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祛瘀护膜法干预TGF-β/Smad通路调控E-钙黏蛋白对反流性食管炎大鼠食管黏膜修复的影响
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作者 王敏 胡绍江 +6 位作者 吴婷婷 徐心怡 王爱民 丁姮月 杨欣 朱惠萍 孙宏文 《中医药导报》 2024年第12期20-27,37,共9页
目的:研究祛瘀护膜法对反流性食管炎(RE)大鼠食管TGF-β/Smad通路及E-钙黏蛋白(E-Cadherin)表达的影响。方法:使用“4.2 mm幽门夹+2/3胃底结扎术”建立RE大鼠模型56只,造模成功后,随机分为西药组1、西药组2、治疗组、优化组、祛瘀护膜... 目的:研究祛瘀护膜法对反流性食管炎(RE)大鼠食管TGF-β/Smad通路及E-钙黏蛋白(E-Cadherin)表达的影响。方法:使用“4.2 mm幽门夹+2/3胃底结扎术”建立RE大鼠模型56只,造模成功后,随机分为西药组1、西药组2、治疗组、优化组、祛瘀护膜剂组、加味祛瘀护膜剂组,每组8只,另设空白组8只。连续给药14 d,第15天采血后处死大鼠并取出食管组织。采用HE染色光镜下观察食管组织病理变化;透射电镜观察食管上皮细胞间隙;ELISA法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;RT-PCR法检测Snail m RNA、Slug m RNA、Twist m RNA、E-Cadherin m RNA表达水平;Western blotting检测TGF-β1、Snail、Slug、Twist、NLRP3、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达水平;免疫组织化学染色测定TGF-β1、E-Cadherin、NLRP3表达。结果:祛瘀护膜法治疗的RE大鼠一般情况好转,体质量增加;食管黏膜损伤改善;上皮细胞间隙呈缩小趋势;食管组织中TGF-β1、Snail、Slug、Twist、NLRP3蛋白表达及Smad2/3磷酸化占比低于模型组(P<0.05),E-Cadherin蛋白及E-Cadherin m RNA表达高于模型组(P<0.05);血清中TNF-α、TGF-β1低于模型组(P<0.05)。结论:祛瘀护膜法可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路,干预该通路介导的E-cadherin表达,促进食管炎黏膜修复,拮抗RE大鼠食管黏膜炎症。 展开更多
关键词 反流性食管炎 祛瘀护膜法 tgf-β/smad信号通路 E-钙黏蛋白 食管黏膜修复 大鼠
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屈膝点按叩揉法影响TGF-β/Smad通路促进损伤肌腱修复的作用机制研究 被引量:2
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作者 王一洲 冯伟 赵强 《天津中医药大学学报》 CAS 2017年第3期205-208,共4页
[目的]通过分析屈膝点按叩揉法对调控肌腱干细胞(TSCs)成肌腱分化相关通路蛋白的影响,探讨该手法对髌腱炎损伤修复的机制。[方法]50只SD大鼠按随机数字表法随机分成5组,每组10只运用局部胶原酶Ⅰ注射建立大鼠髌腱炎模型,造模后治疗组采... [目的]通过分析屈膝点按叩揉法对调控肌腱干细胞(TSCs)成肌腱分化相关通路蛋白的影响,探讨该手法对髌腱炎损伤修复的机制。[方法]50只SD大鼠按随机数字表法随机分成5组,每组10只运用局部胶原酶Ⅰ注射建立大鼠髌腱炎模型,造模后治疗组采用屈膝点按叩揉法治疗,针剂组采用局部糖皮质激素注射治疗,CPM组运用持续被动运动(CPM)治疗仪治疗,模型组及正常组同条件饲养。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测调控肌腱干细胞(TSCs)成肌腱分化相关通路蛋白的表达。[结果]治疗组、针剂组、CPM组转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad-2、腱调蛋白(Tnmd)、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)蛋白的表达均高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组TGF-β1、Smad-2、Tnmd、CollagenⅠ蛋白的表达高于针剂组、CPM组,且差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]屈膝点按叩揉法能够影响TGF-β/Smad信号通路调控TSCs分化行为产生对髌腱炎的修复作用。 展开更多
关键词 屈膝点按叩揉法 tgf-β/smad通路 肌腱 修复
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雄芍汤调节TGF-β/Smad通路有效部位的研究 被引量:2
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作者 李霞 门九章 李孝波 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第7期1547-1551,共5页
