hyp的浓度和TGF β1、TIMP 1及α SMA基因表达量均增加 ,MMP 2于肝纤维化早期明显升高 ,晚期明显降低。结论 实验性肝纤维化过程中TGF β1、TIMP 1促进肝纤维化的进展 ,MMP 2抑制其进展。

TGF-β1 mRNA与BMP-2 mRNA在羊下颌骨牵张成骨过程中的表达

目的 观察TGF - β1mRNA与BMP - 2mRNA在羊下颌骨牵张成骨过程中的表达情况。 方法 用自制的牙支抗下颌骨牵引装置 ,对山羊下颌骨进行牵引 ,0 .2 5mm/ 12h ,共牵引 16天 ,分别于开始牵引的 8、16、32、4 8天取材 ,标本常规进行TGF - β1mRNA与BMP - 2mRNA的原位杂交反应 ,并对阳性细胞进行计数。 结果 TGF - β1mRNA及BMP - 2mRNA在成纤维样细胞以及成骨细胞内表达 ,阳性细胞数在 8天组开始增加 ,16天组达到最高 ,之后逐渐减少。结论 两者的表达具有一定的时程变化特点 ,提示它们可能在骨牵张过程促进细胞的增殖、分化、胞外基质的合成。

2型糖尿病患者血清TGFβ_1的临床评价

对单纯糖尿病 (A)组 ;微量白蛋白尿 (B)组 ;临床蛋白尿 (C)组 ,用双抗夹心ELISA法测TGFβ1等 ,结果 :A组TGFβ11 2 5 4± 5 3ng/ml与正常对照 1 0 1 4± 5 8ng/ml无差别 (P >0 0 5 ) ;B组TGFβ12 2 68± 9 8ng/ml明显高于A组 (P <0 0 1 )。C组TGFβ11 3 5 3 6± 1 1 5ng/ml明显高于B组 (P <0 0 1 )。相关分析显示TGFβ1与尿白蛋排泄率呈正相关。结论 :2型糖尿病病人血清TGFβ1在DN早期开始增高 ,并随着尿白蛋白排泄率的增加而升高 ,提示TGFβ1可能参与了DN的发生。

TGFβ_1与Smad_(2/3)在乳腺癌组织中的表达及意义

目的研究TGFβ1与Smad2/3在乳腺癌组织中的表达,揭示其在乳腺癌中的信号转导通路。方法应用免疫组化SABC法检测62例乳腺癌组织中TGFβ1与Smad2/3的表达情况,利用SPSS19.0统计学软件分析TGFβ1与Smad2/3的差异性及相关性。结果 TGFβ1与Smad2/3在乳腺癌组织中呈高表达,阳性表达率依次为69.35%(43/62)和40.32%(25/62)。TGFβ1与Smad2/3在乳腺癌组织中的表达与年龄无关,TGFβ1与Smad2/3在组织学分级、病理学分类、TNM分期方面差异均有统计学意义(P<0.05)。TGFβ1与Smad2/3在乳腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.261,P<0.05)。结论乳腺癌的发生可能与TGFβ1及Smad2/3信号转导途径发生异常,致使下游信号Smad2/3突变,增加瘤细胞与细胞外基质的相互作用、抑制免疫系统、增加血管形成等机制促进乳腺癌的浸润和转移有关。

DM2肾病患者血浆ET-1、血清TGF-β_1和尿Alb检测的临床意义

目的:探讨了2型糖尿病肾病(DN)患者血浆ET-1、血清TGF-β1和尿Alb水平的变化及临床意义。方法:应用放射免疫分析和酶联法对40例糖尿病无肾病和32例DN患者进行了血浆ET-1、血清TGF-β1和尿Alb进行了测定,并与35名正常健康人作比较。结果:DN组血浆ET-1、血清TGF-β1和尿Alb水平均显著地高于正常人组(P<0.01),NDN组与正常人组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:血浆ET-1、血清TGF-β1和尿Alb含量随DN的发生以及严重程度逐渐增高,可作为早期诊断DN发生以及严重程度的指标,对监测早期DN的发生和病情发展程度有重要的临床价值。

益气平悬饮对小鼠Lewis肺癌组织细胞中IL-2、TGF-β_1 mRNA表达的影响

目的探讨益气平悬饮 (YQPXB)对小鼠Lewis肺癌组织细胞中白细胞介素 (IL—2 )、转化生长因子(TGF—β1)表达的影响。方法皮下接种Lewis肺癌的C57BL 6J小鼠 40只 ,随机分为益气平悬饮大剂量组、小剂量组、环磷酰胺对照组、荷瘤对照组 ,给药 1 0d后处死 ,用逆转录PCR法测定各组Lewis肺癌组织细胞中IL—2、TGF—β1mRNA表达。结果YQPXB大、小剂量组Lewis肺癌组织细胞中IL—2mRNA表达水平明显高于模型组和化疗组 (P <0 .0 1 ) ,YQPXB大、小剂量组之间无显著性差异。YQPXB大、小剂量组TGF—β1mRNA表达水平明显低于模型组和化疗组 (P <0 .0 1 ) ,YQPXB大、小剂量组之间无显著性差异。结论YQPXB能促进小鼠Lewis肺癌组织细胞中IL—2mRNA的表达 ,抑制TGF—β1mRNA的表达。

