TGFβ1/Smads信号通路抗纤维化抑制心室重构及红花黄色素干预作用的研究

目的 研究红花黄色素对心肌梗死后的心室重构及TGFβ1/Smads信号通路的影响。方法 结扎左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,假手术组开胸显露左冠状动脉前降支但不行结扎。建模成功大鼠随机分为模型组,红花黄色素高、中、低剂量组,氯沙坦组,给药4周。观察心脏形态结构变化;分析血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)含量变化;Westem blot检测心肌组织转化生长因子β1(TGFβ1)、SMAD2/3、P-SMAD2/3蛋白表达量。结果 与假手术组比较,模型组心脏体积变大,梗死区面积大,左室壁凹陷,变薄;与模型组比较,给药组左心室壁没有明显凹陷,梗死区范围和体积变小;血清MDA降低,SOD、GSH-Px和CAT活性增强(P<0.05);与模型组比较,给药组心肌组织TGFβ1及SMAD2/3蛋白表达下降(P<0.05)。结论 红花黄色素能够减轻心室重构,缓解氧化应激,可能是通过抑制TGFβ1/Smads信号通路而实现。

银杏素调节TGF⁃β1/Smad通路对ox⁃LDL诱导血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨银杏素调节转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)/Smad信号通路对ox⁃LDL诱导血管内皮细胞损伤的影响。方法将人脐静脉血管内皮细胞HUVEC分为对照组(未处理的HUVEC细胞)、模型组(50μg/mL ox⁃LDL处理的HUVEC细胞)、银杏素组(50μg/mL ox⁃LDL+12.5μmol/L银杏素处理HUVEC细胞)、SRI⁃011381组(50μg/mL ox⁃LDL+10μmol/L的TGF⁃β1/Smad激活剂SRI⁃011381处理HUVEC细胞)、银杏素+SRI⁃011381组(50μg/mL ox⁃LDL+12.5μmol/L银杏素+10μmol/L的SRI⁃011381共同处理HUVEC细胞)。ELISA试剂盒检测HUVEC细胞丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃α水平;CCK⁃8法检测HUVEC细胞增殖;流式细胞术检测HUVEC细胞凋亡率;Western blot检测细胞上皮间质转化(EMT)、TGF⁃β1/Smad通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组IL⁃1β、IL⁃6、TNF⁃α、MDA水平、细胞凋亡率、TGF⁃β1、Smad3、神经型钙黏附蛋白(N⁃cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白水平显著增加(P<0.05),A值、GSH、SOD水平、上皮钙黏附素(E⁃cadherin)蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,银杏素组IL⁃1β、IL⁃6、TNF⁃α、MDA水平、细胞凋亡率、TGF⁃β1、Smad3、N⁃cadherin、Vimentin蛋白水平显著下降(P<0.05),A值、GSH、SOD水平、E⁃cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),而SRI⁃011381组趋势相反,SRI⁃011381减弱了银杏素对ox⁃LDL诱导的HUVEC细胞损伤的抑制作用。结论银杏素可能通过下调TGF⁃β1/Smad信号通路对ox⁃LDL诱导的血管内皮细胞损伤起到改善作用。

