葶苈子对压力负荷大鼠心肌CYP11B1、CYP11B2及TGF-β_1 mRNA表达的影响

目的:研究葶苈子水提液对压力负荷大鼠心肌CYP11B1、CYP11B2及TGF-β1 mRNA表达的影响。方法:腹主动脉不完全结扎法(AAB)制作大鼠心肌肥厚、心室重构模型。药物干预30d后,称重法测定心脏指数(HW/BW)、左室重量指数(LVW/BW),Real-Time PCR反应技术,以Rat 18S为内参照,测定心肌CYP11B1,CYP11B2,TGF-β1 mRNA的表达水平。结果:模型组大鼠心脏指数增高,醛固酮合成基因和转化生长因子β1表达增强。葶苈子水提液能改善心肌肥厚指数,降低大鼠心肌醛固酮合成基因CYP11B1、CYP11B2及TGF-β1的mRNA表达水平。结论:葶苈子水提液可能通过抑制心肌醛固酮合成相关基因CYP11B1、CYP11B2 mRNA表达水平,降低转化生长因子β1的合成而抑制心室重构的发生。

厄贝沙坦联合阿托伐他汀治疗对早期糖尿病肾病患者血清Cys C、Hcy、TNF-α、ET、TGF-b1水平的影响

目的:研究分析厄贝沙坦联合阿托伐他汀治疗对早期糖尿病肾病患者血清Cys C、Hcy、TNF-α、ET、TGF-b1水平的影响。方法:60例早期糖尿病肾病患者随机分为对照组和观察组,各30例。两组均采取常规降糖治疗等措施,同时观察组给予厄贝沙坦联合阿托伐他汀治疗,对照组仅给予厄贝沙坦治疗。记录比较患者治疗前后各项生化指标以及血清Cys C、Hcy、TNF-α、ET、TGF-b1水平。结果:(1)治疗前,两组FBG、TG、Scr、BUN水平之间的差异无统计学意义(P>0.05);在治疗结束后,两组TG、Scr、BUN水平均较同组治疗前明显降低,差异具有显著性(P<0.05),且观察组TG、Scr、BUN水平降低程度均优于对照组,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05);(2)治疗前,两组血清Cys C、Hcy、TNF-α、ET、TGF-b1水平之间的差异无统计学意义(P>0.05);在治疗结束后,两组血清Cys C、Hcy、TNF-α、ET、TGF-b1水平均较同组治疗前明显降低,差异具有显著性(P<0.05),且观察组血清C、Hcy、TNF-α、ET、TGF-b1水平降低程度均优于对照组,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:对早期糖尿病肾病患者使用厄贝沙坦和阿托伐他汀联合治疗,可显著改善患者各生化指标和细胞因子等的血清水平,保护患者肾功能。

良性胆管狭窄组织中TGF-β_1及TβRⅠ的表达意义

目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子-βⅠ型受体(TβRⅠ)在良性狭窄胆管组织中的表达,探讨其信号转导在良性胆管狭窄形成机制中的作用.方法:采用免疫组织化学SABC法检测TGF-β1,TβRⅠ在23例良性狭窄胆管组织、6例正常胆管组织中的表达.结果:TGF-β1,TβRⅠ在狭窄胆管组织中的阳性率分别为91.3%,82.6%,在正常胆管组织中的阳性率分别为33.3%,16.7%,组间有明显差异(P<0.05).结论:良性胆管狭窄组织中TGF-β1,TβRⅠ的高表达是造成成纤维细胞增殖旺盛,细胞外基质过度沉积,瘢痕增生的重要因素.