目的:研究雄芍汤抗肝纤维化的药效物质基础,筛选其调节TGF-β/Smad通路的有效部位。方法:Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀胶囊组(扶正组)、雄芍汤组(雄芍组)、粗多糖组(多糖组)、总苷组、总生物碱组(总碱组),二甲基亚硝... 目的:研究雄芍汤抗肝纤维化的药效物质基础,筛选其调节TGF-β/Smad通路的有效部位。方法:Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀胶囊组(扶正组)、雄芍汤组(雄芍组)、粗多糖组(多糖组)、总苷组、总生物碱组(总碱组),二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型。造模成功后,开始灌胃给药,治疗组分别给予扶正化瘀胶囊(0.105 g·mL-1)、雄芍汤粗多糖提取物(35.420 mg·mL-1)、雄芍汤总苷提取物(25.725 mg·mL-1)、雄芍汤总生物碱提取物(0.196 mg·mL-1),正常组与模型组灌服等量生理盐水,每日1次,疗程4周。4周后处死取材,实时荧光定量PCR检测肝组织TGF-β1mRNA表达,Western blotting检测肝组织Smad3、Smad7蛋白表达。结果:与模型组比较,各治疗组TGF-β1mRNA、Smad3蛋白表达均显著降低,Smad7蛋白表达均显著升高(P<0.05或P<0.01),总苷组Smad7、总碱组与模型组无显著性差异。结论:粗多糖部位和总苷部位为雄芍汤调节TGF-β/Smad通路的有效部位。 展开更多
关键词 雄芍汤 有效部位 tgf-β/smad通路 实时荧光定量PCR WESTERN BLOTTING
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水蛭提取物对电离辐射诱导的肺泡上皮细胞TGF-β/Smad通路及上皮-间质转化的影响 被引量:3
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作者 杨吉帆 张涛 李春梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1201-1206,共6页
目的:探讨水蛭提取物对电离辐射诱导的肺泡上皮细胞L2上皮-间质转化(EMT)影响及机制。方法:采用MTT法检测水蛭提取物对L2细胞活力的影响以筛选适合的作用浓度。将体外培养的L2细胞分为正常对照组、8 Gy(^(60)Coγ照射剂量)组和8 Gy+0.50... 目的:探讨水蛭提取物对电离辐射诱导的肺泡上皮细胞L2上皮-间质转化(EMT)影响及机制。方法:采用MTT法检测水蛭提取物对L2细胞活力的影响以筛选适合的作用浓度。将体外培养的L2细胞分为正常对照组、8 Gy(^(60)Coγ照射剂量)组和8 Gy+0.50 g/L水蛭提取物组和8 Gy+1.00 g/L水蛭提取物组,倒置显微镜观察L2细胞形态变化,免疫荧光法检测L2细胞中E-钙黏附蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,RT-qPCR和Western blot检测E-cadherin、α-SMA、TGF-β、Smad2、Smad3 mRNA及蛋白表达,Transwell细胞迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力。结果:与0 g/L相比,2.00和4.00 g/L水蛭提取物作用48 h后L2细胞存活率显著降低(P<0.05),0.125、0.25、0.50和1.00 g/L水蛭提取物对L2细胞存活率无明显毒性作用(P>0.05),因此选取0.50和1.00 g/L水蛭提取物进行后续实验。8 Gy^(60)Coγ照射后L2细胞由鹅卵形变为长梭形,给予0.50和1.00 g/L水蛭提取物后细胞上述形态变化逐渐恢复。与正常对照组相比,8 Gy^(60)Coγ照射后L2细胞E-cadherin荧光强度减弱,α-SMA荧光强度增强,E-cadherin表达显著降低,α-SMA、TGF-β、Smad2、Smad3表达显著升高,细胞迁移数和划痕愈合率显著升高(P<0.05);0.50和1.00 g/L水蛭提取物作用后可明显逆转8 Gy^(60)Coγ照射所引起的上述变化(P<0.05)。结论:水蛭提取物可抑制电离辐射诱导的肺泡上皮L2细胞EMT,其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad通路活化有关。 展开更多
关键词 电离辐射 水蛭提取物 肺泡上皮细胞 上皮-间质转化 tgf-β/smad通路
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FoxL在TGF-β/Smad通路中对肝星状细胞活化的影响 被引量:1
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作者 熊飞 李昌平 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第23期2396-2399,共4页
肝纤维化是肝脏内弥漫性细胞外基质(特别是胶原)过度沉积的结果,如果肝纤维化进行性发展,常演变为肝硬化.而肝星状细胞的激活则是肝纤维化的核心事件,是细胞外基质分泌的主要细胞,其中的TGF-β/Smad通路是肝星状细胞内主要的信号传导通... 肝纤维化是肝脏内弥漫性细胞外基质(特别是胶原)过度沉积的结果,如果肝纤维化进行性发展,常演变为肝硬化.而肝星状细胞的激活则是肝纤维化的核心事件,是细胞外基质分泌的主要细胞,其中的TGF-β/Smad通路是肝星状细胞内主要的信号传导通路之一,在细胞外基质的合成中起着重要作用.由于在该信号通路下游Smad复合物只能与靶基因形成松散连接,所以必然存在着相应的协同蛋白质使整个复合物紧密连接,而最近研究发现,FoxL转录因子中的FoxL2可能与整个Smad复合物形成了分子伴侣关系,他有可能加强了Smad复合物与靶基因的结合的稳定性. 展开更多
关键词 FOXL2 tgf-β/smad通路 肝星状细胞 螺旋-转角-螺旋