补体分子调控TGFβ1/smad通路减少蛛网膜下腔出血后神经元凋亡的作用及机制

目的 探讨补体分子对蛛网膜下腔出血(SAH)后神经元凋亡的影响及可能的机制。方法 将90只大鼠随机分为假手术组、SAH模型组、SAH模型+补体分子组,每组30只。采用枕大池单次注射自体血的方法建立SAH模型,SAH后24 h采用Garcia评分和平衡木试验评分评定神经功能缺损程度。成功建模24 h后,称取脑组织湿质量和干质量,计算脑组织含水率。绘制伊文思蓝标准曲线,评估血-脑屏障通透性。采用免疫荧光染色观察各组小胶质细胞活化情况,蛋白质免疫印迹法(WB)检测各组补体C3、TGFβ1/smad蛋白的表达情况,TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果 与假手术组相比,SAH模型组大鼠的Garcia评分和平衡木试验评分均降低,脑组织含水率和血-脑屏障通透性均增加,小胶质细胞活化程度增强,补体C3、TGFβ1/smad蛋白的表达水平升高,神经元凋亡率增加(P<0.05)。与SAH模型组相比,SAH模型+补体分子组大鼠的Garcia评分和平衡木试验评分均升高,脑组织含水率和血-脑屏障通透性均降低,小胶质细胞活化程度减弱,补体C3、TGFβ1/smad蛋白的表达水平降低,神经元凋亡率减少(P<0.05)。结论 补体分子可通过调控TGFβ1/smad通路抑制SAH后小胶质细胞活化,从而减少神经元凋亡,改善神经功能缺损。

祛风清热凉血方介导CTGF、TGFβ1参与银屑病的治疗

目的观察祛风清热凉血方治疗寻常型银屑病的临床疗效,探讨其对外周血结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子(TGF)β1表达的调控。方法40例中医辨证为寻常型银屑病的患者为治疗组,20例健康人为健康对照组,采用免疫组织化学方法分别检测两组皮肤组织中CTGF、TGFβ1表达;收集两组外周血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒与荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测两组外周血中CTGF、TGFβ1表达;治疗组予以祛风清热凉血方内服配合外用卤米松、卡泊三醇治疗,检测患者治疗前后外周血中CTGF、TGFβ1表达并对病情严重程度进行银屑病面积严重程度指数(PASI)评分。结果CTGF、TGFβ1在寻常型银屑病皮肤组织中呈高表达。治疗组外周血CTGF、TGFβ1 mRNA明显高于健康对照组(P<0.05)。治疗组治疗后皮损PASI评分及外周血中CTGF、TGFβ1水平较治疗前显著下调(P<0.05);CTGF、TGFβ1表达与PASI评分呈显著正相关(P<0.01)。结论祛风清热凉血方对外周血CTGF、TGFβ1的下调作用可能是其治疗银屑病的作用机制之一。

miR⁃146a通过TGF⁃β1/SMAD通路调控脊柱结核进展的分子机制

目的探讨miR⁃146a/转化生长因子-β(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)/母亲抗肢瘫(small mother against decapentaplegic,SMAD)通路在脊柱结核进展中的调控机制。方法收集脊柱结核病人和正常病人髓核组织,验证miR⁃146a/TGF⁃β1/SMAD通路在结核髓核组织中的表达量;分离培养髓核细胞,敲低/过表达miR⁃146a,分别应用qPCR、Western blot、CCK⁃8、划痕实验验证miR⁃146a对TGF⁃β1/SMAD通路表达及髓核细胞增殖、迁移能力的影响。结果与正常病人比较,脊柱结核病人髓核细胞增殖及迁移能力显著减低,miR⁃146a在脊柱结核病人髓核组织中表达量显著减低,而脊柱结核病人髓核组织中SMAD同系物2(SMAD2)、SMAD同系物3(SMAD3)、SMAD同系物4(SMAD4)、TGF⁃β1基因表达增高,SMAD同系物7(SMAD7)表达减低,提示miR⁃146a与TGF⁃β1/SMAD通路活性显著负相关。过表达miR⁃146a可抑制SMAD2、SMAD3、SMAD4、TGF⁃β1和促进SMAD7表达,而敲低miR⁃146a可促进SMAD2、SMAD3、SMAD4、TGF⁃β1 mRNA和抑制SMAD7表达水平。细胞实验进一步证实过表达miR⁃146a可促进脊柱结核病人髓核细胞增殖和迁移能力,而敲低miR⁃146a可显著抑制其增殖和迁移能力。结论miR⁃146a是脊柱结核进展的关键调控因子,其可通过抑制TGF⁃β1/SMAD通路活性进而调控髓核细胞增殖及迁移活性。