中医复方对狼疮性肾炎患者HMGB1、IL-10和TGF-β_1改变作用研究

目的：观察中医复方对狼疮性肾炎患者高迁移率族蛋白1（HMGB1）、白细胞介素-10（IL-10）和转化细胞生长因子-β1（TGF-β1）的改变作用。方法：选取本院自2011年4月～2013年4月间收治的狼疮性肾炎患者124例，分为观察组（60例）和对照组（64例）；观察组给予中医复方治疗，对照组给予激素治疗。比较2组患者临床疗效和HMGB1、IL-10和TGF-β1检测指标的改变情况。结果：观察组总有效率为91．7％，对照组为81．3％，2组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。2组HMGB1、1IL-10、TGF-β1治疗前后组内比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）。2组治疗后HMGB1、TGF-β1比较，差异也有显著性意义（P〈0．05）。结论：中医复方治疗狼疮性肾炎患者有较好的临床疗效，且能改善患者血清HMGB1、IL-10和TGF-β1水平，对病变的肾脏组织有着很好地修复作用。

TGF-β1基因修饰的肝干细胞诱导大鼠移植肝脏免疫耐受的实验研究

目的探讨TGF-β1基因修饰的肝干细胞对大鼠移植肝脏的免疫耐受的影响。方法采用Kamade的"二袖套法"行SD大鼠对Wistar大鼠的异种原位肝脏移植动物模型,根据处理方式的不同将动物分为对照组(生理盐水和地塞米松)、干细胞组(肝干细胞和地塞米松)和实验组(TGF-β1基因修饰的肝干细胞和地塞米松)。记录各组动物的手术基本情况,观察受鼠的存活时间,相比术后24 h后移植肝组织的肝功能指标冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、丙氨酸转氨酶(ALT)和白蛋白(ALB),比较各组动物肝脏的病理。结果与对照组和干细胞组相比,实验组动物存活时间明显延长,肝功能好转。实验组AST、TBIL、ALT和ALB与其他两组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。在肝脏病理中,实验组的免疫排斥反应明显降低。结论 TGF-β1基因修饰的肝干细胞对移植肝脏具有保护作用,在急性免疫排斥方面具有明显的抑制作用。

IgA肾病大鼠模型血清IL-2和IL-6变化对肾小管上皮细胞TGF-β_1表达的影响

目的观察IgA肾病大鼠模型血清白介素-2(IL-2)和血清白介素-6(IL-6)变化对肾纤维化的影响。方法根据IgA肾病大鼠模型的血清IL-2和IL-6浓度各设置3个浓度梯度(IL-2:10、30和90 pg/mL;IL-6:100、300和600 pg/mL),分别单独和联合干预肾小管上皮细胞(RTEC),采用免疫组织化学法检查转化生长因子β1(TGF-β1)在各组细胞的表达。结果 IL-2单独干预对肾小管上皮细胞TGF-β1表达无影响(P<0.05);而IL-6能直接增强肾小管上皮细胞TGF-β1表达(P<0.01)。IL-2和IL-6对肾小管上皮细胞TGF-β1表达存在交互作用;当IL-2=90 pg/mL,IL-6=300 pg/mL时,TGF-β1表达量最高(P<0.01)。结论血清IL-2和IL-6变化,特别是IL-6的升高可能与TGF-β1介导的IgA肾病肾纤维化有关。

重症肌无力患者血清TGF-β_1和sICAM-1的检测及其临床意义

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)及可溶性细胞间粘附分予(sICAM-1)在重症肌无力(MG)发病中的作用及其临床意义。方法 采用酶联免疫吸附ELISA方法.测定了32例MG患者及30名正常对照组(NC)血清TGF-β1和sICAM-1的水平。结果 与NC组相比,MG患者血清TGF-β1明显降低(P<0.01),而sICAM-1水平则明显升高(P<0.01)。与轻型组比较,重型组TGF-β1水平明显降低(P<0.01),而sICAM-1水平则明显升高(P<0.01)。动态观察显示,治疗后随着病情的好转,TGF-β1水平逐渐升高,而sIMCA-1水平则逐渐下降。结论TGF-β1和sICMA-1可能参与了MG的发病机制,且与病情的轻重有密切关系。

TGF—β_1表达与小鼠病毒性心肌炎细胞凋亡的关系

本实验通过给BALB/C小鼠腹腔接种柯萨奇B_(-3m)病毒(CVB_(3m))诱发病毒性心肌炎(VMC),感染病毒9d后,VMC检出率93.33％。应用原位末端标记法(T/VNEL)及免疫组化技术检测发现:76.67％感染病毒鼠心肌中发现凋亡细胞,73.33％有TGF—β_1的表达,二者之间分布区域一致。提示细胞凋亡可能参与CVB_(3m)诱导的VMC的发生、发展,而TGF—β_1可能参与VMC细胞凋亡的调控。