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IL-27调控TGF-β/Smad通路在博来霉素诱导肺纤维化中的作用 被引量:9
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作者 雷雯 张涛 +3 位作者 赵晓远 王颖 李振坤 董昭兴 《昆明医科大学学报》 CAS 2016年第5期9-12,共4页
目的在博来霉素诱导肺纤维化小鼠肺组织中,探讨IL-27是否通过TGF-β/Smad信号通路抑制肺纤维化.方法将40只雄性C57/BL6小鼠随机分为:空白对照组(A组),博来霉素组(B组),博来霉素+白介素27组(C组),博来霉素+白介素27抗体组(D组),每组10只... 目的在博来霉素诱导肺纤维化小鼠肺组织中,探讨IL-27是否通过TGF-β/Smad信号通路抑制肺纤维化.方法将40只雄性C57/BL6小鼠随机分为:空白对照组(A组),博来霉素组(B组),博来霉素+白介素27组(C组),博来霉素+白介素27抗体组(D组),每组10只.于造模后第7、28天每组各处死5只小鼠,取右肺组织用Western Blot的方法检测TGF-βR1、Smad1、Smad3蛋白的表达.结果 (1)博来霉素诱导肺纤维化模型中,7 d、28 d肺组织均有TGF-βR1表达升高,IL-27治疗后降低TGF-βR1表达(P<0.05);(2)D组p-Smad1、p-Smad3表达量在造模后7 d、28 d均最高,C组在造模后7 d表达量少于B组(P<0.05).结论外源性IL-27可能通过抑制TGF-β/Smad通路相关蛋白的磷酸化减轻肺纤维化. 展开更多
关键词 IL-27 肺纤维化 tgf-β/smad信号通路
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A型肉毒毒素对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β/Smad通路和ERK通路表达的影响 被引量:7
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作者 尚念胜 牛燕英 《中国美容医学》 CAS 2020年第5期104-109,共6页
目的:探讨A型肉毒毒素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Human keloid fibroblasts,HKF)生物学行为和TGF-β/Smad信号通路和ERK信号通路表达的影响。方法:在HKF培养过程中加入A型肉毒毒素进行干扰,观察A型肉毒毒素对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β/Sma... 目的:探讨A型肉毒毒素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Human keloid fibroblasts,HKF)生物学行为和TGF-β/Smad信号通路和ERK信号通路表达的影响。方法:在HKF培养过程中加入A型肉毒毒素进行干扰,观察A型肉毒毒素对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β/Smad通路和ERK通路相关分子的变化及细胞增殖、侵袭、凋亡情况。结果:A型肉毒毒素可以抑制HKF增殖、迁移和侵袭,促进凋亡,并且明显抑制Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白、α-SMA和CTGF基因的表达水平,上调IFN-γ、TGF-β3基因的表达水平。上调Smad7基因和蛋白的表达,下调VEGF基因表达,明显抑制p-Smad2和p-Smad3蛋白表达水平,并且抑制P-ERK1/2蛋白表达。以上生物学变化均且呈药物浓度依赖性。结论:A型肉毒毒素可抑制HKF的增殖、侵袭、血管生成和胶原积累,这些效应与TGF-β/Smad和ERK1/2信号通路有关。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 A型肉毒毒素 人瘢痕疙瘩成纤维细胞 ERK信号通路 tgf-β/smad通路 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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藤茶总黄酮通过TGF-β/Smad通路对肝纤维化小鼠的作用机制研究 被引量:10
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作者 王利兵 李雯 李木松 《中医药导报》 2022年第2期24-29,共6页
目的:探讨藤茶总黄酮对肝纤维化小鼠的影响以及对转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路的调节作用。方法:50只小鼠按随机数字表法随机分为对照组、模型组、藤茶总黄酮组、激动剂组和藤茶总黄酮+激动剂组。除对照组外,其余各组小鼠皮下注... 目的:探讨藤茶总黄酮对肝纤维化小鼠的影响以及对转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路的调节作用。方法:50只小鼠按随机数字表法随机分为对照组、模型组、藤茶总黄酮组、激动剂组和藤茶总黄酮+激动剂组。除对照组外,其余各组小鼠皮下注射25%四氯化碳(CCl4)花生油溶液建立肝纤维化模型。各药物组小鼠给予相应药物处理,1次/d,连续10周。HE染色观察肝组织病理学变化,Masson染色观察肝纤维化情况,试剂盒检测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,计算肝指数,蛋白印迹法检测TGF-β1、ColⅠ、p-Smad2和Smad7蛋白相对表达量。