益气活血通络汤与低分子肝素抗凝对大鼠骨折愈合、血液流变学及TGF-β1表达的影响

目的探究益气活血通络汤与低分子肝素抗凝对大鼠骨折愈合、血液流变学及转化生长因子(TGF)-β1表达的影响。方法选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(A)组、模型(B)组、益气活血通络汤(C)组、低分子肝素(D)组、益气活血通络汤联合低分子肝素(E)组,每组10只,对B、C、D、E组采用骨钳截断加克氏针髓内固定法建立胫骨骨折模型,A组不建立该模型,建模成功后,C组4 g/kg益气活血通络汤灌胃,D组500 U/kg低分子肝素灌胃,E组给予益气活血通络汤联合低分子肝素治疗,A组、B组同期灌胃同体积生理盐水,X线摄片检测骨折愈合程度,苏木素-伊红(HE)染色法检测骨组织病理形态,全自动血流变仪检测血液流变学相关指标,免疫组化法检测骨组织中TGF-β1蛋白表达。结果与A组相比,B组骨折线清晰,且没有形成明显骨痂;与B组相比,C、D、E组骨愈合速度明显加快,C、D组骨折线仍可见但折断端边缘趋于模糊,且形成明显骨痂,而E组骨折基本消失,髓腔再通,外骨痂减少,可见大部分骨痂长入骨折线,已有骨外膜形成并可见骨连接形成;A组骨组织形态完整,骨小梁生长旺盛,排列规则有序,且无坏死区域;B组骨组织形态紊乱,出现部分坏死区域,并可见少量纤维组织;C、D组骨痂组织中可见大量肉芽组织、纤维组织长入,成软骨细胞增生活跃,并有网状交织的骨小梁;E组骨组织形态已趋于完整,排列有序且部分已被正常组织替代,骨小梁排列相对规则,可见部分成熟板状骨形成;与A组比较,B、C、D、E组软骨比例、胫骨组织TGF-β1蛋白表达显著降低,纤维性骨痂比例、全血低切黏度、中切黏度、高切黏度及血浆黏度显著升高(P<0.05);与B组比较,C、D、E组软骨比例、胫骨组织TGF-β1蛋白表达显著升高,纤维性骨痂比例、全血低切黏度、中切黏度、高切黏度及血浆黏度显著降低(P<0.05);与C、D组相比,E组上述指标变化显著(P<0.05),而各组骨性骨痂相比无明显差异(P>0.05)。结论益气活血通络汤联合低分子肝素抗凝具有显著疗效,其可显著促进骨折愈合,改善血液流变学,并促进TGF-β1表达。

基于TGF-β1/smads信号通路研究电针对少弱精症大鼠的影响

【目的】探究电针对少弱精症大鼠精子质量、性激素水平以及睾丸组织中TGF-β1/smads信号通路中相关蛋白的影响。【方法】取40只SD大鼠,雄性,采用随机数字表法,分成空白组、模型组、电针组、阳性药物组,应用腺嘌呤灌胃法建立少弱精症大鼠模型,分别对电针组(每天电针中极、关元、足三里、三阴交,30 min/次,连续28 d)、阳性药物组(以10 mL/kg左卡尼汀口服液灌胃,连续28 d)进行干预。治疗后检测各组大鼠精子数量、精子活力率、促卵泡生成激素(FSH)、黄体生成素(LH)、血清性激素睾酮(T)指标变化;采用HE染色法对睾丸组织进行形态学观察;采用Western Blot检测睾丸组织中TGF-β1/smads信号通路相关蛋白的表达。【结果】模型组与空白组比较,精子数量、精子活力率均显著降低(P<0.05),电针组和阳性药物组与模型组比较均有显著升高(P<0.05)。性激素水平比较:模型组与空白组相比,血清T水平显著降低(P<0.05)、血清FSH、LH水平显著升高(P<0.05);电针组和阳性药物组与模型组比较,血清T水平显著升高(P<0.05)、血清FSH、LH水平显著降低(P<0.05)。HE染色结果显示:模型组大鼠睾丸组织出现典型AR病理特征,电针组和阳性药物组睾丸组织均出现不同程度改善。Western Blot检测显示:睾丸组织中模型组TGF-β1/smads通路TGF-β、p-smad2、p-smad3蛋白水平表达均显著升高(P<0.05),电针组和阳性药物组与模型组比较TGF-β、p-smad2、p-smad3蛋白水平均显著降低(P<0.05)。【结论】电针能够提高少弱精子症大鼠精子数量和精子活力率,调节性激素水平,改善大鼠的生精环境,其机制可能与通过调节TGF-β1/smads信号通路影响睾丸生精过程有关。