复方落地生根膏对溃疡愈合过程中TGF-β1/TIMP-1表达的影响

目的通过对大鼠皮肤溃疡愈合过程中肉芽组织TGF-Β1和TIMP-1含量的动态观察,探讨复方落地生根膏促进大鼠溃疡愈合的机制。方法制备大鼠创伤性溃疡模型120只,随机分为对照组、实验对照组和实验组,每组各40只。三组分别用生理盐水纱块、生长因子纱块和复方落地生肌膏外敷伤口,实验对象每日肌注青霉素8000u。每组40只SD大鼠随机分4次、每次10只于实验的1、7、14及皮肤愈合时取材。采用RT-PCR法检测TGF-Β1和TIMP-1含量。结果实验组和实验对照组能显著缩短创面愈合时间(P<0.05),改善瘢痕质量;TGF-Β1/TIMP-1在溃疡愈合过程中的表达具有时间相关性,TGF-Β1表达趋势呈抛物线样改变,高峰出现在创面愈合中期,而TIMP-1表达呈直线上升,高峰出现在愈合晚期。结论复方落地生根膏可通过调节组织愈合过程中TGF-Β1和TIMP-1的表达而促进创面愈合并改善瘢痕质量,与常用的生长因子相比,具有简便廉验的特点,值得临床推广。

高容量通气对兔肺组织肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、转化生长因子-β_1表达的作用

目的:探讨高容量机械通气对大白兔肺组织TNF-α、IL-1β、TGF-β1的作用。方法:将30只3月龄雄性大白兔随机分成3组:对照组、常规潮气量组及大潮气量组,每组各10只。对照组插管后不机械通气,另2组插管后机械通气。常规潮气量组VT8mL/kg,大潮气量组VT25mL/kg,其它参数相同,通气时间24h。观察实验前后动脉血pH值、PaO2及PaCO2的变化、ELISA法测定肺组织TNF-α、IL-1β,SABC法测定TGF-β1、测定肺组织湿/干重(W/D)值、观察肺组织病理学变化。结果:与对照组比较,大潮气量组通气24h后动脉血pH、PaO2和PaCO2变化显著(均P<0.05),肺组织W/D、TNF-α、IL-1β、TGF-β1升高(均P<0.01),肺组织水肿,常规潮气量组相应指标无显著变化(P>0.05)。结论:大潮气量机械通气易发生呼吸机相关性肺损伤(VILI),表现为动脉氧分压、肺组织W/D、肺组织病理变化,同时肺组织TNF-α、IL-1β、TGF-β1升高,表明VILI与TNF-α、IL-1β、TGF-β炎性细胞因子有关。

益肾活血方对糖尿病肾病大鼠肾组织中转化因子-β_1/p38丝裂原活化蛋白激酶信号传导的影响

【目的】探讨益肾活血方对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织中转化因子-β1/p38丝裂原活化蛋白激酶(TGF-β1/p38MAPK)表达的影响。【方法】选用SD大鼠,随机分为正常组、模型组、治疗组(给予19.5 g.kg-1.d-1的益肾活血方药液灌胃),采用链脲佐菌素(55 mg/kg)一次性腹腔注射复制DN模型。采用全自动生化分析仪检测各组大鼠24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清白蛋白(ALB)、血糖水平;Leica Qwin Plus图像分析系统测量肾小球直径、肾小管短径和完整肾小管数目,并称取各组大鼠左肾质量、计算肥大指数;过碘酸雪夫反应(PAS)染色观察各组大鼠肾组织病理变化;免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、p38MAPK表达。【结果】治疗组能够降低模型大鼠肾组织TGF-β1、p38MAPK的表达及24 h尿蛋白、Scr、BUN、血糖水平,升高ALB水平,缩小肾小球直径及肾小管短径,增加完整肾小管数量,改善肾组织病理变化,降低肾质量及肥大指数,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。【结论】益肾活血方可能通过影响DN大鼠肾组织TGF-β1/p38MAPK的表达而改善上述生化指标,减轻肾脏病理损害。