乳腺癌p21^(WAF1)表达与bcl-2、EGFR、p53和TGF-β_1的关系

探讨了 p2 1WAF1在原发性乳腺癌中的表达及其与bcl 2、EGFR、p53和TGF β1的关系。采用免疫组化S P法检测了 152例乳腺癌组织 p2 1WAF1、bcl 2、EGFR、p53和TGF β1蛋白的表达水平。结果表明 p2 1WAF1表达与EGFR(x2 =5.2 2 1,p <0 .0 5,γ =0 .19)和TGF β1(x2 =4 .354,p <0 .0 5,γ =0 .17)表达呈正相关 ,与bcl 2呈负相关 (x2 =16.4 75,p <0 .0 1,γ =- 0 .33) ,与 p53无相关(x2 =3.114,p >0 .0 5)。由此推断bcl 2、EGFR和TGF β1可能与 p2

2型糖尿病肾病患者血浆ET、血清TGF-β_1和VEGF检测的临床意义

目的:探讨2型糖尿病肾病(DN)患者血浆ET、血清TGF-β1和VEGF水平的变化及临床意义。方法:应用放射免疫分析和酶联免疫吸附法对44例糖尿病无肾病患者和32例2型糖尿病肾病患者进行了血浆ET、血清TGF-β1和VEGF测定,并与35名正常健康人作比较。结果:DN组血浆ET、血清TGF-β1和VEGF水平显著高于正常人组(P<0.01)。NDN组与正常人组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:血浆ET、血清TGF-β1和VEGF含量随DN的发生以及严重程度逐渐增高,可作为早期诊断DN发生以及严重程度的指标,对监测早期DN的发生和病情发展程度有重要的临床价值。

MMP-2/MMP-9、TGF-β_1在声带息肉发病机制中的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶 - 2、9(MMP- 2、9)及影响二者作用的转化生长因子β1 (TGF-β1 )在声带息肉中的表达及意义 ,进一步探讨其发病机制。 方法 (1 )应用苏木精 -伊红染色及 Grocott- zones PISM复合法基底膜染色观察声带息肉基底膜的改变 ,并与声带小结及正常声带标本作比较。(2 )采用免疫组织化学方法检测 MMP- 2 /MMP- 9、TGF- β1在声带息肉、声带小结、正常声带粘膜中的表达及分布情况。 结果 (1 )苏木精 -伊红染色及 Grocott- zones PISM复合法基底膜染色检查 ,与正常声带相比 ,声带息肉粘膜上皮下基底膜正常或变薄 ,但血管内皮下基底膜比正常声带血管内皮下基底膜薄、稀疏 (P<0 .0 5 ) ,且粘膜固有层 (L P)间质水肿 ,变性 ,血管扩张 ,血栓形成等。与正常声带、声带息肉相比 ,声带小结粘膜上皮下基底膜增厚 (P <0 .0 5 )且不规则 ,但血管内皮下基底膜正常 ,粘膜固有层结构不改变或改变较轻。(2 )免疫组织化学染色 ,MMP- 2、MMP- 9、TGF- β1 在声带息肉的表达程度明显高于声带小结 (P <0 .0 1 )及正常声带粘膜 (P<0 .0 5 ) ,MMP- 2、MMP- 9、TGF-β1 在声带小结表达的阳性率比正常声带粘膜的表达的阳性率低 ,但 P>0 .0 5。声带息肉组织中 MMP- 2、MMP- 9与 TGF-β1

千金子二萜醇调控TGF-β/Smad4通路调节肾癌小鼠Th1/Th2免疫平衡

目的探究千金子二萜醇对肾癌小鼠Th1/Th2免疫平衡的影响及转化生长因子(TGF)-β/Smad4信号通路调控作用的可能机制。方法12只BALB/c小鼠随机分为模型组、实验组(模型+千金子二萜醇)和TGF-β/Smad通路抑制剂组(模型+LY2109761),通过接种肾癌Renca细胞构建肾癌小鼠模型。灌胃21 d后,取小鼠瘤块和脾脏组织并计算各组瘤块体积增长率,Western印迹检测小鼠脾脏TGF-βRⅡ和Smad4蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素(IL)-4和干扰素(IFN)-γ水平,RT-qPCR检测小鼠脾脏TGF-βRⅡ、Smad4、IL-4和IFN-γmRNA表达水平。结果与模型组相比,实验组肿瘤体积增长率、TGF-βRⅡ、Smad4 mRNA和蛋白表达显著降低,IL-4水平显著降低,IFN-γ水平显著升高,LY2109761组TGF-βRⅡmRNA表达显著升高,蛋白水平显著降低,Smad4蛋白表达水平显著降低(均P<0.05)。结论千金子二萜醇通过调控TGF-β/Smad4信号通路抑制肾癌模型小鼠的肿瘤生长,并调节Th1/Th2免疫平衡。