关于利拉鲁肽TGFβ1诱导的心脏成纤维细胞 激活临床应用研究

深入分析利拉鲁肽在TGFβ1诱导的心脏成纤维细胞激活过程中的实际应用情况,明确利拉鲁肽对心肌成纤维细胞活化产生的具体影响。方法:需要构建大鼠模型,培养初代大鼠乳鼠心脏成纤维细胞,利用TGFβ1进行刺激诱导,使心脏成纤维细胞活化增殖,并利用不同浓度的利拉鲁肽对成纤维细胞进行处理。之后需要开展细胞活性检测以及细胞增殖检测,同时需要完成转化生长因子β(TGFβ1)的mRNA表达水平。检测工作主要通过免疫应急检测明确相关蛋白的表达变化情况,对多组样本进行单因素方差分析,确定终的结果。结果:在利拉鲁肽浓度不同的情况下对心肌成纤维细胞活性进行处理时,并不会产生影响,P>0.05;TGFβ1组细胞的增殖水平比较明显,不同浓度的利拉鲁肽细胞增殖水平比TGFβ1组的细胞增殖水平更低,P<0.05;TGFβ1的mRNA表达水平比对照组更低,其中浓度为100和200的利拉鲁肽组细胞中TGFβ1的因子mRNA水平明显比TGFβ1组相关指标水平更低,P<0.05。结论利拉鲁肽对TGFβ1的心脏纤维细胞激活有一定的抑制作用能够减轻因为TGFβ1诱导的心肌成纤维细胞活化以及分泌。利拉鲁肽在发挥作用的过程中,主要是对AKT磷酸化机制进行抑制达到减缓心肌成纤维细胞活化与增殖的作用。

暗纹东方鲀TGF-β1基因的克隆、表达特征及生长性状相关SNP位点筛选

为探究暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)TGF-β1基因与其生长性状的关联及作用,采用RACE技术克隆了暗纹东方鲀TGF-β1基因,分析了其基因结构与表达特征,并通过直接PCR扩增法对TGF-β1基因进行多片段比对,在此基础上筛选出与生长性状相关的SNP位点。研究发现TGF-β1基因cDNA全长共2217 bp,包含5′UTR 51 bp,3′UTR 1014 bp,ORF 1152 bp,编码383个氨基酸。氨基酸序列比对分析表明,暗纹东方鲀TGF-β1基因与红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)同源性最高(92.82%)。进化树分析表明,暗纹东方鲀TGF-β1基因编码氨基酸序列与红鳍东方鲀聚为一支,与鲈形目鱼类亲缘关系最近(68.46%~73.33%)。qRT-PCR检测显示,TGF-β1基因在暗纹东方鲀8种不同组织(心脏、肝脏、脑、脾脏、肾脏、肌肉、中肠和鳃)都有表达,其中肾脏表达量最高,心脏和脾脏表达量次之。通过SNP位点不同基因型与个体生长性状的相关性分析,发现TGF-β1上的SNP g.3908 C>A位点与暗纹东方鲀多项生长性状有关,其中CC型是优势基因型,且CC型个体体宽、肥满度较高。研究结果证实TGF-β1基因与暗纹东方鲀生长性状有一定的相关性,可为暗纹东方鲀分子标记辅助育种提供基础资料。