肺表面活性物质对肺损伤胎兔肺组织转化生长因子β1表达的影响

目的:探讨羊膜腔内注射肺表面活性物质(PS)对宫内感染致肺损伤胎兔的肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法:选取健康成年育龄日本大耳白兔19只,成功受孕后随机分为对照组、细菌组、细菌+PS组,建立宫内感染模型。对照组和细菌组按胎龄又分为21、22、23、24、26 d 5个亚组,细菌+PS组分为24、26 d 2个亚组。细菌组宫内注射E.coli菌株,细菌+PS组宫内注射E.coli菌株的同时羊膜腔内注射PS200 mg/kg,对照组宫内注射生理盐水。模型建成后分别在各时相点取胎兔肺组织,免疫组织化学法检测肺组织内TGF-β1表达;RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达;Western blotting法检测TGF-β1蛋白表达。结果:对照组TGF-β1蛋白在支气管上皮或血管内皮细胞及其周围的结缔组织有阳性表达,细菌组、细菌+PS组TGF-β1阳性蛋白表达量增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β1mRNA、蛋白表达在细菌感染后明显上调,3组比较,差异有显著统计学意义(F=631.109、183.980,P=0.000)。结论:宫内感染后胎肺TGF-β1高表达是肺损伤的高危因素。羊膜腔内注射PS可使TGF-β1表达下降,对减轻肺损伤、促进肺发育具有积极作用。

香叶醇对人肝癌细胞株Huh7增殖及TGF-b1/Smad 2信号通路影响研究

目的:探讨香叶醇对肝癌细胞株Huh7增殖及TGF-b1/Smad 2信号通路的影响。方法:不同浓度香叶醇干预体外培养肝癌细胞株Huh7不同时间。MTT检测香叶醇对Huh7细胞生长情况的影响,流式细胞术检测细胞周期的变化情况,RT-PCR和Western blot分别检测细胞内TGF-b1和Smad 2 m RNA和蛋白表达水平的变化情况。结果:MTT结果显示香叶醇显著抑制了肝癌细胞的生长。流式细胞结果表明香叶醇明显降低了肝癌细胞S期含量而增加了G0/G1期含量。而TGF-b1和其下游因子Smad2的m RNA和蛋白水平的表达也明显受到香叶醇的抑制,且这种抑制作用呈浓度一时间依赖性。结论:香叶醇可能够通过阻断TGF-b1/Smad 2信号通路抑制肝癌细胞生长。

角膜营养不良家系患病角膜细胞角蛋白及b-FGF与TGF—bl表达的研究

目的了解深圳地区一角膜营养不良家系中患病角膜中细胞角蛋白，纤维组织相关的碱性成纤维细胞因子（b—FGF）和转化生长因子（TGF—b1）的表达改变。方法分别按照SABC免疫组织化学方法及双夹心ELISA方法检测家系中5例受累颗粒状营养不良角膜及1例格子状角膜营养不良角膜中高、低分子量细胞角蛋白的分布表达情况，以及h—FGF和TGF—bl的表达，散发4例格子状角膜营养不良角膜及4例意外死亡者的正常角膜做为对照。结果高、低分子量细胞角蛋白在本角膜营养不良家系患者的角膜中分别有100％及66．7％的阳性表达（阳性／弱阳性均计入阳性表达率），散发性格子状营养不良角膜均有弱阳性的表达，正常角膜则没有表达。b—FGF在各组角膜中的表达无明显差异。TGF的含量在家系颗粒状角膜营养不良的角膜中平均为1．225±0．867pg／ml，与正常角膜中的含量无明显差异；家系格子状角膜营养不良的角膜中为4．0pg／ml，比正常角膜明显增多（t检验t=36．373，P=O．017）；散发格子状角膜营养不良的角膜中平均为（8．375±0．667）pg／ml，比正常角膜明显增多（t检验t=9．413，P=0．020）；正常角膜中TGF的含量平均为（0．0625±0．0088）pg／ml。结论细胞角蛋白在本家系颗粒状角膜营养不良及格子状角膜营养不良均有表达，高分子量细胞角蛋白的表达更明显，其发病与角膜上皮表达细胞角蛋白的增多有关联。家系中的主要角膜营养不良类型（颗粒型）的患病角膜组织中TGF—bl及b—FGF的含量均无明显改变。格子状角膜营养不良（包括家系及散发）的角膜组织中TGF—bl的含量明显增加，其发病与板层纤维增生有一定的关联。