结果:对照组小鼠肝小叶结构清晰可见,肝索排列整齐,肝细胞大小均匀,未见变性坏死;模型组小鼠肝小叶结构受损,模糊不清,肝细胞发生脂肪变性水肿,部分细胞出现坏死,肝索结构紊乱,炎症细胞浸润;藤茶总黄酮组病变程度较模型组轻,激动剂组病变程度较模型组严重;藤茶总黄酮+激动剂组病变程度较激动剂组轻。与对照组比较,模型组小鼠ALT、AST、肝指数、胶原面积百分比,以及TGF-β1、ColⅠ、p-Smad2蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05),Smad7蛋白相对表达量明显降低(P<0.05);与模型组比较,藤茶总黄酮组小鼠ALT、AST、肝指数、胶原面积百分比,以及TGF-β1、ColⅠ、p-Smad2蛋白相对表达量均明显降低(P<0.05),Smad7蛋白相对表达量升高(P<0.05),激动剂组小鼠ALT、AST、肝指数、胶原面积百分比,以及TGF-β1、ColⅠ、p-Smad2蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05),Smad7蛋白相对表达量明显降低(P<0.05);与激动剂组比较,藤茶总黄酮+激动剂组小鼠ALT、AST、肝指数、胶原面积百分比,以及TGF-β1、ColⅠ、p-Smad2蛋白相对表达量均明显降低(P<0.05),Smad7蛋白相对表达量明显升高(P<0.05)。结论:藤茶总黄酮可改善肝纤维化小鼠肝损伤,可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 藤茶总黄酮 tgf-β/smad信号通路 小鼠
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RAD51相关蛋白1在宫颈癌组织中的表达及通过TGF-β/Smad通路参与调控人宫颈癌细胞的增殖和凋亡 被引量:3
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作者 梁殿迅 王秋宇 +5 位作者 姜平 李和丽 朱军义 许静 郭哲 孙慧霞 《解剖学杂志》 CAS 2022年第5期417-421,477,共6页
目的:探讨RAD51相关蛋白1(RAD51AP1)通过调节转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路对人宫颈癌细胞(SiHa)增殖和凋亡的影响。方法:收集2018年7月至2021年3月间南阳市中心医院51例宫颈癌组织与癌旁组织标本,免疫组织化学法检测宫颈癌组织R... 目的:探讨RAD51相关蛋白1(RAD51AP1)通过调节转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路对人宫颈癌细胞(SiHa)增殖和凋亡的影响。方法:收集2018年7月至2021年3月间南阳市中心医院51例宫颈癌组织与癌旁组织标本,免疫组织化学法检测宫颈癌组织RAD51AP1蛋白表达。筛选RAD51AP1高表达宫颈癌细胞系,体外培养SiHa细胞,分为对照组、si-RAD51AP1组(转染si-RAD51AP1质粒)、si-NC组(转染si-NC质粒)、抑制剂组(TGF-β/Smad通路抑制剂LY2109761)、si-RAD51AP1+激活剂组(转染si-RAD51AP1质粒+TGF-β/Smad通路激活剂人重组TGF-β1)。采用MTT法与平板克隆形成实验检测各组SiHa细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR法检测细胞中RAD51AP1、TGF-β1 mRNA水平;免疫印迹检测细胞中RAD51AP1蛋白、TGF-β/Smad通路相关蛋白及增殖、凋亡相关蛋白表达。结果:RAD51AP1在宫颈癌组织与SiHa细胞系中均显著高表达;抑制RAD51AP1表达或抑制TGF-β/Smad通路后,细胞增殖活性、细胞克隆形成率及cyclin D1、TGF-β1、p-SMAD2、p-SMAD3蛋白表达水平显著减低,细胞凋亡率、Bax、caspase-3、cleaved caspase 3蛋白表达水平显著升高,而抑制RAD51AP1表达基础上使用TGF-β/Smad通路激活剂后,可部分逆转上述变化。结论:RAD51AP1在宫颈癌中表达上调,抑制RAD51AP1表达可通过抑制TGF-β/Smad通路而抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 人宫颈癌细胞 RAD51相关蛋白1 转化生长因子β/smad信号通路 增殖 凋亡
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miR-21介导的TGF-β/Smad通路在子宫内膜样癌发病中的作用 被引量:2
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作者 高红艳 刘俊玲 +3 位作者 陈继明 王慧 刘轩彤 戴莉 《妇产与遗传(电子版)》 2020年第1期46-49,共4页
子宫内膜样癌的发病机制尚不明确。TGF-β/Smad信号通路可能参与了子宫内膜样癌形成的多个过程。miR-21因在肿瘤侵袭转移中的调节作用而倍受重视。miR-21是否与TGF-β/Smad信号通路相关,是否通过该通路参与子宫内膜样癌的发生,其在发病... 子宫内膜样癌的发病机制尚不明确。TGF-β/Smad信号通路可能参与了子宫内膜样癌形成的多个过程。miR-21因在肿瘤侵袭转移中的调节作用而倍受重视。miR-21是否与TGF-β/Smad信号通路相关,是否通过该通路参与子宫内膜样癌的发生,其在发病机制中发挥怎样的作用以及通过调控miR-21能否成为子宫内膜样癌治疗的新策略,以上问题都需要进一步研究证实。本文将围绕上述问题进行综述。 展开更多
关键词 子宫内膜样癌 MIR-21 tgf-β/smad信号通路