Correlation between TGFβ1 Gene Polymorphism and Asthma in Baise, Guangxi Children

Objective: This research was to study the correlation between the rs1800469, rs1800470, rs2241712, rs224171 and rs4803455 of TGFβ1 gene and asthma in Baise, Guangxi children. This research also studied the relationship between serum concentration of TGFβ1 and childhood asthma. Method: From June 2022 to December 2023, 121 children had physical examination in affiliated Hospital of Youjiang Medical University for Nationalities were selected as control group and 118 children suffered from asthma in affiliated Hospital of Youjiang Medical University for Nationalities during the same period were selected as asthma group. Result: There was no correlation between rs1800469, rs1800470, rs2241712, rs2241715, rs4803455 and asthma in Baise, Guangxi children. Linkage disequilibrium analysis showed that there were strong linkage disequilibrium among rs1800469, rs1800470, rs2241712, rs2241715 and rs4803455. Their haplotypes had no significant correlation with childhood asthma. The serum concentration of TGFβ1 in asthma group was lower than that in control group (p β1 had no significant relationship with the genotypes of rs1800469, rs1800470, rs2241712, rs2241715 and rs4803455.

慢性乙型肝炎肝纤维化患者剪切波弹性成像参数变化与TGFβ1、TIMP-1的相关性

目的探讨剪切波弹性成像技术(SWE)检查慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化患者肝脏硬度值(LSM)与转化生长因子β1(TGFβ1)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的相关性。方法选择2020年7月至2022年12月海安市人民医院就诊的CHB肝纤维化患者100例列入观察组,按照肝纤维化程度分为S0组(n=22)、S1组(n=25)、S2组(n=23)、S3组(n=15)和S4组(n=15);选择同期健康体检人员50名,列入对照组。比较观察组和对照组的LSM、TGF-β1和TIMP-1水平,以及不同纤维化组的血小板、肝功能和肝纤维化指标水平。Pearson相关性分析LSM与TGF-β1和TIMP-1的相关性;受试者工作特征曲线下面积评估LSM、TGF-β1和TIMP-1对CHB肝纤维化的诊断效能。结果观察组的LSM、TGF-β1和TIMP-1水平分别为(9.32±1.82)kPa、(113.42±10.98)pg/mL和(199.08±23.56)μg/L,均高于对照组的(2.41±0.25)kPa、(24.53±5.64)pg/mL和(120.32±14.53)μg/L,差异有统计学意义(t=26.685、53.758、21.653,均P<0.05)。CHB患者的PLT和血清Alb水平随着肝纤维化分期的增加依次降低,血清ALT、AST、γ-GT、TBil、DBil、HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN水平以及FIB-4指数随着肝纤维化分期的增加依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。CHB患者的LSM、TGF-β1和TIMP-1水平均随着肝纤维化分期的增加依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson分析显示,LSM与TGFβ1、TIMP-1均呈正相关(r=0.564、0.587,P<0.05)。LSM诊断CHB肝纤维化的AUC、敏感度、特异度分别为0.887、89.70%、85.49%,高于血清TGFβ1和TIMP-1的0.854、85.64%、83.78%和0.821、83.05%、80.56%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LSM、TGFβ1和TIMP-1水平与CHB患者的肝纤维化严重程度密切相关,LSM的评估效能更佳。