DAPT对肺成纤维细胞表型转化中Wnt信号通路的影响

目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路与Notch信号通路之间存在间接或直接的相互作用以及该信号通路在DAPT抑制肺成纤维细胞增殖中的作用表达。方法:通过使用TGF-β1刺激SD大鼠胚肺成纤维细胞发生表型转化为肌成纤维细胞,并采用DAPT抑制Wnt/β-catenin信号通路,体外纯化肺成纤维细胞,使用细胞免疫荧光检测波形蛋白进行鉴定;分别采用5ng/mLTGF-β1和500nmol/L的DAPT作用于肺成纤维细胞24h,观察其形态学改变;分别采用RT-PCR及Western blot检测wnt1、β-catenin在肺成纤维细胞经TGF-β及DAPT作用24h后的表达情况。结果:与正常组相比较TGF-Β1能显著增加肺成纤维细胞中β-catenin的表达(P<0.05),但加用DAPT后wnt1及β-catenin在肺成纤维细胞中的表达下降(P<0.05)。结论:Wnt/β-catenin信号通路与Notch信号通路之间是存在相互关系的,TGF-β1可使肺成纤维细胞中的β-catenin表达增高;DAPT对于抑制肺成纤维细胞中的wnt/β-catenin信号通路发挥了作用。

二氧化硅对人支气管上皮细胞TGF-β1基因产物表达的影响分析

目的分析人支气管上皮细胞(16HBE)在二氧化硅(SiO2)粉尘染毒后TGF-β1基因产物的表达情况,为探索矽肺新的治疗途径提供基础资料。方法以16HBE作为靶细胞,以灭菌SiO2粉尘配置30μg/ml及60μg/ml两种不同浓度的悬浮液(以含10%FBS的DMEM培养基定溶),以不同浓度的SiO2粉尘悬液分别培养16HBE靶细胞8h、16h、24h、32h,各做三个平行实验孔,同时,做10%FBS的DMEM空白对照;以免疫细胞化学方法检测TGF-β1基因产物的表达。结果在经30ug/ml及60ug/mlSiO2粉尘悬浮液培养8h、16h、24h、32h后,各实验孔16HBE细胞扫描灰度值均较对照组细胞低,结果提示,16HBE细胞经SiO2粉尘染毒后TGF-β1基因产物表达增加。结论体外实验条件下,SiO2粉尘可上调16HBE细胞TGF-β1基因产物的表达。

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯诱导大鼠尿道下裂及对阴茎TGF-β1、TGF-βR3表达的影响

目的:探讨诱导建立大鼠先天性尿道下裂,研究邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)及胎鼠阴茎内转化生长因子(TGF-β1,TGF-βR3)在尿道下裂发生机制中的意义。方法:SD孕鼠随机分为DEHP组(每日500 mg/kg)和大豆油对照组,每组20只。分别于母鼠孕12 d至19 d(GDl2～19)持续经口灌注给药。每组分别留取10只孕鼠让其正常分娩,出生第1日计数新生大鼠,并在解剖显微镜下测量雄性新生鼠的肛门生殖器距离(AGD)和称体质量;雄性仔鼠70日龄时逐个检查尿道下裂的发生情况。另10只孕鼠于孕第19日行剖宫产取仔鼠,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测胎鼠阴茎TGF-β1、TGF-βR3 mRNA的表达水平。结果:DEHP成功诱导出尿道下裂大鼠动物模型,DEHP组仔鼠体质量及AGD较对照组明显缩小(P<0.05)。DEHP组胎鼠阴茎TGF-β1、TGF-βR3 mRNA表达水平增加(P<0.05)。结论:DEHP成功诱导建立先天性尿道下裂大鼠模型,胎鼠阴茎内TGF-β1、TGF-βR3异常表达可能是尿道下裂的发生机制之一。