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中医药干预糖尿病肾病TGF-β/Smad通路的研究现状 被引量:1
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作者 林育 陈刚毅 《中国中医药现代远程教育》 2013年第9期156-158,共3页
糖尿病肾病是糖尿病最常见并发症之一,目前干预TGF-β/Smad通路治疗糖尿病肾病已成为一个热点,中医药在糖尿病肾病中干预TGF-β/Smad通路的研究已经取得一定成果,向人们展现了其广泛的应用前景。
关键词 糖尿病肾病 中医药 tgf-β smad通路
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TGF-β/Smad通路在大鼠放射性肺损伤中的作用 被引量:9
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作者 欧雪 王寒蕾 +2 位作者 李其耕 李路 刘文其 《广西医科大学学报》 CAS 2017年第6期816-819,共4页
目的:研究TGF-β/Smad信号通路在大鼠放射性损伤中的作用。方法:将144只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组(A组)和不同剂量8Gy、10Gy、12Gy、14Gy、16Gy照射组(分别为B组、C组、D组、E组、F组),每组24只。采用^(60)Coγ射线放射治疗仪... 目的:研究TGF-β/Smad信号通路在大鼠放射性损伤中的作用。方法:将144只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组(A组)和不同剂量8Gy、10Gy、12Gy、14Gy、16Gy照射组(分别为B组、C组、D组、E组、F组),每组24只。采用^(60)Coγ射线放射治疗仪分别给予各剂量照射组大鼠进行右全肺照射,A组不作照射处理。于照射后第2、第5、第12、第24周末处死大鼠,取其右肺组织行苏木精—伊红(HE)、Masson染色评价其病理改变;westen blotting检测大鼠肺组织中Smad2、Smad7蛋白表达。结果:(1)A组大鼠肺组织肺泡结构完整,未见明显渗出、增生;照射后第5、第12周末,所有照射组大鼠肺组织表现为淋巴细胞浸润为主的慢性炎症改变,且可见肺组织间胶原沉积、纤维组织增生;照射后第24周末,B组、C组、D组照射后充血、水肿消退,部分肺组织仍可见淋巴细胞浸润,肺间质纤维化较第12周减轻,而E组、F组则表现为明显的肺泡壁增厚,肺泡壁不完整,组织间仍有较多的淋巴细胞,肺间质纤维组织增生明显。(2)与A组比较,各照射组大鼠肺组织的Smad2、Smad7蛋白表达量在照射后第5周末均明显升高(均P<0.05),随后逐渐下降。与第5周末比较,B组、C组、D组、E组的Smad2蛋白表达量在第12、第24周末明显回落(均P<0.05),而高剂量的F组到第12、第24周末并未出现明显回落(均P>0.05),且第24周末明显高于其他各组(均P<0.05);同时,B组、C组、D组的Smad7蛋白表达量在第24周末也均大幅回落(均P<0.05),但E组、F组却无明显下降趋势(均P>0.05)。结论:在大鼠放射性肺损伤中,Smad2、Smad7蛋白的变化与其肺组织病理改变一致,TGF-β/Smads信号通路参与调控大鼠放射性肺损伤的过程。 展开更多
关键词 大鼠 放射性肺损伤 tgf-β/smad信号通路 调控
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小檗碱通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β1诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化的研究 被引量:28
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作者 陈春苗 张国哲 +2 位作者 刘平平 火跃芳 李廷利 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期261-267,共7页
目的探讨小檗碱(berberine)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用及其机制。方法MTT法检测小檗碱对HepG2细胞增殖活性;采用10 ... 目的探讨小檗碱(berberine)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用及其机制。方法MTT法检测小檗碱对HepG2细胞增殖活性;采用10 ng·L-1 TGF-β1诱导HepG2细胞EMT模型形成,并加入小檗碱处理;克隆形成实验、细胞划痕和Transwell小室实验分别检测HepG2细胞的克隆形成能力、迁移和侵袭能力;免疫荧光法检测EMT间质标志物Vimentin的表达;Western blot法检测EMT标志物蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Snail)、基质金属蛋白酶(MMP-2)、TGF-β/Smad通路蛋白(Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3)的表达。结果小檗碱呈浓度时间依赖性抑制HepG2细胞活性;与TGF-β1组比较,小檗碱可以明显抑制HepG2细胞的克隆形成能力、迁移和侵袭能力;并且小檗碱可以抑制TGF-β1上调的E-cadherin蛋白表达,和TGF-β1下调的N-cadherin、Vimentin、Snail、MMP-2、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。结论小檗碱可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路,干预TGF-β1诱导HepG2细胞的EMT进程,抑制HepG2细胞的迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 小檗碱 人肝癌HEPG2细胞 tgf-β1 上皮间质转化 细胞迁移 细胞侵袭 tgf-β/smad信号通路