基于补体C3及TGFβ1/Smad信号通路探究七氟烷麻醉对老龄小鼠突触可塑性及工作记忆力损伤的机制

目的探讨补体C3及TGFβ1/Smad信号通路在七氟烷麻醉对老龄小鼠突触可塑性及工作记忆力损伤中的作用。方法将90只C57BL/6小鼠随机分为3组,对照组、七氟烷麻醉组和七氟烷麻醉+补体C3抑制剂组。用Y迷宫试验检测工作记忆,用q RT-PCR法检测C1q和C3 mRNA表达;用长时程增强效应(LTP)评价突触可塑性,用Western blot法检测TGFβ1/Smad3通路蛋白表达。结果七氟烷麻醉抑制小鼠自发交替率和LTP实验的群峰电位(PS)增幅,促进C1q和C3 mRNA及TGFβ1和Smad3蛋白表达;补体分子C3抑制剂促进小鼠自发交替率和PS增幅,抑制C1q和C3 mRNA及TGFβ1和Smad3蛋白表达。结论七氟烷麻醉可导致老龄小鼠工作记忆水平和突触可塑性下降,其机制可能与补体C3介导TGFβ1/smad信号通路有关。

同种异体骨移植辅助PRP技术对Hepple V型距骨骨软骨损伤患者短期效果及TGF⁃β1、PDG、VEGF的影响

目的分析同种异体骨移植辅助富血小板血浆技术(PRP)技术对HeppleV型距骨骨软骨损伤患者短期效果及转化生长因子β1(TGF⁃β1)、血小板衍生生长因子(PDG)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法选择河北省沧州中西医结合医院自2021年7月至2022年11月间收诊的116例HeppleV型距骨骨软骨损伤患者,根据不同的治疗方案分为对照组(自体骨软骨移植治疗,n=57)、研究组(同种异体骨移植辅助PRP技术治疗,n=59),对比两组临床相关指标情况[视觉模拟量表(VAS)、完全负重时间、住院时间]、踝功能情况[囊肿直径、踝与后足功能评分(AOFAS)、核磁共振关节软骨损伤修复评估表(MOCART)]、生长因子水平(TGF⁃β1、PDG、VEGF)、短期疗效、并发症情况。结果研究组治疗后VAS评分小于对照组,其完全负重时间、住院时间明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组囊肿直径减少,AOFAS评分、MOCART评分升高,其中研究组各项指标改善更明显,差异有统计学意义(P<0.05);与治疗前比较,治疗后两组TGF⁃β1水平降低,PDG、VEGF水平升高,其中研究组三种因子变化更明显,差异有统计学意义(P<0.05);研究组短期治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组骨不连、骨折愈合延迟、伤口感染的总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论同种异体骨移植辅助PRP技术对HeppleV型距骨骨软骨损伤患者短期治疗效果明显,可改善患者TGF⁃β1、PDG、VEGF因子水平,有较高的临床应用价值,可经深入试验后推广应用。

芪倍合剂对UC小鼠模型TGF-β1/Smad2信号通路及Th17/Treg平衡、炎性细胞因子表达的影响

目的探究芪倍合剂对溃疡性结肠炎(UC)小鼠模型转化生长因子(TGF)-β1/Smad2信号通路及T辅助细胞(Th)17/调节T细胞(Treg)平衡、炎性细胞因子表达的影响。方法30只小鼠随机分为对照组、UC组和UC+芪倍合剂组,每组10只。UC组和UC+芪倍合剂组通过葡聚糖硫酸钠构建UC模型,UC+芪倍合剂组通过芪倍合剂灌肠。比较两组结肠黏膜病变情况、外周血炎性细胞因子Th17、Treg和TGF-β1/Smad2信号通路水平。结果与对照组比较,UC组干预后每日疾病活动指数(DAI)评分、结肠病变程度、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、Th17、Treg、Th17/Treg及结肠黏膜和淋巴细胞中的TGF-β1/Smad2通路水平显著升高,IL-4水平显著降低(P<0.05)。UC+芪倍合剂组干预后DAI评分、结肠病变程度、TNF-α、IL-1、Th17、Treg、Th17/Treg及结肠黏膜和淋巴细胞中TGF-β1/Smad2通路水平显著低于UC组,IL-4水平显著高于UC组(P<0.05)。结论芪倍合剂可以通过抑制结肠黏膜和淋巴细胞中TGF-β1/Smad2通路抑制炎性反应和调节Treg/Th17细胞平衡,从而起到缓解UC的作用。