黄芪提取物对肺纤维化小鼠肺泡炎症影响及抗纤维化作用研究

目的:研究黄芪多糖、黄芪总黄酮、和黄芪总皂苷对博莱霉素(BLM)诱导肺纤维化KM小鼠肺泡炎症影响及抗肺纤化的作用。方法:KM小鼠随机分为假手术组、模型组、药物处理组(黄酮组、多糖组、皂苷组、皂苷+黄酮组)共6组,模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注BLM,假手术组予等量生理盐水,造模后予相应药物或生理盐水灌胃,第28天取材;分别行肺泡灌洗液细胞计数分类,肺组织HE、Masson染色,免疫组化及western blot测TGF?β1、TNF?α表达水平。结果:1与对照组比较,模型组肺泡灌洗液(BALF)单核细胞和巨噬细胞明显增多(P<0.05),黄芪黄酮治疗组改善较明显,且优于其他成份组(P<0.05);2 Masson结果和HE结果具有高度一致性,炎症反应强度和纤维化程度成正比。黄芪总黄酮能明显改善肺纤维化炎症反应,抑制早期纤维化结节出现,黄芪多糖和黄芪皂苷改善作用不如黄芪黄酮;3模型组TNF?α、TGF?β1免疫组化阳性颗粒明显比对照组增多,与模型组比较,黄芪黄酮能有效降低TNF?α、TGF?β1水平,黄芪多糖组和黄芪皂苷组与模型组比较虽有一定改善,但是效果不如黄芪黄酮;黄芪皂苷+黄酮联合应用无协同作用;4蛋白印迹结果与免疫组化结果具有一致性。结论:黄芪黄酮能有效抑制肺纤维化炎症反应及后期的纤维化过程,该抑制作用与抑制TNF?α、TGF?β1表达具有密切关系。

干眼患者结膜上皮细胞的凋亡与炎症

目的了解干眼患者结膜上皮细胞是否存在凋亡与炎症状态,进一步理解干眼的发病机制。方法印迹细胞法获得干眼6例22眼和正常人7例10眼的结膜上皮细胞。Annexin V-FITC/PI流式细胞技术(flow cytometric.FCM)定量检测凋亡;免疫印迹细胞化学染色检测核转录因子-kB(NF-kB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果干眼患者结膜上皮细胞的凋亡指数较正常对照组明显增高(P<0.05),NF-kB和TGF-β1的表达较正常增强。凋亡指数与NF-kB和TGF-β1的表达呈正相关。结论干眼患者结膜上皮存在细胞凋亡及炎症,眼表上皮细胞的炎症可能是引起细胞凋亡的重要原因,抑制炎症是干眼的重要治疗方法。

人体皮肤创伤组织细胞因子表达的时间相关性

目的探讨TGF-β1、b—FGF和VEGF在人体皮肤创伤组织中的表达变化及其与损伤时间的关系。方法收集15例机械性致伤的人体皮肤组织(受伤5—120min内死亡),常规制作组织切片后进行免疫组化染色,并统计分析TGF-β1、b—FGF和VEGF因子的表达情况。结果 TGF-β1在16—50min组表达升高,60～120min组呈阳性至强阳性表达;b—FGF在16—50min组表达升高明显,强阳性表达亦出现在60～120min组;VEGF仅在60—120min组出现阳性表达。统计学分析表明,TGF—β1和b—FGF的表达升高分别在受伤60~120min(P【0.01)和在16—50min(P【0.01)有显著性意义,VEGF表达升高只在60~120min(P【0.05)有显著性意义。结论 TGF-β1、b—FGF和VEGF的表达时间和表达强度与损伤时间有关;TGF-β1、b—FGF和VEGF的表达可为人体短存活期损伤时间的推断提供参考。