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MicroRNA调控TGF-β/SMAD通路调节肝纤维化机制 被引量:12
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作者 冉龙娇 梁健 邓鑫 《世界华人消化杂志》 CAS 2017年第2期166-171,共6页
已有研究表明转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是最重要的促肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)因子之一,TGF-β/Smad信号转导通路是HF主要的信号转导通路.而微小RNA(micro RNA,mi RNA)在HF发生过程中存在异常表达,并... 已有研究表明转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是最重要的促肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)因子之一,TGF-β/Smad信号转导通路是HF主要的信号转导通路.而微小RNA(micro RNA,mi RNA)在HF发生过程中存在异常表达,并对HF的发生和发展有着不可忽视的作用.近年来有研究提示:通过外源性调控相关mi RNA表达可能影响TGF-β/SMAD通路,从而影响HF的发生发展.文章就TGF-β/SMAD通路及与其相关的mi RNA分子与HF的关系作一综述. 展开更多
关键词 微小RNA tgf-β/smad 肝纤维化
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山羊毛乳头细胞分离鉴定及TGF-β/smad通路相关基因的表达 被引量:1
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作者 丁洋洋 赵会静 +5 位作者 关伟军 何晓红 浦亚斌 蒋琳 马月辉 赵倩君 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第9期2724-2731,共8页
试验旨在分离山羊毛乳头细胞,并探索其中TGF-β/smad通路相关基因的表达,为体外开展山羊毛囊发育的相关机制研究提供良好模型。采用中性蛋白酶与胶原酶两步消化法对山羊背部皮肤做处理,在体视显微镜下分离毛乳头细胞并进行纯化。细胞免... 试验旨在分离山羊毛乳头细胞,并探索其中TGF-β/smad通路相关基因的表达,为体外开展山羊毛囊发育的相关机制研究提供良好模型。采用中性蛋白酶与胶原酶两步消化法对山羊背部皮肤做处理,在体视显微镜下分离毛乳头细胞并进行纯化。细胞免疫荧光和Western blotting验证平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和波形蛋白(vimentin,VIM)在体外培养的毛乳头细胞中的表达,并检测TGF-β/smad通路中相关基因在山羊毛乳头细胞中的表达情况。结果显示,分离后进行贴壁培养的毛乳头细胞生长较慢,在分离15 d后具有成熟形态,可进行传代培养。细胞免疫荧光和Western blotting结果表明,α-SMA和VIM在体外培养的毛乳头细胞中均表达,TGF-β/smad通路中smad4、smad5基因的表达水平显著高于对照组(P<0.05),smad2、smad6、smad7基因的表达量极显著高于对照组(P<0.01),这些与毛囊发育相关的关键基因均呈现高表达,表明毛乳头细胞可能通过TGF-β/smad通路的调控从而影响毛囊的发育。本研究成功分离出山羊毛乳头细胞,为体外研究山羊毛囊发育机制奠定良好的理论基础和细胞模型。 展开更多
关键词 山羊 毛乳头细胞 酶消化法 tgf-β/smad 毛囊发育
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右美托咪定下调TGF-β/Smad通路促进炎症诱导软骨细胞自噬及抑制凋亡的研究 被引量:6
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作者 于芝 吴茜萍 +2 位作者 焦华杰 汪婷 徐卉芳 《宁夏医学杂志》 CAS 2021年第1期17-19,F0003,共4页
目的探讨右美托咪定(DEX)在膝骨关节炎(KOA)治疗中的价值及其机制。方法体外培养人软骨细胞,分为正常对照组、模型组、DEX组,CCK8检测3组细胞增殖情况,药物作用72h后收集细胞,流式细胞仪检测3组细胞凋亡率,Western-blot检测3组细胞凋亡... 目的探讨右美托咪定(DEX)在膝骨关节炎(KOA)治疗中的价值及其机制。方法体外培养人软骨细胞,分为正常对照组、模型组、DEX组,CCK8检测3组细胞增殖情况,药物作用72h后收集细胞,流式细胞仪检测3组细胞凋亡率,Western-blot检测3组细胞凋亡相关蛋白、自噬相关蛋白以及TGF-β/Smad通路TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白表达。结果药物作用72 h后细胞增殖检测,DEX组细胞OD值较模型组升高,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡率比较,DEX组细胞凋亡率低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);Western-blot法检测显示,与模型组比较,DEX组Bcl2蛋白、LC3-Ⅱ蛋白、Beclin-1蛋白表达上调,Bax蛋白、p62蛋白表达下调;TGF-β/Smad通路蛋白表达检测显示,模型组细胞TGF-β1、Smad3、p-Smad3蛋白表达上调,可显著抑制上述蛋白变化。结论DEX通过下调TGF-β/Smad信号通路促进人软骨细胞自噬并抑制炎症诱导的人软骨细胞凋亡,DEX在延缓KOA发展及治疗方面具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 右美托咪定 tgf-β/smad信号通路 软骨细胞 膝骨关节炎