FGF对关节软骨细胞基质及其TGFβ_1表达的作用

目的：观察成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）对培养兔关节软骨细胞基质及转化生长因子β１（ＴＧＦβ１ ）表达的影响。方法：培养１月龄新西兰兔关节软骨细胞，在每次换液时加入ＦＧＦ１００ ｎｇ／ｍ ｌ，铺满后收集细胞，作关节软骨细胞ＴＧＦβ１检测及电镜免疫组织化学观察。采用氯胺Ｔ法和Ａｎｔｏｎｏｐｏｕｌｏｓ法，作细胞基质的胶原和蛋白多糖含量测定。结果：ＦＧＦ能明显促进胶原和蛋白多糖的合成，并且与剂量、时间呈正相关（Ｐ＜ ０．０１）。光镜下实验组细胞明显呈棕色，电镜下细胞膜表面有明显的胶金颗粒粘附。结论：ＦＧＦ能促进关节软骨细胞ＴＧＦβ１ 的表达及基质合成，推迟了关节软骨细胞的成熟，维持细胞的软骨表现型，这些作用有利于关节软骨损伤后的修复，可能具有一定的临床意义。

软肝冲剂对CCl_4肝纤维化大鼠TGFβ_1mRNA表达的影响

目的 :研究软肝冲剂对CCl4肝纤维化大鼠转化生长因子 β1(TGFβ1)mRNA表达的影响 ,从分子水平探讨软肝冲剂促进肝细胞再生、阻止肝纤维化、肝硬化形成的作用机制。方法 :采用Northern blot方法检测CCl4肝纤维化大鼠TGFβ1mRNA表达。结果 :Northern blot杂交显示 ,实验第 45、90天 ,模型组、中药各组和西药秋水仙碱组大鼠肝脏TGFβ1mRNA表达均较正常组增强 (P <0 0 1)。但中药各组和西药秋水仙碱组TGFβ1mRNA表达水平均低于模型组(P <0 0 1)。其中中药高剂量组TGFβ1mRNA表达水平均低于中药低剂量组和西药秋水仙碱组 (P <0 0 1)。结论 :软肝冲剂能调节CCl4肝纤维化大鼠TGFβ1mRNA表达 ,促进肝细胞再生 ,抑制肝纤维化、肝硬化的形成。

鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化大鼠TGF-β_1mRNA表达的影响

目的 :观察中药复方鳖甲煎丸对免疫性纤维化模型大鼠肝组织细胞因子TGF -β1 mRNA表达的影响 ,分析鳖甲煎丸的治疗作用 ,探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机理 ;并与西药秋水仙碱作对照 ,为临床防治肝纤维化用药提供科学依据。方法 :雄性Wistar大鼠 90只随机分为 6组 :正常对照组、模型对照组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、鳖甲煎丸预防组、鳖甲煎丸治疗组 ,选用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型。各组于 10周后取 10只大鼠断头处死 ,取肝组织 ,用原位杂交法检测肝组织内TGF -β1 mRNA。结果 :鳖甲煎丸能够明显减少TGF -β1 mRNA的表达 ,作用接近或优于秋水仙碱 ,显示它具有明显的抗纤维化作用。鳖甲煎丸和秋水仙碱的预防效果同治疗效果相比差异均不显著。