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基于ZEB2、14-3-3ζ/TGF-β/smad通路探讨七方胃痛颗粒对人胃腺癌AGS细胞EMT的影响 被引量:4
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作者 袁铁超 陈国忠 +4 位作者 彭振西 易志忠 欧智海 李璐璐 王婕 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第1期175-180,I0047,I0048,I0049,I0050,I0051,共11页
目的探讨七方胃痛颗粒对ZEB2、14-3-3ζ/TGF-β/smad通路介导胃癌EMT和获得浸润侵袭转移能力过程中的作用和机制及对EMT细胞的ZEB2、14-3-3ζ表达的影响,为七方胃痛颗粒防治胃癌提供理论依据。方法参照血清药理学方法制备七方胃痛颗粒... 目的探讨七方胃痛颗粒对ZEB2、14-3-3ζ/TGF-β/smad通路介导胃癌EMT和获得浸润侵袭转移能力过程中的作用和机制及对EMT细胞的ZEB2、14-3-3ζ表达的影响,为七方胃痛颗粒防治胃癌提供理论依据。方法参照血清药理学方法制备七方胃痛颗粒含药血清,观察七方胃痛颗粒中药对AGS细胞、TGF-β1诱导AGS细胞形成EMT细胞的干预情况,分别采用细胞划痕试验、Transwell细胞侵袭试验和MTT法检测细胞侵袭迁移穿透能力;采用Western Blot、RT-PCR法检测细胞ZEB2、14-3-3ζ的转录及表达情况。结果与TGF-β1/Smad组和空白对照组相比,七方胃痛颗粒能抑制人胃腺癌AGS细胞及EMT细胞的增殖、侵袭和穿透能力(P<0.05),且EMT细胞中ZEB2、14-3-3ζ蛋白和mRNA表达降低(P<0.05),并呈时间依赖性。结论在体外试验中,七方胃痛颗粒能抑制人胃腺癌AGS细胞及其EMT细胞的增殖、侵袭和穿透能力,其机制可能与抑制其ZEB2、14-3-3ζ及TGF-β/smad通路相关,从而达到抗癌作用。 展开更多
关键词 胃癌 中药 ZEB2 14-3-3ζ tgf-β/smad
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IL-9通过TGF-β/Smad通路诱导胃癌MKN-45细胞上皮-间充质转化 被引量:6
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作者 阮水良 韩晨阳 +1 位作者 官俏兵 杨毅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1748-1753,共6页
目的:研究白细胞介素9(IL-9)通过激活转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路促进人胃癌MKN-45细胞上皮-间充质转化(EMT)的机制。方法:将常规培养的MKN-45细胞分为对照组和IL-9刺激组,利用CCK-8检测细胞活力;光镜下观察细胞形态的变化; RT... 目的:研究白细胞介素9(IL-9)通过激活转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路促进人胃癌MKN-45细胞上皮-间充质转化(EMT)的机制。方法:将常规培养的MKN-45细胞分为对照组和IL-9刺激组,利用CCK-8检测细胞活力;光镜下观察细胞形态的变化; RT-qPCR和Western blot检测EMT相关蛋白、TGF-β、Smad3和Smad5 mRNA和蛋白表达的变化; Transwell法检测细胞侵袭能力;免疫荧光染色检测细胞中波形蛋白(vimentin)的表达。结果:IL-9可以提高MKN-45细胞的存活率,且具有时间依赖性; IL-9刺激组关键转录因子Snail与Slug的表达上调,EMT相关蛋白N-cadherin、fibronectin、collagen I和vimentin表达上调,E-cadherin表达下调(P <0. 05)。Transwell结果显示IL-9组细胞侵袭能力增强,镜下观察迁移运动的细胞形态呈长梭形,RT-qPCR和Western blot结果显示TGF-β、Smad3和Smad5表达升高(P <0. 05)。结论:IL-9可以促进MKN-45细胞EMT,其作用与TGF-β/Smad信号的激活有关。 展开更多
关键词 白细胞介素9 tgf-β/smad信号通路 上皮-间充质转化 胃癌
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桔梗皂苷D基于TGF-β/Smad通路调控上皮-间质转化对人子宫内膜癌Ishiwaka细胞迁移及侵袭的作用 被引量:7
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作者 李瑞锋 崔燕 +2 位作者 曾湘晖 李文元 郭清民 《西部医学》 2022年第5期633-638,共6页
目的探讨桔梗皂苷D调控上皮间质转化(EMT)对人子宫内膜癌Ishiwaka细胞迁移、侵袭的影响,及对转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路的调节作用。方法取第4代对数生长期的人子宫内膜癌Ishiwaka细胞,随机分为对照组、桔梗皂苷D组、激动剂... 目的探讨桔梗皂苷D调控上皮间质转化(EMT)对人子宫内膜癌Ishiwaka细胞迁移、侵袭的影响,及对转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路的调节作用。方法取第4代对数生长期的人子宫内膜癌Ishiwaka细胞,随机分为对照组、桔梗皂苷D组、激动剂组和桔梗皂苷D+激动剂组。桔梗皂苷D组细胞加入桔梗皂苷D 18μmol/L培养24 h,激动剂组细胞加入重组人TGF-β20 ng/mL刺激24 h,桔梗皂苷D组+激动剂组细胞先加入重组人TGF-β20 ng/mL刺激24 h后,再加入桔梗皂苷D培养24 h。MTT法检测细胞存活率,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力及蛋白印迹法检测TGF-β1、p-smad2/3、上皮钙粘蛋白(E-cad)和神经钙粘蛋白(N-cad)相对表达量。结果与对照组比较,桔梗皂苷D组细胞存活率及TGF-β1、p-smad2/3和N-cad蛋白相对表达量降低,细胞迁移和侵袭能力减弱,E-cad蛋白相对表达量升高,激动剂组TGF-β1、p-smad2/3和N-cad蛋白相对表达量升高,细胞迁移和侵袭能力增强,E-cad蛋白相对表达量降低(P<0.05);与桔梗皂苷组比较,桔梗皂苷D+激动剂组细胞存活率及TGF-β1、p-smad2/3和N-cad蛋白相对表达量升高,细胞迁移和侵袭能力增强,E-cad蛋白相对表达量降低(P<0.05);与激动剂组比较,桔梗皂苷D+激动剂组细胞存活率及TGF-β1、p-smad2/3和N-cad蛋白相对表达量降低,细胞迁移和侵袭能力减弱,E-cad蛋白相对表达量升高(P<0.05)。结论桔梗皂苷D可能通过抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路调控上皮间质转化降低人子宫内膜癌Ishiwaka细胞迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 桔梗皂苷D 上皮间质转化 转化生长因子β/smad信号通路 Ishiwaka细胞
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栀子苷对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中TGF-β/Smad通路的影响 被引量:3
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作者 梁栋 杨洪涛 《天津中医药》 CAS 2022年第8期1064-1068,共5页
[目的]探究栀子苷(GE)对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中转化生长因子-β和Smad相关蛋白(TGF-β/Smad)通路的影响。[方法]实验分为对照组、高糖组、GE 1、10、50、100μmol/L组。对照组HK2细胞在5.5 mmol/L低糖DMEM培养液中培养,除对... [目的]探究栀子苷(GE)对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中转化生长因子-β和Smad相关蛋白(TGF-β/Smad)通路的影响。[方法]实验分为对照组、高糖组、GE 1、10、50、100μmol/L组。对照组HK2细胞在5.5 mmol/L低糖DMEM培养液中培养,除对照组外,其余各组均于25 mmol/L高糖DMEM培养液中培养,GE 1、10、50、100μmol/L组同时添加GE,使GE终浓度分别为1、10、50、100μmol/L,干预48 h。显微镜下观察HK2细胞形态;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中纤连蛋白(FN)、E-钙黏素(E-cad)、Ⅳ型胶原(COLⅣ)mRNA水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白水平。[结果]对照组细胞呈多边形或卵圆形,分布均匀;高糖组细胞部分呈现长梭形、胞核呈梭形变;随着GE剂量的升高,细胞形态逐渐恢复正常。与对照组相比,高糖组细胞中FN、COLⅣmRNA水平,TGF-β1、p-Smad3/Smad3、α-SMA蛋白水平,上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高,细胞中E-cad mRNA水平降低(P<0.05);与高糖组相比,GE 1μmol/L组细胞中FN mRNA水平,TGF-β1、p-Smad3/Smad3、α-SMA蛋白水平,上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),GE 10、50、100μmol/L组细胞中FN、COLⅣmRNA水平,TGF-β1、p-Smad3/Smad3、α-SMA蛋白水平,上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,细胞中E-cad mRNA水平升高(P<0.05)。[结论] GE可以抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中TGF-β/Smad通路。 展开更多
关键词 栀子苷 肾小管上皮细胞 转分化 转化生长因子-β和smad相关蛋白通路
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