龙血竭对大鼠肺损伤间质过度修复及其TGFβ_1mRNA表达的影响

目的:探讨龙血竭(LXJ)对博莱霉素肺损伤大鼠肺间质过度修复及其TGFβ1mRNA表达的调控作用。方法:60只健康SD大鼠,随机分为生理盐水组(NS)、博莱霉素肺损伤组(BLM)及龙血竭组(LXJ),每组20只,再分成两亚组,每亚组10只,通过博莱霉素一次性气管内滴入复制肺损伤修复大鼠模型,并在肺损伤修复过程中予龙血竭灌胃干预,分别于14和28天取大鼠肺组织,运用组织芯片,进行HE、胶原纤维染色及免疫组化分别定量肺内炎性细胞数、胶原蛋白、I型胶原,用实时荧光定量RT-PCR技术定量转化生长因子beta(TGFβ1)mR-NA的表达。结果:龙血竭对两时相肺组织的炎症程度和胶原(IOD分别从0.5492±0.2105和0.9578±0.3756降至0.2749±0.1592和0.3181±0.1210)及28天的I型胶原过度沉积(IOD从0.9348±0.3774降至0.5045±0.2796)皆有明显抑制作用(P<0.05),对两时相TGFβ1mRNA表达(从0.0219±0.0110和0.0170±0.0157分别降至0.0083±0.0024和0.0062±0.0051)有明显下调的作用(P<0.05)。结论:龙血竭具有抑制炎症性肺损伤促进修复,并可通过抑制胶原尤其是I型胶原的过度沉积而调控肺损伤肺间质过度修复之作用,后者可能主要与下调肺组织TGFβ1mRNA的表达有关。

葶苈子对压力负荷大鼠心肌CYP11B1、CYP11B2及TGF-β_1 mRNA表达的影响

目的:研究葶苈子水提液对压力负荷大鼠心肌CYP11B1、CYP11B2及TGF-β1 mRNA表达的影响。方法:腹主动脉不完全结扎法(AAB)制作大鼠心肌肥厚、心室重构模型。药物干预30d后,称重法测定心脏指数(HW/BW)、左室重量指数(LVW/BW),Real-Time PCR反应技术,以Rat 18S为内参照,测定心肌CYP11B1,CYP11B2,TGF-β1 mRNA的表达水平。结果:模型组大鼠心脏指数增高,醛固酮合成基因和转化生长因子β1表达增强。葶苈子水提液能改善心肌肥厚指数,降低大鼠心肌醛固酮合成基因CYP11B1、CYP11B2及TGF-β1的mRNA表达水平。结论:葶苈子水提液可能通过抑制心肌醛固酮合成相关基因CYP11B1、CYP11B2 mRNA表达水平,降低转化生长因子β1的合成而抑制心室重构的发生。

自发性高血压大鼠TGF β_1/Smad7通路与心室纤维化的关系

【目的】探讨自发性高血压大鼠心室纤维化过程中TGFβ1和其下游分子Smad7蛋白的表达规律。【方法】雄性自发性高血压大鼠(SHR)14只随机分为2组,SHR22周龄组和SHR14周龄组,另14只WKY大鼠也分为WKY大鼠22周龄组和WKY大鼠14周龄组。在实验动物14周龄和22周龄时,分别测定血压、心室质量指数;以氯胺T法测定心肌羟脯氨酸的含量,免疫组化测定Ⅰ型和Ⅲ型胶原在心肌组织中的表达水平;RT-PCR和Western-blot测定心肌中TGFβ1和其下游分子Smad7的表达。【结果】自发性高血压大鼠在14周龄和22周龄时收缩压都显著高于同龄的WKY大鼠(P<0.001),同时22周龄SHR的收缩压也比14周龄明显升高(P<0.001)。与SHR14周龄组相比,SHR22周龄组的心室质量指数、心肌羟脯氨酸的含量、Ⅰ型和Ⅲ型胶原均明显增加(P<0.01);在mRNA水平或蛋白水平,心肌中的TGFβ1的表达上调,Smad7的表达下调。【结论】在一定的时间窗内,自发性高血压大鼠血压的升高及心肌纤维化随着病程的进展而发展,同时伴随着TGFβ1的表达上调,Smad7的表达下调。